全 文 ：China Pharmacy 2012Vol.23No.19 中国药房 2012年第23卷第19期
精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μL，注入液相色
谱仪，按“2.1”项下色谱条件进样分析，连续进样6次，测定峰
面积。结果表明，对照品和供试品峰面积的 RSD分别为
0.65％和0.92％（n＝6），表明仪器和方法的精密度均良好。
2.6 稳定性试验
精密吸取同一供试品溶液10μL，分别于0、2、4、6、8、12h
各进样一次，测定峰面积。结果，RSD＝0.72％（n＝6），表明供
试品溶液在12h内基本稳定。
2.7 重复性试验
取同一批骨痹宁胶囊（批号：080701），分别取高、中、低3
个剂量（1.5、2、2.5g），每个剂量3份，按“2.2.1”项下方法制备
供试品溶液，再按“2.1”项下色谱条件进样测定。结果，RSD＝
2.47％（n＝9），表明方法重复性良好。
2.8 加样回收率试验
精密称取已知丹酚酸B含量的同一批（批号：080701）骨痹
宁胶囊1g，共9份，分别置100mL具塞三角瓶中，再分别按
高、中、低3种浓度加入丹酚酸B对照品溶液，按“2.2.1”项下方
法制备供试品溶液，在“2.1”项下色谱条件下进样测定，计算
加样回收率，可得平均回收率为98.91％，RSD＝2.41％（n＝
9），结果见表1。
2.9 样品含量测定
取不同批次的骨痹宁胶囊各适量，分别按“2.2.1”项下方
法制备供试品溶液，各精密吸取10μL，注入液相色谱仪，按
“2.1”项下色谱条件测定，计算样品含量。结果，3批样品（批
号：080701、080702、080703）中丹酚酸B的含量分别为4.49、
4.83、5.57mg·g－1（n＝3）。
3 讨论
笔者采用紫外分光光度法在200～700nm波长范围内对
丹酚酸B对照品进行了光谱扫描，结果发现丹酚酸B在286
nm波长处有最大吸收，故选择286nm作为检测波长，以提高
检测的灵敏度[2]。
综上所述，本方法简便、准确、重复性好，适用于骨痹宁胶
囊中丹酚酸B的含量测定。
参考文献
[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部）[S].2010
年版.北京：中国医药科技出版社，2010：580.
[2] 笔雪艳，刘晓凤，张清波. HPLC法测定清开灵泡腾片中
栀子苷的含量[J].中国药房，2011，22（3）：240.
（收稿日期：2011-08-30修回日期：2012-01-30）
表1 加样回收率试验结果（n＝9）
Tab 1 Results of recovery test（n＝9）
称样量/g
0.985
1.024
1.016
0.973
1.038
0.997
0.971
1.034
0.981
样品含量/mg
0.451
0.519
0.482
0.226
0.258
0.242
0.045
0.051
0.048
加入量/mg
0.463
0.531
0.458
0.219
0.264
0.227
0.048
0.054
0.046
测得量/mg
0.892
1.108
0.954
0.448
0.527
0.451
0.099
0.098
0.087
回收率/％
95.24
110.92
103.06
101.37
101.89
92.07
112.50
87.04
84.78
x/％
103.10
98.61
95.01
RSD/％
2.66
0.79
3.77
＊主管药师。研究方向：药物质量分析。E-mail：479166842@qq.
com
#通讯作者：教授，博士。研究方向：制剂质量控制方法与新药开
发。E-mail：ganguop@sina.com
HPLC法测定日本薯蓣中尿囊素的含量
熊 丽 1＊，李金涛 2，干国平 2#（1.武汉市妇女儿童医疗保健中心，武汉 430014；2.湖北中医药大学，武汉
430065）
中图分类号 R284.1；R927.2 文献标志码 A 文章编号 1001- 408（2012）19-1792-03
DOI 10.6039/j.issn.1001- 408.2012. 9.28
摘 要 目的：建立测定日本薯蓣中尿囊素含量的方法，并比较日本薯蓣与山药中尿囊素的含量。方法：采用高效液相色谱法。
色谱柱为Kromasil C18（250mm×4.6mm，5µm），流动相为甲醇-水（2∶98），流速为0.8mL·min－1，检测波长为224nm，柱温为
30℃。结果：尿囊素进样量在0.355～4.260µg范围内与峰面积积分值呈良好线性关系（r＝0.9998）；平均加样回收率为98.77％，
RSD＝1.49％（n＝6）。日本薯蓣明显高于山药中尿囊素的含量。结论：该方法可作为日本薯蓣中尿囊素的含量测定方法。
关键词 日本薯蓣；尿囊素；高效液相色谱法；含量测定
Content Determination of Allantoin in Dioscorea japonica by HPLC
XIONG Li（Wuhan Medical Care Center for Women and Children，Wuhan 430014，China）
LI Jin-tao，GAN Guo-ping（Hubei University of Traditional Chinese Medicine，Wuhan 430065，China）
ABSTRACT OBJECTIVE：To establish a method for the content determination of allantoin in Dioscorea japonica，and to com-
pare the content of allantoin in D. japonica and D. opposita. METHODS：HPLC was adopted. Kromasil C18（250mm×4.6mm，5
µm）column was used with methanol-water（2∶98）as mobile phase at the flow rate of 0.8mL·min－1. The detection wavelength
was set at 224nm，and the column temperature was at 30℃ .RESULTS：The linear range of allantoin was 0.355～4.260µg（r＝
0.9998）with average recovery of 98.77％（RSD＝1.49％，n＝6）. The content of allantoin in D. japonica was higher than in D. op-
posita significantly. CONCLUSION：The method could be used for the content determination of allantoin in D. japonica.
