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提高长寿花试管苗增殖和生根率的研究



全 文 :提高长寿花试管苗增殖和生根率的研究
崔广荣 ,韦帮勤
(安徽技术师范学院农学系 , 安徽 凤阳 233100)
摘 要:以长寿花为材料 ,研究细胞分裂素 BA 和生长素 NAA对带腋芽茎段和茎尖
的增殖及 IBA 、NAA 对幼苗生根的影响 。试验结果表明 ,当茎尖和带腋芽茎段在
MS+BA 0.4mg L +NAA 0.1mg L的培养基中培养 ,有利于芽增殖 、分化 ,其繁殖系
数可达 5.8;而在培养基 1 2MS+ IBA 0.4mg L 中培养 ,有利于长寿花幼苗生根 。
关键词:长寿花;试管苗;增殖;生根
中图分类号:Q813.1 +2;Q949.751.1    文献标识码:A
长寿花(Kalanchoe Blossfeldian)是景天科伽蓝菜属的观叶和观花的花卉[ 1] ,又名寿星花 、
矮生伽蓝菜 ,一直深得消费者喜爱 。为典型的短日照植物 ,花期为冬 、春季 。植株形态矮小 、株
型紧凑 、多分枝;株高为 15 ~ 20cm ,株幅 10 ~ 20cm ;叶对生 ,肉质 、肥厚 ,叶色深绿或红绿色;花
较小 ,绯红 、桃红或橙红等色[ 2] 。每个花序着生 10 ~ 20个小花 ,形成一个个花团 ,整体观赏效
果很好。
近年来 ,随着改革开放和人民生活水平的提高 ,各种花卉市场需求大大增加 ,发展长寿花
生产具有广阔的前景 。利用长寿花茎尖和带腋芽茎段 、叶片等为外植体进行快繁报道较多[ 3] ,
其基本实验流程为:首先进行愈伤组织的诱导及继代培养 ,再进行愈伤组织的分化和芽的增
殖 ,而后进行根的诱导 。本试验在他人的研究基础上[ 4] ,以不同激素组合 ,试图选择出更加适
合长寿花增殖及生根的培养基 ,进一步提高其幼苗增殖率 ,为实现快繁和工厂化生产奠定基
础。
1 材料与方法
1.1 材料与主要药品
长寿花无菌苗 ,由本院生物系花卉中心提供;吲哚丁酸(IBA)、苄基腺嘌呤(BA)、萘乙酸
(NAA)购于中国医药集团上海化学试剂公司。
1.2 培养基
1.2.1 芽增殖培养基及其激素组合 以 MS 为基本培养基 ,添加不同浓度的激素 BA 、NAA ,
5.8g L 的卡拉胶 ,30g L 蔗糖 , pH调到 5.8。激素组合见表 1。
1.2.2 生根培养基及其激素组合 以 MS 为基本培养基 ,添加不同浓度的激素 IBA ,5.8g L
的卡拉胶 ,30g L 蔗糖 ,pH 调到 5.8。激素组合见表 2 。
1.3 处理方法
1.3.1 芽的增殖 本试验设计了二因素随机区组试验 ,以了解 BA和 NAA 对长寿花芽增殖
收稿日期:2003-06-20
基金项目:安徽技术师范学院自然科学基金项目资助(2003Y207)
作者简介:崔广荣(1964-),男 ,安徽长丰人 ,硕士 ,讲师 ,主要从事植物遗传学 、组织培养等相关生物技术的教学和研究工作。
特产研究 Special Wild Economic Animal and Plant Research   2003年第 4期   15 
文章编号:1001-4721(2003)04-0015-04
DOI:10.16720/j.cnki.tcyj.2003.04.004
表 1 芽增殖培养基中加入 BA、NAA的组合
编号 A B NAA(mg L) BA(mg L)
1
2
3
A1
B1
B2
B3
0.1
0.1
0.1
0.2
0.4
0.6
4 B4 0.1 0.8
5 B1 0.2 0.2
6
7
8
A2
B2
B3
B4
0.2
0.2
0.2
0.4
0.6
0.8
表 2 生根培养基中加入 IBA的组合
编  号 B IBA(mg L)
1 B1 0
2 B2 0.2
3 B3 0.4
4 B4 0.8
的影响 ,寻找出两种因素最佳组合 。在试验设计上 ,缩小 BA和 NAA 这 2个因子的浓度梯度
差 ,以期获取更加精细的两类激素组合培养基 。每个处理接 4瓶 ,每瓶 2个茎尖或带腋芽茎段
为外植体。在无菌条件下 ,将嫩茎切为 1cm左右的茎尖或带 1 ~ 2个节的茎段 ,接种到芽增殖
培养基上 ,置于温度 25±2℃、光照强度 1 500 ~ 2 000lx 、每天照光时间 12h的条件下培养 ,注
意观察芽的分化情况 ,接种后 30d进行芽增殖数统计。
1.3.2 生根壮苗 为探讨 IBA对长寿花生根的影响 ,对处理因素 IBA设置了 4个水平 ,每个
处理接种 4瓶 ,每瓶接 2个芽 ,15d后统计生根情况 。
2 结果与分析
2.1 BA、NAA对芽增殖的影响(见表 3)
  表 3 BA 、NAA对芽增殖的影响
处理序号 BA(mg L) NAA(mg L) 芽增殖(个) 增殖系数
1 0.2 0.1 24 3.00
2 0.4 0.1 45 5.67
3 0.6 0.1 41 5.11
4 0.8 0.1 38 4.75
5 0.2 0.2 26 3.22
6 0.4 0.2 47 5.80
7 0.6 0.2 42 5.20
8 0.8 0.2 38 4.75
表 3结果表明:将外植体接种在不同增殖培养基上 ,在激素 BA 浓度为 0.2 ~ 0.8mg L 和
NAA 的浓度分别为 0.1mg L 和 0.2mg L 时 ,结果发现都能长出新的不定芽;在 BA 浓度为 0.
