全 文 ：Guiding Journal of Traditional Chinese Medicine and Pharmacy
第15卷第2期
Vol.15 No. 2
2009年 2月
February.2009
假杜鹃中总黄酮的含量测定
刘冬珠，朱全红，张宏伟
（南方医科大学中医药学院，广东 广州 510515）
[摘要] 目的：建立假杜鹃中总黄酮含量的测定方法，并测定其含量。方法：以硝酸铝、亚硝酸钠及氢氧化钠为显色剂，利用
紫外分光光度计测定假杜鹃中总黄酮的含量。结果：最佳检测波长为510 nm，芦丁质量浓度在0.0151-0.30897 mg/mL范围内，吸
收度与质量浓度呈良好的线性关系，回归方程为y=11.471x+0.005(r=0.9998)，测定的平均回收率为RSD%=0.88%，精密度试验
RSD%=0.0247%，重复性试验RSD%=2.79%，稳定性实验RSD%=0.13%。结论：利用紫外分光光度法测定假杜鹃中总黄酮的含量，
简便快速且有良好的稳定性、准确性和重现性，可用于药材的质量控制。
[关键词] 假杜鹃；总黄酮
[中图分类号] R927.2 [文献标识码] A [文章编号] 1672-951X（2009）02-0077-02
Determination of Total Flavones in Barleria cristata L．
LIU Dong-zhu，ZHU Quan-hong，ZHANG Hong-wei
College of Traditional Chinese Medicine，Southern Medical University，Guangzhou，China 510515
[Abstract] Objective：To establish a method on determination of total flavones in Barleria cristata L.and determination of its
content.Methods:With NaNO2-A1(NO3)3-NaOH as chromogenic agent,total flavanone content of Barleria cristata L ．is determined by
ultraviolet spectrophotometry.Results: The optimal detective wavelength was 510 nm,and absorbability and mass concent ration
was satisfactory linear relations hip at the mass concentration of rutin was in 0.0151-0.30897 mg/mL.The regression equation
was Y=11.471X+0.005 (r=0.9998)，and the average recover ate was and RSD%= 0.88%, Accuracy experiment RSD%=0.0247%,
Repeatability test RSD%=2.79% , Stability experiment RSD% =0.13% . Conclusion: The use of UV spectrophotometry can be
measured the content of total flavones in Barleria cristata L．.The method is simple and fast with good stability, accuracy and
repeatability, can be used for quality control of herbal medicines.
[Key Words] Barleria cristata L.; Total flavones
假杜鹃Barlerisa crisata L.又名紫锭、蓝花草、吐红草、地
狗胆、青藤、刺牛膝、白牛膝、假红蓝、洋杜鹃等，为爵床科假
杜鹃属植物。民间药用多用其全株。其味辛、苦，性凉。具清肺
化痰，驱风利湿，解毒消肿之功。主治肺热咳嗽，百日咳，风湿
疼痛，风疹身痒，黄水疮，小便淋痛，跌打瘀肿，痈肿疮疖[1]。根
据目前的文献[2]，黄酮类为假杜鹃属的主要成分之一，而黄酮
类化合物是一类生物活性较强的化合物，在医疗、保健食品
中应用越来越广泛，为更好地开发利用假杜鹃，笔者对假杜
鹃中的总黄酮进行了定量分析研究。
1 仪器、试剂和材料
1.1 仪器 HP8453型紫外分光光度仪，美国惠普（HEWETT
PACKARD）公司产品；JA2003千分之一电子天平，为上海良
平仪器表有限公司产品；2K5200LH型超声仪 (200w、59Hz)则
购自上海科导超声仪器有限公司。
1.2 试剂 芦丁对照品（批号：100080-200306）购自中国药
品生物制品检定所。乙醇、NaNO2、Al(NO3)3 、NaOH等均为分析
纯。
1.3 材料 样品采自广州市白云区京溪街犀牛角村后山，经
南方医科大学中医药学院药植鉴定教研室马骥教授鉴定为
爵床科假杜鹃属假杜鹃Barlerisa crisata L。地上部分切成10-
50 cm段落，于45 ℃烘干，粉碎，备用。
2 方法与结果
2.1 对照品溶液的制备 准确称取于120 ℃下减压干燥至恒
重的芦丁对照品7.55 mg，置于25 mL量瓶中，加入30%乙醇，
超声使之溶解，冷却至室温，并用30%乙醇稀释至刻度，摇匀，
得浓度为0.3020 mg/mL的芦丁对照品溶液，冷藏，备用。
2.2 供试品溶液的制备 取假杜鹃药材粉末约8 g，置于索氏
提取器中，加入适量乙醚回流提取至无色，放冷，倾出乙醚，
挥干滤渣，精确称取样品1.014 g，置于50 mL烧杯中加入80％
