全 文 ：　 　２０１２，Ｖｏｌ．２９Ｎｏ．５化学与生物工程
Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　＆Ｂｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ
２２
基金项目：国家自然科学基金资助项目（２１１７６１４１）
收稿日期：２０１２－０２－２１
作者简介：叶艳平（１９８６－），女，湖北武汉人，硕士研究生，研究方向：生物化工，Ｅ－ｍａｉｌ：ｙｅｚｉｘｉｎ１０２９＠ｓｉｎａ．ｃｏｍ．ｃｎ；通讯作者：张建安，
副教授，Ｅ－ｍａｉｌ：ｚｈａｎｇｊａ＠ｔｓｉｎｇｈｕａ．ｅｄｕ．ｃｎ。
ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７２－５４２５．２０１２．０５．００７
青霉纤维素酶酶解芦竹的研究
叶艳平１，２，周玉杰２，丁一刚１，刘　靖２，张建安２
（１．武汉工程大学 绿色化工过程教育部重点实验室，湖北 武汉４３００７３；
２．清华大学 核能与新能源技术研究院，北京１０００８４）
摘　要：以青霉纤维素酶酶解芦竹，探讨了酶解温度、酶解时间、ｐＨ值和酶载量对芦竹酶解效果的影响。结果表明，
青霉纤维素酶酶解芦竹的最适条件为：酶解时间７２ｈ、酶解温度４５℃、ｐＨ值４．８、酶载量３０ＦＰＵ·ｇ－１　ＤＭ，在此条件
下，葡萄糖产率为（６１．７５±１．２２）％、木糖产率为（４０．０７±６．８８）％；通过添加商业酶调配酶系中不同酶活比例，可进一步
提高还原糖产率，当增加β－葡萄糖苷酶至４０ＣＢＵ·ｇ
－１　ＤＭ时，葡萄糖产率达６８．９６％、木糖产率达９８．１６％。
关键词：纤维素酶；酶解；芦竹
中图分类号：ＴＱ　２２３．１　　　　　文献标识码：Ａ　　　　　文章编号：１６７２－５４２５（２０１２）０５－００２２－０４
　　纤维素酶为诱导型复合酶系，是生物降解纤维素
生成葡萄糖的酶的总称，主要由葡聚糖内切酶（Ｃｘ
酶）、葡聚糖外切酶（Ｃ１酶）、β－葡萄糖苷酶（ＣＢ酶）组
成［１，２］，其中前两者将纤维分解成纤维二糖，后者将纤
维二糖转化为葡萄糖，当三者的活性比例适当时，就能
有效地协同完成对纤维素的降解［３，４］。国内外对木霉
纤维素酶研究较多［５，６］，但该酶系普遍存在着β－葡萄糖
苷酶活力很低的缺陷，致使纤维二糖积累，影响了酶解
效率。相对于木霉属的微生物而言，青霉属（Ｐｅｎｉｃｉｌ－
ｌｉｕｍ）真菌不仅能分泌较全的降解天然木质纤维材料
的聚糖酶系，而且能产生较多的β－葡萄糖苷酶
［７，８］。
作者在此以蒸汽爆破预处理后的芦竹为原料，研
究青霉纤维素酶酶解芦竹的适宜条件，同时探讨了向
青霉纤维素酶中添加一定量的商业酶后的酶解效果，
拟为利用芦竹糖化发酵制取燃料乙醇和丁醇提供理论
依据。
１　实验
１．１　材料与试剂
蒸汽爆破预处理后芦竹，其组分为：纤维素４６％，
半纤维素８％，木质素３３％，灰分１３％。
青霉纤维素酶液，自制。
商业纤维素酶：ＮＳ５００１３（７０ＦＰＵ·ｍＬ－１　ＤＭ）、
ＮＳ５００１０（２５０ＣＢＵ·ｍＬ－１　ＤＭ），诺维信公司；木聚糖
酶（Ｘｙｌａｎａｓｅ）。
１．２　纤维素酶酶解单因素实验
在５０ｍＬ三角瓶中，取蒸汽爆破预处理后芦竹使
其底物质量浓度为２％，加入５ｍＬ　１ｍｏｌ·Ｌ－１醋酸缓
冲溶液和一定量纤维素酶，在一定转速恒温摇床中于
４５℃、ｐＨ值４．８、酶载量３０ＦＰＵ·ｇ－１　ＤＭ 条件下酶
解７２ｈ。离心，取上清液适当稀释，测定还原糖浓度。
固定其它反应条件，依次改变酶解时间（１２ｈ、２４
