免费文献传递   相关文献

千日红多糖的提取及含量测定



全 文 :中国执业药师·
多糖是自然界中含量最丰富的生物聚合物 ,
几乎存在于所有的生物中,具有能量储存、结构支
持、防御功能和抗原决定性等多方面的生物功能 [1],
有些多糖或其衍生物还有多种药理活性 ,如从宁
夏枸杞子 (Lycium barborum L.) 中提取得到的多
糖具有抗氧化、抗肿瘤、防衰老及增强免疫力等方
面的作用 [2];从浒苔(Enteromorpha prolifea)中提取
的浒苔多糖,具有降血脂和抗衰老功能 [3];从担子
菌纲多孔菌科灵芝属灵芝(Ganoderma lucidum)中
提取的灵芝多糖是一种良好的抗氧化剂和免疫增
强剂 [4];而猴头菌丝多糖和子实体多糖、黑木耳多
糖和银耳多糖能使小鼠脑和肝脏中 SOD 活力增
加 [5-6],所以近年来多糖成为天然药物研究的热
点。千日红(Gomphrena globosa L.)又名千年红、百
日红、火球花、红火球,为苋科千日红属一年生草
本花卉 [7],该植物性味甘平,具有清肝,散结,止咳
千日红多糖的提取及含量测定
李金花 1 农石生 2 卢秋杰 1 李津 2 黄锁义 2
(1 百色市妇幼保健院检验科,广西 百色 533000;2 右江民族医学院)
【摘要】 目的:测定千日红多糖的含量。方法:采用水提醇析的方法提取千日红中多糖,采用硫酸-苯酚法进行多糖含
量的测定。结果:多糖在 484 nm有最大吸收峰,求得其回归方程为 A = 0.126 9C - 2.076 27 × 10-3,相关系数 r =
0.999 5;平均回收率为 99.29%,RSD = 1.739%(n = 5)。千日红中多糖含量为 1.819%(g/L)。结论:该方法简便、快速、
准确,灵敏度高。
【关键词】 千日红;多糖;提取;含量测定;分光光度法
doi:10.3969/j.issn.1672-5433.2015.04.006
Extraction and Content Determination of Polysaccharides in Gomphrena globosa
Li Jinhua1,Nong Shisheng2,Lu Qiujie1,Li Jin2,Huang Suoyi2 (1 Clinical Laboratory of Maternal and Child Health
Hospital of Baise City,Guangxi Baise 533000,China;2 Youjiang Medical University for Nationalities)
ABSTRACT Objective:To determine the content of polysaccharides in Gomphrena globosa. Methods:Polysaccharides
were extracted from Gomphrena globosa with hotwater-ethanol method. The content of polysaccharides was determined by
phenol-sulfuric acid method. Results:The polysaccharides have the maximum absorption peak at 484 nm, the regression
equation was A = 0.126 9C - 2.076 27 × 10-3 with correlation coefficient r = 0.999 5, and the average recovery was
99.29%,RSD = 1.739% (n = 5). The content of polysaccharides in Gomphrena globosa was 1.819%(g/L). Conclusion:
The results showed that the method is convenient,rapid and accurate with a high sensitivity.