4mg L 、NAA浓度为 0.2mg L 时 ,能够较早分化出不定芽 ,且不定芽的增殖速度很快 ,繁殖系
数可达 5.80倍 ,长势良好。当 NAA浓度为 0.1 ~ 0.2mg L时 ,BA浓度为 0.2 ~ 0.4mg L 时 ,随
着 BA浓度的升高 ,芽的增殖系数显著增加;BA浓度为 0.4 ~ 0.8mg L 时 ,随着 BA浓度的升
高 ,芽的增殖系数却逐渐下降 。
  表 4 激 素 与 浓 度 对 芽 增 殖 的 方 差 分 析
变异来源 DF SS MS F F0.05 F0.01
区 组 间 3 3.35 1.11 0.25
处 理 间 7 123.47 17.64  3.93** 2.49 3.64
A 1 0.78 0.78 <1
B 3 122.34 40.78  9.08** 3.07 4.87
A×B 3 0.35 0.12 <1
误  差 21 94.25 4.49
总 变 异 31 217.72
  经上述试验结果(表 4)的统计分析显示:不同浓度的 BA对芽增殖影响差异达到极显著水
16  特 产 研 究 2003年
平(F =9.08>F 0.01=4.87),不同浓度 NAA 对这个指标不显著(F =0.78<1),因此选择适宜
的 BA浓度对长寿花芽的增殖和生长显得尤为重要。
  表 5  激 素 BA 新 复 极 差 测 验(SSR)
浓  度 XB
差 异 显 著
5% 1%
B2 46.0 a A
B3 41.5 b B
B4 38.0 c C
B1 25.0 d D
通过表 4 、表 5多重分析比较 ,B2 为优 ,在 a=1%水平上 ,B3 与 B4 有显著差异 , B2 与 B1 、
B3 、B4 都达到了极显著差异 ,所以增殖培养基选择 B2 即 BA 0.4mg L +NAA 0.1 ~ 0.2mg L
较为合适 。
2.2 长寿花不定根的诱导(见表 6)
  表 6 IBA对 生 根 的 影 响 和 新 复 极 差 测 验
处理序号 IBA(mg L) 每株平均根数及其新复极差测验 平均根长度(cm)及其新复极差测验
1 0 1.5 D 0.80 C
2 0.2 4.0 B 1.11 B
3 0.4 4.5 A 1.43 A
4 0.8 3.6 C 0.65 D
取初代培养 35d的不定芽 ,接到含不同浓度 IBA的 1 2M S培养基中诱导生根 。表 6的结
果表明:一定浓度的 IBA 有利于促进根的生成 , 但超过一定的浓度范围则对根的生长起抑制
作用 。本试验培养基中生长激素 IBA浓度为 0.4mg L 时最有利于不定根的形成 , 不仅生根数
多 , 而且平均根长也为最长 。在此条件下 , 经 15d的培养 , 生根数平均可达 4.5 ,平均根长为
1.43cm ,经方差分析可知差异显著。当 IBA浓度为 0.8mg L 时 ,对根的生长有明显的抑制作
用 ,这有可能 IBA在较高浓度下对长寿花根的伸长有抑制作用。
3 结论与讨论
在长寿花的组培快繁过程中 ,细胞分裂素 BA对促进芽分化增殖有明显作用 ,而 NAA的作
用似乎不是很显著。长寿花芽增殖的最适培养基为 MS+BA 0.4mg L+NAA 0.2mg L。使用生
长素 IBA在适宜浓度进行组培时 ,有利于根的形成 ,其培养基为:1 2MS +IBA 0.4mg L。
用侧芽和顶芽直接进行丛芽诱导长寿花的快速繁殖再生植株 ,一方面能缩短幼苗繁殖时
间 ,另一方面减少突变体的产生 ,有利于保持良种的优良品质[ 5] 。从实验的结果来看 ,BA浓度
的变化对芽增殖有明显影响 ,尤其从 0.2 ~ 0.4mg L 时 ,变化极显著。而 NAA 浓度的变化似
乎对芽增殖的影响不是太显著 ,这可能与我们设计的 NAA浓度变化范围小有关系 ,较大浓度
的 NAA 对长寿花芽增殖的影响还有待于进一步的研究。
Skoog 和 Miller1957年提出的有关植物激素控制器官形成的学说是植物组织培养进行激
素组合研究的重要理论依据。本试验中的 BA 、NAA 对长寿花增殖影响的总体趋势是上升的 ,
但两者的比例必须适当 ,否则不利于芽增殖 ,会出现繁殖系数减小现象。
  第 4 期 崔广荣等:提高长寿花试管苗增殖和生根率的研究 17 
参考文献:
[ 1] 李芝强 , 张荣蛰.室内花卉———长寿花[ J] .林木花卉 , 1998 ,(5):50.
[ 2] 程广有.名优花卉组织培养技术[ M] .北京:科学技术出版社 , 2001.1.
[ 3] 吴丽芳 , 屈云慧 ,杨春梅.长寿花的组培快繁[ J] .云南农业科学 , 2001 ,(4):21.
[ 4] 崔广荣 , 王彦.长寿花组织培养的研究[ J] .河南职业技术师范学院学报 , 2003 ,(1):51 ~ 53.
[ 5] 谭文澄 , 戴策刚.观赏植物组织培养技术[ M] .北京:中国林业科技出版社 , 1991.
Studies on Propagation and Rooting Rate of Kalanchoe
