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南川升麻化学成分的初步研究



全 文 :— 38 — 现代中药研究与实践2010年第24卷第5期Chin Med J Res Prac,2010 Sept.,Vol.24 No.5
南川升麻 Cimicifuga nanchuanensis Hsiao为升麻
属多年生草本植物 [1,2], 具有解热透疹、去瘀消肿、
升举阳气之功效,主治风热头痛、齿痛、咽喉痛、子
宫脱垂等症。调查表明,南川升麻分布区十分狭窄,
仅分布于重庆金佛山地区海拔 1 700 m 以上的北坡。
分布区内生境阴湿,土壤为山地黄壤。个体数量稀
少、结籽率低,种子自然萌发率、种子 -幼苗转化
率都很低 [3,4],目前对南川升麻的研究仅限于对南川
升麻生理生态学和生殖生态学等特性的研究,本文主
要是通过一系列中药化学成分预实验方法,对金佛山
地区特有植物南川升麻的主要化学成分从理化性质
的角度进行初步研究。
1 仪器及材料
植物粉碎机 (天津市泰斯特仪器有限公司
FW135型 ),药典标准筛 (浙江上虞市新光仪器厂 ),
AUW120电子天平 (日本岛津 ),101A-3型电热鼓风
南川升麻化学成分的初步研究
罗 川,邓才富﹡,刘开阳,章文伟,谭秋生
(重庆市药物种植研究所,重庆 南川 408435)
摘要:目的 对南川升麻的化学成分进行初步研究。方法 采用中药化学成分预试验研究方法。结
果 通过预试验初步判定南川升麻的根茎中含有生物碱、有机酸、氨基酸、黄酮、皂苷、酚类、鞣质、香
豆素与萜类内酯、强心苷、糖类、苷类或多糖类、甾萜类等成分等化学成分,结论 为南川升麻下一步的
深入研究打下基础。
关键词:南川升麻 ; 化学成分 ; 预试验
中图分类号:R284.1 文献标识码:A 文章编号:1673-6427(2010)05-0038-03
Prelliminary Research of Chemical Components for Cimicifuga nanchuanensis Hsiao
LUO Cuan, DENG Cai-fu, LIU Kai-yang, ZHANG Wen-wei, TAN Qiu-shen
(Chongqing Institute of Medicinal Plants Cultivation, Nanchuan 408435;China)
Abstract: Objective To study the chemical components of Cimicifuga nanchuanensis Hsiao by
preliminary test.Methods Research was carried by systemic preliminary test of pharmaceutical chemistry from
Cimicifuga nanchuanensis Hsiao.Results The priliminary test indicated that C.nanchuanensis may contain
chemical constituents such as alkaloid, organic acid, amino acid, fl avonoids, saponin, phenols, tannin, coumarin,
terpene lactone, cardiac glycoside, carbohydrate, glucosides or polysaccharides and steroids.Conclusion The
results of priliminary test provide evidence for further study of the chemical Components and biological activities
of C.nanchuanensis.
Key words: Cimicifuga nanchuanensis Hsiao;chemical components;prilliminary test
干燥箱 (上海市实验仪器总厂 )。
药材采自重庆金佛山地区,经重庆市药物种植
研究所易思荣副研究员鉴定为毛茛科升麻属草本植
物南川升麻 Cimicifuga nanchuanensis Hsiao。
2 化学成分预试验方法及结果
2.1 乙醇提取预试法
