全 文 ：收稿日期:2012-07-04基金项目:贵州省中药现代化科技产业研究开发专项资金贵州苗药感清糖浆的二次开发研究(临床前)(黔科合中药[ 2010]5006号)
作者简介:刘 斌贝(1990-),女 , 2012级研究生 ,研究方向:中药及
民族药的资源鉴定与质量控制。通讯作者:田源红 ,教授 ,硕士生导
师。
铁筷子中微量元素的研究
刘 斌贝 ,田源红 ,马敬原 ,张 英 ,熊灿霞
(贵阳中医学院 ,贵阳 550002)
摘要:目的:对不同产地铁筷子中微量元素含量进行分析。方法:用原子吸收分光光度法和原子荧光分光光
度法测定铁筷子中 Cu 、Hg、As、Cr、Se、Cd 、Pb 的含量。结果:不同产地铁筷子中微量元素 Cu 、Hg 、As、Cr、Se、
Cd 、Pb 含量有显著性影响。结论:革东村的铁筷子中有害微量元素含量最低 , 有益微量元素含量最高。
关键词:铁筷子;微量元素;原子吸收分光光度法;原子荧光分光光度法
中图分类号:O657.31 文献标识码:A 文章编号:1005-5320(2013)02-0052-03
Studies on Trace Elements of Tiekuaizi
LIUYun , TIANYuan-hong , MA Jin-yuan ,ZHANG Ying ,XIONGChan-xia
(Guiyang College of Traditional Chinese Medicine , Guiyang 550002 , China)
Abstract:Objective:Studies on seven trace elements of T iekuaizi in different regions.Method:To determining seven trace elements(Cu 、
Hg 、As 、Cr 、Se 、Cd 、Pb)of T iekuaizi with atomic absorption spectropho tometry and atomic fluorescence spectrophotometry.Results:the
content of six trace elements(Cu 、Hg 、As 、Cr 、Se 、Cd 、Pb)of T iekuaizi in different regions were significant differences.Conclusion:I t is
suggested that the content of harmful trace elements of T iekuaizi in Gedongcun district were lower , and that of beneficial elements were
higher than any other district.
Key Words:Tiekuaizi;trace elements;atomic absorption spectrophotometry
铁筷子为腊梅科植物腊梅 Chimonanthus praecox(L.)
link.及山腊梅 Chimonanthus nitens Oliv的干燥根 ,一年四季
均可采挖 ,洗去泥土鲜用 , 或烘干 、晒干。味辛 、性温 、有毒 ,
具有祛风止痛 ,理气活血 , 止咳平喘的功效;主治风寒感冒 、
风湿痹痛。目前研究铁筷子主要含有挥发油[ 1] 、微量元素等
成分 ,其中 , 硒可以提高机体免疫力 、拮抗有毒重金属元素 ,
还可以防治癌症 ,是人体必需的微量元素[ 2] ,但铬 、铅 ,砷 、汞
等则是属于有害元素 ,这些元素在数量较小的范围内调节机
体的生长发育和衰老病死[ 3] 。铁筷子药材仅在《贵州省中药
材 、民族药材质量标准》 2003 版中有性状和鉴定[ 4] , 未见含
量测定的标准。拟采用原子吸收分光光度法和原子荧光分
光光度法测定其微量元素含量 , 并综合评分 , 优化出好的产
地和含量标准 , 为提高铁筷子在地标中的质量标准提供依
据 ,为下一版《贵州省中药饮片炮制规范》提供资料 , 为以后
收入国家标准打下基础。
1 药材及产地
1.1 药 材
铁筷子采于贵州省 12 个不同产地 , 经我院魏升华副教
授鉴定为腊梅科植物腊梅 Chimonanthus praecox(L.)link.
