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铁筷子多糖联合阿苯达唑抑制小鼠细粒棘球蚴生长



全 文 :!#*+,&’ -./+,+%. 0’1 2 31 2 4.*1 5662·576·
8文章编号 9 :7;5<27:= >5662 ?62<6576<6@ ·论著·
作者简介:包根书(:=7; A),男,硕士,讲师,主要从事包虫
病的流调与防治工作。
棘球蚴病(B,C+%,,,D+D)又称包虫病(EF/&G+/
/+D.&D.)是一种严重危害人体健康和畜牧业发展的
人兽共患寄生虫病。包虫病的治疗以手术为主,但
药物治疗是重要的辅助手段。目前,药物治疗主要
是苯丙咪唑类药物和吡喹酮,其中阿苯达唑
(H’I.%/&J’.,HKL)被认为是治疗包虫病最有效的
药物之一 8 :,5 9,经临床应用,取得了一定效果。但由
于其存在肠道吸收差,血、肝药浓度较低,化疗效果
仍不令人满意 8 2 9。-$$+D等 8 @ 9用阿苯达唑治疗沙鼠
棘球蚴时,发现棘球蚴对阿苯达唑产生了耐药性。为
了进一步提高阿苯达唑等药物抗包虫病的化疗效果
及寻找更有效的药物治疗途径,本文试用中药铁筷子
多糖(C.’’.I&$#D GC+I.G&%#D ($&%,C *’FD&,,C&$D.M
ENO4)单独及联合阿苯达唑治疗小鼠继发性棘球蚴
病,观察其治疗效果。
! 材料和方法
! ! 原头节
从自然感染的绵羊肝棘球蚴囊中,无菌抽取含
铁筷子多糖联合阿苯达唑抑制小鼠细粒棘球蚴生长
包根书 :,邓 英 5M史大中 :
:1 兰州医学院病原生物学教研室 >兰州 ;26666 ?
51 兰州市第二人民医院 >兰州 ;26626 ?
【摘要】 目的 研究中药铁筷子多糖单独及联合阿苯达唑用药对小鼠继发性感染细粒棘球蚴的抑制作用,探
讨其作用的机制及寻找药物治疗细粒棘球蚴病的新途径。方法 动物实验共分 @ 组:阿苯达唑组;铁筷子多糖组;铁
筷子多糖 P阿苯达唑组;对照组。对小鼠继发性感染细粒棘球蚴病药物治疗 =6/后,检测各组小鼠棘球蚴囊湿重;并
进行病理组织学和超微结构观察。结果 铁筷子多糖、阿苯达唑及联合用药组均有抑制小鼠棘球蚴生长的作用(抑
囊率分别为 2Q1 52R,7@1 Q7R 和 ;;1 S@R),其中联合用药组明显优于单独用药组(! T 61 6S)。病理组织及超微结
构观察发现各治疗组中棘球蚴囊壁组织和细胞均有不同程度的改变或破坏。结论 铁筷子多糖对小鼠棘球蚴生长
有一定的抑制作用,与阿苯达唑联合治疗效果更佳,这可能与铁筷子多糖提高小鼠机体的免疫力有关。联合用药是
提高阿苯达唑驱虫效果的有效途径之一。
【关键词】 细粒棘球蚴;抑制作用;铁筷子多糖;阿苯达唑
中图分类号:U2Q21 22;U@S2 文献标识码:H
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KHV W.% #-&0(1) 12 !%0’1*)(& 3(141*56 7%)8’19 :+(&%4 ;1446 7%)8’19,<%)-9 =>????6 ;’()% @
【6*9%4-%】 :*;.-%)<. ) DG#/F GC. +%C+I+GF .((.,G ( E.’’.I&#D GC+I.G&%#D (&%,C *’FD&,,C&D. >ENO4? (]C+ID &%/ H’I.%/&J’. >HKL? % GC. Z^GC ( A&’()1&1&&9- *.%)941-9- +% \+,.1 ,.%; -+,. ^.. /+_+/./ +%G
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&’%.M HKL &’%. &%/ ENO4 ,\I+%./ ^+GC HKL C&/ I_+#D +%C+I+GF.((.,G^GC ( CF/&G+/ ,FDG > +%C+I+G+% &G.D ^.. 2Q1 52R M 7@1 Q7R &%/ ;;1 S@R .D*.,G+_.’F ? 1 BD*.,+&’’FM GC. ,\I+%&G+% GC.&*F ( GC. G^ /#ZDM ENO4 &%/ HKLM % A&’()1&1&&1-9- *.%)941-9- DC^./ DG%Z +%C+I+G+% &,G+%1 ?#(-7>9)#( ENO4 \&F .%C&%,. H’I.%/&J’. +%C+I+GF .((.,G &Z&+%DG A&’()1&1&&1-9- *.%)941-9-1 【@./#59】 A&’()1&1&&9- *.%)941-9-c +%C+I+G+_. &,G+%c ENO4c H’I.%/&J’.
