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北桑寄生化学成分系统预实验



全 文 :中国药物与临床 2012 年 6 月第 12 卷第 6 期 Chinese Remedies & Clinics,June 2012,Vol.12,No.6
北桑寄生为桑寄生科 (Loranthaceae) 桑寄生属(Loran-
thus)植物。 前期研究发现,北桑寄生粗提物对体外肿瘤细胞
具有细胞毒活性和血管抑制活性。 但对该植物的化学成分研
究仅分出 4 个黄酮类化合物 [1],本研究对该植物中化学成分
进行了系统预实验,为其化学成分的系统研究和有效成分的
分离奠定基础。
1 仪器、试剂与材料
1.1 仪器: 旋转蒸发器 RE-52AA (上海亚荣生化仪器厂);
SHZ-DⅢ型循环水式真空泵(巩义市英峪予华仪器厂);电热
恒温水浴锅(国华电器有限公司);控温电热套 KDM 型(山东
鄄城华鲁仪器公司);AR1140 电子分析天平 (奥豪斯国际贸
易有限公司);电热鼓风干燥箱 DGF30/-IA HG101-IA(南京
实验仪器厂)。
1.2 试剂与药材:95%乙醇、石油醚、氯仿、茚三酮、α-萘酚、
1%三氯化铁、三氯化铁·铁氰化钾、氯化纳·明胶、镁粉、氢氧
化钾、碘化铋钾、硅钨酸、pH 试纸,溴甲酚绿、盐酸、冰乙酸、
乙酸酐、浓硫酸。 所用试剂均为分析纯,实验用水为蒸馏水。
北桑寄生于 2010 年 10 月初采自山西省晋城市历山,由
山西医科大学药学院鉴定为北桑寄生 L. tanakae Franch. et.
Sav.。 标本保存于山西医科大学药学院中药学教研室。
2 方法和步骤
2.1 水提取物成分分析:药材粉碎成 20~30 目粗粉,取 10 g
加入 100 ml 水,60 ℃水浴加热提取 1 h,滤液供做蛋白质、多
肽、氨基酸、糖及苷、鞣质及酚性物质、皂苷、有机酸的检识。
2.2 乙醇提取物成分分析:取 10 g 药粉,加 95%乙醇 60 ml,
水浴加热回流提取,留 10 ml 供酚类、鞣质、有机酸检识,其余
浓缩成浸膏。 浸膏分为两部分,一部分加 2% HCl 10 ml 充分
搅拌,过滤,取滤液供生物碱的检识,滤纸上的残渣加 10 ml
乙醇溶解做黄酮和蒽醌检识;另一部分浸膏以少量乙酸乙酯
溶解,溶液置分液漏斗加适量 5%NaOH 振摇洗涤 2 次(每次
2~3 ml),使酚性物质及有机酸转入下层的 NaOH 水溶液中,
剩下的乙酸乙酯为中性部分,用蒸馏水洗至中性,水浴蒸去
乙酸乙酯,残留物用乙醇 15 ml 溶解,供强心苷、香豆素、内酯
类检识。
2.3 石油醚提取物有效成分分析:称取 2 g 药粉,加石油醚
(60~90 ℃沸程)100 ml,密封放置 2 h,过滤。 滤液供挥发油、
油脂检识。
3 结 果
3.1 水提取物成分:水提取物成分分析结果见表 l,从表中可
知,多糖及其苷检识反应 α-萘酚试验,鞣质检识反应明胶试
验,酚类的检识反应 1%FeCl3试验,皂苷检识反应泡沫反应、
Liebermann-Burchard 反应均呈阳性,表明水提取物中肯定含
有多糖及苷、鞣质及酚类、甾体皂苷。 蛋白质、多肽、氨基酸的
检识反应加热沉淀试验、双缩脲反应、茚三酮反应均呈阴性,
但是植物中一般均含有蛋白质、多肽及氨基酸,表明蛋白质、
多肽及氨基酸在水提取物中含量较低或无。 有机酸检识反应
pH 试纸、溴甲酚绿试验分别呈阴性和阳性,表明水提取物中
可能含有有机酸。
3.2 乙醇提取物成分: 乙醇提取物成分分析结果见表 2,从
表中可知,酚类和鞣质检识反应三氯化铁-铁氰化钾试验、氯
化钠-明胶试验,黄酮类检识反应盐酸-镁粉试验,蒽醌类检
识反应氢氧化钾试验、碱性试验,强心苷检识反应 Rosenheim
反应、三氯化铁-冰乙酸试验、Baljet 反应,甾体检识反应乙酸
酐-浓硫酸试验、Rosenheim 反应、Salkowksi 反应均呈阳性,
表明乙醇提取物中肯定含有酚类或鞣质、黄酮类、蒽醌类、强
心苷、甾体。 生物碱检识反应硅钨酸试验、碘化铋钾试验、鞣
酸试验,香豆素检识反应开环闭环试验均呈阳性,表明乙醇
提取物中无生物碱和香豆素。
3.3 石油醚提取物成分: 石油醚提取物成分分析结果见表
