全 文 ：VIS法测定山蜡梅冲剂中的总黄酮含量
李少华　胡满根　汪　玢　樊华轩
(化学教研室　南昌　 330006)
　　山蜡梅冲剂为蜡梅科植物山蜡梅叶子的
提取物制成的颗粒冲剂 (山蜡梅叶重∶冲剂
重= 1∶ 1 )。山蜡梅叶味微苦、辛、凉 ,功能解
表祛风、清热解毒 ,用于防治感冒、流行性感
冒 [1～ 3 ]。江西、安微一带民间习惯用山蜡梅叶
泡茶以防治感冒。 山蜡梅叶中黄酮类成份含
量较高 ,为了控制成品质量 ,我们采用分光光
度法测总黄酮含量 (以芦丁计 ) [ 4]。
1　资料与方法
1. 1　仪器与药品
721型分光光度计 (上海第三分析仪器
厂 )
芦丁对照品 (中国生物制品鉴定所 )
山蜡梅冲剂 (江西省卫生厅科技开发中
心 )
甲醇、亚硝酸钠、硝酸铝均为分析纯。
1. 2　测定波长的选择
取芦丁对照品 (真空干燥至恒重 ) 10 mg
左右用甲醇溶解、定容至 100 ml,吸取该溶
液 3 ml置于 10 ml容量瓶中 ,加入甲醇至 5
m l,然后分别加 5% NaNO2 0. 3 ml、摇匀、静
置 6 min;加 10% AI( NO3 ) 3 0. 3 ml、摇匀、静
置 6 min;加 4% NaOH 4 ml、加水稀至刻度、
摇匀、静置 15 min。去除芦丁 ,照上述方法加
试剂得空白对照品。 进行分光扫描 ,结果表
明: 芦丁在 500 nm处有最大吸收峰 (见图
1) ,山蜡梅冲剂经处理后 (处理方法见 1. 4—
含量测定 )取定容后的甲醇溶液 3 ml,照上
法加 NaNO2、 AI( NO3 ) 3、 NaOH,定容 ,然后
进行分光扫描。结果表明 ,冲剂在 490～ 500
nm处有最大吸收峰 (见图 2) ,故选择 500
nm作为最大吸收波长进行含量测定。
图 1　芦丁的最大吸收峰
1. 3　线性关系与吸收系数测定
分别吸取上述芦丁—甲醇液 0、 1、 2、 3、
4、 5 ml分置于 10 m l容量瓶中 ,照上法分别
加 入 甲 醇、 5% NaNO2、 10% AI ( NO3 ) 3、
NaOH、 H2 O,在 500 nm处测其吸光度 A。以
A为纵坐标 ,芦丁含量 (μg )为横坐标 ,绘制
标准曲线 (见图 3) ,回归方程为: A= 0. 00111
X= 0. 005,γ= 0. 9999。
1. 4　山蜡梅冲剂中总黄酮含量测定
取同一批号山蜡梅冲剂 5包、混合、研匀
减压下干燥至恒重 ,准确称取 2. 5 g左右置
索氏提取器中 ,用 200 ml甲醇进行索氏提取
至无色。提取物移至 250 ml容量瓶中 ,加甲
醇至刻度、摇匀、即得供试品 ,按标准曲线项
下的方法分别取供试品 1、 2、 3 ml进行吸光
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江西医学院学报　 1999; 39( 4): 87～ 88
Acta Academiae Med icinae J iangx i
江西省卫生厅科技开发中心
度 A的测定 ( 500 nm处 ) ,对照芦丁标准曲
线 ,求平均值 ,即得该批号山蜡梅冲剂中总黄
酮含量 (以芦丁计 )。以同样方法测定 5批 ,每
批取 5个样 ,结果见表 1。
图 2　山蜡梅冲剂的最大吸收峰
图 3　芦丁含量测定标准曲线
表 1　不同批号山蜡梅冲剂总黄酮含量
批号 总黄酮含量 (% ) (n= 5) RSD% 平均值
970102 0. 95 1. 56
970302 0. 96 1. 89
970401 0. 98 1. 96 0. 96%
970404 0. 97 1. 82
970502 0. 96 1. 37
1. 5　稳定性试验
取供试品依照含量测定方法 ,在加完试
剂后 15 min、 1 h、 2 h、 3 h分别测定吸光度、