热带医学杂志 !#年第 #卷第 #期 ·! 1(,()
23’ # 4 .’ !!
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3+/42’ / 33’ +2 — 表 ! 各组棘球蚴囊湿重和抑囊率的比较 #% ! &’()#*+,’- ’. /01#2+1 30,2 452 45+6/27 +-/++2+’- *#25 52455- 3’-2*’8 #-1 2*5#251 6*’9),
原头节的囊液,置 26自然沉淀 !,78后弃上清,用
无菌 ’ .5 生理盐水(均含青霉素和链霉素各
+! ) ,9),清洗原头节 +次,镜检活原头节占 .+5
以上,即可作动物体内接种。
! # 实验动物及药品
雌性昆明种小鼠 2只,体重 %/ : !!(,购自兰
州医学院实验动物中心。阿苯达唑(购自浙江万马
药业有限公司);铁筷子多糖呈灰褐色粉末状,易溶
于水,由兰州医学院天然药物化学教研室从铁筷子
的根块中提取,铁筷子根块采自甘肃成县,每公斤
铁筷子提取约 !/(铁筷子多糖。
! 实验动物模型的建立及给药方法 取上述备用的原头节,每只小鼠腹腔注射原头节 约 !个,饲养 #;后,作为动物模型,随机分组治疗 0表 %和表 !1。将药物用蒸馏水配成混悬液,各治疗组 中阿苯达唑 +,( ) *(·;;铁筷子多糖 %( ) *(·;;对照 组(未治疗组)和空白组均给予等体积蒸馏水,用小鼠 灌胃针每日灌胃 %次,连续给药 .;(其间 只自然
死亡)后,随之眼眶采血,解剖测量。
! % 疗效评价
%’ 2’ % 棘球蚴囊湿重及抑囊率 小鼠治疗 #个月
后,摘眼球取血。从小鼠腹腔取出棘球蚴囊称重,并
计算抑囊率 <抑囊率 =(对照组棘球蚴囊湿重—治
疗组棘球蚴囊湿重))对照组棘球蚴囊湿重 >。
%’ 2’ ! 组织学观察 随机抽取各组棘球蚴囊,用
%5甲醛溶液固定,石蜡包埋,?@染色及切片,观
察棘球蚴囊壁组织病理形态改变并拍照,同时对棘
球蚴囊壁组织进行病理分级。
%’ 2’ # 超微结构观察 随机抽取各组棘球蚴囊,
置 25戊二醛前固定,四氧化锇后固定,丙酮梯度脱
水,@ABCD/%!包理,EFGDCHIJ型超薄切片机切片,
置于铜网上经醋酸铀、柠檬酸铝双重染色后,用
K?LD%MN电镜观察并拍照。
%’ 2’ 2 统计分析 应用专业 OAOO/’ PHQ R78;HRS
统计软件,采用方差分析和等级资料秩和检验。
# 结 果
# ! 棘球蚴囊湿重及抑囊率
各治疗组囊湿重较对照组明显减少( ! &
’ %),联合用药组与单用药组比较有显著性差异
( ! & ’ +),铁筷子多糖、阿苯达唑及联合用药组
的抑囊率分别是 #/’ !#5,2’ /5 和 33’ +25。棘
球蚴囊湿重和抑制率 0表 % 1。
# # 棘球蚴组织学观察
对照组细粒棘球蚴囊壁组织显微镜下观察,显
示角质层纹理规整,生发膜细胞多,排列紧密。治疗
组棘球蚴囊壁组织均有不同程度的改变,以联合组
坏死性改变最为显著 0图 % :图 # 1。各治疗组与对照
组棘球蚴囊病理组织改变在程度上有显著性差异
( ! & ’ %)T 联合用药组与单用药组棘球蚴囊病理
组织改变有显著性差异( ! & ’ %,表 ! 1。
图 : 铁筷子多糖组棘球蚴囊壁角质层变薄,生发层细胞数
目细明显减少 ; < :== >
?+6% : @/’4+-6 2/5 2/+- 8#(+-#251 8#05* #-1 65*(+-#8
8#05* 4+2/ *519351 -9(5* ’. 3588, +- ! #%&’()*’* 30,2#.25*
2*5#2(5-2 4+2/ A?B@ ; < :== >
图 ! 对照组棘球蚴囊壁组织角质层、生发层 ; < :== >
?+6% ! @/’4+-6 2/5 -’*(#8 8#(+-#251 8#05*7 65*(+-#8