KEY WORDS Dioscorea japonica；Allantoin；HPLC；Content determination
􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂􀤂
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中国药房 2012年第23卷第19期 China Pharmacy 2012Vol.23No.19
日本薯蓣为薯蓣科植物日本薯蓣 Dioscorea japonica
Thund.的地下块茎，作蔬菜食用，部分地区作“山药”入药，有滋
补强壮的作用。它在我国浙江、安徽、江苏、福建、台湾、湖北、
湖南、广东、广西、贵州、四川等省区有大量栽培[1]，资源丰富。
日本薯蓣中主要含有尿囊素、多糖、蛋白质等成分。其中，尿
囊素具有麻醉镇痛、促进上皮生长、消炎、抑菌等作用，已广泛
用于皮肤科临床，如手足皲裂、鱼鳞病、银屑病、多种角化性皮
肤病和消化性溃疡的治疗与清洁创面。它还是糖尿病、肝硬
化及癌症治疗剂的重要成分[2]。为了开发利用日本薯蓣植物
资源，笔者参考文献[3，4]，建立了日本薯蓣中尿囊素的含量测定
方法，并对日本薯蓣与山药中尿囊素的含量进行了比较分析。
1 仪器与试药
GILSON高效液相色谱（HPLC）仪、785AUV检测器（美国
Perkin-Elmer公司）；Anke TGl-16G台式离心机（上海安亭科学仪
器厂）；YQ-520超声提取器（上海易净超声波仪器有限公司）。
日本薯蓣采自湖北武穴市余川镇，经中国科学院武汉植
物研究所李建强研究员鉴定为真品，标本贮藏于湖北中医药
大学中药制剂分析实验室（批号：091020、100115、101103）；山
药为市售品，经湖北中医药大学潘宏林教授鉴定为真品，标本
贮藏于湖北中医药大学中药制剂分析实验室（批号：100311、
100508、100823）。尿囊素对照品（中国食品药品检定研究院，
批号：501-200001，供含量测定用）；甲醇为色谱纯，其余试剂均
为分析纯，水为重蒸水。
2 方法与结果
2.1 溶液的制备
2.1.1 供试品溶液 取样品适量，粉碎过五号筛，取约0.5g细
粉，精密称定，置于50mL量瓶中，加20％乙醇适量，超声提取
（功率：250W，频率：40kHz）30min，放冷，加20％乙醇稀释至
刻度，摇匀，3000r·min－1离心10min，取上清液，以0.45µm微
孔滤膜过滤，即得。
2.1.2 对照品贮备液 精密称取真空干燥4h的尿囊素对照
品35. mg，置10mL量瓶中，加20％乙醇溶解并稀释至刻度，
摇匀，即得（3.55mg·mL－1）。
2.2 检测波长的选择
取上述对照品贮备液适量，在200～360nm波长范围内进
行UV扫描。结果，对照品溶液在224nm波长处有最大吸收，
故选择224nm为检测波长。
2.3 色谱条件
色谱柱：Kromasil C18（250mm×4.6mm，5µm）；流动相：甲
醇-水（2∶98）；流速：0.8mL·min－1；检测波长：224nm；柱温：
30℃；进样量：10µL。
2.4 方法学考察
2.4.1 系统适用性试验 在“2.3”项下色谱条件下，尿囊素与
其相邻色谱峰的分离度＞1.5；理论板数按尿囊素峰计算
应＞2000。色谱见图1。
2.4.2 线性关系考察 分别精密吸取对照品贮备液0.1、0.3、0.6、
0.9、1.2mL，置于10mL量瓶中，用20％乙醇稀释至刻度，摇匀，
各取10µL注入HPLC仪测定。以进样量（X）为横坐标，峰面积
积分值（Y）为纵坐标，进行线性回归，得回归方程为Y＝79447X+
2385（r＝0.9998，n＝5）。结果表明，尿囊素进样量在0.355～
4.260µg范围内与峰面积积分值呈良好线性关系。
2.4.3 精密度试验 取同一对照品溶液（0.1065mg·mL－1）连
续进样6次，每次10µL，测定尿囊素峰面积。结果，RSD＝
1.10％（n＝6），表明仪器精密度良好。
2.4.4 重复性试验 取同一批样品适量，按“2.1.1”项下方法
