全 文 ：雪灵芝的抗缺氧作用
苏红卫 ,徐维光1 ,刘军祥 ,杨　艳 ,陈　润
(泸州医学院预防医学教研室 , 四川泸州　646000;　1 四川大学华西医学部营养与食品卫生教研室)
　　摘　要　目的:探讨雪灵芝的抗缺氧作用。方法:利用自建慢性常压缺氧动物模型 ,观察雪灵芝能否减轻肺血
管的结构重建和阻止由缺氧引起肺组织Ⅱ型上皮细胞氧化酶及酵解酶活性改变 , 从而探讨雪灵芝有无抗缺氧作
用。结果:实验结果显示在氧浓度为10%的环境中连续缺氧20 天 , 昆明种小鼠摄入含雪灵芝全草粉5g kg 和50g kg
(基础饲料)的饲料后 ,小于 100微米肺血管中MA 、PMA 的比例低于缺氧对照组 ,高于正常对照组;而NMA 的比例正
好相反。酶组织化学的结果显示雪灵芝能有效降低缺氧条件已升高的组织酶活性。结论:表明雪灵芝能有效预防
慢性缺氧性肺血管结构重建并能提高组织利用氧的能力和降低机体耗氧量 , 故雪灵芝具有抗缺氧作用。
关键词　雪灵芝;抗缺氧作用;肺血管的结构重建;酶组织化学
中图分类号　R285.6　　　　　文献标识码　A　　　　　文章编号　1000-2669(2002)05-0371-04
　　高山病和慢性阻塞性肺病是我国人群中的常见
病和多发病 ,严重威胁人民的身体健康。高山病和
慢性阻塞性肺病的发生发展都直接或间接与肺泡内
缺氧有关 ,缺氧又可导致肺动脉高压[ 1 ～ 3] 。经研究
证实一些益气 、活血类的植物具有抗缺氧和预防慢
性缺氧性肺动脉高压的作用 ,雪灵芝就是其中之一 。
雪灵芝又名草灵芝 ,为高原野生植物 ,学名卵瓣蚤缀
(Areneria Kensuensis Var Ovatipetala Tsui),属石竹科
蚤缀属 ,是多年生垫状草本植物 ,生长在海拔 4000
～ 5000米的高山草甸和石缝中 。广泛分布在青藏
高原各地 ,资源十分丰富 。雪灵芝是一种传统藏药 ,
以全草入药 ,性味甘寒 ,清热解毒 ,主治肺热咳嗽 ,高
血压等[ 4] 。雪灵芝全草的抗缺氧作用尚无研究报
道。本实验选用自建动物缺氧模型对四川产雪灵芝
的抗缺氧和阻抑慢性缺氧性小鼠肺血管结构重建的
作用进行了观察[ 5, 6] 。
1　材料和方法
1.1　实验动物及分组
选用初成年雄性昆明种小鼠 ,体重 20g ～ 28g ,按
体重随机分成五个组:正常对照组 ,缺氧对照组 ,低
剂量组 ,中剂量组 ,高剂量组;每组 10只 。
1.2　仪器设备
1)自行组装的常压缺氧设备
2)CY-2测氧仪(上海化光仪器仪表厂)
3)显微镜(OLYMPUS)等
1.3　受试物及给药剂量与给药方式
作者简介:苏红卫(1966-), 男 ,讲师 , 硕士。
本次实验选用四川阿坝产雪灵芝 ,经清洗凉干后研
磨成粉 ,系用该植物全草粉作为受试物 。经检测雪
灵芝全草粉的营养成分如下表。
表 1　100g雪灵芝全草粉的营养成分
蛋白质
(g)
脂质
(g)
糖
(g)
水分
(g)
灰分
(g)
总热量
(KCal)
11.76 2.08 20.84 8.17 23.56 147.9
　　受试物是雪灵芝全草粉 ,采用拌饲方法给药。
参见雪灵芝食品毒理结果 ,并考虑拌入受试物而不
影响饲料的营养成分 ,确定高剂量组的饲料配方为
95g 基础饲料加 5g 雪灵芝全草粉 ,混合均匀 ,受试物
在饲料中的浓度为 5%。中剂量组饲料的配方为取
10g 高剂量组饲料均匀混入 90g基础饲料 ,受试物在
饲料中的浓度为 0.5%。低剂量组的饲料配方为取
10g 中剂量组饲料均匀混入 90g基础饲料 ,受试动物
在饲料中的浓度为 0.05%。
1.4　实验方法
选用自制慢性缺氧动物模型进行实验 。正常对
照组在常压环境条件下喂养 ,其余各组放入缺氧舱
中喂养 。缺氧舱通入 1∶1氮和空气混合气 ,氧浓度
为 10%±1%。从缺氧开始 ,正常对照组和缺氧对
照组喂基础饲料 ,低 、中 、高剂量组喂相应剂量组饲
料 。5 天称重一次 ,连续缺氧 20 天后 ,处死所有动
