全 文 ：第 32 卷
Vol． 32
第 3 期
No． 3
微 量 元 素 与 健 康 研 究
Studies of Trace Elements and Health
2015 年 05 月
May 2015
收稿日期:2014 － 12 － 01
基金项目:国家中医药管理局“十二五”中医药重点学科中
药化学建设项目(国中医药人教发［2012］32 号) ;广西重点
学科药物化学建设项目(桂教科研［2013］16 号) ;2014 年右
江民族医学院大学生创新训练计划立项资助项目
(XJCXB201425)
作者简介:莫 璐(1991 －)，女，壮族，在读临床医学专业本科生。
通讯作者:黄锁义，教授，硕士研究生导师。
土人参叶的多糖提取及含量测定
莫 璐1，4，冯小雄2，4，农 嵩1，4，黄锁义3，4
［右江民族医学院:1．临床学院;2．检验学院;3．药学院;4．右江流域道地中药材(民族药材)研
究广西高校重点实验室:广西 百色 533000］
摘要:目的:提取土人参叶多糖，测定其含量。方法:水提醇沉淀法提取多糖，苯酚—硫酸法显色，以葡萄糖标
准液绘制标准曲线。结果:回归方程为 y = 7． 4625x － 0． 0484，相关系数 r = 0． 9999，平均回收率 98． 7%，ＲSD =
0. 49%(n = 5)。结论:土人参叶多糖含量为 1． 3%，方法简单易行，数据可靠，精密度和稳定性好。
关键词:土人参叶;多糖;含量测定;苯酚 －硫酸法
中图分类号:Ｒ284． 2 文献标识码:A 文章编号:1005 － 5320(2015)03 － 0029 － 02
Determination for the content of polysaccharide and extract of the Talinum paniculatum leaves
MO Lu1，4，FENG Xiao － xiong2，4，Nong Song1，4，HUANG Suo － yi3，4
［1． College of Clinical Medicine，Youjiang Medical University for Nationalities;2． College of Laboratory and Clinical of
Medicine Sciences，Youjiang Medical University for Nationalities;3． College of Pharmacy，Youjiang Medical University for
Nationalities;4． Key Laboratory of Chinese Medicinal Materials in Youjiang Basin(National Medicine)Ｒesearch ，Guan-
gxi Universities:Baise Guangxi 533000，China］
Abstract:Objective:Extraction of Artemisia capillaries polysaccharide，and content determination of polysaccharide from Talinum panic-
ulatum leaves． Methods:Water extracting and alcohol precipitation extraction for content polysaccharides from Artemisia capillaries． U-
sing phenol － sulfuric acid method to make them development color． With glucose as standard substance． Ｒesults:The regression equation
for y = 7. 4625x － 0. 0484，the correlation coefficient r = 0． 9999． The average recovery rate is 98． 7%，ＲSD =0. 49%(n = 5)． Conclu-
sion:Artemisia polysaccharide Content is 1． 3% ． The results show that the proposed method was easy，accurate，stability and precision
well．
Key Words:Talinum paniculatum leaves;polysaccharide;content;phenol － sulfuric acid method
土人参(学名:Talinum paniculatum (Jacq．)Gaertn．)又
名飞来参、申时花等，为马齿苋科一年生草本。生于田野，路
边，村旁。多为栽培，可供观赏。根入药，补中益气，润肺生
津。叶:通乳汁，通便［1］。此外，土人参叶存在显著的“消毒
消痈”功效，能显著降低耳肿胀，减少腹腔毛细血管通透性以
及抑制炎症渗出、肉芽组织形成，其效果与免疫抑制剂无明
显差异;对金黄色葡萄球菌，腐生葡萄球菌有抑制作用［2］。
土人参叶中可提取得到草酸、钙、磷、铁，抗坏血酸，胡萝卜
素，尼克酸，核黄素，硫胺素等成分［3］，其中维生素 C、可溶性
糖、POD、CAT、GSH － PX具有抗氧化作用［4］。提取土人参叶
中各种成分取得可喜成果，但未见其多糖含量测定的相关报
道，本实验从多糖强极性、溶于水而不溶于有机溶剂的特性
入手，采用水提醇沉法提取土人参叶多糖，并用苯酚 －硫酸
法显色从而完成对土人参叶多糖的含量测定，为土人参叶的
开发及应用提供实验依据。
1 仪器与试剂
1． 1 材料
土人参叶采集于广西来宾市忻城县，干燥粉碎备用。
1． 2 试剂
950 ml /L乙醇 AＲ，无水乙醇 AＲ，乙醚 AＲ，苯酚 AＲ，浓
硫酸 AＲ，葡萄糖标准品(成都科龙化工试剂厂，批号
20041102)。
1． 3 仪器
722N型分光光度计(上海菁华科技有限公司) ;电子天
平(上海舜宇恒平科学仪器有限公司) ;ZKJ － 1002 循环水真
空抽气泵(巩义市子华仪器有限公司) ;ＲE － 52AA电热式恒
温水浴锅(江苏金坛宏凯仪器厂) ;DHG －9070A型电热恒温
