全 文 ：华西药学杂志
W C J·P S 2012，27(3)∶262 ～ 264
伤［5］。CCl4 所致的急性肝损伤模型是最常用的经
典模型之一，实验模型组大鼠 ip CCl4 之后，血清中
ALT、AST的含量明显升高，表明模型制备成功。马
尾松针叶聚戊烯醇(20、40 mg·kg －1)能降低 CCl4 损
伤所致大鼠血清中 ALT、AST活性的升高，对肝细胞
水样变性、脂肪变性及坏死、纤维结缔组织增生和炎
性细胞浸润都有不同程度的减轻，具有一定的降酶、
保肝作用。CCl4 是亲肝性毒物，对肝脏具有较强的
损伤作用，其引致的自由基及其启动的脂质过氧化
连锁反应是其损伤肝细胞的主要机制之一。马尾松
针叶聚戊烯醇在体外对·OH、·O2 －以及 DPPH自由
基具有直接清除作用，在体内能降低肝匀浆中 MDA
的含量、提高其 SOD 和 GSH － Px 的活力。因此，马
尾松针叶聚戊烯醇可能是因为具有抗脂质过氧化作
用、减轻自由基对脂膜及线粒体膜的攻击而起到对
CCl4 肝损伤的保护作用，具体的作用机制值得进一
步研究。
参考文献:
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收稿日期:2011 － 10 － 08
基金项目:贵州省科技基金(No． 20092150) ;贵阳市科技计划项目(筑科合同 201120422 号)
作者简介:钱海兵(1977—) ，男，河南卫辉，博士，副教授，从事中药及民族药药效物质基础及作用机制的研究。Email:qhb888@ sohu． com
铁筷子醇提物对小鼠的镇痛作用及其机制研究
钱海兵，徐玉平，蒲金山，王 龙，靳凤云
(贵阳中医学院，贵州 贵阳 550002)
摘要:目的 研究苗药铁筷子醇提物的镇痛作用。方法 采用小鼠扭体致痛法、热板致痛法和甲醛致痛法考察铁筷子醇提
物的镇痛作用，并采用左旋精氨酸(L － Arg)和 N －硝基 － L －精氨酸甲酯(L － NAME)对铁筷子醇提物镇痛作用的影响实验
以及纳洛酮拮抗实验来初步研究铁筷子醇提物的镇痛机制。结果 铁筷子醇提物对冰醋酸引起的小鼠扭体反应有明显的抑
制作用，可显著提高小鼠热板法的痛阈值，对甲醛疼痛模型动物 I、II 相疼痛反应均有抑制作用;纳洛酮对铁筷子醇提物的镇
痛作用无明显影响;L － Arg可减弱铁筷子醇提物对醋酸致小鼠扭体反应的抑制作用，L － NAME 可增强其镇痛作用。结论
铁筷子醇提物具有明显的镇痛作用，其作用部位可能在外周神经末梢或中枢神经系统。
关键词:铁筷子;醇提物;镇痛;小鼠
中图分类号:R96 文献标志码:A 文章编号:1006 － 0103(2012)03 － 0262 － 03
Study on the analgesic effects and mechanism of the ethanol extracts of Tie Kuaizi
QIAN Hai － bing，XU Yu － ping，PU Jin － shan，WANG Long，JIN Feng － yun
(Guiyang College of Traditional Chinese Medicine，Guiyang，Guizhou，550002 P． R． China)
Abstract:OBJECTIVE To study the analgesic effects and mechanism of ethanol extracts of Tie Kuaizi in mice．METHODS The
analgesic effects were tested by hot － plates test and twisting body test． The I and II phase pain were observed with the pain model
caused by formalin test． Influence of naloxone antagonism test and L － Arg and L － NAME were also used to explore the analgesic mech-
anism of ethanol extracts of Tie Kuaizi． RESULTS The ethanol extracts of Tie Kuaizi could significantly reduce the times of twisting