ｈ、３６ｈ、４８ｈ、６０ｈ、７２ｈ、８４ｈ、９６ｈ）、酶解温度（３０℃、
４０℃、４５℃、５０℃、６０℃）、ｐＨ值（３．５、４．０、４．８、５．６、
６．５）、酶载量（１０ＦＰＵ·ｇ－１　ＤＭ、２０ＦＰＵ·ｇ－１　ＤＭ、３０
ＦＰＵ·ｇ－１　ＤＭ、４０ＦＰＵ·ｇ－１　ＤＭ、５０ＦＰＵ·ｇ－１　ＤＭ），
考察各因素对酶解效果的影响。
１．３　混合商业酶酶解实验
１．３．１　外加木聚糖酶单因素实验
添加木聚糖酶混合至酶液总木聚糖酶酶活（ＩＵ·
ｇ－１　ＤＭ）依次达到：１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、２００，
酶解芦竹后测定其还原糖含量。
１．３．２　外加ＮＳ５００１０酶液单因素实验
添加ＮＳ５００１０酶液混合至酶液总β－葡萄糖苷酶
酶活（ＣＢＵ·ｇ－１　ＤＭ）依次达到：１０、２０、３０、４０、６０、９０、
１５０，酶解后测定其还原糖含量。
叶艳平等：青霉纤维素酶酶解芦竹的研究／２０１２年第５期 　２３　
１．３．３　酶解效果对比
就以下不同酶系的酶解效果进行对比：３０ＦＰＵ·
ｇ－１　ＤＭ 青霉纤维素酶（酶系１）、３０ＦＰＵ·ｇ－１　ＤＭ 青
霉纤维素酶加木聚糖酶至１８０ＩＵ·ｇ－１　ＤＭ（酶系２）、
３０ＦＰＵ·ｇ－１　ＤＭ青霉纤维素酶加ＮＳ５００１０至β－葡萄
糖苷酶４０ＣＢＵ·ｇ－１　ＤＭ（酶系３）、３０ＦＰＵ·ｇ－１　ＤＭ
ＮＳ５００１３酶（酶系４）。
１．４　酶活测定
酶活力测定采用ＮＲＥＬ推荐的标准方法［９］。一个
滤纸酶活力的国际单位（ＦＰＵ）等于在标准反应条件下
每分钟释放１μｍｏｌ葡萄糖的酶量。葡聚糖内切酶酶活
用羧甲基纤维素（ＣＭＣ）测定；β－葡萄糖苷酶酶活用水杨
素试剂测定；木聚糖酶酶活用木聚糖溶液测定。
１．５　还原糖含量测定
采用ＬＣ－２０Ｄ型高效液相色谱仪测定酶液中的还
原糖，如葡萄糖、木糖等的含量。色谱条件：色谱柱为
ＨＰＸ－８７Ｈ有机酸分析柱，柱温６５ ℃，流动相为５
ｍｍｏｌ·Ｌ－１稀硫酸，流速０．８ｍＬ·ｍｉｎ－１，检测器
ＲＩＤ－１０Ａ。
２　结果与讨论
２．１　各纤维素酶酶活比较
比较发现，不同纤维素酶的酶活和酶系组成都各
不相同，青霉纤维素酶的β－葡萄糖苷酶酶活偏低，仅为
０．９ＣＢＵ·ｍＬ－１，其滤纸酶酶活、木聚糖酶酶活、ＣＭＣ
酶活分别为５．２ＦＰＵ·ｍＬ－１、４２．５ＩＵ·ｍＬ－１、１５．４
Ｕ·ｍＬ－１；Ｘｙｌａｎａｓｅ的木聚糖酶酶活较高，为２５０３．２
ＩＵ·ｍＬ－１，且检测不到其它酶活性；ＮＳ５００１３的滤纸
酶酶活和ＮＳ５００１０的β－葡萄糖苷酶酶活较高，分别为
７０ＦＰＵ·ｍＬ－１　ＤＭ和２５０ＣＢＵ·ｍＬ－１　ＤＭ。
２．２　青霉纤维素酶酶解芦竹工艺条件优化
２．２．１　酶解时间对酶解效果的影响（图１）
图１　酶解时间对酶解效果的影响
Ｆｉｇ．１　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｅｎｚｙｍｏｌｙｓｉｓ　ｔｉｍｅ　ｏｎ　ｅｎｚｙｍｏｌｙｓｉｓ　ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ
由图１可知，酶解初期（１～１２ｈ）反应速度较快，
还原糖产率迅速上升；随着酶解时间的延长，反应速度
急剧下降；酶解时间超过７２ｈ后，还原糖产率提高不
明显。其原因可能是：当酶解时间达到７２ｈ后，酶与
底物的反应变缓、酶的活性降低，还原糖的生成趋缓。
故选取适宜的酶解时间为７２ｈ。
２．２．２　酶解温度对酶解效果的影响（图２、图３）
图２　酶解温度对酶解效果的影响