及山腊梅 Chimonanthus nitens Oliv的干燥根。符合《贵州省
中药材 、民族药材质量标准》(2003 版)标准。
1.2 产地及炮制
分别将遵义 、龙里 、高坡 、毕节 、革东 、川洞 、龙洞堡 、百花
湖 、贵定 、寨张 、仙人洞 、安顺 12 个不同产地采挖的铁筷子洗
净 ,以 5倍水润 12 h 后 105℃烘干 , 粉碎过 40 目筛 , 得样品
备用。
2 仪器与试药
2.1 仪 器
美国-PE 原子吸收光谱仪 , 铜 、铁 、锰 、锌元素的空心阴
极灯 , 乙炔气 ,氩气 , 空气压缩机 , AB204-S 型电子分析天平
(万分之一 ,瑞士梅特勒-托利多公司), AE240-型电子分
析天平(十万分之一 , 瑞士梅特勒-托利多公司), 马弗炉。
所有玻璃仪器使用前须用 20%的硝酸浸泡 24 h 以上 ,然后
分别用水和去离子水洗干净后烘干。
2.2 试 药
铜(1000μg/ ml ,批号:F20050107)、铅(100μg/ml ,批号:
GBW(E)080003)、镉(1 mg/ ml , 批号:GBW(E)080005)、硒
(100 μg/ ml , 批号:GBW(E)080136)、汞(100 μg/ ml , 批号:
GBW(E)080006)、砷(100 μg/ ml , 批号:GBW(E)080008)、铬
(HI93723-01)对照品均由国家标准物质研究中心提供 , 含
量测定用。混合酸为∶硝酸∶氯酸=5∶1 ,高氯酸为优级纯 , 硝
酸为分析纯。磷酸二氢铵 、钯为优级纯 ,硝酸镁为分析纯 , 实
验用去离子水。
·52·
第 30 卷Vo l.30 第 2 期No.2 微 量 元 素 与 健 康 研 究S tudies of T race Elements and Health 2013 年 03 月Mar. 2013
3 标准曲线的制备
3.1 Pb 、Cd、Cu、Cr 的标准曲线
准确吸取 0.0 、1.0、2.0 、4.0 、6.0、8.0 、10.0 ml各元素
标准溶液(10 μg/ ml), 分别置于 10 ml容量瓶中 , 加硝酸
(0.5%)稀释至刻度 ,摇匀 , 各吸取 10μl注入石墨炉 ,测得其
吸光值 ,并求得各元素吸光值与浓度关系的一元线性回归方
程。结果见表 1。
3.2 Hg、Se、As 的标准曲线
准确吸取 0.0、0.1、1.0、1.5 、3.0、5.0 ml各元素标准溶
液(0.1 μg/ ml), 分别置于 10 ml容量瓶中 , 各加 50 g/ L 硫
脲 , 50%硝酸 1 ml ,补加去离子水至刻度 ,混匀待测。结果见
表 1。
表 1 标准曲线
元素 回归方程 R值 浓度范围 基体改进剂
Pb A=0.0078C 0.999625 1～ 10μg/ml 0.050mgNH4H2PO4[ 4]
Cd A=0.03603C 0.999990 1～ 10μg/ml 无
Cr A=0.017C 0.999821 1～ 10μg/ml 无
Cu A=3.84224C 0.999443 1～ 10μg/ml 无
Hg A=553.7301C-2.1588 0.9999 1～ 50μg/ L 无
Se A=46.4119C+7.6554 0.9991 1～ 50μg/ L 无
As A=147.4160C+4.2944 0.9998 1～ 50μg/ L 无
4 样品溶液的制备
湿法硝化(用于测定铅 、镉 、硒)精密称定铁筷子粉末
0.2 g , 置于具塞三角烧瓶 ,加硝酸 15 ml , 浸泡过夜。置于可
调电炉上低温消煮至近干 ,若样品未溶解完全则继续加硝酸
消煮直至溶液近干为止。再加入 3 ml高氯酸 , 加热 , 待冒白
烟溶液未干前停止加热。将溶液无损失地转移到 100 ml容
量瓶中 ,用超纯水定容至刻度混匀待测 , 同时做好样品空白。
5 仪器工作参数(见表 2、3)
表 2 石墨炉原子吸收法工作参数
元
素
波长
(nm)
狭缝
宽度
(nm)
氩气
流量
(ml/min)
灯电
流
(mV)
干燥 灰化 原子化 清除
温度
(℃)
时间
(s)
温度
(℃)
时间
(s)
温度
(℃)
时间
(s)
温度
(℃)
时间
(s)
Pb 283.3 0.7 10 110 20 450 15 1700 3 2200 2
Cd 228.8 0.7 1.5 4 110 30 350 20 1500 5 2450 3
Cu 324.8 2.0 16 110 10 450 15 2000 3 2100 2
Cr 357.9 0.4 12 100 25 800 25 2100 3 2200 3
表 3 原子荧光吸收法工作参数
元
素
灯电
流
(mA)
负高
压
(V)
原子化
器高度
(mm)
载气
流量
(ml/min)
屏蔽气
流量
