全 文 ：收稿　1999-08-12　　　　修定　1999-10-22
粟米草的组织培养和快速繁殖
丁如贤　许铁锋 　张汉明(第二军医大学药学院 , 上海 200433)
Tissue Culture and Rapid Propagation of Mollugo pentaphylla
DING Ru-Xian , XU Tie-Feng , ZHANG Han-Ming(Second Military Medical University , Shanghai 200433)
1　植物名称　粟米草(Mollugo pentaphylla)。
2　材料类别　叶 、带腋芽茎段。
3　培养条件 　诱导愈伤组织培养基:(1)
MS+2 , 4-D 1 mg·L-1(单位下同)+6-BA 1;
(2)MS +NAA 1+6-BA 0.5;(3)MS +2 , 4-D
2+KT 0.1;(4)MS+IBA 1+6-BA 2。诱导芽
分化培养基:(5)MS +ZT 2+NAA 0.2+CH
500;(6)MS+ZT 4+NAA 0.5+CH 500;(7)
MS+6-BA 2+NAA 0.5+CH 500;(8)MS+KT
1+NAA 0.1。诱导生根培养基:(9)MS+NAA
1+6-BA 0.1;(10)MS +NAA 0.5+KT 0.5。
每种培养基均附加 3%蔗糖 , 0.7%琼脂 , pH
5.8。培养温度(25±1)℃,光照每天 12 h ,光
照度 2 000 lx左右。
4　生长与分化情况
4.1　无菌材料的获得 　将粟米草种子用
70%乙醇浸泡 1 min ,自来水冲洗 ,再用0.1%
升汞灭菌 10 min ,在超净台上用无菌水漂洗 4
次 ,接种于 MS 固体培养基上 。待苗长至 4
cm 高时 ,剪其叶和带腋芽茎段作外植体。
4.2　愈伤组织的诱导　外植体接种于愈伤
组织培养基上约 1周左右 , (1)、(3)培养基
上 , 在接触培养基的部位外植体开始膨大 ,
逐渐愈伤化 , 随后整个外植体都开始膨松并
愈伤化。愈伤组织较疏松 , 颜色为土黄色 。
其中外植体在(3)培养基上愈伤速度较(1)
快 , 而在(2)、(4)培养基上 , 叶停止生长 , 逐
渐由接触培养基处枯黄扩大至整个叶片 , 带
腋芽的茎段则基部稍愈 ,约 20 d 左右长出
1 ～ 2个小芽 , 生长速度很慢 。由此可见 ,
2 ,4-D有利于促进粟米草的愈伤形成 , 且浓
度较高时效果较好 , 其他生长素效果则不理
想 。
4.3　丛生芽的快速诱导　将外植体置于分
化培养基上 ,5d左右带腋芽的茎段在(5)、(6)
接触培养基处稍膨大 , 10 d左右在叶腋处开
始长出小芽 ,随后数量逐渐增多。每个外植
体上有长得较大的小苗 ,也有稍有点愈伤的
芽点。以(6)培养基效果最佳 ,(5)次之 ,(7)、
(8)培养基上出芽较晚 ,而且数量少 ,一般在
2 ～ 3个左右 。外植体叶未出现以上的结果 。
看来 ,高浓度的玉米素有利于粟米草丛生芽
的形成 。同时我们将愈伤培养基上诱导形成
的愈伤组织置于分化培养基上 ,结果只能促
进愈伤的生长 ,而未有芽的诱导 ,说明它的再
分化有一定的困难。
4.4　生根与生长情况　分化培养基上形成
的丛生芽切下移至生根与生长培养基上 , 7 d
可看到根的形成 ,但根较细 ,数目多 ,尤以(9)
培养基上根数目多。(10)培养基上粟米草的
生长较(9)要快 。
4.5　试管苗的移栽 　将培养试管苗的三角
烧瓶打开 ,在温室中炼苗 5 d后取出 ,仔细洗
去根部的培养基 ,移至盛有蛭石与泥炭(1∶1)
的花钵中 ,每天浇稀释 10倍的 MS大量元素
培养液 ,5 d后移栽田里 ,成活率 52%。
5　意义与进展　粟米草是番杏科植物 , 为
我国及东南亚的传统草药 。全草入药 , 有清
热解毒 、收敛的功效 , 主治腹痛 、泄泻 、中暑 、
疮疖等症。印度学者 M.Rajasekaran 等[ Con-