平行制备6份供试品溶液，各取10µL进样测定。结果，尿囊素
的平均含量为1.385％，RSD＝2.34％（n＝6），表明该方法重复
性良好。
2.4.5 稳定性试验 取同一供试品溶液，分别于0、1、2、4、6、8
h进样10μL，测定尿囊素峰面积。结果，RSD＝1.78％（n＝6），
表明供试品溶液在8h内稳定。
2.4.6 加样回收率试验 取已知含量的样品粉末9份，每份约
0.25g，精密称定，置于50mL量瓶中，分别精密加入对照品溶
液0.8、1.0、1.2mL，各3份（相当于0.25g样品含量的80％、
100％、120％），加20％乙醇溶液适量，余下按“2.1.1”项下方法
相应操作，制备供试品溶液，精密吸取10µL注入HPLC仪，用
外标法测定含量，计算加样回收率，结果见表1。
表1 加样回收率试验结果（n＝9）
Tab 1 Results of recovery tests（n＝9）
取样量/g
0.251 3
0.252 2
0.249 6
0.251 7
0.248 9
0.250 8
0.252 4
0.249 7
0.251 5
样品含量/mg
3.48
3.49
3.46
3.49
3.45
3.47
3.50
3.46
3.48
加入量/mg
2.84
2.84
2.84
3.55
3.55
3.55
4.26
4.26
4.26
测得量/mg
6.35
6.28
6.31
6.91
6.98
6.93
7.78
7.65
7.70
回收率/％
101.04
98.13
100.46
96.45
99.51
97.36
100.57
98.40
98.98
x/％
98.77
RSD/％
1.49
2.5 样品含量测定
精密吸取各批供试品溶液10µL注入HPLC仪，每批连续
进样3次，按外标法以峰面积计算样品含量，结果见表2。
表2 样品含量测定结果（n＝3）
Tab 2 Results of content determination of samples（n＝3）
样品（批号）
日本薯蓣（091020）
日本薯蓣（100115）
日本薯蓣（101103）
山药（100311）
山药（100508）
山药（100823）
含量/％
1.40
1.34
1.37
0.41
0.32
0.31
3 讨论
样品含量测定结果表明，日本薯蓣中的尿囊素含量明显
高于山药中的含量，提示日本薯蓣具有一定的药用开发价值。
取同一批样品，分别以纯水、10％乙醇、20％乙醇、30％乙
醇、40％乙醇作为提取溶剂，超声处理相同时间，制备供试品
溶液，测定，结果以20％乙醇为提取溶剂效果最好。
取同一批样品，以20％乙醇为提取溶剂，分别超声提取
20、30、40min，制备供试品溶液，测定。结果，超声提取30min
12345678910
t/min
A
12345678910
t/min
B
12345678910
t/min
C
图1 高效液相色谱图
A.日本薯蓣；B.山药；C.尿囊素对照品
Fig 1 HPLC chromatograms
A. D. japonica；B. D. opposite；C. allantoin control
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China Pharmacy 2012Vol.23No.19 中国药房 2012年第23卷第19期
时，制备的供试品溶液中尿囊素的含量不再提高，表明超声提
取30min即可提取完全。
综上，本方法可作为日本薯蓣中尿囊素的含量测定方法。
参考文献
[1] 中国科学院《中国植物志》编辑委员会.中国植物志（第
16卷第1分册）[M].北京：科学出版社，1985：105.
[2] 邵珠民，吕冬梅，王 涛，等.尿囊素凝胶的制备及含量
测定[J].中国药房，2007，18（28）：2205.
[3] 王海波，蔡宝昌.反相高效液相色谱法测定不同产地山药
中尿囊素的含量[J].中药新药与临床药理，2004，15（3）：
190.
[4] 白 雁，朱风云，王 东，等.HPLC法测定不同产地山药
中尿囊素的含量[J].中草药，2003，34（2）：179.