3,挥发油、油脂检识反应滤纸油斑加热法检测结果为加热前
有油斑,加热后无油斑,表明石油醚提取物含挥发油、不含油
脂。
4 讨 论
经过系统溶剂预试验表明, 北桑寄生中可能含有糖类、
鞣质及酚性物质、黄酮类、蒽醌类、甾体皂苷类、挥发油成分。
由于预试验检测试验是用粗提取液,有些反应为几种成
分所共有, 比如三氯化铁反应, 只是酚羟基的检识反应,苯
酚、鞣质都可以发生阳性反应;有个别反应具有一定的局限
性,比如某些特殊的生物碱用传统的检识反应无法检出如麻
黄碱、咖啡碱等,因此预试验只能作为大类成分的判断;有些
成分需要多项反应均为阳性才能确认含有此类成分,有个别
显色反应为阳性,则只能说明可能含有此类成分,需要进一
步的实验证明[2,3],比如本实验中有机酸。
本研究对桑寄生科植物北桑寄生进行化学成分预试验,
·药物研究·
北桑寄生化学成分系统预实验
许宁宁 白云娥 薛强强 张守元 杨官娥
基金项目:国家自然科学基金(30672621,81173473);山西省自
然科学基金(2010011048-2)
作者单位:030001 太原,山西医科大学药学院
通信作者:杨官娥,Email:yangguane@hotmail.com
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中国药物与临床 2012 年 6 月第 12 卷第 6 期 Chinese Remedies & Clinics,June 2012,Vol.12,No.6
表 1 北桑寄生水提物成分检识
检测项目 检测方法 结果 反应类型 结论
蛋白质、多肽、氨基酸 加热沉淀试验 无沉淀 - 无或含量很低
双缩脲反应 未出现颜色变化 -
茚三酮反应 未出现颜色变化 -
多糖及其苷 α-萘酚试验 有紫色环出现 + 有
鞣质 明胶试验 白色沉淀 + 有
酚类 FeCl3试剂 有颜色变化 + 有
皂苷 泡沫反应 有泡沫产生 + 可能含有甾体皂苷
Liebermann-Burchard 反应 最后呈污绿色 +
三萜与甾体皂苷鉴别 酸碱法 碱性>酸性 - 进一步证明含有甾体皂苷
有机酸 pH试纸 pH值为 5~6 - 可能含有有机酸
溴甲酚绿试验 有蓝色出现 +
初步确定了其可能含有的化学成分,为进一步进行该植物化
学成分及活性成分的提取分离奠定了基础,也为其生药学鉴
定提供了依据。
参 考 文 献
[1] Young KK,Young SK,Sang UC,et al. Isolation of flavonol rham-
nosides from Loranthus tanakaeand cytotoxic effect of them on hu-
man tumor cell lines. Arch Pharm Res,2004,27(1):44-47.
[2] 漆小梅,郑庆红,杨官娥,等.北桑寄生化学成分系统预实验.中
国药物与临床,2011,11(10):1113-1115.
[3] 杨倩. 淡竹叶中总黄酮物质的提取工艺考察. 山西医药杂志,
2010,39(12):1128-1129.
(收稿日期:2012-02-09)
表 2 北桑寄生乙醇提取物成分检识
检测项目 检测方法 结果 反应类型 结论
酚类和鞣质 三氯化铁-铁氰化钾试验 溶液呈蓝绿色 + 有
氯化钠-明胶试验 有白色沉淀产生 +
生物碱 硅钨酸试验 无沉淀产生 - 无
碘化铋钾试验 无沉淀产生 -
鞣酸试验 无沉淀产生 -
黄酮类 盐酸-镁粉试验 显红紫色 + 有
蒽醌类 氢氧化钾试验 有红色斑点 + 有
碱性试验 呈现相应的颜色变化 +
香豆素 开环闭环试验 未出现相应的变化 - 无
强心苷 Rosenheim 反应 显蓝绿色 + 有
三氯化铁-冰乙酸试验 出现相应颜色变化 +
Baljet 反应 橙色 +
甾体 乙酸酐-浓硫酸试验 最后呈污绿色 + 有
Rosenheim 反应 蓝绿色 +
Salkowksi 反应 分层并有绿色荧光 +
表 3 北桑寄生石油醚提物成分检识
检测项目 检测方法 结果 反应类型 结论
挥发油 滤纸油斑加
热法
加热前有油斑,
后无油斑
+ 有
油脂 滤纸油斑加
热法
加热前有油斑,
后无油斑
- 无
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