Ｆｉｇ．２　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｅｎｚｙｍｏｌｙｓｉｓ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｏｎ
ｅｎｚｙｍｏｌｙｓｉｓ　ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ
由图２可知，随着酶解温度的升高，还原糖产率逐
渐上升；酶解温度为４５℃时达到最大值，之后迅速降
低。其原因可能是：酶解温度升高时，酶解液中活化分
子数增多，反应速度加快；但酶解温度升至一定程度
后，酶蛋白逐渐变性甚至失活，使反应速度降低甚至很
快结束。
图３　不同温度下葡萄糖产率随酶解时间的变化
Ｆｉｇ．３　Ｖａｒｉａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｇｌｕｃｏｓｅ　ｙｉｅｌｄ　ｗｉｔｈ
ｅｎｚｙｍｏｌｙｓｉｓ　ｔｉｍｅ　ａｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｓ
由图３可知，５０℃和６０℃下的葡萄糖产率从１２
ｈ起即保持几乎不变，即其反应在１２ｈ左右时即将近
结束。４５℃下的葡萄糖终产率最高。
综合上述分析，选取适宜的酶解温度为４５℃。
２．２．３　ｐＨ值对酶解效果的影响（图４）
由图４可知，酶解效果在ｐＨ值４．０～５．５之间较
好，这是由纤维素酶蛋白对ｐＨ值的敏感性所决定的，
其中ｐＨ值为４．８时酶解效果最好。因此，选取适宜
的ｐＨ值为４．８。
　 叶艳平等：青霉纤维素酶酶解芦竹的研究／２０１２年第５期２４　
图４　ｐＨ值对酶解效果的影响
Ｆｉｇ．４　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｐＨ　ｖａｌｕｅ　ｏｎ　ｅｎｚｙｍｏｌｙｓｉｓ　ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ
２．２．４　酶载量对酶解效果的影响（图５、图６）
图５　酶载量对酶解效果的影响
Ｆｉｇ．５　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｃｅｌｕｌａｓｅ　ｌｏａｄｉｎｇ　ａｍｏｕｎｔ　ｏｎ
ｅｎｚｙｍｏｌｙｓｉｓ　ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ
由图５可知，随着酶载量的增加，葡萄糖的产率明
显上升；当酶载量超过３０ＦＰＵ·ｇ－１　ＤＭ后，葡萄糖的
升幅趋缓，最高葡萄糖产率约６６．４％。当酶载量持续增
大时，酶解后底物的ｐＨ值急剧降低，不利于后期生产。
图６　不同酶载量下葡萄糖产率随酶解时间的变化
Ｆｉｇ．６　Ｖａｒｉａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｇｌｕｃｏｓｅ　ｙｉｅｌｄ　ｗｉｔｈ
ｅｎｚｙｍｏｌｙｓｉｓ　ｔｉｍｅ　ａｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｃｅｌｕｌａｓｅ　ｌｏａｄｉｎｇ　ａｍｏｕｎｔｓ
由图６可知，当酶载量在４０ＦＰＵ·ｇ－１　ＤＭ 和５０
ＦＰＵ·ｇ－１　ＤＭ时，随着酶解的进行，葡萄糖产率开始
有起伏波动甚至出现下降的趋势。综合考虑酶解效果
和成本因素，选取适宜的酶载量为３０ＦＰＵ·ｇ－１　ＤＭ。
通过单因素实验分析，确定青霉纤维素酶酶解芦
