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苗药土人参多糖的含量测定



全 文 :作者简介:胡静静 (1984-)女 , 在读硕士研究生 , 从事中药化学及中药新药的研究。
 *通讯作者:张俊巍 (1951-)男 , 教授 , 硕士生导师 , 从事中药化学及中药新药的研究。
苗药土人参多糖的含量测定
胡静静 张俊巍*
贵州省贵阳中医学院 , 贵州 贵阳  550002
【摘 要】:目的:测定土人参中多糖的含量 , 并建立土人参多糖的含量测定方法。方法:采用紫外分光光度法 , 苯酚 -浓硫酸比色法
于波长 486nm处测定吸光度。结果土人参多糖含量为 9.30% (n=3), 平均加样回收率为 100.23%, RSD=2.19%。结论:苯酚 -浓硫酸
比色法测定土人参中多糖含量 , 方法简便 、准确 、 稳定性好。
【关键词】:土人参;多糖;紫外分光光度法;苯酚 -浓硫酸比色法
【中图分类号】R284.1    【文献标识码】A     【文章编号】 1007-8517 (2009) 19-0140-02
Abstract:[ Objective] TosetupTalinumpaniculatummethodforthedeterminationofpolysaccharides.[ Methods] UVspectropho-
tometry, phenol-sulfuricacidcolorimetricdeterminationofabsorbanceat486nmDepartment.[ Results] Thesoilcontentofginseng
polysaccharide9.30% (n=3), averagerecoverywas100.23%, RSD=2.19%.[ Conclusion] phenol-sulfuricacidwasde-
tectedinsoilginsengpolysaccharidecontent, methodissimple, accurate, andbetterstability.
Keywords:soilginseng, polysaccharides, ultravioletspectrophotometry, phenol-sulfuricacidcolorimetricmethod
  土人参为马齿苋科植物栌兰 Talinum paniculatum
Gaertn.的根 , 生长于田间 、 路边 、 墙角石旁 、 山坡沟边等
阴湿处 , 分布于四川 、 贵州 、 云南 、 江苏 、 安徽 、 浙江 、
福建等地。 为贵州苗族习用药材 [ 1] , 味甘 、 淡 、 性平 , 有
补中益气 , 润肺生津之功效 , 可用于治疗气虚劳倦 、 食少 、
泄泻 、 肺痨咳血 、 眩晕 、 潮热 、 盗汗 、 月经不调 , 产妇乳
汁不足等症 [ 2, 3] 。
近年来 , 对多糖的深入研究表明 , 多糖具有多种生物
活性 [ 4] , 多糖具有免疫调节 、 抗肿瘤 、 降糖 、 保肝 、 抗感
染 、 抗消化道溃疡 、 抗衰老 、 降血脂 、 抗凝血等作用 [ 5] 。
植物多糖的药理作用为:免疫调节 、 抗病毒 、 延缓衰老 ,
抗肿瘤 , 抗辐射等作用 [ 6] 。
测定可溶性糖的含量可采用蒽酮比色法 , 二硝基水杨
酸法 , 索姆基 (Somogri)法 , 苯酚 -浓硫酸法等。苯酚 -
浓硫酸法操作简便 , 重现性好 , 不要求特殊条件 , 几乎用
于任何糖类及其衍生物的测定。
本实验以土人参多糖为指标成分 , 采用分光光度法 ,
苯酚 -浓硫酸法测定土人参的多糖含量。
1 仪器 、 试剂 、 药材
1.1 仪器
岛津 UV-2501PC紫外分光光度计 (司 .分内号:
03040426, 设 备 编 号: 20010529, 单 位 编 号: 0207);
XS205电子天平 (十万分之一)(瑞士梅特仪器仪表有限公
司)
1.2 试剂
浓硫酸 (分析纯), 苯酚 (分析纯 重蒸), 蒸馏水 , 葡
萄糖 (分析纯)
1.3 药材
土人参药材来源于贵州开阳 , 经贵阳中医学院生药研
究室刘芃老师鉴定为马齿苋科植物栌兰 Talinumpaniculatum
Gaertn.的干燥根。
2 方法与结果
2.1 对照品溶液的制备
精密称取经 105℃干燥至恒重的无水葡萄糖 60mg置
100mL容量瓶中 , 加蒸馏水溶解并稀释至刻度 , 摇匀 , 即
得 (每 1mL含无水葡萄糖 0.6mg)
2.2 标准曲线的制备
精密称取对照品溶液 0.5mL, 1.0mL, 1.5mL, 2.0mL,
2.5mL, 分别置 50mL量瓶中 , 各加蒸馏水至刻度 , 摇匀 ,
分别精密量取上述溶液 2mL置具塞试管中 , 各加 5%苯酚
溶液 1mL, 混匀 , 迅速加入浓硫酸 7.0mL, 摇匀 , 置 40℃
水浴中保温 30min, 取出后置冰水浴中放置 5min, 取出 ,
以相应试剂为空白 , 用紫外 -可见分光光度法 , 在 486nm
的波长处测定吸光度 , 以吸光度为纵坐标 , 浓度为横坐标 ,
绘制标准曲线 , 得回归方程:A=13.45C+0.1247, R=