8#05* ’. ! #%&’()*’* 30,2 4#88 ; < :== > !#%&’ ( )*+,&’ -./+,+%. 0’1 2 31 2 4.*1 5662·575· ! 讨 论 铁筷子多糖是从中药铁筷子的根块中提取的 组 别 囊数(个) 病理分级 铁筷子多糖 阿苯达唑 铁筷子多糖 8阿苯达唑 对照组 9: 97 9: 5; 正常 ; 9 5 9< 变性 95 < = 2 坏死 5 7 99 5 表 ! 各组间细粒棘球蚴囊病理组织改变 #% ! &’()*+#),*-*.’/#- /,#0.1( *2 ! #%&’()*’* /3()( 40516 ),1 -’.,) 7’/6*(/*+1 ’0 5’221610) 2*674-#)’*0( 图 8 对照组棘球蚴囊壁组织生发层皮质区细胞 9 : ;<<<< = >’.% 8 ?,*@’0. ),1 0*67#- /1-- *2 .167’0#- -#316 ’0 ! #%&’()*’* /3() *2 /*0)6*- .6*4+ 9 : ;<<<< =
# ! 棘球蚴超微结构观察结果
对照组棘球蚴囊角质层呈现明暗相间规则
的板层状结构。生发膜皮层区与角质层邻接,微
毛发育良好,数量较多,排列规则,呈纵切面长条
状,伸向并嵌入角质层。细胞区可见生发细胞排
列疏松,胞浆内可见许多细胞器,胞核规则。治疗
组棘球蚴超微结构均有不同程度损伤 >图 ; ?图
: @。
图 A 对照组棘球蚴囊壁组织生发层皮质区微绒毛,呈长条
状,并延伸嵌入到角质层中 9 : !8<<< =
>’.% A ?,*@’0. ),1 7’/6*B’--’ *2 /1-- *2 .167’0#- -#316 ’0
! #%&’()*’* /3() *2 /*0)6*- .6*4+9 : !8<<< = 图 C 铁筷子多糖组棘球蚴囊壁组织生发层皮区细胞核周 间隙增宽,胞浆出现大量空泡 9 : ;D<<< = >’.% C ?,*@’0. ),1 ’0/61#(15 B1(’/-1( ’0 ),1 /1-- *2 .167’0#- -#316 ’0 ! #%&’()*’* /3() #2)16 )61#)710) @’), &>E?9 :
;D<<< =
图 F 对照组棘球蚴囊壁组织角质层 9 : !<<<< =
>’.% F ?,*@’0. ),1 0*67#- -#7’0#)15 -#316 ’0 ! #%&’()*’* /3() *2 /*0)6*- .6*4+ 9 : !<<<< = 图 D 铁筷子多糖和阿苯达唑联合组棘球蚴囊壁组织变性 坏死,部分钙化 9 : !<< = >’.% D ?,*@’0. ),1 /3() @’), 01/6*(’( #05 /#-/’2’/#)’*0 #2)16 )61#)710) @’), /*7’0#)’*0 *2 &>E? #05 GHI 9 : !<< =
热带医学杂志 !#年第 #卷第 #期 ·!#· %上接 #&页 ’ 有 !( 只感染性蚊叮咬才可能出 现新的微丝蚴血症者。本文计算结果均未达此数, 五年纵向观察未发现新感染的微丝蚴血症者,与 )*+,-./,0的结论相符,说明丝虫病的传播已被阻断, 大量的人群和蚊媒的横向监测结果显示,&12年后
未发现自然感染的蚊媒,&11(年后已无微丝蚴血症
者。提示在防治后期只要单一处理残存的微丝蚴血
症者即可达到消灭丝虫病的目的。
在丝虫病的防治后期系统的开展横向监测,可
以了解残存微丝蚴血症者的分布概况和发现防治
工作存在的薄弱环节,有目的地开展针对消除残存
微丝蚴血症者的巩固扫尾工作,加快消灭传染源,
使全省达到消灭丝虫病的目标。
3参 考 文 献 4
邓珊珊 5 浙江余杭县丝虫病纵向监测研究 3 6 4 5 寄生虫学与
寄生虫病杂志7 &12$;8:!25
冯祖梅 5 应用间接免疫荧光抗体试验检测丝虫病抗体的研究
3 6 4 5 寄生虫学与寄生虫病杂志7 &12#;&:8(5
魏银松 5 丝虫病传播阈值的研究 3 6 4 5 中国寄生虫病防治杂
志,&121;!:&5
)*+,-./,0 9:5 ;0<0=, />?/=<0@ A= ,-0 0BA>0CA*D*.E /=> <*=,F*D *G
GAD/FA/D A=G0<,*=@ A=A=. 0=,*C*D*.A3 6 4 5 !#% &’( )’ !’* +,- .(/0 &128:(@+BBD0C0=,):(25 %收稿日期:!#HH&87修回日期:!#H(H!! ’