物 ,取肺组织作病理和酶组织化学检查。
1.5　观察指标
1.5.1　小鼠一般情况
观察动物进缺氧舱前后活动 ,进食以及体重变
化情况等。
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Journal of Luzhou Medical College　Vol.25　No.5　2002
1.5.2　病理学指标
在10×10倍显微镜下观察 Victoria 蓝染的肺组
织病理切片 , 计数直径小于 100μm 的肌性血管
(MA);部分肌性血管(PMA);非肌性血管(NMA)数 ,
并计算三者的构成比 。
1.5.3　酶组织化学检测
按常规方法[ 7] 做肺组织琥珀酸脱氢酶(SDH),
辅酶 I 黄递酶(NADHD)和葡萄糖 6 磷酸脱氢酶
(G6PD)活性检测。在显微镜下观察 、记录各酶活性
(根据肺组织各酶作用于底物时着色深浅 ,用+、 、
、 表示酶活性强弱)。
1.6　资料处理
记数资料用 χ2 检验 ,等级资料用秩和检验进
行统计处理 。统计分析在微机上用华西医科大学统
计教研室编百科统计软件包(2.1版PEMS)完成 。
2　结　　果
2.1　一般情况
动物进缺氧舱后进食和活动减少(与对照组比
较)。实验期间 ,各组均有部分动物死亡(1 ～ 3只),
经假设检验各组无显著差异 。
2.2　病理学指标
小于100μm肺血管中肌性血管(MA)、部分肌性
血管(PMA)、非肌性血管(NMA)数合计及三者构成
比变化的结果见表 2:(图 1 、图 2)
图 1　缺氧对照组肺组织中三种血管的比例
Victoria 蓝染色 , 40×10
图2　灵芝中剂量组肺组织中三种血管的比例
Victoria蓝染色 , 20×10
表 2　各组动物三类血管(小于 100μm)计数合计的构成比
　组　别 n MA血管数 %
PMA
血管数 %
NMA
血管数 %
正常对照组 7 37 7.54 73 14.86 381 77.60
缺氧对照组 9 167 20.05 231 27.73 435 52.22
低剂量组 8 167 19.74 245 28.96 434 51.30
中剂量组 7 112 14.95 168 21.68 495 63.37
高剂量组 8 139 14.23 195 19.96 643 65.81
　　表 2显示:中 、高剂量组的 MA 和 PMA 的比例
明显低于缺氧对照组和低剂量组 ,高于正常对照组;
而NMA的比例高于缺氧对照组 ,低于正常对照组 。
分别与正常对照组和缺氧对照组比较均有显著性差
异(P<0.05)。低剂量组与缺氧对照组这三类血管
的比例基本一致 ,差异无显著性。
2.3　酶组织化学指标
琥珀酸脱氢酶(SDH)、辅酶 I 黄递酶(NADHD)
和葡萄糖 6磷酸脱氢酶(G6PD)活性变化情况见下
列各表。
1.2.3.1　琥珀酸脱氢酶(SDH)的活性变化情况
表 3　各组动物肺组织SDH 的活性变化
　组　别 n 活性等级+ ++
正常对照组 7 6 1
缺氧对照组 9 9
低剂量组 8 6 2
中剂量组 7 7
高剂量组 8 8
　　表 3 显示:低 、中 、高剂量组及正常对照组琥珀
酸脱氢酶的活性均显著低于缺氧对照组(P <
0.01)。
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2.3.2　辅酶 I黄递酶(NADHD)的活性变化情况(图3 、图 4)
图 3　缺氧对照组肺组织中辅酶Ⅰ黄递酶活性 20×10 图 4　雪灵芝高剂量组肺组织中辅酶Ⅰ黄递酶活性 20×10
表 4　各组动物肺组织 NADHD的活性变化
组别 n 活性等级++ +++ ++++
正常对照组 7 7
缺氧对照组 9 1 7 1
低剂量组 8 3 5
中剂量组 7 6 1
高剂量组 8 7 1
　　表4显示:中 、高剂量组及正常对照组辅酶 I 黄
递酶的活性显著低于缺氧对照组(P <0.01)和低剂