blossfeldian in vitro
CUI Guang-rong ,WEI Bang-qin
(Agronomy Department of Anhui Technical Teachers College.Fengyang , Anhui 233100)
Abstract:The propagation of shoo t-tip and stem with auxillary bud of Kalanchoe blossfeldian , w hich were used as
explants , w as studied in MS medium supplemented with BA and NAA.Auxin NAA combined with IBA could pro-
mote the grow th of roots.The results indica ted that monthly propagation coefficient of Kalanchoe blossfeldian could
reach 5.8.I t was advantageous to the differentiation of the bud when shoo t-tip and stem with auxillary bud were
cultured in MS medium supplemented w ith 0.4mg L BA and 0.2mg L NAA.The best medium for the grow th of
root was 1 2MS+IBA 0.4mg L , w hich was suitable to no t only rooting but also making plantlets strong.
Key words:Kalanchoe blossfeldian;Plant in vitro;P ropagation;Roo ting
(上接第 14 页)
A Study on Fitting Conditions of Hypha Growth of Bailing Mushroom
ZHANG Chang-qing1 , WANG Hong-ying2 , ZHANG Jian-min1 , FAN Mou-chun1
(1.Depar tment o f Ag ronomy , Hubei Ag ricultural College of Changjiang University.
Jing zhou ,Hubei 434025;2.Qinghai University.Xining , Qinghai 810016)
Abstract:The effects of temperature , pH and nutrients on the hypha g rowth o f two different v arieties of Bailing
mushroom were S tudied.The results showed tha t the most proper temperature to the hypha grow th of the fungi va-
rieties of T ianshan-mushroom 2 was 25℃;under this temperature , hypha g rowth was quicker and more strong than
that at 22.5℃ o r 27.5℃ .Between 25℃ and 27.5℃, the hypha g row th of Bailing mushroom 1 w as be tter than
that at 22.5℃ o r 30.0℃.How ever , the hypha of two kinds of Bailing mushroom could all grow in the range of pH
4.5 ~ 8.5 and tempera ture 17.5~ 30.0℃, but the pH 6.9~ 7.7 w as more advantageous to the hypha g rowth.The
effects of Peptone and ZnSO 4 at certain concentration on the hypha grow th of tw o kinds of Bailing mushroom were
stronger than others.ZnSO4 could make Bailing mushroom s hypha g row well.
Key words:Bailing mushroom;Hypha g rowth;Temperature;pH;Nutrients
18  特 产 研 究 2003年