全 文 ：2005年第 2期
调查研究 中兽医医药杂志 JTCVM
Study on tissue residues ofAnagyr ine in hepar kideny and bra in of rats
DA lin qim u ge, LI Pei - feng, GUAN Hong, ZHANG Ling - nan
(The Co llege of Anim a l Sc ience and Anima lM ed icine InnerM ongo liaAg ricu ltura l Unive rsity,
Inne rHuhho tM ongo lia 010018 , China)
Abstract:T issue residues o f o ra lly adm in iste red a t a do se o f 6. 82 m g /kg b ow Anagy rine we re inve stig ated in ra ts. C oncen-
tra tion o fAnagy rine in liver , brain , k idney tissue we rem easured by RP -HPLC and concentration - tim e da ta in these correspond-
ing tissuew ere ana ly zed w ith DAS Ve r1. 0 Pha rm acokine tics so ftw are. The resu lts ind ica ted tha t the p rofile ofAnagy rine in live r and
k idney and bra in tissue o f rats confo rm to one compartm ent open m ode l a fter ora l adm inistra tion. The pha rm acok ine tics param eters
in live rw ere:Tm ax(2. 5)m in, Cm ax(12095. 84)μg /l, T1 /2(118. 55)m in, T1 /2ka(0. 000)m in, AUC(1807361. 08)μg /.l m in, Vd /F
(15. 256) l /kg, V
1 /F
(0. 0017) l /kg, CL
/F
(0. 009) l /m in /kg;The pha rm acokine tics param eters in kidney w ere:T
m ax
(60)m in, C
m ax
(13747. 80)μg /l, T1 /2(113. 34)m in, T1 /2ka(16. 19)m in, AUC(3033978)μg /.l m in, V d /F(16. 193 l /kg), CL /F(0. 005) l /m in /kg ;
The pharm acokinetics pa ram e te rs in bra in we re Tm ax(20)m in, Cmax(1260. 09)μg /l, T1 /2(142. 05)m in, T1 /2 ka(16. 90)m in, AUC
(319068. 95)μg /.l m in, Vd /F(9. 82) l /kg, CL /F(0. 048) l /m in /kg. A fte r o ra l adm inistration. , Anagyrine can assim ilate and elim i-
na te qu ick ly, can distribute ex tensive ly, bu t on ly accumu late in body sho rt tim e.
Key w ords:Anagy rine;rat;tiszzsue re sidue;RP -HPLC
蕨麻多糖对小鼠免疫功能的影响
陈炅然 1 ,胡庭俊1 ,张瑞孝 2 ,程富胜 1 ,孟聚诚1 ,高　芳 1
(1.中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所 , 甘肃兰州　730050;2.皋兰县畜牧站)