取南川升麻粗粉 10 g左右,加 5~10倍 95%乙
醇及 60%乙醇在水浴上分别回流 2次,1 h/次,过滤,
合并滤液;滤液取 2~5 mL做 A项试验;其余浓缩成
浸膏,浸膏分为两部分,一部分加少量 2%盐酸溶解
过滤,分出酸液做 B项试验;附在滤纸上的残渣以
少量乙醇溶解,乙醇液做 C项试验;另外一部分浸
膏以少量的乙酸乙酯溶解,溶液置分液漏斗中加适量
5%氢氧化钠振摇,收集乙酸乙酯部分,用蒸馏水洗
至碱性,取乙酸乙酯液 5~10 mL,蒸干,以乙醇溶解,
乙醇液做 D项试验。
2.1.1 A项试验
2.1.1.1 酚类试验 取醇提液 A适量滴于滤纸上,再
滴加 1%三氯化铁试液,观察,为阳性反应。
2.1.1.2 鞣质试验 取醇提液 A适量滴于滤纸上,再
滴加 1%三氯化铁试液,观察,为阳性反应。
收稿日期:2009-08-05
基金项目:重庆市科委基本科研业务费资助。
作者简介:罗 川(1982-),实习研究员,主要从事中药化学质量研究。
*通讯作者:邓才富, E-mail:dcf0509@126.com ; Tel:023-71480782
DOI:10.13728/j.1673-6427.2010.05.022
— 39 —现代中药研究与实践2010年第24卷第5期Chin Med J Res Prac,2010 Sept.,Vol.24 No.5
2.1.1.3 有机酸试验 取醇提液 A适量,点于硅
胶 -CMC-Na薄层板上,以 96%乙醇 -水 -25%氨水
(78:9.5:12.5)为展开剂,展开,取出,晾干后喷
以溴甲酚绿试液,斑点显色明显,为阳性反应。
2.1.2 B项试验
2.1.2.1 生物碱试验 分别取酸水液 B适量置于四支
试管中,第一支试管中滴加碘化铋钾试剂,出现橘红
色无定形沉淀,为阳性反应;第二支试管中滴加磷
钼酸试剂,出现黄褐色无定形沉淀,加氨水后变成
深蓝色,为阳性反应;第三支试管中滴加鞣酸试剂,
出现土黄色沉淀,为阳性反应;第四支试管中滴加苦
味酸试剂,有黄色结晶析出,为阳性反应。
2.1.3 C项试验
2.1.3.1 黄酮试验 取乙醇液 C适量置试管中,加
少许镁粉振摇,再滴加几滴浓盐酸,水浴上加热 2
min,有明显颜色变化,为阳性反应。
取乙醇液 C适量滴于滤纸上,与 1%三氯化铝
乙醇液纸斑反应后,置于紫外灯下观察,有明显荧
光,为阳性反应。
2.1.3.2 蒽醌试验 分别取乙醇液C适量滴于三张
滤纸上,第一张滴加10%氢氧化钾溶液,无明显变
化,为阴性反应;第二张干燥后喷0.5%醋酸镁甲醇
溶液,并于90 ℃加热5 min,无明显变化,为阴性反
应;第三张用氨气熏,无明显变化,为阴性反应。
2.1.4 D项试验
2.1.4.1 香豆素与萜类内酯试验 取乙醇液 D适量置
试管中,滴加异羟肟酸铁试剂,变为红色,为阳性反
应。
取乙醇液 D适量置试管中,滴加 1%氢氧化钠
溶液,无明显变化,再滴加 2%盐酸后出现白色浑浊,
为阳性反应。
取乙醇液 D适量点于硅胶 G薄层板上,以氯仿 -
乙酸 -水(4:1:1)为展开剂,展开,取出,晾干
后置紫外灯下(254 nm)观察,斑点明显,为阳性
反应。
2.1.4.2 强心苷试验 取乙醇液 D适量置滤纸上,
滴加 Kedde试剂(3,5-二硝基苯甲酸试剂),无明显
变化,为阴性反应。取乙醇液 D适量置于滤纸上,
晾干后,喷 20%三氯化锑氯仿溶液,100 ℃加热 3~5
min,无明显变化,为阴性反应。
2.2 水提取预试法
取升麻药材粗粉 5 g左右,加 10倍量水,回流
提取 2次,每次 1 h,过滤,合并提取滤液;滤液做
E项试验。
2.1.1 E项试验
2.2.1.1 糖类试验 取水液适量置试管中,滴加菲林
氏试剂(碱性酒石酸铜试剂),有颜色变化,为阳性
反应。
2.2.1.2 有机酸试验 取水液适量,测其 pH值为 6,
显弱酸性。取水液适量,点于硅胶 -CMC-Na薄层板
上,以 96%乙醇 -水 -25%氨水(78:9.5:12.5)为
展开剂,展开,取出,晾干后喷以溴甲酚绿试液,斑
点显色明显,为阳性反应。
2.2.1.3 酚类试验 取水液适量滴于滤纸上,再滴加
1%三氯化铁试液,观察,为阳性反应。
2.2.1.4 鞣质试验 取水液适量滴于滤纸上,再滴加
1%三氯化铁试液,观察,为阳性反应。
2.2.1.5 氨基酸试验 取水液适量滴于滤纸上,再喷
以茚三酮试剂,于 110 ℃加热,观察,显紫色,为阳
性反应。
2.2.1.6 蛋白质试验 取水液适量置于试管中,滴加
双缩脲试剂,观察,为阳性反应。