(ml/min)
进样
体积
(ml)
测量
方式
读数
方式
延迟
时间
(s)
读数
时间
(s)
Hg 30 0 400 800 1 标准曲线法 峰面积 1.5 7
Se 100 50 8 400 800 1 标准曲线法 峰面积 1.5 7
As 80 40 400 800 1 标准曲线法 峰面积 1.5 7
6 方法学考察
6.1 精密度实验
称取 0.2 g安顺铁筷子样品制成供试品溶液 , 分别按样
品溶液的制备和含量测定法每个元素平行测定 6 次 , Pb、
Cd、Cr、Cu、Hg 、Se、As 的 RSD%值分别为 9.10%、7.54%、
4.52%、9.42%、4.46%、6.30%、6.74%。 RSD%在 4.46%
～ 9.42%之间 , 精密度良好。
6.2 稳定性实验
称取 0.2 g安顺铁筷子样品制成供试品溶液 , 分别按样
品溶液的制备和含量测定法对 Pb、Cd、Cr、Cu 、Hg、Se、As 每
个元素每隔 30 min 测定 1 次 , 重复测定 6 次 , 对应的 RSD%
值分别为 9.74%、9.27%、9.73%、9.84%、5.78%、5.95%、
6.30%, RDS%值在 5.78%～ 9.84%之间 , 稳定性良好。
6.3 重复性实验
称取 0.2 g安顺铁筷子样品制成供试品溶液 6 份 ,分别
按样品溶液的制备和含量测定法对 Pb、Cd、Cr、Cu 、Hg、Se、
As平行测 6 次 , 对应的 RSD%值分别为 7.90%、8.76%、
3.65%、8.52%、6.92%、6.74%、5.95%, RDS%值在 3.65%
～ 8.76%之间 , 重复性良好。
6.4 加样回收实验
称取 6 份安顺铁筷子样品各 0.1 g , 加入 Pb 、Cd、Cr、Cu、
Hg、Se、As 标准溶液适量 , 按含量测定法对每个元素进行测
定 ,计算各元素的加样回收率及 RSD%, 结果 Pb 、Cd、Cr、Cu
、Hg、Se、As 平均加样回收率分别为 89.82%、86.87%、
90.32%、87.68%、84.92%、84.62%、99.67%,在 84.62%～
99.67%之间 , RSD%值为 8.63%、7.10%、7.91%、7.71%、
9.28%、7.84%、6.24%。
7 含量测定
精密称定各铁筷子样品 , 按样品溶液制备项下制备样品
溶液 , 在相应的测定条件下测定 ,结果见表 4。
7.1 原子吸收法
仪器中输入称样量和消化液体积 , 每次自动进样 10μl ,
直接得出 Pb 、Cd、Cu 、Cr 4 种微量元素的含量。见表 4。
表 4 试验结果及综合评分结果
产地 铅(μg/g)
镉
(μg/g)
铬
(μg/g)
铜
(μg/g)
汞
(μg/ g)
硒
(μg/g)
砷
(μg/g)
综合
评分
遵义 2.052 0.012 0.070 0.005 0.049 0.472 0.118 0.57
高坡 3.719 0.213 0.058 0.009 0.041 0.743 0.186 0.44
革东 1.716 0.012 0.024 0.007 0.033 0.042 0.039 0.69
毕节 0.622 0.031 0.093 0.008 0.050 0.033 0.008 0.59
百花湖 0.789 0.081 0.082 0.019 0.108 0.100 0.025 0.56
川洞 3.809 0.101 0.019 0.010 0.091 0.018 0.004 0.49
龙洞堡 2.256 0.224 0.110 0.018 0.025 0.056 0.014 0.50
寨张 3.065 0.082 0.030 0.015 0.085 0.019 0.005 0.56
贵定 4.175 0.059 0.110 0.007 0.031 0.153 0.038 0.44
龙里 1.230 0.054 0.033 0.006 0.057 0.071 0.018 0.62
仙人洞 0.470 0.263 0.084 0.011 0.033 0.038 0.009 0.53
安顺 1.771 0.022 0.045 0.009 0.045 0.162 0.065 0.64
7.2 原子荧光法
精密吸取 5 ml溶液于比色管中 ,各加 50 g/ L硫脲 , 50%
硝酸 2.5 ml后进行试验 ,根据所得浓度值计算 Hg、Se、As 3
·53·
第 30 卷Vo l.30 第 2 期No.2 微 量 元 素 与 健 康 研 究S tudies of T race Elements and Health 2013 年 03 月Mar. 2013
种微量元素的含量 , 按公式:[ (C-C0)×V] /(m ×1000)(C