竹的最适条件为：酶解时间７２ｈ、酶解温度４５℃、ｐＨ
值４．８、酶载量３０ＦＰＵ·ｇ－１　ＤＭ，在此条件下，葡萄糖
产率为 （６１．７５±１．２２）％、木糖产率为 （４０．０７±
６．８８）％。
２．３　混合纤维素酶和商业酶酶解效果对比
２．３．１　外加木聚糖酶酶载量对酶解效果的影响（图
７）
图７　外加木聚糖酶酶载量对酶解效果的影响
Ｆｉｇ．７　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｘｙｌａｎａｓｅ　ｌｏａｄｉｎｇ　ａｍｏｕｎｔ　ｏｎ
ｅｎｚｙｍｏｌｙｓｉｓ　ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ
由图７可知，随着木聚糖酶酶载量的增加，还原糖
产率明显上升；木聚糖酶酶活为１８０ＩＵ·ｇ－１　ＤＭ 时，
还原糖产率最高，此后葡萄糖产率略有下降，木糖产率
明显下降。最高的葡萄糖产率为６９．８２％、木糖产率
为６０．５０％，相对于单独青霉纤维素酶酶解的最高葡
萄糖产率６２．９７％和木糖产率４６．９５％，分别提高
６．８５％和１３．５５％。
２．３．２　外加ＮＳ５００１０酶载量对酶解效果的影响（图８）
图８　外加ＮＳ５００１０酶载量对酶解效果的影响
Ｆｉｇ．８　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ＮＳ５００１０ｌｏａｄｉｎｇ　ａｍｏｕｎｔ　ｏｎ
ｅｎｚｙｍｏｌｙｓｉｓ　ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ
由图８可知，随着外加 ＮＳ５００１０酶载量的增加，
葡萄糖的产率逐渐上升、木糖产率迅速上升；当酶载量
为４０ＣＢＵ·ｇ－１　ＤＭ 时，葡萄糖产率和木糖产率均达
到最高；此后再增加 ＮＳ５００１０酶载量，葡萄糖产率几
乎不变、木糖产率略有下降。最高的葡萄糖产率为
６８．９６％、木糖产率为９８．１６％，相对于单独青霉纤维
素酶酶解的最高葡萄糖产率６２．９７％和木糖产率
叶艳平等：青霉纤维素酶酶解芦竹的研究／２０１２年第５期 　２５　
４６．９５％，分别提高５．９９％和５１．２１％。添加ＮＳ５００１０
时木糖产率显著提高，且高于添加木聚糖酶的效果，其
原因可能为：青霉纤维素酶中木聚糖酶酶活与滤纸酶
酶活比例已达到一定理想值，单独添加木聚糖酶提高
该比例只能一定程度上提高酶解效率；而青霉纤维素
酶中β－葡萄糖苷酶酶活与滤纸酶酶活比例较低，当添
加一定的ＮＳ５００１０提高该比例后，有效地提高了各酶
之间的协同作用，从而得到较好的酶解效果。
２．３．３　不同酶酶解效果对比（图９）
图９　不同酶的酶解效果对比
Ｆｉｇ．９　Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ　ｏｆ　ｅｎｚｙｍｏｌｙｓｉｓ　ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ
ｆｏｒ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｃｅｌｕｌａｓｅｓ
由图９可知，青霉纤维素酶加ＮＳ　５００１０至β－葡萄
糖苷酶４０ＣＢＵ·ｇ－１　ＤＭ（酶系３）时木糖产率最高，为
９８．１６％，高于单独３０ＦＰＵ·ｇ－１　ＤＭ　ＮＳ５００１３（酶系
４）的８４．８８％。补加木聚糖酶（酶系２）或ＮＳ５００１０（酶
系３），均能提高葡萄糖产率，且接近商业酶 ＮＳ５００１３
单独酶解效果。故通过调节酶系中不同酶活比例，可