图 ! 铁筷子多糖和阿苯达唑联合组棘球蚴囊壁组织生发
层皮区细胞核固缩,胞浆内溶酶体增多( #
%&’( ! )*+,&-’ .*/ &-01/23/4 563+3+7/ 2-4 869-+3&3 &- .*/
0/55 +: ’/17&-25 526/1 &- ! #%&’()*’* 063. 2:./1 .1/2.7/-. ,&.* 0+7;&-2.&+- +: <%=) 2-4 >?@ A #$$$ B
主要成分,中药铁筷子的根及根茎有活血散瘀、消
肿止痛、清热解毒之功效。临床用于治疗泌尿系炎
症、疮疖肿痛等。国外曾报道铁筷子根具有抑制人
上皮癌 I9细胞体外生长的成份 3 J 4。刘昕 3 $,( 4等报道
铁筷子多糖对小鼠体内实体型 )&2肿瘤具有抑制作
用,能明显改善机体的免疫功能,逆转因肿瘤生长
而造成的免疫抑制状态,提高脾淋巴细胞转化率和
巨噬细胞内酸性磷酸酶、精氨酸酶活性,诱导脾细
胞合成 KLH!。本实验首次试用铁筷子多糖治疗小鼠
继发性棘球蚴病,结果显示其能抑制棘球蚴的生
长,抑囊率为 #25 !#M。这可能与铁筷子多糖能改善
因棘球蚴寄生造成的免疫抑制状况,增强了机体的
免疫功能,对棘球蚴的生长有一定的抑制作用有
关。本实验结果显示阿苯达唑确有抑制小鼠棘球蚴
生长作用,其抑囊率为 $85 2$M 7 但仍不能充分发
挥其最佳疗效7 主要是因为其不溶于水、肠道吸收
差,肝血浓度较低,动物实验发现长期应用可产生
抗药性 3 8 4及感染棘球蚴后机体免疫功能被抑制等。
仅用杀虫药物要完全治愈棘球蚴病是困难的,所以
疗效还取决于免疫反应。早在 &11年,就有学者注
意到药物与免疫反应具有联合杀虫作用,随后陆续
报道了有关化疗的免疫依赖性。免疫力低下可降低
包括血吸虫病、疟疾和锥虫病等的化疗效果。故改
善机体的免疫力可提高药物的杀虫效果 3 2 4。用铁筷
子多糖联合阿苯达唑治疗小鼠继发性腹腔棘球蚴
病,其抑囊率达 ((5 J8M,与单用药组有显著性差异
( 1 N 5 J)。病理组织和超微结构观察对棘球蚴囊
壁组织有一定的破坏作用。综上所述,中药铁筷子多
糖有抑制小鼠腹腔继发性棘球蚴生长作用,但杀虫效
果不及阿苯达唑,联合用药明显增强阿苯达唑对棘球
蚴生长的抑制作用,提高阿苯达唑的驱虫效果。
3参 考 文 献 4
O/FA@ :7 P/QD*Q@RA S)7 OAT*= U5 V+D,A<0=,F0 W0=XACA>/X*D0 5.67 &12Y 8 %# ’ Z #2# [ #225
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/D?0*D/F 0<-A=*<*<<*@A@ -+C/= 3 6 4 5 5!6 89’:#4 5’;</ =’3*
>7?<’7’77’%<%7 &11Y (8 %# ’ Z !#& [ !8!5 V*FFA@ OL7 a/ED*F OU5 >7?<’7’773% /#34’%3%Z >0?0D*BC0=, *G F0@A@,/=<0 ,* /DW0=>/X*D0 A= /= /=AC/D C*>0D 3 6 4 5 @ .,4:<A?’47
&11Y 8 %! ’ Z &(& [ &(85 郭晓庄 5 有毒中草药大词典 3V 4 5 天津Z 科技翻译出版公司7 &11!:8#J5 刘 昕7 扬永键 5 铁筷子多糖抗肿瘤及免疫调节作用的实验 研究 3 6 4 5 中药新药与临床药理,!;&& %8 ’:!&# [ !&J5 刘 昕7 扬林西7 潘兴斌7 等 5 铁筷子多糖抑制小鼠体内 )&2 生长作用及其机制的实验研究 3 6 4 5 中国现代应用药学杂志, !&;&2 %! ’ Z 18 [ 15
詹希美 5 人体寄生虫学 3V 4 5 第 J 版 5 北京:人民卫生出版
社,!&Z #!J5
%收稿日期:!#HH&!7修回日期:!#H(H&J ’ 3 & 4 3 ! 4 3 # 4 3 8 4 3 J 4 3 4
3 ( 4
3 2 4
3 & 4
3 ! 4
3 # 4
3 8 4

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