traception ,1993 , 47(4):401] 研究它的化学成
231植物生理学通讯　第 36 卷 第 3 期 , 2000 年 6 月
DOI :10.13592/j.cnki.ppj.2000.03.015
分 、药理机理发现 , 它所含的一种皂甙(mol-
lugogenol-A)具有较强的杀精作用 , 被认为是
一种非常有前途的避孕药 。粟米草在我国主
要分布于东南部的热带与亚热带 , 多生长于
旷地或田边 。本文组培方法可为粟米草的开
发利用 、种质改良 、工业化生产有效成分提供
参考资料。粟米草的组织培养国内外尚未见
报道。
收稿　1999-06-21　　　　修定　1999-09-20
　 1　中国农业科学院院长基金资助项目。
花生种间杂种的胚胎营救和植株再生1
周　蓉　陈小媚(中国农业科学院油料作物研究所 , 武汉 430062)
Embryo Rescue and Plantlet Regeneration from Interspecific Hybrid in
Genus Arachis
ZHOU Rong , CHEN Xiao-Mei(Oil Crops Research Institute , Chinese Academy of Agricultural Sciences , Wuhan 430062)
1　植物名称　花生种间杂种(Arachis hy-
pogaea×A.cardenasii)。
2　材料类别　取杂交授粉后30 d的幼果 ,自
来水冲刷去泥土 ,洗净。以 70%乙醇浸泡 1
min后在无菌条件下剥离出胚珠。胚珠再以
70%乙醇表面灭菌 1 min ,0.1%HgCl2 处理 5
min ,灭菌水洗涤 5次 ,然后进行胚珠和幼胚
培养 。成苗后切取带腋芽茎段作外植体 。
3　培养条件　(1)胚珠生长培养基:MS+KT
0.2 mg·L-1(单位下同)+5%蔗糖;(2)诱导
幼胚萌发培养基:MS+2 , 4-D 1.0+BA 0.5;
(3)腋芽扩繁培养基:MS+BA 4.0+CH 600;
(4)生根培养基:MS +NAA 0.2。培养基
(2)～ (4)均加入 3%蔗糖 ,并以 0.7%琼脂固
化 ,pH 5.8。培养温度25 ～ 28℃,每日光照16
h ,光照度约 3 000 lx 。
4　生长与分化情况　胚珠培养用液体培养
基比固体培养基效果好 , 48.5%的胚珠表现
膨大。当胚珠生长至 4 ～ 5 mm时 ,解剖出未
成熟幼胚接种至固体培养基(2)诱导幼胚萌
发。胚萌发小苗长至 3 ～ 4个茎节时 ,切取长
1 ～ 2 cm带有腋芽的茎段接种至腋芽扩繁培
养基。1周后茎段基部开始出现愈伤组织和
芽原基 。3 ～ 4 周形成大量愈伤和芽原基 。
将愈伤组织切成 1 cm3左右的小块继代 ,其愈
伤组织和芽原基迅速增殖 。扩繁培养 4 ～ 5
周后部分芽原基分化出芽和真叶 ,平均每块
愈伤组织产生 7 ～ 8个小苗 。每隔 4 ～ 5 周继
代 1次 ,芽原基和芽以及小苗可持续增殖 。
再生小苗长出 2 ～ 3片真叶时 ,将小苗转入生
根培养基中 。7 ～ 10 d后小苗基部生出 5 ～ 10
条白色不定根 , 1周后根长 1 ～ 5 cm ,移入砂
杯置温室中生长 ,成活率达 85%以上 。再生
苗成活后移入田间自然生长 ,并开花结实 。
5　意义与进展　花生属野生种对栽培花生
的多种病虫害具有高水平抗性 ,但由于种间
遗传差异和生殖隔离等因素 ,常规的花生种
间杂交常表现出低亲和及杂种败育。杂种败
育多数是合子后败育 ,因此胚珠和幼胚离体
培养技术对克服花生种间杂种胚败育具有重
要的应用价值。以带腋芽的茎段为外植体离
体扩繁种间杂种植株 ,具有数量多 、速度快 、
技术简单和方法实用等优点 ,以往未见报道 。
离体培养技术可促进花生远缘杂交以改良花
生抗逆性的研究 。
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