以达到较好的协同作用，并获得较好的酶解效果。
３　结论
（１）青霉纤维素酶酶解芦竹的最适条件为：酶解时
间７２ｈ、酶解温度４５℃、ｐＨ值４．８、酶载量３０ＦＰＵ·
ｇ－１　ＤＭ，在 此 条 件 下，葡 萄 糖 产 率 为 （６１．７５±
１．２２）％、木糖产率为（４０．０７±６．８８）％。
（２）通过添加不同商业酶如木聚糖酶、β－葡萄糖苷
酶，调节纤维素酶酶系中不同酶活比例，可一定程度上
提高酶解效率。当添加β－葡萄糖苷酶至４０ＣＢＵ·ｇ
－１
ＤＭ时，葡萄糖产率达６８．９６％、木糖产率达９８．１６％。
参考文献：
［１］　王超，章超桦．酶解纤维素类物质生产燃料酒精的研究进展［Ｊ］．
纤维素科学与技术，２００３，１１（３）：５２－５９．
［２］　武秀琴．纤维素酶及其应用［Ｊ］．微生物学杂志，２００９，２９（２）：８９－９２．
［３］　Ｋｕｍａｒ　Ｒａｊｅｅｖ，Ｗｙｍａｎ　Ｃｈａｒｌｅｓ　Ｅ．Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｃｅｌｕｌａｓｅ　ａｎｄ　ｘｙｌａ－
ｎａｓｅ　ｅｎｚｙｍｅｓ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｄｅｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｓｏｌｉｄｓ　ｆｒｏｍ　ｐｒｅｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｏｆ
ｐｏｐｌａｒ　ｂｙ　ｌｅａｄｉｎｇ　ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ［Ｊ］．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　Ｐｒｏｇｒｅｓｓ，２００９，
２５（２）：３０２－３１４．
［４］　Ｓａｈａ　Ｂａｄａｌ　Ｃ，Ｃｏｔｔａ　Ｍｉｃｈａｅｌ　Ａ．Ｌｉｍｅ　ｐｒｅｔｒｅａｔｍｅｎｔ，ｅｎｚｙｍａｔｉｃ　ｓａｃ－
ｃｈａｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｒｉｃｅ　ｈｕｌｓ　ｔｏ　ｅｔｈａｎｏｌ［Ｊ］．Ｂｉｏｍａｓｓ
ａｎｄ　Ｂｉｏｅｎｅｒｇｙ，２００８，３２（１０）：９７１－９７７．
［５］　Ｘｉａ　Ｌｉｍｉｎｇ，Ｓｈｅｎ　Ｘｕｅｌｉａｎｇ．Ｈｉｇｈ－ｙｉｅｌｄ　ｃｅｌｕｌａｓｅ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｂｙ　Ｔｒ－
ｉｃｈｏｄｅｒｍａ　ｒｅｅｓｅｉ　ＺＵ－０２ｏｎ　ｃｏｒｎ　ｃｏｂ　ｒｅｓｉｄｕｅ［Ｊ］．Ｂｉｏｒｅｓｏｕｒｃｅ　Ｔｅｃｈ－
ｎｏｌｏｇｙ，２００４，９１（３）：２５９－２６２．
［６］　Ｋｒｉｓｚｔｉｎａ　Ｋｏｖáｃｓ，Ｇｅｏｒｇｅ　Ｓｚａｋａｃｓ，Ｇｕｉｄｏ　Ｚａｃｃｈｉ．Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ　ｅｎ－
ｚｙｍａｔｉｃ　ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｐｒｅｔｒｅａｔｅｄ　ｓｐｒｕｃｅ　ｂｙ　ｓｕｐｅｒｎａｔａｎｔｓ，ｗｈｏｌｅ
ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ　ｂｒｏｔｈｓ　ａｎｄ　ｗａｓｈｅｄ　ｍｙｃｅｌｉａ　ｏｆ　Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ　ｒｅｅｓｅｉ
