全 文 ：图 1　 NaCl浓度改变与降纤酶效价变化曲线
值 7. 4) 对效价测定结果的判断有很大的帮助。另
据报道 ,不同金属盐离子对类凝血酶促凝作用的影
响不同 [2 ] , Na+对尖吻蝮蛇毒类凝血酶促凝作用有
明显的抑制 [3 ]。通过对不同 NaCl浓度条件下降纤
酶效价测定实验分析 , 初步认为 NaCl浓度的不同
是导致半成品和冻干成品效价差异的主要原因 ,即
降纤酶半成品配制液 ( 1%右旋糖酐溶液 ) 与冻干
品稀释液的 NaCl浓度存在差别。为此 , 我们对半
成品效价测定方法进行了完善 ,配制出比冻干样品
稀释液 NaCl浓度高一倍的缓冲液 , 半成品与其等
比稀释 , 消除了 NaCl浓度的差异 , 得出结果再乘
以检验系数 , 即为与冻干制品较为接近的效价。经
过一段时间的试验观察 ,证明在生产工艺稳定不变
的情况下 ,利用该方法对降纤酶生产和质量控制极
为有利 , 从而使降纤酶效价稳定可靠。
参考文献
1　中华人民共和国卫生部国家标准 (药典、部颁 )颁布件 .
97卫药准字 01号 .
2　郝芮丽 , 沈　佳 , 孙　磊 . 类凝血酶效价测定方法的研
究 [ J]. 中国生化药物杂志 , 1997 ( 3) : 134～ 136.
3　周素芳 , 钟满森 , 余清声 , 等 . 尖吻蝮蛇类凝血酶和促
凝作用的研究 [ J] . 蛇志 , 1997 ( 9): 4: 1～ 5.
作者简介:
　　曹晓静 , 女 , 29岁 , 大专学历 , 检验师。
(收稿: 1999- 11- 03)
快速低压干柱柱层析技术的改进及其在
刺苋分离提纯中的应用
秦　箐
(广西医科大学基础医学院化学教研室　南宁　 530021)
　　 [分类号 ] 　 TQ460. 7　　　 [文献标识码 ] 　 B　　　 [文章编号 ]　 1001- 5639 ( 2000) 02- 0076- 02
　　快速低压干柱柱层析 ( Dry - column f lash
chroma tog raphy) 技术是由 L. M. Ha rwood创造
的。由于是一项较新的技术 ,尽管与经典的常压柱
层析 [1, 2 ]比较具有明显优点 , 但目前尚不被广泛了
解和应用。作者在丹麦皇家药学院药物化学系工作
期间曾多次使用该技术 , 并进行了改良 ,使其更合
理 ,更符合我国实验室的实际情况 , 而且应用此项
技术分离纯化了一种治疗毒蛇咬伤的中药—— 刺
苋 ( Amaranthus sinosus L. ) [3 ]。
1　实验仪器
　　玻璃砂芯漏斗 ,抽滤瓶 , 抽气器 , 硅胶 GF254
(青岛海洋化工厂 ) , TLC硅胶 60 F254铝板 (德国
MERCK)。
2　实验方法
2. 1　快速低压干柱柱层析
　　装柱: 将 1# 砂芯漏斗装在抽滤瓶上 , 在抽气
状态下把干燥的、薄层层析用的硅胶吸附剂倒入漏
斗中至距漏斗上边缘约 10mm处。用软木塞轻敲
漏斗外壁 , 使吸附剂装填均匀。将起始溶剂 (或吸
性次之的溶剂 )倒入漏斗 ,并保持液面覆盖柱子直
至使整个柱子润湿。停止抽气 ,用干净的玻璃塞将
润湿的柱子均匀压实。装柱完毕。
样品的准备: 用少量起始溶剂将样品溶解即
可。通常样品并不完全溶于起始溶剂 ,可先使之成
为均匀的混浊液 ,再加入一些极细的硅胶或硅藻土
粉末 ,在旋转蒸发器上使之接近干燥 ,形成均匀的
样品固体溶液。装样: 将样品固体溶液倒在柱子上 ,
略压实。剪一块直径小于漏斗内径的滤纸盖在样品
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2000年 第 12卷 第 2期　　　　　　　　　　蛇志 JOU RN AL OF SNAKE　　　　　　　　　　 Vo l. 12 No. 2, 2000
中国 -丹麦科技合作协议 Danida基金资助项目 (编号 AM 9: 3)
上 , 以保护样品不致被洗脱液冲刷。
　　漏斗大小及试剂用量见表 1。
　　洗脱: 逐份加入洗脱液 , 梯度洗脱 , 顺序接收
各流分。
　　组份收集: 用 TLC分析各流分 , 根据其表现
合并相同流分 ,浓缩 ,干燥 ,即可得到不同的组份。