body induced by acetic acid，and greatly improve the pain threshold of hot － plate in mice． Ethanol extracts had inhibitory effect on I
and II phase pain in formalin induced pain model animals． Analgesic effect was not significantly reduced by naloxone． L － Arg could
reduce but L － NAME could enhance the analgesic action． CONCLUSION The ethanol extracts of Tie Kuaizi shows analgesic effects．
The analgesic site may locate in both central and peripheral nervous system．
Key words:Tie Kuaizi;Ethanol extracts;Analgesic;Mice
CLC number:R96 Document code:A Article ID:1006 － 0103(2012)03 － 0262 － 03
DOI:10.13375/j.cnki.wcjps.2012.03.015
苗药铁筷子为腊梅科腊梅属植物腊梅 Chimo-
nanthus praecox(L．)1ink． 及山腊梅 Chimonanthus
nitens Oliv．的干燥根，又称铁钢叉、瓦鸟柴，收载于
《中华本草·苗药卷》及 2003 年版《贵州省中药材、
民族药材质量标准》［1］。铁筷子具有祛风止痛、理
气解毒之功效，主治胃痛、腹痛、风湿痹痛、疔疮肿
痛、跌打损伤等疾病，民间多用于治疗风湿疼痛。市
面上以铁筷子为主要原料开发了如筋骨伤喷剂、通
络骨质宁等制剂，但关于铁筷子的药理特别是镇痛
作用研究报道较少。为此，特探讨了铁筷子醇提物
的镇痛作用及其机制，为其开发提供药理基础。
1 实验部分
1. 1 仪器、试药与动物
智能热板仪(YLS － 6B 安徽省淮北正华生物仪
器设备有限公司)。铁筷子采自贵阳新添寨，经王
祥培副教授鉴定为蜡梅科植物蜡梅 Chimonanthus
praecox(L．)Link．的根茎，每 6 g药材加 60%乙醇回
流(100 mL × 3) ，合并滤液，减压回收乙醇至无醇
味，浓缩后烘干即得醇提物;纳洛酮(重庆莱美药业
有限公司) ;左旋精氨酸(L － Arg)、N －硝基 － L 精
氨酸甲酯(L － NAME) (美国 Sigma) ;盐酸吗啡粉针
剂(青海制药厂有限公司) ;其余试剂为分析纯。昆
明种小鼠(贵阳医学院实验动物中心)6 ～ 8 周龄，体
重 18 ～ 22 g，♀♂兼用。
1． 2 方法与结果
1． 2． 1 铁筷子醇提物对乙酸引起的扭体反应的影
响［2］ 昆明种小鼠 50 只随机均分为空白组，阿司匹
林组(200 mg·kg －1)及铁筷子醇提物高、中、低剂量
组(200、100、50 mg·kg －1)。ig给药，qd，连续 5 d，末
次给药后 1 h，各组分别 ip 0． 6%乙酸 0． 01 mL·g －1，
观察各组动物 20 min内扭体反应出现次数，计算镇
痛率(表 1)。从表 1 可见:与空白对照组相比，在乙
酸诱发小鼠扭体反应实验中，铁筷子醇提物具有明
显的镇痛作用，高剂量组最明显(P ＜ 0． 01)。
1． 2． 2 铁筷子醇提物对小鼠热板刺激痛阈的影
响［3］ 取♀昆明种小鼠，空腹 12 h 后，于 55 ±
0． 5 ℃的热板上进行痛阈筛选，以热板上小鼠出现
舔后足所需时间(s)为该鼠正常痛阈值。选择正常
痛阈值在 5 ～ 30 s内的合格小鼠 50 只，随机均分为
5 组。给药前再次测定小鼠痛阈值 2 次，取平均值
作为该鼠给药前痛阈。分组及给药方法同“1． 2． 1”
项。分别测定给药后 30、60、90 min 的痛阈值。从
表 1 可见:与空白组相比，铁筷子醇提物在给药
60 min后，具有明显的提高小鼠热刺激痛阈的作用，
且高、中、低剂量组均有明显作用，高剂量组最强。
在给药 90 min后，高剂量组仍具有明显作用，但中、
低剂量组作用已不明显，较 60 min 时明显减弱，提
示铁筷子醇提物的镇痛作用具有一定的时间依
赖性。
表 1 铁筷子醇提物对小鼠醋酸诱发扭体反应及热板刺激痛阈的影响(珔x ± s，n =10)
