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第 17卷 第 3期 遵义师范学院学报 2015年 6月
漆姑草（ (Sw.) Ohwi）又名珍珠
草、瓜槌草、星宿草、日本漆姑草、腺漆姑草、地松和
大龙叶等，为石竹科漆姑草属植物。漆姑草为一年
生小草本，高 5～20cm，上部被稀疏腺柔毛；茎丛生，
稍铺散；叶片线形，顶端急尖，无毛；花小形，种子细，
圆肾形，表面具尖瘤状凸起；花期 3～ 5月，果期 5～
6月；生长于海拔 600～ 1900m间河岸沙质地、撂荒
地或路旁草地。漆姑草具有拔毒、散结消肿、解毒止
痒和抗癌之功效，民间常用于治疗白血病、漆疮、秃
疮、痈肿、淋巴结核、龋齿痛、跌打内伤和蛇咬伤等病
症[1]。漆姑草主产于江苏、湖南、湖北、贵州、云南和
四川等省[2]。
多糖物质是很多中草药的主要成分，生物活性
较高，研究表明漆姑草水粗提物对人白血病K562细
胞株具有较强的抑制作用[3]，具有较高的开发利用价
值，因此探讨漆姑草多糖提取及含量测定的方法具
有实际意义，可为漆姑草多糖药应用于临床提供参
考。
1 材料与方法
1.1 材料
漆姑草购于遵义市中医院，并经遵义市中医院
孔蕾药剂师及遵义师范学院卫生院赵淑敏副主任医
师鉴定。
样品经低温干燥后，用中药粉碎机破碎，过 70
目筛，采用四分法缩分，存放于玻璃瓶中备用。
1.2 仪器与试剂
漆姑草多糖的提取及其含量的测定
胡明华，江忠远，金 茜
（遵义师范学院黔北特色资源应用研究实验室，贵州遵义 563002）
摘 要：探讨了漆姑草多糖提取及含量测定的方法。采用蒸馏水溶解乙醇沉降法提取漆姑草中的多糖，用苯酚-硫酸法测定其
含量。实验结果表明：该方法简单、方便、无污染，从漆姑草中提取的多糖含量高达 20.19%。
关键词：漆姑草；多糖；含量；水提醇沉法
中图分类号：O629.12 文献标识码：A 文章编号：1009-3583（2015）-0102-03
On the Extraction and Determination of Polysaccharide in
Sagina Japonica
HU Ming-hua，JIANG Zhong-yuan，JIN Qian
(The Application Research Lab for Featured Resources of Qianbei, Zunyi Normal College, Zunyi 563002, China)
This paper gives a full account of the extraction and determination of polysaccharide in Sagina Japonica. The study adopts the
distilled water to dissolve ethanol to extract polysaccharide and then use phenol-sulfuric aid method to determine its content. The ex-
periment shows that this method is simple and convenient, and the content of the polysaccharide reaches 20.19%.
Sagina Japonica; polysaccharide; content; water extraction and alcohol precipitation
收稿日期：2015-01-11
作者简介：胡明华，男，贵州遵义人，遵义师范学院化学化工学院实验师。
第 17卷 第 3期
2015年 6月
遵义师范学院学报
Journal of Zunyi Normal College
Vol.17,No.3
Jun.2015
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仪器：T6新世纪紫外-可见分光光度计（普析通
用）；RE-2000E旋转蒸发器（上海亚荣生化仪器厂）；
电子天平（北京多利斯仪器有限公司）；HH-1恒温水
浴锅（海浦东物理光学仪器厂）。
试剂：葡萄糖、苯酚、浓硫酸、氯仿、无水乙醇、丙
酮、正丁醇、石油醚（bp：30～ 60℃）、95%乙醇均为
分析纯。
1.3 漆姑草多糖的提取方法
准确称取待用漆姑草 70g于烧杯中，在 25℃下
用 95%乙醇浸泡 3次，每次浸泡时间为 5h，95%乙醇
用量依次为 350 mL、250 mL、200 mL。过滤，滤渣挥
干溶媒后分三次加入蒸馏水 400mL、250 mL、150
mL，于 97℃水浴锅中浸提，每次 3h，合并滤液，减压