量组(P <0.05)。
2.3.3　葡萄糖 6磷酸脱氢酶(G6PD)的活性变化情
况(图 5 、图 6)
表 5　各组动物肺组织 G6PD的活性变化
组别 n 活性等级+ ++ +++
正常对照组 7 6 1
缺氧对照组 9 4 5
低剂量组 8 5 3
中剂量组 7 5 2
高剂量组 8 8
　　表 5 的结果显示;低 、中 、高剂量组及正常对照
组葡萄糖6磷酸脱氢酶的活性均显著低于缺氧对照
组的酶活性(P <0.01)。
图 5　缺氧对照组肺组织中葡萄糖 6磷酸脱氢酶活性 20×10 图 6　雪灵芝高剂量组肺组织中葡萄糖 6 磷酸脱氢酶活性 20×10
3　讨　　论
雪灵芝能生长在海拔 4000 ～ 5000米的高山缺
氧恶劣环境中 ,说明这种植物具有良好的抗缺氧能
力。前期的研究表明:雪灵芝除了作为一种传统藏
药具有清热解毒 ,有主治肺热咳嗽 ,高血压等作用外
还 ,还具有保肝 、抗炎 、调节免疫作用等[ 8 , 9] ,因此进
一步探讨雪灵芝抗缺氧作用 ,对于开发和利用这一
野生植物资源是必要的。
肺血管的结构重建是缺氧引起的肺动脉高压的
病理基础[ 10] ,部分细胞氧化酶及酵解酶的活性也极
易受到缺氧的影响而发生改变[ 6] ,故本实验选用肺
血管的结构重建和几种肺组织Ⅱ型上皮细胞氧化酶
及酵解酶活性改变作为观察指标 。
从病理结果可发现:高 、中雪灵芝剂量组的肌性
血管(MA)、部分肌性血管(PMA)比例低于缺氧对照
组和低剂量组 , 高于正常对照组 , 而非肌性血管
(NMA)的比例高于缺氧对照组 ,低于正常对照组;低
373第 5期　苏红卫等:雪灵芝的抗缺氧作用
剂量组与缺氧对照组这三种血管的比例基本一致 ,
两者无显著差异 ,说明中 、高剂量的雪灵芝能显著降
低缺氧所致的MA和 PMA比例的升高;而低剂量的
雪灵芝没有此作用。表明高中剂量的雪灵芝能有效
阻抑肺血管结构的重建。
从酶组织化学的结果看:在缺氧条件下虽然不
同剂量的雪灵芝对不同的酶的活性影响有一定的差
异 ,但几种有氧氧化酶的活性与缺氧对照组比较都
呈现下降趋势。缺氧条件下 ,机体组织为提高氧的
摄取率和利用率 ,有氧氧化酶的活性会代偿性的升
高。动物摄食雪灵芝后 ,组织有氧氧化酶的活性降
低 ,表明机体缺氧状况得到改善 ,组织的耗氧量下
降 ,氧的利用率升高。提示雪灵芝有降低缺氧动物
组织的耗氧量 ,增强组织氧的利用率作用 ,因而具有
抗缺氧的能力 。实验还发现:高 、中 、低剂量组的葡
萄糖 6磷酸脱氢酶(G6PD)的酶活性均显著低于缺
氧对照组 ,表明各个剂量的雪灵芝均有降低 G6PD
的活性作用。可能也是由于雪灵芝能提高组织利用
氧的能力 、降低组织耗氧量 ,使能量代谢趋于正常 ,
所以无氧酵解酶的活性也随之降低 。
本实验证明雪灵芝及其提取物有抗缺氧以及阻
抑慢性缺氧性肺血管结构重建的作用。雪灵芝的成
分复杂 ,经化学鉴定[ 4] 雪灵芝中含有生物碱 、皂甙 、
氨基酸 、香豆素 、多糖和黄酮等多种成分 ,究竟是什
么成分在起作用及怎样起作用目前尚不清楚 ,有待
进一步的研究。我们推测可能是雪灵芝的某些成分
有直接的扩血管的作用;或者有清除体内氧自由基 ,
减少氧自由基对血管内皮的损伤 ,保护血管内皮 ,使
内皮素 、血小板衍生生长因子 、表皮生长因子等能引
气肺血管壁细胞增殖分化的细胞因子合成和分泌减
少 ,阻抑肺血管结构重建 ,已有很多实验证明植物中
的多糖 、生物碱 、皂甙 、香豆素和黄酮等都具有抗氧
化和清除氧自由基的作用[ 11 ～ 15] ;或者有降低组织的
耗氧量 ,提高组织利用氧的能力等。
综上所述 ,通过本实验证实了雪灵芝的抗缺氧
为雪灵芝开发利用特别是在肺功能保健的开发利用
提供了新的证据。
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(2002-07-10收稿)
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