Table 1 Effects of ethanol extracts on the pain caused by acetic acid and hot － plate in mice(珔x ± s，n =10)
Groups Dose /mg·kg －1
热板刺激痛阈值 / s
基础痛阈值 30 min 60 min 90 min
醋酸诱发扭体反应
扭体次数 镇痛率 /%
空白组 － 14． 77 ± 2． 77 14． 76 ± 2． 36 15． 10 ± 2． 95 15． 95 ± 2． 51 30． 7 ± 6． 06 －
阿司匹林 200 15． 23 ± 2． 16 21． 03 ± 3． 35＊＊ 21． 91 ± 2． 95＊＊ 20． 36 ± 4． 54* 12． 8 ± 1． 07＊＊ 60
铁筷子高剂量 200 15． 15 ± 2． 98 17． 31 ± 3． 02 20． 01 ± 3． 88* 19． 89 ± 4． 97* 17． 8 ± 4． 76＊＊ 42
铁筷子中剂量 100 14． 75 ± 3． 39 16． 42 ± 4． 20 19． 64 ± 4． 61* 17． 68 ± 5． 38 20． 9 ± 5． 53* 32
铁筷子低剂量 50 14． 42 ± 3． 21 16． 31 ± 3． 96 18． 75 ± 3． 56* 16． 03 ± 3． 37 21． 8 ± 4． 92* 29
Compared with blank group:* P ＜ 0． 05，＊＊P ＜ 0． 01
1． 2． 3 铁筷子醇提物对小鼠甲醛刺激致痛的影
响［4］ 昆明种小鼠 50 只，随机均分为空白组、阿司
匹林组(200 mg·kg －1)、吗啡组(实验前一次性 ip 10
mg·kg －1)及铁筷子醇提物高、低剂量组(200、100
mg·kg －1)ig给药，qd，连续 5 d。末次给药 1 h后，用
微量注射器在小鼠右后足 sc 2． 5%甲醛 15 μL，立即
置于直径为 20 cm 的玻璃杯中，记录小鼠的累积舔
足时间为疼痛指标，在 0 ～ 5 min 及15 ～ 30 min 两个
时间分别记录，分别代表 I 相和 II 相疼痛指标(表
2)。从表 2 可见:与空白组相比，铁筷子醇提物具
有明显抑制Ⅱ相反应的作用，高剂量对Ⅰ相反应也
有抑制作用。
表 2 铁筷子醇提物对小鼠甲酫致痛的影响(珔x ± s，n =10)
Table 2 Effects of ethanol extracts on the pain caused by formalin
in mice(珔x ± s，n =10)
Groups Dose /mg·kg －1
累积舔足时间 / s
0 － 5 min 15 － 30 min
空白 － 23． 54 ± 8． 23 72． 62 ± 21． 69
阿司匹林 200 19． 48 ± 6． 91 12． 30 ± 5． 58＊＊
吗啡 10 8． 53 ± 3． 17 7． 82 ± 4． 58＊＊
铁筷子高剂量 200 18． 69 ± 6． 17* 11． 82 ± 4． 78＊＊
铁筷子低剂量 100 21． 79 ± 8． 14 17． 59 ± 6． 79*
Compared with blank group:* P ＜ 0． 05，＊＊P ＜ 0． 01
362第 3 期 钱海兵，等。铁筷子醇提物对小鼠的镇痛作用及其机制研究
1． 2． 4 纳洛酮的拮抗实验［4］ 取昆明种小鼠 50
只，随机均分为空白组、铁筷子醇提物(200 mg·
kg －1，ig，qd × 5 d)、铁筷子醇提物 + 纳洛酮(200
mg·kg －1，ig，qd × 5 d + 5 mg·kg －1)、吗啡组(实验前
一次性 ip 10 mg·kg －1)、吗啡 +纳洛酮(实验前一次
性 ig 15 mg·kg －1 + 5 mg·kg －1)。铁筷子醇提物 +纳
洛酮组和吗啡 +纳洛酮组在末次给药前 10 min 开
始 ip纳洛酮，然后给予铁筷子醇提物或吗啡。铁筷
子醇提物给药 1 h后或吗啡给药 30 min 后，小鼠 ip
0． 6%冰乙酸 0． 2 mL，观察记录 15 min 内各组小鼠
的扭体次数，并计算镇痛率(表 3)。由表 3 可见:与
空白组相比，吗啡与铁筷子醇提物均可显著减少小
鼠的扭体次数;与吗啡组相比，吗啡 +纳洛酮组小鼠
的扭体次数明显增加(P ＜ 0． 01) ，提示纳洛酮可完
全拮抗吗啡的镇痛作用;与铁筷子醇提物组相比，铁
筷子醇提物 +纳洛酮组小鼠扭体次数无明显变化，
