全 文 ：7 day s and 14 days.ICH models were produced with the induction o f co llagenase type Ⅶ -S.Immunohistochemical method w as used to
detect PAR-1 protein and RT-PCR technique w as used to detect PAR-1mRNA in brain tissue around the haematoma in different
g roups.Results:PAR-1 pro tein and mRNA were mild positive in normal group. In model groups , intensity of PAR-1 expression
started to enhance at 6 hours , and enhanced more at 24 hours.PAR-1 expression reached the peak at 3 days and began to descend.
At 7 days the descent w as obvious and there was further descent at 14 days.At each time point , the PAR-1 pro tein positive cell num-
ber and PAR-1mRNA absorbance ra tio in ICH model groups w ere significantly higher than those in no rmal group(P <0.05 or P <
0.01).In addition , PAR-1 proteins were obviously expressed in vivo in brain capillary endothelial cell.Conclusion:Functional PAR-
1 exists in brain capillary endothelial cells.Activ ation of PAR-1 af ter ICH due to the stimula tion of thrombin is not only the initiating
agent of cerebral edema after ICH , but also participates the development of cerebral edema.
KEY WORDS: intracerebral hemo rrhage; thrombin; thrombin receptor-1
西藏雪灵芝促进消化作用实验研究＊
姚思宇 , 赵 鹏 , 刘荣珍 , 李 彬 , 李风文 , 马宇燕 , 张陆娟 , 覃辉艳 , 苏爱荣
(广西壮族自治区疾病预防控制中心 , 广西 南宁 530021)
摘要 目的:探讨雪灵芝是否具有促进消化的功效。方法:选用雄性大鼠和小鼠各一批:①大鼠灌胃给不同剂量的雪灵芝提取浓
缩液和蒸馏水一个月后进行消化酶的测定;并计算体重增重量 、摄食量及食物利用率。 ②小鼠灌胃给不同剂量的雪灵芝提取浓缩
液和蒸馏水(2个对照组)15 d后进行小肠运动实验。结果:①雪灵芝各剂量组大鼠体重增重量均高于阴性对照组 ,高 、中剂量组
与阴性对照组的差异具有显著性(P <0.05)。各剂量组的食物利用率均高于阴性对照组 ,且高 、中剂量组与阴性对照组的差异有
显著性(P<0.05)。 ②雪灵芝各剂量组小鼠的墨汁推进率均高于便秘模型对照组 ,且差异均显著或非常(P <0.01或 P<0.05)。
结论:雪灵芝具有促进消化功能的功效。
关键词: 雪灵芝; 消化
KEY WORDS: Tibetan A.kansuensis; digestion
中图分类号:R114 文献标识码:A 文章编号:1000-6834(2007)03-0332-03
雪灵芝 , 又名草灵芝 ,藏药名阿仲 , 为高原野生植物 , 学
名卵瓣蚤缀(areneria kensuensis var ovatipetala tsui), 属石竹
科蚤缀属 , 是多年生垫状草本植物 , 藏族人称之为人间仙
草。世界上海拔最高的绿色开花植物 , 也是一种极为宝贵的
野生藏药资源[ 1] 。喜爱生长在高山草甸和石缝中 , 分布在青
藏高原海拔 4700 ～ 6000 m 左右的永久雪线的附近地带。 广
泛分布在青藏高原各地 , 资源十分丰富 , 但是采集十分不
易[ 2] 。藏药志 、全国中草药汇编 、中华人民共和国卫生部药
品标准·藏药(1995 版)等多部医药典籍记载:雪灵芝全草入
药 ,性味甘寒 , 对胃肠溃疡 、流感 、肺炎 、风湿 、癌症 、淋病 、淋
巴结核 、黄疸 、肾结石 、等有治疗作用[ 3] 。本研究主要对雪灵
芝促进消化的功效进行了动物实验研究。
1 材料与方法
1.1 受试物
由西藏阿仲嘎保生物制品有限责任公司提供 , 是以西藏
雪灵芝叶子为原料经过清洗 、浸提 、分离 、浓缩 、喷雾干燥得
粉状提取物 , 再将这干粉加适量蒸馏水搅拌 、过滤 、罐装 、灭
菌即为本实验所用的样品雪灵芝浓缩液 , 为棕色液体 , 比重
为 1.10 ,其标称的功效成分为总皂甙。人体推荐用量为每人
(成人)每日 1 次 ,每次 5 ml , 按 60 kg 体重折算成 91.7 mg/
kg bw。
1.2 动物
繁殖的 SPF 级Wistar 雄性大白鼠 37 只 ,由广西医科大
学医学实验动物中心提供(批准号为桂动许字 2000 第 001
号)体重(100.5±7.9)g。 SPF 级昆明种雄性小白鼠 60 只 ,
体重(20.5±1.9)g , 本中心 SPF 级实验动物房提供(合格证
号桂医动字第 23003 号)。动物室温度:22 ～ 25℃, 相对湿
度:55～ 70%。
1.3 主要仪器和试剂