ａｎｄ　Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ　ａｔｒｏｖｉｒｉｄｅ［Ｊ］．Ｂｉｏｒｅｓｏｕｒｃｅ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２００９，
１００（３）：１３５０－１３５７．
［７］　孙宪昀，曲音波，刘自勇．青霉木质纤维素降解酶系研究进展［Ｊ］．
应用与环境生物学报，２００７，１３（５）：７３６－７４０．
［８］　Ｊｏｒｇｅｎｓｅｎ　Ｈｅｎｎｉｎｇ，Ｍｏｒｋｅｂｅｒｇ　Ａｓｔｒｉｄ，Ｋｒｏｇｈ　Ｋｒｉｓｔｉａｎ　Ｂ　Ｒ，ｅｔ　ａｌ．
Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃｅｌｕｌａｓｅｓ　ａｎｄ　ｈｅｍｉｃｅｌｕｌａｓｅｓ　ｂｙ　ｔｈｒｅｅ　Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ
ｓｐｅｃｉｅｓ：Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｓｕｂｓｔｒａｔｅ　ａｎｄ　ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃｅｌｕｌｏｓｅ　ａｄｓｏｒｐｔｉｏｎ
ｂｙ　ｃａｐｉｌａｒｙ　ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ［Ｊ］．Ｅｎｚｙｍｅ　ａｎｄ　Ｍｉｃｒｏｂｉａｌ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏ－
ｇｙ，２００５，３６（１）：４２－４８．
［９］　Ｇｈｏｓｅ　Ｔ　Ｋ．Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ　ｏｆ　ｃｅｌｕｌａｓｅ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ［Ｊ］．Ｐｕｒｅ　ａｎｄ　Ａｐ－
ｐｌｉｅｄ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１９８７，５９（２）：２５７－２６８．
Ｒｅｓｅａｒｃｈ　ｏｎ　Ｅｎｚｙｍｏｌｙｓｉｓ　ｏｆ　Ａｒｕｎｄｏ　Ｄｏｎａｘ　Ｕｓｉｎｇ　Ｃｒｕｄｅ　Ｃｅｌｕｌａｓｅ　ｆｒｏｍＰｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ
ＹＥ　Ｙａｎ－ｐｉｎｇ１，２，ＺＨＯＵ　Ｙｕ－ｊｉｅ２，ＤＩＮＧ　Ｙｉ－ｇａｎｇ１，ＬＩＵ　Ｊｉｎｇ２，ＺＨＡＮＧ　Ｊｉａｎ－ａｎ２
（１．Ｋｅｙ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　ｆｏｒ　Ｇｒｅｅｎ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｐｒｏｃｅｓｓ　ｏｆ　Ｍｉｎｉｓｔｒｙ　ｏｆ　Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ，
Ｗｕｈａｎ　Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ　ｏｆ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｗｕｈａｎ　４３００７３，Ｃｈｉｎａ；