为试样被测液的浓度 , C0为试样空白液的浓度 , V 为试样消
化液总体积 ,m 为试样质量)计算。
8 结果与讨论
8.1 结 果
综合指标的计算:本试验引用综合指标“隶属度”计算。
对于欲达到最大值的指标(铜 、铁 、锌 、锰), 其隶属度=(指标
值-指标最小值)∕(指标最大值-指标最小值)。欲达到最
小值的指标(铅 、镉)其隶属度=(指标最大值-指标值)∕
(指标最大值-指标最小值)。可见 ,指标最大值的隶属度为
1 ,而最小隶属度为 0。 如果每个指标的重要性不一样就要
求出加权和作为综合分数。根据所测成分对人体的益弊 , 考
虑到药物的安全有效 ,故铅 、镉 、铬 、汞 、砷 5 种有毒重金属各
占15%,铜占 10%,硒占 15%的权重。于是每号试验的综合
分数=(铅+镉+铬+汞+砷)隶属度×15%+硒隶属度×
15%+铜隶属度×10%,满分为 1.00。
从表 4 可见:不同产地的铁筷子中微量元素的含量的综
合分数革东村 0.69>安顺 0.64>龙里 0.62>毕节 0.59>
遵义 0.57>百花湖 、寨张村 0.56>仙人洞 0.53 >龙洞堡
0.50>川洞村 0.49>高坡村 、贵定 0.44 , 说明革东村所产的
铁筷子中有害微量元素的含量最低有益微量元素含量最高。
高坡村 、贵定的综合评分最低 , 说明此处的铁筷子药材有害
成分含量较多有益成分含量较少。铁筷子不同产地的微量
元素含量有较大差异 , 由微量元素含量综合评分可知 , 革东
村的铁筷子质量最优。
8.2 讨 论
本实验参照《中国药典》2010 版甘草项下微量元素的限
定:铅<5μg/g ,镉<0.3 μg/ g , 砷<2μg/g ,汞<0.2 μg/ g , 铜
<20 μg/g[ 5] 。不同产地的铁筷子中微量元素铅 、镉 、砷 、汞 、
铜的平均含量分别为 2.139 μg/ g、0.096 μg/g 、0.168 μg/ g、
0.054 μg/ g、0.010 μg/g ,均未超标 , 达到药典要求。
参考文献:
[1] 娄方明 ,李群芳 ,张倩茹 ,等.气质联用分析铁筷子的挥
发油成分[ J] .安徽医药 ,2010 , 14(3):279-281.
[2] 王以明 ,汪模辉 ,张 勇 ,等.硒和硒化物的药理及药效
学研究[ J] .药学进展.2003 , 27(2):96-99.
[ 3] 唐任寰.生命科学中的微量元素[ M] .第2版.北京:中国
计量出版社 ,1996.1-6.
[ 4] 贵州省药品监督管理局.贵州省中药材 、民族药材质量
标准[S] .贵阳:贵州科技出版社 ,2003.457.
[5] 国家药典委员会.中国药典 2010年版(一部)[ S] .北京:
化学工业出版社 , 2010.80-81.
收稿日期:2012-12-10
作者简介:邬守华(1970-),男 ,主管技师 ,本科 ,学士学位 ,主要从
事理化检验工作。
过氧化氢消化富集火焰原子吸收法
测定尿中锰铅镉的方法探讨
邬守华
(巩义市疾病预防控制中心 ,河南 巩义 451200)
摘要:目的:尿液经过氧化氢消化处理 , 富集后用火焰原子吸收法测定 , 以建立尿中锰 、铅 、镉的实用测定方
法。方法:尿液用硝酸 、过氧化氢消化处理 , 用氢氧化镁富集后 , 火焰原子吸收光度法测定样品中锰铅镉含
量。结果:方法的标准曲线线性 r>0.999 ,锰铅镉的相对标准偏差在样品测定中分别为 2.3%～ 5.9%、1.8%
～ 6.5%、2.4 %～ 4.1%,回收率分别为 90.1%～ 98.6%、93.4%～ 98.2%和 96.5%～ 102.0%, 其它共存离
子无明显干扰。结论:尿中锰铅镉元素的测定适宜用该方法进行测定 , 方法简便 ,灵敏度高。
关键词:沉淀富集;镉;铅;锰
中图分类号:O655.24 文献标识码:A 文章编号:1005-5320(2013)02-0054-02
重金属中毒临床诊断以及职业健康监护中 ,尿
中锰 、铅 、镉的含量测定作为重要的指标 ,因为测定
尿中铅 、镉和锰的含量的多少能间接反映机体的吸
收量 ,也是反映人体排泄重金属情况的重要指标 。
本试验通过改变样品的消化 、富集的方式 ,达到用常
规的火焰原子吸收法同时测定多元素的目的 ,既可
以有原火焰法的快速 、简便 、灵敏的优点 ,又可以消
除较高的背景干扰 ,使火焰原子吸收法的灵敏度得
到了一定的提高。
1 方法与材料
1.1 试剂与仪器
瑞利WA2081原子吸收分光光度计 ,锰 、镉 、铅
元素空心阴极灯。
实验用水均为自制的去离子水 ,所用试剂均为
分析纯试剂(特别注明除外)。
·54·
第 30 卷Vo l.30 第 2 期No.2 微 量 元 素 与 健 康 研 究S tudies of T race Elements and Health 2013 年 03 月Mar. 2013