电子分析天平 、旋涡混匀器 、水浴锅及游标卡尺等。 主
要试剂有:易蒙停 、印度墨汁 、乙醚 、盐酸。
1.4 实验方法
按照保健食品检验与评价技术规范(卫生部 2003 年版)
进行实验。
1.4.1 大鼠实验 大鼠在动物实验室检疫室内饲养观察 5
d后 , 根据体重分层随机分为 4 组 ,即 3个剂量组和 1个阴性
对照组 ,每组 9-10 只雄性大鼠。开始实验后 , 各剂量组大鼠
灌胃给予 458.5、917.0 、1834.0 mg/ kg bw 的雪灵芝溶液(相
当于人体推荐摄入量的 5、10、20 倍), 阴性对照组给予蒸馏
水 ,灌胃量为 1.0 ml/100g bw ,每 d灌胃一次 ,连续 30 d。每
周称重 2 次 ,每 d记录食物摄入量(给饲料量 、剩余饲料量及
撒落量), 计算食物利用率。实验至第 31 d 时禁食不禁水 24
h , 采用乙醚麻醉大鼠幽门结扎法收集 3 h 内排出的胃液 , 测
332 Chin J Appl physiol 2007;23(3)
DOI :10.13459/j.cnki.cjap.2007.03.005
量单位时间内胃液量。取胃液 1 ml放入 20 ml的有盖试管
中 ,加入 0.05 mol/ L盐酸溶液 15 ml摇匀 , 放入新鲜制作的
蛋白管两根。塞好瓶口 , 在 37℃恒温水浴锅孵育 24 h , 取出
蛋白管 ,用尺测量蛋白管两端透明部分的长度(mm), 以四端
之值求其平均值。计算胃蛋白酶活性和胃蛋白酶排出量。
胃蛋白酶活性单位(μ/ml)=四端蛋白管透明部分长度
均值2×16。
胃蛋白酶排出量(μ/ h)=胃蛋白酶活性×每小时胃液
量。
1.4.2 小鼠实验 小鼠在动物实验室检疫室内饲养观察 5
d 后 , 随机分成 5 个组(n =12)。 3 个剂量组分别给予
458.5 、917.0、1834.0 mg/ kg bw 的雪灵芝溶液(相当于人体
摄入量的 5、10 、20倍),两个对照组给予蒸馏水 , 灌胃容量为
0.2 ml/ 10 g bw , 每天一次 , 连续 15 d。末次给样的当天晚
上 ,各组动物禁食不禁水 16 h 后 ,模型对照组和三个剂量组
给予剂量为 5 mg/ kg bw 的易蒙停溶液(0.2 ml/10 g bw), 阴
性对照组给予蒸馏水。 30 min后 ,三个剂量组给予含相应受
试物浓度的墨汁印度墨汁溶液 ,模型对照组和阴性对照组给
予印度墨汁(用生理盐水稀释 4 倍)。给墨汁 25 min 后颈椎
脱臼处死动物 ,打开腹腔分离肠系膜 ,剪取上端自幽门 、下端
至回盲部的肠管 , 置于托盘上 , 轻轻将小肠拉成直线进行测
量。肠管长度为“小肠总长度” , 从幽门至墨汁前沿为“墨汁
推进长度” , 按下列公式计算墨汁推进率(P)。
墨汁推进率=墨汁推进长度(cm)小肠总长度(cm) ×100%
1.5 数据处理
应用 SPSS 统计软件对数据进行方差分析处理 , 食物利
用率与墨汁推进率资料先按下式进行数据转换(将百分率转
换成小数以减少各组方差)。实验数据用均数±标准差(≧x ±
s)表示 , 然后再分析。
X=Sin-1 p , 式中 P 为食物利用率和墨汁推进率 ,用小
数表示。
2 结果
2.1 雪灵芝对大鼠体重的影响
Tab.1 Effects of T ibetan A.kansuensis on body weights of
rats(g , x ±s)
Dosage
(mg/kg bw)
Weight
n Initial n End
Increase
(g)
Negative
control
9 100.2±8.9 9 199.8±17.1 99.6±18.6
1834.0 10 100.6±9.9 10 219.3±20.1＊118.7±19.7＊
917.0 9 100.9±7.5 9 223.9±19.7＊123.0±17.6＊
458.5 9 100.1±6.1 9 203.6±20.7 103.5±22.6
＊P <0.05 vs negative control
实验开始时各剂量组与阴性对照组的大鼠平均体重均
衡 ,差异均无显著性(P >0.05)。实验结束时 ,雪灵芝各剂量
组的大鼠体重增重量均高于阴性对照组 , 且高 、中剂量组与
阴性对照组的差异具有显著性(P <0.05), 表明雪灵芝具有
促进大鼠的体重增长的作用(表 1)。
2.2 雪灵芝对大鼠的食物摄入量和食物利用率的影响
各剂量组大鼠的食物摄入量与阴性对照组比较 , 差异均无显
著性(P>0.05)。各剂量组大鼠的平均食物利用率均高于阴
性对照组 ,且高 、中剂量组与阴性对照组的差异有显著性(P
<0.01 或 P<0.05)表明雪灵芝具有提高大鼠的食物利用率
的作用(表 2)。
Tab.2 Effects of T ibetan A.kansuensis on feed intaking and
the usefactors of feed( x±s)
Dosage
(mg/ kg bw) n
I ntaking
(g)
Usefactor
(%)
T ransition
value
Negative
control
9 454.8±29.8 21.9±4.2 0.49±0.05
1834.0 10 449.3±32.4 26.4±3.6 0.54±0.04＊
917.0 9 460.3±37.5 26.7±2.5 0.54±0.03＊＊
458.5 9 456.8±28.2 22.5±4.5 0.49±0.06
＊P <0.05 , ＊＊P <0.01 vs negative control
2.3 雪灵芝对大鼠的胃蛋白酶活性 、胃液排出量和胃蛋白
酶排出量的影响
各剂量组大鼠的胃液排出量与阴性对照组比较 , 差异均
无显著性(P>0.05)。各剂量组的胃蛋白酶活性和胃蛋白酶
排出量均高于阴性对照组 ,但差异均无显著性(P>0.05), 提
示雪灵芝具有提高大鼠的胃蛋白酶活性和胃蛋白酶排出量
的趋势 ,但作用不够明显(表 3)。