乙醇20 mL在40kHz超声提取35 min，滤纸过滤，用80％乙醇冲
洗滤纸至下滴液无色，滤液定容至25 mL量瓶中。
2.3 测定波长的选择 精确量取对照品溶液和供试品溶液各
0.5 mL，分别置于10 mL量瓶中，加5%NaNO2溶液0.3 mL摇匀，
放置6 min加10%Al (NO3)3溶液0.3 mL摇匀，放置6 min加4%
NaOH溶液4 mL，再用30%乙醇定容并摇匀，放置10 min置比
色皿中在波长400-600 nm之间测定吸收光谱内扫描，结果2
77
DOI:10.13862/j.cnki.cn43-1446/r.2009.02.032
第15卷第2期
Vol.15 No. 2
2009年 2月
February.2009Guiding Journal of Traditional Chinese Medicine and Pharmacy
种溶液均在510 nm处有最大吸收，其他成分对测定无干扰。
2.4 标准曲线的绘制 准确吸取标准液0.5，1.0，1.5，2.0，2.5，
3.0 mL分别置于10 mL容量瓶中，加5%NaNO2溶液0.3 mL摇
匀，放置6 min加10%Al(NO3)3溶液0.3 mL摇匀，放置6 min加
4%NaOH溶液4 mL,再用30%乙醇定容并摇匀，放置20 min，进
样，于波长510 nm处测定吸光度(用不含芦丁的空白管对照调
零)，得回归方程:y=11.471x+0.005(r=0.9998)，结果表明，测定
芦丁质量浓度在0.0151-0.30897 mg/mL范围内呈良好的线性
关系[3-4]。
2.5 精确度试验 取对照品溶液1 mL，方法如“2.4”，于510
nm波长处测定吸收值5次。
表1 精确度试验结果
次序 吸光度值 平均吸光度值 RSD（%）
1 0.33978
2 0.33978
3 0.33989 0.33977 0.0247
4 0.33966
5 0.33973
注：结果显示平均吸光度为0.33977，RSD%为0.0247％(n=
6)，表明该方法精确度良好。
2.6 稳定性试验 取供试品溶液0.5 mL，方法如“2.4”，于510
nm波长处测定吸光度。结果表明，总黄酮与铝离子形成的红
色络合物在1 h内稳定，最佳测定时间为显色后20-40 min，
RSD%为0.13％(n=6)。
表2 稳定性试验结果
时间（min） 吸光度值 RSD（%）
20 0.52131
25 0.51961
30 0.52067 0.13
35 0.52025
40 0.51972
2.7 重复性试验 精确称取药材样品1.0 g，共5份，平行试
验，于510 nm波长处测定吸光度，计算结果得RSD%为2.79％
(n=6)。
表3 重复性试验结果
样品 吸光度值 RSD（%）
1 0.52067
2 0.52480
3 0.51063 2.79
4 0.50479
5 0.48884
2.8 加样回收率试验 精确称取芦丁标准品7.55 mg，用30%
乙醇溶解，定容至25 mL量瓶中。取已知总黄酮含量的5个样
品各1 g，置于50 mL烧杯中加入80％乙醇20mL在40kHz超声
提取35 min。滤纸滤过，用80％乙醇冲洗滤纸至下滴液无色，
滤液定容至25 mL量瓶中，取样品各0.5 mL置于10 mL量瓶
中，再分别加入上述芦丁贮备液1 mL，方法如“2.4”，在510
nm波长处测定吸光度，按回归方程进行计算处理，平均加样
回收率为97.23%，RSD%为0.88%。
表4 加样回收率试验结果
取样 样品含量 加入量 测得量 回收率 平均回收 RSD
（g） （mg） （mg） （mg） （％） 率(％) (％)
1.014 22.76 15.1 37.56 98.01
1.018 22.85 15.1 37.39 96.26
1.013 22.74 15.1 37.34 96.69 97.23 0.88
1.004 22.54 15.1 37.20 97.09
1.001 22.47 15.1 37.31 98.28
2.9 样品的测定 精确称取研碎的样品0.5 g，置于50 mL烧
杯中，按照“2.2”项下方法制备样品供试液同法平行制备3份。
精确吸取供试品溶液0.5 mL，按照“2.4”项下方法进行操作，
在波长为510 nm处测定供试液的吸光度，按回归方程进行计
算处理，平均含量为22.45 mg/g。
3 讨 论
假杜鹃的药用记载最早见于《全国中草药汇编》，“味甘、
淡，性凉。清肺化痰，止血，截疟”[5]。其后《广东药用植物手
册》、《广西药用植物名录》及《广西民族药简编》等均有记载，
表明假杜鹃作为一种草药在民间应用具有一定的历史。为确
保临床疗效，本文对其所含的总黄酮进行了定量分析，并进
行了稳定性、精密度、回收率试验，证明本法测定结果稳定可
靠且测得的值为22.45 mg/g，显示假杜鹃的总黄酮含量比较
高。因此，本试验设定的技术参数和方法适用于假杜鹃总黄
酮的定量分析，可用于药材的质量控制。
假杜鹃在民间应用的记载多为全株，但由于假杜鹃是多
年生半灌木，地上分枝很多，就药材来说，其根所占比例甚
少；从保护环境和资源利用角度，留根有利于营养繁殖，因此
本试验采用地上部分。
参考文献
[1] 国家中医药管理局《中华本草》编委会.中华本草（第7册）
[M].上海：上海科学技术出版社，1999：454-455
[2] 姚振生.药用植物学[M].2版 .北京：中国中医药出版社，
2007：343
[3] 金泉，廉丽花，罗惠善.紫外分光光度法测定翻白草中总黄
酮的含量[J].延边大学学报，2007，30（4）：40
[4] 李瑶，齐晓丽，孟祥颖，等.竹叶中黄酮提取纯化工艺研究
[J].东北师大学报：自然科学版，2006，38(1)：91-94
[5]《全国中草药汇编》编写组.全国中草药汇编（下册）[C].北
京：人民卫生出版社，1978：835
（收稿日期：2008-11-13 编辑：蔡铁如）
78