　　摘　要:　用环磷酰胺作为免疫抑制剂小鼠腹腔注射(100 m g /kg)建立免疫抑制模型 , 观察不同剂量蕨麻多
糖(50、100、200、 400 mg /kg)对小鼠脾脏指数 、胸腺指数及血清溶菌酶活力的影响。结果显示 ,蕨麻多糖能明显提
高正常小鼠脾脏指数 、胸腺指数及免疫抑制小鼠脾脏指数;增强正常小鼠和免疫抑制小鼠血清溶菌酶活力 , 尤其
在免疫抑制状态下 ,增强作用更明显。表明该多糖可对抗 Cy所致的免疫抑制 , 明显地增强小鼠免疫功能。
　　关键词:　蕨麻多糖;环磷酰胺;脾脏指数;胸腺指数;血清溶菌酶
　　中图分类号:S852. 4　　　　 　文献标识码:A　　文章编号:1000 - 6354(2005)02 -0014 - 03
　　20世纪 60年代以后 ,人们发现多糖类物质具有特殊的
生物活性功能 [ 1] 。由于多糖与其它糖类物质的结构不同 , 使
得多糖类物质及其衍生物具有极其重要的生命科学研究价
值 [ 2] 。越来越多的研究也已经表明 [ 3] :多糖不但能够治疗机
体的免疫系统受到严重损伤的癌症 , 又能治疗多种免疫缺损
疾病 ,如慢性病毒性肝炎和某些耐药细菌或病毒引起的慢性
疾病 ,还能治疗诸如风湿病之类的自身免疫疾病 , 有的多糖
类药物还能够诱导干扰素的产生。随着现代医学研究的深
入 ,糖类合成化学和结构鉴定技术的发展 , 人们逐步认识到
寡糖和多糖结构涉及到许多生命过程 , 多糖在生命科学领域
中研究的进一步深入 , 将对生命科学产生重大的推动作用。
蕨麻为鹅绒委陵菜 (Potentilla anserine L. )的根 ,属蔷薇
科委陵菜属 , 又名委陵菜 、曲尖委陵菜 、人参果 、延寿草 、戳
玛 、卓老洒曾 、仙人果等。分布于青海 、西藏等高海拔地区 ,
收稿日期:2004 - 12 -18
项目来源:国家自然科学基金项目(30371056)
作者简介:陈炅然(1968 - ),女 ,副研究员 ,现从事中药免疫药理方面
研究工作。
其味道独特 、口感细腻 , 并有滋补 、治诸血症 、止咳利痰等功
效而深受当地群众的欢迎。 《青海高原药物图鉴》载为 “常
用上药” [ 3] 。有报道 , 蕨麻具有较好的补益作用 ,对小鼠抗疲
劳和抗缺氧能力有一定增强作用 [ 4] , 还有很强的抗应激作
用 [ 5] , 且蕴藏量丰富。 蕨麻多糖 (poten tilla anserine poly sac-
charide, PAP)为蕨麻活性成分之一。杨桦等 [ 6]从蕨麻中提取
分离出了多糖成分 , 并测定了总糖含量。但有关蕨麻多糖的
生物学活性鲜见文献报道。该实验旨在探讨蕨麻多糖对小
鼠免疫功能的影响。
1　材料与方法
1. 1　材料
1. 1. 1　实验动物　BALB /c纯系小鼠 , 8周龄 , 体重 18 ～ 22
g, 雌雄各半 ,由兰州军区总医院动物试验科提供。
1. 1. 2　实验药物及试剂　 蕨麻多糖由中国农业科学院兰
州畜牧与兽药研究所新兽药工程研究室提取分离。环磷酰
胺为上海华联制药有限公司产品。溶菌酶测定试剂盒为南
京建成生物工程研究所生产。
1. 1. 3　实验仪器　岛津 UV - 3000紫外可见光分光光度计;
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调查研究
恒温水浴箱;天平等。
1. 2　方法
1. 2. 1　实验动物及处理 [ 7] 　 BALB /c小鼠 100只 , 雌雄各
半 ,随机分为 10组 , 每组 10只。第 1组:生理盐水对照组 , 分
别于试验的第 1、 3、 5、 6、 7天腹腔注射 0.85%生理盐水 ,
0.2 m l /只;第 2组:环磷酰胺(Cy)对照组 , 分别于第 1 ～ 5天
腹腔注射 0. 85%生理盐水 , 0. 2 m l /只 , 第 6天每只小鼠注射
Cy 100 m g /kg;第 3、4、5、6组为蕨麻多糖对照组:各组分别
按 50 mg /kg、 100 m g /kg、200 mg /kg、400 mg /kg剂量于试验的
第 1、 3、 5、 7天腹腔注射蕨麻多糖 , 第 6天注射生理盐水;
第 7、8、9、10组为多糖 +环磷酰胺组 , 各组分别按 50 mg /kg、
100 mg /kg、200 m g /kg、400 m g /kg剂量于第 1、3、 5、 7天腹腔