计标含量 ,结果见表 2。
表 2　间隔不同时间测得总黄酮含量
时间 含量 (% ) (n= 5) RSD%
15 min 0. 96 1. 93
1h 0. 94 2. 18
2 h 0. 93 1. 54
3 h 0. 94 1. 50
上述实验表明: 供试品液在 3 h内测定
结果稳定。
1. 6　重现性试验
按含量测定方法 ,对同一批样品进行 5
次测定 ,结果见表 3。
表 3　平行测定五次总黄酮含量
试验次数 含量 (% ) RSD%
1 0. 97
2 0. 94
3 0. 94 1. 59
4 0. 97
5 0. 95
　　以上结果表明:本方法重现性好。
1. 7　回收率试验
采用加样回收法 ,取已知含量的山蜡梅
颗粒分别添加芦丁对照品 ,按含量测定项下
的方法进行提取 ,测定、计算回收率 ,结果见
表 4。
以上结果表明:回收率值较高 ,该测定方
法所得数据可靠。
2　讨论
1)　山蜡梅叶中含有芦丁、 皮素、山
奈酚、山奈酚甙等黄酮类成份 ,而且含量较
高 ,于是选用分光光度法测总黄酮含量来控
制冲剂的质量。
2)　作者查阅有关文献 ,发现山蜡梅叶
中芦丁、 皮素含量相对较高 ,于是试图以芦
丁或 皮素为标准来测定冲剂中总黄酮含
量 ,经实验模索得知 , 皮素在紫外—可见光
区无最大吸收峰 ,故选用芦丁作为指标成份
进行黄酮含量测定。 (下转第 91页 )
88　 江　西　医　学　院　学　报 39卷
附表　合成样品的分析结果
样品 半胱氨酸测定量 (× 10- 6 mol /L) 均值 (× 10- 6 mol /L) 相对标准偏差 (% )
1号 0. 81 0. 81 0. 79 0. 79 0. 80 0. 79 0. 80 1. 0
2号 1. 69 1. 68 1. 68 1. 68 1. 71 1. 71 1. 69 1. 0
　　　　　* 半胱氨酸含量 1号: 8. 0× 10- 7 mol /L; 2号 1. 70× 10- 6 mol /L
　　结果显示 ,该方法用于半胱氨酸含量测
定 ,具有选择性高、方法简单、易于操作、结果
准确的特点。
4　参考文献
1　孙长林 .半微分吸附溶出伏安法直接测定啤酒中痕量
半胱氨酸 . 分析化学 , 1990, 18( 2): 167
2　高小霞主编 . 极谱催化波 . 北京: 科学出版社 ,
1991. 346
3　孙长林 .吸附溶出伏安法研究 ( I) . 高等学校化学学报 ,
1986, 7( 9): 786
(收稿日期　 1999— 06— 14)
(上接第 88页 )
3)　通过对山蜡梅冲剂中总黄酮含量测
定试验 ,发现以芦丁为标准的测定值重现性 ,
稳定性都还好 ,回收率也高 ,说明该法可靠 ,
而且分光光度法简便 ,所以可作为各种山蜡
梅叶制剂的含量测定和质量控制依据。
表 4　芦丁回收率测定值
制剂中黄酮量 (以芦丁计 mg) 添加芦丁的量 mg 测出芦丁的量 mg 回收率 (% ) 平均值
9. 3 9. 3 18. 3 97. 0
9. 0 8. 6 17. 3 96. 7
9. 3 9. 2 18. 1 96. 0 96. 7%
10. 6 8. 3 18. 7 97. 5
9. 4 8. 5 17. 6 96. 3
注:回收率 = 测出芦丁量—制剂中芦丁量添加对照品芦丁量 × 100%
3　参考文献
1　卫生部药典委员会 .中华人民共和国药典 . 北京:人民
卫生出版社 , 1997. 50
2　卫生部药典委员会 . 中华人民共和国药典 .第二版 .
北京:化学工业出版社 , 1995. 5, 54, 311, 479
3　徐礼炎 . 中草药成份分析法 . 北京:人民卫生出版社 ,
1985. 231
(收稿日期　 1999— 04— 28)
914期 王敏等:单扫描示波极谱法测定半胱氨酸含量