2. 2　刺苋的分离纯化
　　刺苋干品 10g以二氯甲烷冷浸 ,提取液浓缩成
浸膏。取此浸膏 0. 03g用快速低压干柱柱层析方法
进行分离纯化 ,石油醚 -乙酸乙酯梯度洗脱 ,薄层
层析检查 , 合并相同流分 , 浓缩、 干燥、 称重。
　　表 1　快速低压干柱柱层析漏斗大小及试剂用量
漏斗直径
( mm)
漏斗长度
( m m)
硅胶用量
( g)
样品用量
( g)
每份洗脱液体积
( ml)
60 55 60 3～ 4 15～ 20
80 70 125 6～ 8 40～ 50
100 90 250 13～ 15 100
3　讨论
　　经改良后的快速低压干柱柱层析技术具有以
下优点。 ( 1)仪器简单。使用 250g硅胶吸附剂 ,处
理十几克样品只需要一只体积为 500ml砂芯漏斗
即可足以装柱 ,亦能处理 0. 01g的微量样品。所用
的仪器均为普通的玻璃仪器 ,并采用实验室常见的
抽滤瓶代替磨口抽气接头 , 更加适用于国内的条
件。 ( 2) 装柱质量高。 装柱是柱层析成败的关键。
由于采用边抽气边干装 ,再用溶剂润湿并压紧的方
法 , 使装成的柱子既均匀、又密实 , 保证了层析柱
条件的均一性 , 而且操作易行。 ( 3) 装样容易。无
论样品是否溶于溶剂均可实现装样 ,一般情况下将
样品制成固体溶液 ,可将样品均匀的铺在柱子的表
面 , 便于均匀洗脱。操作简单。由于柱子密实、 体
积小 ,且洗脱时每份洗脱液均可抽干 ,不仅操作容
易 , 还可根据实际情况随时暂停洗脱 ,避免了经典
常压柱层析常见的因洗脱液不慎流干而破坏层析
柱条件均一性的弊端 ,使操作变得更方便、更轻松。
( 4) 效率更高。由于采用了减压抽滤的原理 , 一只
吸附剂用量为 250g的柱子洗脱时间仅为 1～ 2h,
而若采用经典常压柱层析则往往需要几天 ,不仅大
大加快了洗脱速度 ,提高了效率 ,而且避免了常用
的顶端加压柱层析需使用氮气瓶、 操作麻烦的缺
点 , 往往只需 1次柱层析即可获得化合物纯品。
　　刺苋干品经 1次快速低压干柱柱层析分离 ,得
到两个在薄层层析上呈单一斑点的流分 ,一个为绿
色 , Rf值 0. 76 ( 1: 1石油醚- 乙酸乙酯 ) , 另一个
无色 , Rf值 0. 93 ( 1: 1石油醚- 乙酸乙酯 )。
综上所述 ,经过改良的快速低压干柱柱层析技
术具有仪器简单 , 操作方便 , 效率高等诸多优点。
改变了柱层析耗时长、操作烦琐的缺点 , 明显改善
了操作条件 , 的确是一种优良的分离、提纯有机化
合物的柱层析技术 , 具有非常好的利用价值。
　　致谢　丹麦皇家药学院药物化学系 Hasse
Bonde Rasmussen博士的大力帮助。
参考文献
1　兰州大学复旦大学化学系有机化学教研室编 . 有机化
学实验 [M ] . 北京: 人民教育出版社 , 1978.
2　华南师范大学 , 曾昭琼 . 有机化学实验 [M ]. 第 2版 .
北京 : 高等教育出版社 , 1987.
3　沈连升 . 本草纲目制药图谱 [ M ] . 西宁: 青海人民出
版社 , 1999.
作者简介:
　　秦　箐 , 男 , 36岁 , 大学本科毕业 , 大学讲师。
(收稿: 2000- 02- 25)
难穿静脉穿刺的体会
陆兰新　周爱花
(广西农垦医院　南宁　 530001)
　　 [分类号 ] 　 R472. 2　　　 [文献标识码 ] 　 B　　　 [文章编号 ]　 1001- 5639 ( 2000) 02- 0077- 02
　　静脉采血、 输血是抢救和治疗病人的措施之
一 ,也是护理工作的一项基本功 ,提高静脉穿刺一
针见血的成功率 ,是抢救危重患者的关键。1998年
4月至 1999年 4月 , 我们对 100例次难穿刺静脉
进行穿刺 , 成功率达 95% , 现将体会总结如下。
1　临床资料
　　本组病例年龄在出生 24h至 85岁之间 , 其中
新生儿 25例 , 儿童 36例 , 青壮年 25例 , 老年人
14例。本组 100例中 , 一针见血 95例 , 二针见血
2例 , 失败 3例。
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