鼓风干燥箱(上海精宏实验设备有限公司)。
2 结果与分析
2． 1 土人参叶多糖的提取
称取土人参叶粉末 30 g，放入 200 ml 烧杯中，加入蒸馏
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微 量 元 素 与 健 康 研 究
Studies of Trace Elements and Health
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水 120 ml，将其置于温度控制在 65℃的电热恒温水浴锅 3 h，
抽滤，500 ml烧杯收集滤液;所得固体再进行加热水解、抽滤
过程，提取 3 次;将 3 次滤液合并，置于温度为 99． 9℃的电热
恒温水浴锅中浓缩至 32 ml，冷却至室温，加入 90 ml的 95%
乙醇，背光静置 24 h。抽滤，无水乙醇、乙醚依次洗涤沉淀
物，洗涤两次，可得土人参叶多糖固体。
2． 2 5%苯酚溶液的配制
精确量取 12. 5 ml苯酚，置于 250 ml的容量瓶，定容，得
5． 0%苯酚溶液。
2． 3 葡萄糖对照品溶液的配制
精密称取干燥葡萄糖标准品 0. 040 g，定容，摇匀，得 0. 4
g /ml的葡萄糖对照液。
2． 4 标准曲线的制备
分别精确量取葡萄糖对照液 2、4、6、8、10 ml，并加入到 5
个 50 ml 的容量瓶中，定容，摇匀，得 0. 016、0. 032、0. 048、
0. 064、0. 080 g /ml葡萄糖溶液，分别从中精确量取 1． 0 ml置
于 5 支试管中，并向各试管中依次加入 5%苯酚溶液 1. 5 ml，
浓硫酸 7. 5 ml 使其显色，摇匀，冷却至室温。调节波长为
484 nm 并在此波长下依次测定各浓度溶液吸光度值，以多
糖的量(C g /ml )为横坐标，以吸光度(A)为纵坐标，绘制标
准曲线，建立线性回归方程(表 1)。
表 1 紫外线葡萄糖对照液吸光度值
浓度
(C mg /ml)
0． 0 0． 016 0． 032 0． 048 0． 064 0． 080
吸光度(A)0． 000 0． 071 0． 189 0． 312 0． 429 0． 548
经线性回归，得标准曲线方程为 y = 7. 4625x － 0. 0484，
回归系数 r = 0. 9999。
2． 5 土人参叶多糖含量测定
精确称取土人参叶多糖固体 0. 010 g 于 1 支试管中，加
入 1 mol /L的 H2SO4 溶液 2 ml加热水解 2 h，冷却至室温，得
到土人参叶水解溶液，将其转移至 100 ml 的容量瓶中，定
容，摇匀，作为供样液。精密量取 5 份 1． 0 ml 供样液，分别
置于 5 支试管，按照 2． 4 方法显色，摇匀，冷却至室温，测定
相应吸光度值(表 2)。
表 2 紫外线平行测定土人参叶多糖溶液的光度值
份数 吸光度 土人参叶多糖质量浓度(mg /ml)
1 0． 045 0． 0125
2 0． 051 0． 0133
3 0． 051 0． 0133
4 0． 050 0． 0132
5 0． 047 0． 0128
由回归方程及上表数据可计算出土人参叶多糖含量为
1. 3%。
2． 6 稳定性试验
精密量取土人参叶供样液 1 ml置于 1 支试管中，按 2． 4
步骤对其显色处理后依次在 15、30、60、90、120、150、180 min
时测定相应吸光度值(表 3)。
表 3 土人参叶多糖溶液稳定性试验(常温)
T(min) 15 30 60 90 120 150 180
吸光度 0． 119 0． 119 0． 120 0． 120 0． 120 0． 119 0． 118
由上表数据计算得 ＲSD 为 0． 63%，即土人参叶多糖溶
液在 3 h内稳定性良好。
2． 7 精密度试验
精确量取土人参叶供样液 1 ml 置于试管中，按 2． 4 方
法显色处理，连续测定 5 次(表 4)。
表 4 土人参叶多糖溶液精密度试验
测定
次数
吸光度
(A)
ＲSD
(%)
多糖质量浓度
(mg /ml)
多糖含量
(%)
1 0． 092 0． 0188 1． 88
2 0． 093 0． 0189 1． 89
3 0． 092 0． 49 0． 0188 1． 88
4 0． 092 0． 0188 1． 88
5 0． 092 0． 0188 1． 88
由上表数据计算出 ＲSD 为 0． 49%，说明土人参叶供样
液精密度良好。
2． 8 回收率的测定
精确量取 5 份供样液 1 ml置于 5 支试管中，然后分别加
入葡萄糖对照液 0. 1、0. 2、0. 3、0. 4、0. 5 ml，用蒸馏水补足
2. 0 ml。取 2. 0 ml蒸馏水做空白对照，按照 2. 4 步骤显色处
理后测定吸光度值，计算得平均回收率为 98. 7%。
3 讨 论
多糖强极性，可溶于水但不溶于有机溶剂的特点是本实
验进行的主要依据，本实验主要通过水提醇沉淀法及苯酚 －
硫酸法对土人参叶多糖进行提取和显色，在 484 nm 处测定
其吸光度值。由实验结果及相关数据计算得土人参叶多糖
含量为 1． 3%，平均回收率为 98. 7%，稳定性 ＲSD为 0. 63%
(n = 5)。苯酚—硫酸法简单易行、数据可靠、稳定性和精密
度好，适用于土人参叶多糖的含量测定。
土人参是一种广泛生长于广西本土的中药植物药材，提
取其多糖并测定含量，对于土人参的开发和利用，提高其药
用价值具有一定意义［8］。
与国外相比，我国植物多糖资源丰富，应用广泛，具有潜
在开发前景。
参考文献:
［1］覃道光，覃兴乐，苏霞辉，等． 民族医药与方剂学［M］．
南宁:广西科学技术出版社，2009． 142．
［2］聂建华，阮时空，吴符火，等．土人参叶“解毒消痈”疗效
及作用机制的实验研究［J］．中华中医药学刊，2008，26
(6) :1259 － 1261．
［3］ 庄馥莘． 一种营养丰富的新绿叶菜———菜用土人参
［J］．中国蔬菜，1996，(5) :54 － 55．
［4］张 建，刘美艳．土人参的抗氧化成分研究［J］．江苏农
业科学，2005，(1) :109．
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