注射蕨麻多糖 , 并于第 6天每只注射 Cy 100 mg /kg。第 9天
眼眶采血后称重 、捕杀 ,进行生物活性指标的测定。
1. 2. 2　胸腺指数和脾脏指数的测定　各组小鼠捕杀后称
重 ,分别取脾脏 、胸腺 , 称重 , 并计算脾脏指数和胸腺指数
(mg /g)。脾脏 、胸腺置于冰水浴中 , 分别按重量 /体积比加
19倍的生理盐水制成 5%的组织匀浆 , 离心后弃沉淀 , 获取
匀浆上清 ,于 4 ℃冰箱中保存 , 供测定酶活力。
1. 2. 3　血清溶菌酶的测定　采用溶菌酶测定试剂盒 , 按照
操作说明进行溶菌酶含量的测定。
1. 2. 4　统计学处理　 t检验。
2　结果与讨论
2. 1　蕨麻多糖对免疫抑制小鼠脾脏指数和胸腺指数的影响
腹腔注射 Cy可显著降低小鼠脾脏和胸腺的重量。与生
理盐水组相比 , 差异显著(P <0. 05), 说明免疫抑制模型建立
成功。蕨麻多糖能明显提高正常小鼠脾脏指数 、胸腺指数 ,
与生理盐水组相比 , 差异显著;蕨麻多糖能明显提高免疫抑
制小鼠脾脏指数 , 与 Cy组相比 , Cy抑制的多糖组(50 mg /kg,
200 mg /kg)脾脏指数明显提高 , 差异极显著 (P <0.01)。
PAP能明显提高正常小鼠的胸腺指数 , 与对照生理盐水组相
比 ,差异显著。环磷酰胺对免疫系统和造血功能产生严重损
害 ,给予 Cy后脾脏指数和胸腺指数明显下降 , 说明免疫抑制
模型成功。给予 PAP后 , 脾脏指数升高较快 , 而胸腺指数恢
复较慢(见图 1、图 2)。蕨麻多糖能提高正常小鼠和免疫抑
制小鼠脾脏指数 , 可对抗环磷酰胺引起的免疫抑制。
2. 2　蕨麻多糖对血清溶菌酶活力的影响
蕨麻多糖能升高正常小鼠和免疫抑制小鼠血清溶菌酶
含量 ,尤其在免疫抑制状态下 ,作用更明显(见图 3)。
溶菌酶是单核细胞参与机体免疫时分泌的 , 它在机体
的炎症过程 、修复再生等调节中发挥重要作用。 血清溶菌
酶的活力是机体非特异性免疫反映的重要指标。本试验发
现 , 蕨麻多糖能显著提高小鼠血清中的溶菌酶含量 , 这说明
蕨麻多糖能激活并提高小鼠非特异性免疫反应。用药后小
鼠血清溶菌酶活力的升高 , 表明蕨麻多糖能提高血液中吞
噬细胞的活性 , 吞噬细胞活性的增加 ,将导致吞噬细胞产生
大量活性物质 , 如分泌溶细胞蛋白酶 、溶酶体水解酶类
TNF、NO等 , 这些活性分子对肿瘤细胞 、病原体细胞都有强
大杀伤作用 , 并将进一步调节机体免疫细胞的功能 , 介导体
液免疫和细胞免疫 , 促进机体的免疫保护机制 。本实验结
果提示 ,蕨麻多糖具有明显的免疫活性 。蕨麻多糖有明显
的免疫增强作用 , 这与蕨麻作为药材的补益作用和作为食
品的营养丰富性相一致。该结果为蕨麻的开发和充分利用
提供了理论依据。
T reatm ents
F ig. 1 Effe ct of PAP on spleen index in m ice
#P <0. 05 and##P <0. 01 vs contro l;*P <0. 05 and
**P <0. 01 v s Cy (100 m g /m g) .
T reatm ents
F ig. 2 Effe ct of PAP on thymus index in m ice
* P <0. 05 and ** P <0. 01 v s con tro l.
T reatm ents
F ig. 3 PAP raised the concentration of the serum ly sozyme
#P <0. 05 and##P <0. 01 vs contro l;* P <0. 05 and
** P <0. 01 v s Cy(100 m g /m g).
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参考文献:
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志 , 2002, 32(12):19 ～ 20.
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[ 7] 朱正美 ,刘辉 .简明免疫学技术 [M ] . 北京:科技出版社 ,
2002, 32.