2.2.1.7 苷类或多糖试验 取水液适量置试管中,加
6 mol/L盐酸酸化,加热煮沸数分钟,冷后观察,有
絮状沉淀,为阳性反应。
2.2.1.8 皂苷试验 取水液振摇后生成的气泡在 15
min内不消失,为阳性反应。
2.3 石油醚提取预试法
取南川升麻药材粗粉 1 g左右,加 10倍量石油
醚(60 ℃ ~90 ℃),放置 3 h,过滤,滤液置于蒸发
皿上挥干,残留物做 F试验。
2.3.1 F项试验
2.3.1.1 挥发油和油脂试验 石油醚液滴于滤液上,
观察无油斑,为阴性反应。
2.3.1.2 甾体或三萜类试验 残留物滴加醋酐 -浓硫
酸,观察,颜色变化与对比颜色变化相符,为阳性反
应。
3 结果
通过化学成分预试验,可以得出南川升麻中含
有生物碱、有机酸、氨基酸、黄酮、皂苷、酚类、鞣质、
香豆素与萜类内酯、强心苷、糖类、苷类或多糖类、
甾萜类等成分,其定量研究随着项目的深入将逐步进
行。
化学成分预试验中因样品有限及其他原因,造
成许多项目不太明显,故预试验一些项目所做的实验
有待于进一步探讨。 (下转第 37 页)
— 37 —现代中药研究与实践2010年第24卷第5期Chin Med J Res Prac,2010 Sept.,Vol.24 No.5
依赖性,黄芩苷3个剂量组与对照组比较均有显著性
差异(P<0.01,P<0.05)。
3.3 黄芩苷对小鼠腹腔巨噬细胞 IL-1释放的影
响 由表 3可见,体外培养的小鼠腹腔巨噬细胞在
LPS的刺激下,IL-1的分泌量显著增加(P<0.01);
黄芩苷能减少 LPS刺激的腹腔巨噬细胞 IL-1的释放
量,并呈剂量依赖性,其中黄芩苷 40 μg/mL和 20
μg/mL剂量组与对照组比较有显著性差异(P<0.01,
P<0.05)。
4 讨论
巨噬细胞是体内的重要免疫细胞之一,它能产
生各种免疫和炎症相关的因子,在体内的免疫调节
中起着非常重要的作用。IL-1是巨噬细胞分泌的主
要细胞因子,过量分泌,可刺激各种免疫及炎性细胞
产生 TNF-α、IL-6、IL-8及 IFN-γ等多种细胞因子,
从而介导肝脏的炎症反应的发生 [4]。TNF-α主要由激
活的单核巨噬细胞产生的一种内源性细胞因子,是一
种具有广泛而重要生物学作用的蛋白质,且可作为
免疫的第一介质,引起许多免疫有关的第二介质如
IL-1、IL-6、IL-8及蛋白酶等的出现 [5,6 ]。NO属于活
性氮自由基,体外实验表明,释放 NO对细胞产生毒
性作用 [7]。LPS诱导的腹腔巨噬细胞模型中,IL-1、
NO 及 TNF-α含量的高低反映了免疫应答的程度 [8]。
本研究结果显示黄芩苷对 LPS 诱导的小鼠腹腔巨噬
细胞产生 IL-1、NO及 TNF-α均有不同程度的抑制作
用,提示黄芩苷抑制小鼠腹腔巨噬细胞分泌 IL-1、
NO及 TNF-α等因子可能是其发挥抗炎免疫作用的机
制之一。
参考文献
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组别
空白组
脂多糖对照组
吲哚美辛+脂多糖组
黄芩苷+脂多糖组
表2 黄芩苷对小鼠腹腔巨噬细胞TNF-α释放的影响(x±s , n = 6)
Tab.2 Effect of Baicalin on TNF-α release by macrophages in mice
剂量(μg/mL)
20
100
40
20
10
OD值
0.78±0.01
0.54±0.01**
0.73±0.03##
0.76±0.02##
0.66±0.03#
0.62±0.02#
与空白组比较 *P<0.05,**P<0.01 ;与对照组比较 #P<0.05,##P<0.01
组别
空白组
脂多糖对照组
吲哚美辛+脂多糖组
黄芩苷+脂多糖组
表3 黄芩苷对小鼠腹腔巨噬细胞IL-1释放的影响(x±s , n = 6)
Tab.3 Effect of Baicalin on IL-1 release by macrophages in mice
剂量(μg/mL)
20
100
40
20
10
OD值
0.22±0.01
0.38±0.02**
0.24±0.02##
0.25±0.02##
0.30±0.01#
0.36±0.02
与空白组比较 *P<0.05,**P<0.01 ;与对照组比较 #P<0.05,##P<0.01
(上接第 39 页)
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