KEY WORDS Gomphrena globosa;Polysaccharide;Extraction;Content Determination;Spectrophotometry
基金项目:国家中医药管理局“十二五”中医药重点学科中药化学学科建设项目(国中医药人教发[2012]32号);广西
重点学科药物化学学科建设项目(桂教科研[2013]16号)
作者简介:李金花,女,检验技师。研究方向:中草药有效成分提取。E-mail:jinhuaworld@163.com
黄锁义,男,教授,硕士生导师。研究方向:天然产物有效成分提取及活性研究、食品卫生研究。通讯作者 E-mail:
huangsuoyi@163.com
论著
24
China Licensed Pharmacist Apr. 2015,Vol. 12 No.4
合理用药 呵护公众健康
吸光度(A) 浓度(C,μg/mL)
0.129 1.033 1
0.133 1.064 7
0.130 1.041 0
0.128 1.025 2
0.133 1.064 7
表 2 千日红多糖溶液的吸光度
表 1 紫外可见分光光度计测定葡萄糖对照液吸光度
吸光度(A) 浓度(C,μg/mL)
0.000 0.0
0.126 1.0
0.249 2.0
0.509 4.0
0.740 6.0
0.901 7.0
平喘,降低血清、肝脏中的脂肪含量,抗变异及抗
肿瘤 ,防止体内过氧化作用等功效 [8]。 主治百日
咳,哮喘,眼目昏花,小便不利,肺结核咳血,慢性
支气管炎,痢疾腹痛,小儿发热抽搐 [8]。 关于千日
红多糖成分的提取及含量测定的研究尚未见报
导。本研究采用水溶醇析法提取了千日红多糖,并
采用硫酸-苯酚法 [9]对其多糖含量进行了较详细
的研究,为天然药物的开发应用提供了理论依据。
1 实验材料与试剂
1.1 原料
千日红花序干品(采自广西百色市右江区)。
1.2 试剂
无水乙醇,丙酮,乙醚,苯酚,浓硫酸等均为国
产分析纯,双蒸馏水。
1.3 仪器设备
722 型光栅分光光度计(上海精密仪器有限公
司 );TG3288 电子天平 (上海天平仪器厂 );SHB-
Ⅲ循环水式多用真空泵(郑州长城科工贸有限公
司 );HHsyzl-Ni6-C 电热恒温水浴锅 (北京长源实
验设备厂)。
2 实验方法
2.1 千日红多糖的提取
称取粉碎的千日红粉末 3 g, 均匀分成 3 份,
分别放入 50 mL 烧杯中 ,加水至 50 mL 处 ,将其
置于电热恒温水浴锅中,温度控制在 65 ℃左右,
3 小时后,用循环水式多用真空泵进行抽滤,将滤
液放入另外的 500 mL 大烧杯中 ;用同样的方法
重复提取 3 次;合并 3 次的滤液,用电热恒温水浴
锅加热浓缩至 3 ~ 5 mL,冷却至室温后 ,加入
25 mL 乙醇,在暗处静置 24 小时。 用砂布漏斗抽
滤,滤饼依次用乙醇和乙醚洗 2 次,得灰色粉末状
固体 0.214 4 g。
2.2 标准曲线的绘制 [9]
精密量取葡萄糖对照品标准溶液 5,10,20,
30,35 mL,分别置 50 mL 量瓶中 ,用水稀释至刻
度,得到 10.0,20.0,40.0,60.0,70.0 μg/mL 的 5 个
不同浓度的对照品溶液;再分别精密吸取 1.0 mL
置 50 mL 烧杯中 ,分别加入 1.5 mL 苯酚溶液 ,
7.5 mL 浓硫酸,混合均匀后放置 20 分钟,以相应
试剂为空白,照紫外-可见分光光度法,在 484 nm
的波长处测定吸光度,以吸光度为纵坐标,浓度为
横坐标,绘制标准曲线。 建立回归方程,结果见表
1。 根据表 1 得回归方程:
A = 0.126 9C - 2.076 27 × 10-3,
r = 0.999 5。
2.3 千日红多糖含量测定
精密称取千日红多糖 0.010 20 g 置 100 mL 量
瓶中,加 1 mol/L H2SO4 溶液 2 mL 加热水解 2 小
时,冷却至室温,稀释至刻度。对照品溶液的制备按
2.2 相同的方法制成 5 个不同浓度的对照品溶液。
精密量取 1.0 mL千日红样品液 5 份,分别置 50 mL
的烧杯中,按绘制标准曲线的方法,自“加 1.5 mL
苯酚溶液”起,依法测定吸光度,由回归方程计算千
日红中多糖的含量,其测定结果见表 2。 由回归方
程计算得出千日红多糖含量为 1.819%(g/L)。
2.4 回收率的测定
精密称取千日红多糖 5 mg,置 50 mL 量瓶
中,加入 1 mol/L H2SO4 溶液 2 mL 加热水解 2 小
时 ,冷却至室温,稀释至刻度,往不同浓度的对照
品溶液中,分别加入 0.1 mL 上述溶液进行含量测
定 ,结果测得回收率为 99.29% ,RSD = 1.739%
(n = 5)。
3 结果与讨论
将多糖水解成单糖时,水解不完全则测不准,
25
中国执业药师·
过度水解又会导致多糖的差向异构化 ,故需准确
确定水解时酸碱的浓度、温度和时间等条件。千日
红多糖含量为 1.819%(g/L),平均回收率为 99.29%,
RSD = 1.739%(n = 5)。 从实验结果可以看出,用
硫酸-苯酚法测定多糖含量,结果相对标准偏差较
小,实验结果重现性较好,所得数据准确。
参考文献:
[1] 时潇丽,姚春霞,林晓,等.多糖药物应用与研究进展[J].中国新
药杂志,2014,23(9):1057-1062.