浓缩至 150 mL。离心除去不溶物，过滤。滤液在搅
拌下缓慢倒入 95%乙醇至其醇浓度在 80%左右，0～
5℃静置一天。过滤，分别用 20mL无水乙醇、20mL
丙酮冲洗沉淀，于 40℃真空干燥一天，得灰色粗产
物 3.9446g。
将上述粗产物用 150mL二次蒸馏水溶解，离心
分离上层清液。上层清液用 Sevage试剂（氯仿:正丁
醇=4:1）脱蛋白 6次，直至无明显蛋白层[4-5]。收集上
层透明液体，水浴蒸发至 20mL，加入 40mL无水乙
醇醇析多糖，过滤。分别用 20mL无水乙醇、20mL
丙酮分多次冲洗沉淀，将沉淀物于 40℃真空干燥一
天得漆姑草多糖 1.4381g。
1.4 葡萄糖标准溶液的配制
准确称取 105℃恒重的葡萄糖 10mg，定量转移
至 250 mL棕色容量瓶中，使其浓度为 40 g/mL，用
于漆姑草多糖的测定。
2 结果与讨论
2.1 苯酚-硫酸液的配制与测定波长的选择
取分析纯苯酚 120g，在硫酸浴中蒸馏，收集
180～ 182℃馏分。准确称取 5.0g苯酚蒸馏物，用
少量二次蒸馏水溶解，转移至 100mL棕色容量瓶中
定容，0～ 5℃冷藏备用。
在 10mL具塞刻度试管中分别加入 1.0mL葡萄
糖标准液、1.0mL 苯酚储备液，震荡下加入
5.0mL95%硫酸溶液，混匀后沸水浴加热 15min，冷
至室温，在 450～ 510nm范围内进行光谱扫描，其
最大吸收峰波长为 490nm（见图 2）。
图 1 最大吸收波长
2.2 标准曲线的制作
分别取 0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4mL葡萄糖
标准液于 7支 10.0mL具塞刻度试管中，用二次蒸馏
水稀释至 2.0mL，以 2.0mL二次蒸馏水作空白试验。
在具塞刻度试管中加入 1.0mL苯酚储备液，摇匀，震
荡下加入 5.0mL95%硫酸溶液，摇匀后沸水浴加热
15min。冷至室温，于 490nm下测定其吸光度。以
葡萄糖浓度为横坐标，吸光度为纵坐标制作葡萄
糖标准曲线，得标准曲线回归方程：A=0.01708C-
0.00663，R2=0.9990（见图 2）。
图 2 葡萄糖标准曲线
2.3 漆姑草多糖含量的测定
胡明华等·漆姑草多糖的提取及其含量的测定
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第 17卷 第 3期 遵义师范学院学报 2015年 6月
准确称取恒重后的漆姑草多糖 10mg，用少量二
次蒸馏水溶解后移入 50mL棕色容量瓶中，定容。准
确量取该溶液 2mL，按照标准曲线测定方法测定其
吸光度，用回归方程计算测定溶液中葡萄糖的浓度。
漆姑草多糖含量（%）=C×D×0.9/W×1000
式中：W为多糖的质量（mg），C为漆姑草多糖
溶液中葡萄糖的浓度（ g/mL），D为漆姑草多糖的稀
释因素：D=2×100/0.2=1000，0.9为葡萄糖校正系数。
由公式计算出提取的漆姑草多糖含量为20.19%。
2.4 紫外吸收光谱
取恒重后的漆姑草多糖 l0mg，加适量二次蒸馏
水溶解，用二次蒸馏水作空白，在 200～ 600 nm范
围内测定其吸收光谱（见图 4）。
图 3 紫外吸收光谱
由图 3可看出，漆姑草多糖水溶液在 280 nm处
有微弱吸收，说明用Sevage法除蛋白后的多糖仍残
留有微量蛋白质、多肽；但在 260 nm处无吸收现象，
说明溶液中无核酸存在。
2.5 漆姑草多糖的性质
漆姑草多糖恒重品为灰白色，无味，溶于热水，
不溶于试剂级的无水乙醇、环己烷、二甲苯、四氯化
碳、环己酮等有机溶剂。Molish反应有紫色环生成，
苯酚-硫酸法呈阳性反应。
3 结论
采用 95%乙醇浸泡去除漆姑草中的生物碱、苷
类、低聚糖等物质，水溶醇析法提取多糖，Sevage法
除蛋白，经分光光度法测定漆姑草多糖含量为
20.19%。
漆姑草多糖经 95%H2SO4 酸化后水解为单糖，
单糖脱水生成糠醛衍生物，最后和苯酚反应生成有
色物质，显色反应稳定。用紫外可见分光光度法检
测漆姑草多糖的含量，方法简单、可靠。
参考文献：
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上海科学技术出版社,1994．
[2]黄筑艳,李焱.漆姑草挥发油成分的研究[J].长春师范学院学
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[4]田卫.植物多糖的研究[D].兰州:兰州大学,2007．
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（责任编辑：朱 彬）