２．Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ　ｏｆ　Ｎｕｃｌｅａｒ　ａｎｄ　Ｎｅｗ　Ｅｎｅｒｇｙ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｔｓｉｎｇｈｕａ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１０００８４，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ａｒｕｎｄｏ　ｄｏｎａｘ　ｗａｓ　ｅｎｚｙｍａｔｉｃａｌｙ　ｈｙｄｒｏｌｙｚｅｄ　ｂｙ　ｕｓｉｎｇ　ｃｒｕｄｅ　ｃｅｌｕｌａｓｅ　ｆｒｏｍ　Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ．Ｔｈｅ
ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｅｎｚｙｍｏｌｙｓｉｓ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ，ｅｎｚｙｍｏｌｙｓｉｓ　ｔｉｍｅ，ｐＨ　ｖａｌｕｅ　ａｎｄ　ｃｅｌｕｌａｓｅ　ｌｏａｄｉｎｇ　ａｍｏｕｎｔ　ｏｎ　ｅｎｚｙｍｏｌｙｓｉｓ　ｅｆ－
ｆｉｃｉｅｎｃｙ　ｗｅｒｅ　ｄｉｓｃｕｓｓｅｄ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｉｎｄｉｃａｔｅｄ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍｕｍ　ｅｎｚｙｍｏｌｙｓｉｓ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ　ｏｆ　Ａｒｕｎｄｏ　ｄｏｎａｘ　ｗｅｒｅ
ａｓ　ｆｏｌｏｗｓ：ｅｎｚｙｍｏｌｙｓｉｓ　ｔｉｍｅ　ｏｆ　７２ｈ，ｅｎｚｙｍｏｌｙｓｉｓ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｏｆ　４５℃，ｐＨ　ｖａｌｕｅ　ｏｆ　４．８，ｃｅｌｕｌａｓｅ　ｌｏａｄｉｎｇ　ａ－
ｍｏｕｎｔ　ｏｆ　３０ＦＰＵ·ｇ－１　ＤＭ．Ｕｎｄｅｒ　ｔｈｅｓｅ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ，ｔｈｅ　ｇｌｕｃｏｓｅ　ｙｉｅｌｄ　ｗａｓ（６１．７５±１．２２）％，ａｎｄ　ｔｈｅ　ｘｙｌｏｓｅ
ｙｉｅｌｄ　ｗａｓ（４０．０７±６．８８）％．Ｔｈｅ　ｓｕｇａｒ　ｙｉｅｌｄｓ　ｃｏｕｌｄ　ｂｅ　ｆｕｒｔｈｅｒ　ｉｎｃｒｅａｓｅｄ　ｗｉｔｈ　ａｄｄｉｎｇ　ｃｏｍｍｅｒｃｉａｌ　ｃｅｌｕｌａｓｅ　ｔｏ　ａｄ－
ｊｕｓｔ　ｔｈｅ　ｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｅｎｚｙｍｅｓ．Ｔｈｅ　ｇｌｕｃｏｓｅ　ｙｉｅｌｄ　ｒｅａｃｈｅｄ　６８．９６％ａｎｄ　ｘｙｌｏｓｅ　ｙｉｅｌｄ　ｒｅａｃｈｅｄ　９８．１６％
ｗｈｅｎ　ｔｈｅβ－ｇｌｕｃｏｓｉｄａｓｅ　ａｍｏｕｎｔ　ｗａｓ　ｉｎｃｒｅａｓｅｄ　ｔｏ　４０ＣＢＵ·ｇ
－１　ＤＭ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｃｅｌｕｌａｓｅ；ｅｎｚｙｍａｔｉｃ　ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ；Ａｒｕｎｄｏ　ｄｏｎａｘ