（收稿日期：2011-05-02修回日期：2011-11-01）
＊主治医师。研究方向：内科与内分泌临床。 E-mail：ttjj0206@
126.com
#通讯作者a：主治医师。研究方向：内分泌。电话：023-63692368。
E-mail：heroche- ng686909@sina.com
#通讯作者b：副主任医师。研究方向：内科临床。E-mail：xiongy-
i@cqupt.edu.cn
·中药临床·
川芎嗪治疗糖尿病肾病的系统评价
田春娟1＊，程春瑞2# a，熊 奕3# b，欧书钦2（1.重庆市北碚区第二人民医院内科，重庆 400712；2.重庆市第四人民
医院内分泌科，重庆 400014；3.重庆邮电大学医院内科，重庆 400065）
中图分类号 R242；R969 文献标志码 C 文章编号 1001- 408（2012）19-1794-06
DOI 10.6039/j.issn.1001- 408.2012. 9.29
摘 要 目的：系统评价川芎嗪治疗糖尿病肾病的有效性和安全性。方法：计算机检索中国期刊全文数据库（CNKI）、万方数据
库、维普数据库（VIP）、PubMed、Cochrane Library、OVID、EMBASE获取川芎嗪治疗糖尿病肾病的随机对照试验相关文献，应用
RevMan5和Stata Meta-analysis软件进行Meta分析。结果：共纳入28项随机对照，总计2023例糖尿病肾病患者，但试验质量均不
高，漏斗图呈不对称分布。Meta分析结果显示，川芎嗪可以减少尿白蛋白排泄，减少24h尿蛋白，降低血肌酐水平；川芎嗪降低尿
白蛋白排泄率和24h尿蛋白不如血管紧张素转换酶抑制药或血管紧张素受体阻滞药或前列地尔；未见严重不良反应。结论：川芎
嗪治疗糖尿病肾病可能是安全和有效的，但有待更大样本、更高质量的临床随机对照研究证实。
关键词 川芎嗪；糖尿病肾病；系统评价；随机对照试验；Meta分析
Effect of Tetramethylpyrazine on Diabetic Nephropathy：A Systematic Review
TIAN Chun-yan（Dept. of Internal Medicine，Beibei District Second People’s Hospital of Chongqing City，
Chongqing 400712，China）
CHENG Chun-rui，OU Shu-qin（Dept. of Endocrinology，Chongqing Forth People’s Hospital，Chongqing
400014，China）
XIONG Yi（Dept. of Internal Medicine，Hospital of Chongqing University of Posts & Communications，Chongq-
ing 400065，China）
ABSTRACT OBJECTIVE：To evaluate the effectiveness and safety of tetramethylpyrazine in the treatment of diabetic nephropa-
thy（DN）. METHODS：All random control trials（RCTs）of tetramethylpyrazine in the treatment of diabetic nephropathy were re-
trieved from CNKI，Wanfang database，VIP，PubMed，Cochrane Library，OVID and EMBASE. The Cochrane Collaboration’s
RevMan 5.0and Stata Meta-analysis software were used for Meta-analysis. RESULTS：28RCTs were included，involving 2023
DN patients. The quality of including trials was low，and the funnel plot showed asymmetry. The results of Meta-analysis indicated
that tetramethylpyrazine could reduce urinary albumin excretion rate（UAER），24hours urinary protein and serum creatinine
（Scr）； tetramethylpyrazine was inferior to angiotensin converse enzyme inhibitors （ACEI） or angiotensin receptor blockers
（ARBs）or alprostadil in respect of decreasing UAER and 24hours urinary protein. No adverse drug reaction was found. CONCLU-
SION：Tetramethylpyrazine may be safe and effective in the treatment of diabetic nephropathy，and large-scale and high quality
RCTs are required for further study.
KEY WORDS Tetramethylpyrazine；Diabetic nephropathy；Systematic review；Random control clinical trial；Meta-analysis
􀤥􀤥􀤥􀤥􀤥􀤥􀤥􀤥􀤥􀤥􀤥􀤥􀤥􀤥􀤥􀤥􀤥􀤥􀤥􀤥􀤥􀤥􀤥􀤥􀤥􀤥􀤥􀤥􀤥􀤥􀤥􀤥􀤥􀤥􀤥􀤥􀤥􀤥􀤥􀤥􀤥􀤥􀤥􀤥􀤥􀤥􀤥􀤥􀤥􀤥􀤥􀤥􀤥􀤥􀤥􀤥􀤥􀤥􀤥􀤥􀤥􀤥
糖尿病肾病（Diabetic nephropathy，DN）是糖尿病最常见
的微血管并发症之一，临床早期为微量白蛋白尿，逐渐发展至
大量蛋白尿，部分病人最终发展至终末期肾病，需透析或肾移
植生存，大致有10％最终死于DN[1]。国内统计2型糖尿病约
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