E ffects ofPotentilla anserine polysaccharide on mi mune functions in m ice
CHEN Jiong - ran, HU Ting - jun, CHENG Fu - sheng, MENG Ju - cheng, GAO Fang
(Lanzhou Institute ofAnima l Sciences＆Veterinary Pharm aceutics, ChineseAcademy ofAg ricultural Sciences, Lanzhou Gansu 730050, China)
Abstract:The study w as carried out to investiga te thymus index, sp lenic index and the leve l of serum activ ity o f ly sozym e in
m ice treated w ith cyc lophospham ide (Cy)(100m g /kg) in vivo by in trape ritonea l in je ction a t different Potentilla anse rine polysac-
charide (PAP) do ses of 50 mg /kg, 100 mg /kg , 200 m g /kg or 400 m g /kg. The result showed tha t intrape ritonea l adm inistration of
the po lysaccharide could sig inificantly ra ise the thymus and spleen ind ice s and increa se the se rum ac tivity of lysozym e in a dose -
dependentm anner. In conclusion, Po ten tilla anserine po ly saccharidew as ab le to overcome cyc lophospham ide - induced imm unosup-
p ression, and had m arkedly immunom odulation func tions.
Key w ords:Poten tilla anserine po lysaccha ride(PAP);cyclopho spham ide(Cy);thym us index;splenic index;serum ac tiv ity
of ly sozyme
新疆地区奶牛子宫内膜炎病原菌的分离鉴定及其
对抗菌药的敏感性试验
赵红琼 1 ,黄　燕1 ,陈杖榴 2 ,简子健 1 ,陈建新2 ,黄嘉驷 1
(1.新疆农业大学动物医学学院 ,新疆乌鲁木齐　830052;2. 华南农业大学兽医学院)
　　摘　要:　通过细菌形态学和细菌生化特性 , 分离和鉴定了新疆地区患子宫内膜炎的 21头奶牛子宫分泌物
中的病原菌分别为蜡样芽孢杆菌 (24. 5%)、非溶血性链球菌 (18.4%)、大肠杆菌 (14. 3%)、溶血性链球菌
(10.2%)、表皮葡萄球菌(10.2%)、金黄色葡萄球菌(10. 2%)、胎儿弯曲菌(10. 2%)和不动杆菌等。其中革兰氏
阳性菌检出率较高(73. 5%)。子宫内膜炎病原菌以单一菌株感染为主(47.6%)。采用 K irby - Bare r法测定了鉴
定菌株对 13种抗微生物药的体外药物敏感性。链球菌 、大肠杆菌和葡萄球菌对氨苄西林不敏感 , 而对卡那霉素
和庆大霉素敏感性较高;大肠杆菌对青霉素和氨苄西林全部耐药 (100%),对四环素和多西环素耐药率较高(均
为 83.3%);溶血性链球菌对青霉素和四环素全部耐药 , 对链霉素耐药率为 80%;相对而言 , 表皮葡萄球菌和金黄
色葡萄球菌的耐药率较低;氟喹诺酮类对各种分离菌株比较敏感。
　　关键词:　子宫内膜炎;病原菌;抗菌药物敏感性试验;奶牛
　　中图分类号:S858. 23　　　　　 文献标识码:A　　文章编号:1000 - 6354(2005)02 - 0016 - 04
　　奶牛子宫内膜炎 (endome tritis)主要是由于分娩或产后
期间子宫内膜感染病原微生物而引起的繁殖障碍性疾病 , 奶
牛临床上较为多见。近年来 , 新疆奶牛养殖业迅猛发展 , 子
宫内膜炎发病率随之不断升高 , 由于子宫内膜炎病原菌耐
收稿日期:2004 - 10 -24
项目来源:新疆维吾尔自治区教委资助
作者简介:赵红琼(1974 - ),女 ,硕士研究生 ,讲师 ,主要从事家畜生
理学教学和兽医药理学研究。
药性的增加 , 治愈率随之降低 , 给奶牛业造成了巨大经济损
失。由于该病病原菌的种类随地域不同而有较大差异 , 故
此 ,笔者对新疆地区奶牛子宫内膜炎主要病原菌进行了分离
和鉴定 , 并测定这些病原菌对常用抗菌药的敏感性 , 为临床
治疗该病提供了理论依据 , 避免抗菌药的滥用和减少耐药菌
株的产生。
1　材料和方法
1. 1　试验动物
分别从新疆南疆和北疆某 3个牛场 , 选择临床确诊患有
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