[2] 郝红伟,刘敏,王唯霖,等.复方中草药提取物对小鼠机体抗氧化
能力的影响[J].天然产物研究与开发,2014,26(12):1934-1938.
[3] 李世杰,张丹雁,严娅娟,等.阳春砂多糖的分离纯化及体外抗氧
化作用研究[J].天然产物研究与开发,2014,26(12):2037-2040.
[4] 段丽红,李仲秋,吴正治,等.鸢尾苷抗氧化活性的研究[J].天然
产物研究与开发,2014,26(12):2046-2049.
[5] 郑孟君,曹建民,周海涛,等 .蒺藜配伍低聚原花青素对大鼠运
动性肾脏缺血再灌注的保护作用 [J].天然产物研究与开发 ,
2014,26(12):2071-2075.
[6] 文彬 ,陈然 ,彭佩纯 ,等 . 天然牛磺酸对肝硬化大鼠 MMP-9、
Integrin-β1 表达的调控 [J].天然产物研究与开发 ,2014,26
(12):1939-1943.
[7] 李忠华 .盆栽千日红节日开花繁殖栽培和花期控制技术 [J].现
代园艺,2010,(12):19-20.
[8] 董昕瑜,周淑荣,包秀芳,等.千日红栽培与应用[J].特种经济动
植物,2013,16(11):34-35.
[9] 李永,葛兆宏,段琼辉,等.黄蜀葵中活性成分含量测定[J].亚太
传统医药,2014,10(22):16-18.
(收稿日期 :2014-11-20)
美国 FDA 批准治疗银屑病药物 Secuk-
inumab 上市
美国 FDA 于 2015 年 1 月 21 日批准诺华
(Novartis)公司的 Secukinumab(商品名:Cosentyx)
注射液上市,用于需进行全身或光线治疗的中至
重度斑块状银屑病成年患者。
Secukinumab 为人免疫球蛋白 1(IgG1)单克隆
抗体,可选择性与白细胞介素(IL)-17A 结合并抑制
IL-17A 与其受体发生相互作用。 IL-17A 为自然产
生的细胞因子,参与正常炎症反应和免疫反应。 Se-
cukinumab可抑制促炎细胞因子和趋化因子的释放。
Secukinumab 用于银屑病的安全性和有效性
通过 4 项多中心、随机、双盲、安慰剂对照试验证
明。 4 项试验的终末指标皆为 12 周时达银屑病皮
损面积和严重程度指数(PASI)75 的患者比例,以
及经修订的研究者整体评估 5 分量表评分为 0
(完全清除)或 1(几乎完全清除 )分的患者比例 。
其他评估结果包括达 PASI 90 患者比例、52 周时
疗效维持患者比例、12 周时瘙痒、疼痛、脱屑改善。
试验结果显示,Secukinumab 用于银屑病安全有效。
Secukinumab 最常见的不良反应为鼻咽炎、腹
泻、上呼吸道感染。
(来源:http://www.fda.gov)
美国 FDA批准抗菌药物 Finafloxacin上市
美国 FDA 于 2014 年 12 月 17 日批准爱尔康
(Alcon)公司的 Finafloxacin(参考译名:非那沙星,
商品名:Xtoro)混悬滴耳液上市,用于 1 岁及以上
患者治疗铜绿假单胞菌及金黄色葡萄球菌敏感菌
所致急性外耳炎。
Finafloxacin 为氟喹诺酮类抗菌药物 ,对铜绿
假单胞菌及金黄色葡萄球菌有抗菌活性。
Finafloxacin 的有效性通过 2 项随机、多中心、
媒介对照试验评估。 Finafloxacin 1 次 4 滴,1 日 2
次,用药 7 日在临床和微生物学结果以及耳痛消
失时间上疗效均优于媒介对照物 :临床治愈患者
比例 Finafloxacin 组为 71%,媒介对照组为 50%;
耳痛消失时间 Finafloxacin 组为 3.5 日 ,媒介对照
组为 5.3 日 ;在临床治愈的病原阳性患者中 ,Fi-
nafloxacin 组对铜绿假单胞菌及金黄色葡萄球菌
的清除率为 89%,媒介对照组对铜绿假单胞菌的清
除率为 20%,对金黄色葡萄球菌的清除率为 33%。
Finafloxacin 最常见的不良反应为耳部瘙痒及
恶心。
(来源:http://www.fda.gov)
◆医药快讯◆
论著
26