0.9997 (n=5), 结果表明葡萄糖对照品在 0.006 ~
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   中国民族民间医药
Chinesejournalofethnomedicineandethnopharmacy           
   民 族 医 药
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0.03mg/mL呈良好的线性关系。
2.3 供试品溶液的制备
取土人参粗粉约 0.5g, 精密称定 , 置锥形瓶中 , 精密
加水 50mL, 称定重量 , 静置 1h, 加热回流提取 1h, 放冷 ,
再称定重量 , 用水补足减失重量 , 摇匀 , 滤过 , 精密量取
续滤液 3mL, 置 100mL容量瓶中 , 加水至刻度 , 摇匀 , 即
得土人参供试品溶液 。
2.4 含量测定
精密量取供试液 2mL, 置具塞试管中 , 照标准曲线的
制备项下的方法 , 自 “各加 5%苯酚溶液 1mL” 起 , 依法
测定吸光度 , 从标准曲线上读出供试溶液中土人参多糖的
含量 (mg/mL), 计算 , 即得。
表 1 多糖含量测定结果 (n=3)
编号 称样量 /g 吸光度 A 含量 /% 平均含量 /%
1 0.518 0.464 9.21
2 0.507 0.459 9.28 9.30
3 0.512 0.467 9.42
2.5 回收率实验
精称取密同一土人参药粉样品 6份 , 每份约 0.25g, 分
别加入一定量的葡萄糖对照品溶液 , 按供试品溶液的制备
方法制备供试溶液。按标准曲线制作项下的相同测试条件
进行测定。结果见表 2
表 2 加样回收率结果 (n=6)
编号 样品含量 /mg
测得量 /
mg
回收率 /
%
平均回
收率 /% RSD/%
1 20.7 41.11 99.54
2 20.6 40.85 98.79
3 20.4 40.49 97.98 100.23 2.19
4 20.5 41.54 102.61
5 20.6 40.92 99.13
6 20.6 41.78 103.32
  注:对照品加入量均为 20.5mg
2.6 重复性实验
精密称取同一土人参供试品 3份 , 每份约 0.5g, 按供
试品溶液的制备方法制备供试品溶液 , 按含量测定项下方
法操作 , 测多糖含量 , 结果:RSD=1.15%, 表明重复
性好。
2.7 稳定性实验
精密吸取供试液 2mL, 按含量测定项下方法操作 , 在
120min内每隔 30min测定一次吸光度 , 共测试 5次 , 结果:
RSD=2.11% (n=5), 表明稳定性好。
2.8 精密度实验
取供试液 5份 , 分别按含量测定项下方法操作 , RSD=
2.71% (n=5)。结果表明 , 仪器精密度符合要求。
3 小结与讨论
多糖是多种中草药中高效 、 低毒的有效成分之一。某
些多糖还具有抗癌 、 抗炎 、 抗病毒 、 提高免疫力等作用。
本实验应用紫外分光光度法 , 经苯酚 -浓硫酸显色 ,
多糖在浓硫酸的作用下 , 水解成单糖 , 并迅速脱水生成糖
醛衍生物 , 然后和苯酚缩合成橙黄色化合物 , 且颜色稳定 ,
该化合物颜色深浅与糖的浓度成正比。
土人参多糖含量为 9.30%。本实验方法平均回收率为
100.23%, RSD=2.19%, 结果表明 , 苯酚 -浓硫酸比色法
测定土人参中多糖含量 , 简便易行 、 快速 、 准确 , 且供试
液在 120min内稳定 , 重现性良好 , 可作为土人参多糖含量
测定的方法。
参考文献
[ 1] 汪毅.中国苗族药物彩色图集 [ M] .贵阳:贵州科学技术出版
社 , 2002.
[ 2] EditorialBoardofChinaHerbal, StateAdministrationofTraditionalChinese
Medicine, China.ChinaHerbal(中华本草)[ M] .Shanghai::ShanghaiScien-
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[ 3] EditorialOficeofNationalChineseHerbalMedicineColection.Colectionof
NationalChineseHerbalMedicine(全国中草药汇编)[ M] .Beijing:People′s
MedicalPublishingHouse, 1975.
[ 4] DingBJ, JinLQ, NǜJX1.Theprogressonbiologicalactivitiesofpolysac-
charides[ J] .ChinPharmJ(中国药学杂志), 2004, 39(8):561-564.
[ 5] 季宇彬.中药多糖的化学与药理 [ M] .北京.人民卫生出版社.2005.
[ 6] 王稀尧.多糖的药理作用研究 [ J] .本溪冶金高等专科学校学报.
2003, 5 (2):6.
(收稿日期:2009.9.08)
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