提示纳洛酮对铁筷子醇提物的镇痛作用无明显
影响。
表 3 纳洛酮对铁筷子醇提物镇痛作用的影响(珔x ± s，n =10)
Table 3 Interventional effect of naloxone on analgesic effect of eth-
anol extracts in mice(珔x ± s，n =10)
Groups Dose /mg·kg －1 扭体次数 镇痛率 /%
空白 － 32． 4 ± 6． 28 －
吗啡 10 3． 2 ± 1． 04* 90
铁筷子醇提物 200 16． 7 ± 5． 56* 50
吗啡 +纳洛酮 10 + 5 28． 7 ± 4． 66△ 13
铁筷子 +纳洛酮 200 + 5 18． 7 ± 4． 92* 42
Compared with blank group:* P ＜ 0． 01;compared with morphine group:
△P ＜ 0． 01
1． 2． 5 L － Arg 和 L － NAME 对铁筷子醇提物镇痛
作用的影响［4］ 取昆明种小鼠 40 只，随机均分为空
白组、铁筷子醇提物(200 mg·kg －1，ig，qd × 5 d)、铁
筷子醇提物 + L － Arg(200 mg·kg －1，ig，qd × 5 d +
400 mg·kg －1 L － Arg 于实验前 20 min，ip)、铁筷子
醇提物 + L － NAME(200 mg·kg －1，ig，qd × 5 d +
37. 5 mg·kg －1 L － NAME 于实验前 15 min，ip)。末
次给药 1 h 后每只小鼠分别 ip 0． 6% 冰醋酸 0． 2
mL，观察记录 15 min 内各组小鼠的扭体次数，并计
算镇痛率(表 4)。由表 4 可见:与空白组相比，铁筷
子醇提物可显著减少小鼠的扭体次数;与铁筷子醇
提物组相比，铁筷子醇提物 + L － Arg 组小鼠扭体次
数明显增加，铁筷子醇提物 + L － NAME组小鼠扭体
次数明显减少;提示 L － Arg可减弱铁筷子醇提物对
醋酸致小鼠扭体反应的抑制作用，L － NAME可增强
其镇痛作用。
表 4 L － Arg和 L － NAME对铁筷子醇提物镇痛作用的影响(珔x ±
s，n =10)
Table 4 Interventional effect of L － Arg and L － NAME on analge-
sic effect of ethanol extracts in mice(珔x ± s，n =10)
Groups Dose /mg·kg －1 扭体次数 镇痛率 /%
空白 － 36． 4 ± 7． 33 －
铁筷子 200 17． 3 ± 6． 19* 52
铁筷子 + L － Arg 200 + 400 29． 6 ± 7． 94△ 19
铁筷子 + L － NAME 200 + 37． 5 14． 9 ± 4． 58* 59
Compared with blank group:* P ＜ 0． 01;compared with Tie Kuaizi
group:△P ＜ 0． 05
1． 2． 6 统计学处理 数据用 珋x ± s 表示，均采用
SPSS10． 0 for Windows统计分析软件分析处理。
2 讨论
甲醛致痛模型是一个慢性疼痛模型，特点是疼
痛分为两个时相，Ⅰ相是由于直接刺激外周神经末
梢所致，Ⅱ相则主要为炎症介质的产生、释放引起。
铁筷子醇提物高、中剂量对此模型具有良好的镇痛
作用，可明显抑制甲醛致痛的两相反应，提示铁筷子
醇提物可能同时具有外周及中枢镇痛作用。纳洛酮
作为阿片受体拮抗药，可阻断吗啡类镇痛药与阿片
受体的结合，从而消除吗啡类药物的镇痛作用。在
小鼠扭体反应模型中，纳洛酮未能拮抗铁筷子醇提
物对乙酸致小鼠扭体反应的抑制作用，提示铁筷子
醇提物的镇痛作用可能与阿片受体无关。NO 在外
周及中枢的不同水平的痛觉调节中均起重要作用，
在外周神经系统中主要为硝基能神经信息传递物
质，参与各系统与组织的神经调节，用 L － Arg 类似
物可完全阻断该介质的形成［5 － 6］。文中发现:L －
Arg 可部分抑制铁筷子醇提物的镇痛作用，L －
NAME可增强其镇痛作用，表明铁筷子醇提物的镇
痛作用可能与抑制 NO 的生成有关，但确切的镇痛
作用机制还有待进一步研究。
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收稿日期:2011 － 06 － 13
462 华 西 药 学 杂 志 第 27 卷