Tab.3 Effects of T ibetan A.kansuensis on the volume and ac-
tivity of pepsin( x±s)
Dosage
(mg/kg bw)n
Activity of pepsin
(μ/ ml)
Volume of pepsin
(ml/ 3h)
Volume of pepsin
(μ/ h)
Negative
control
9 378.1±58.2 1.3±0.10 167.5±33.1
1834.0 10 477.9±157.6 1.4±0.08 217.5±73.1
917.0 9 492.2±158.5 1.3±0.12 206.5±69.5
458.5 9 400.0±90.4 1.3±0.10 168.7±42.4
2.4 雪灵芝对小鼠的小肠墨汁推进率的影响
Tab.4 Effects of T ibetan A.kansuensis on the advance ratio of
ink in small intestine( x±s , n=12)
Dosage
(mg/ kg bw)
Advance ratio
(%)
T ransition
value
Negativ e control 80.9±13.5 1.16±0.23＊＊
Model control 40.3±9.1 0.69±0.09
1834.0 55.3±15.5 0.84±0.16＊＊
917.0 57.1±15.3 0.86±0.16＊＊
458.5 51.9±15.5 0.81±0.16＊
＊P <0.05 , ＊＊P <0.01 vs model control
便秘模型对照组小鼠的平均墨汁推进率显著低于阴性
(下转第 364 页)
333中国应用生理学杂志 , 2007;23(3)
mRNA were determined by immunohistochemical staining and reverse transcription-polymerase chain reaction(RT-PCR).Results:
① The expression o f P I3K p85αprotein and mRNA in asthmatic 4 weeks group and asthmatic 6 weeks group w ere significantly hi-
gher than contro l group , respectiv ely(P <0.01).The above-mentioned parameters o f therapeutic 6 weeks group w ere significantly
lower than those of asthmatic 4 weeks group , asthmatic 6 w eeks group and therapeutic 4 w eeks group , respectively(P <0.01 , P <
0.01 P <0.05).② The WA/ Pi , the smoo th muscle area/ Pi and the N/ Pi of asthmatic 4 weeks g roup and asthmatic 6 weeks g roup
w ere significantly higher than control g roup , respectively(P<0.01).The above-mentioned parameters of therapeutic 6 weeks g roup
w ere significantly lower than those of asthmatic 4 weeks group , asthmatic 6 weeks g roup and therapeutic 4 weeks group , respectively
(P <0.01).③The airway resistance of asthmatic 4 weeks g roup and asthmatic 6 weeks g roup were significantly higher than the
control group , respectively(P<0.01).The above-mentioned parame ters of therapeutic 6 w eeks g roup w ere significantly lower than
those of asthmatic 4 w eeks g roup , asthmatic 6 w eeks group and therapeutic 4 w eeks group , respectively(P<0.01 , P<0.01 , P <
0.05).Conclusion:The proliferation of airway smoo th muscle is a remarkable character of airw ay remodeling in asthma.The PI3K
signal pathway may be involved in the process.T riptolide may reduce AHR and decrease the proliferation of ASMCs by inhibiting the
expression of PI3K.I t may have potential therapeutic effects in the asthmatic airway remodeling.
KEY WORDS: asthma; airway remodeling; triptolide; phosphoinositide 3-kinases
(上接第 333页)
对照组(P<0.01), 表示便秘模型成立。雪灵芝各剂量组小
鼠的平均墨汁推进率均高于模型对照组 ,经数据转换后统计
分析 , 各剂量组与便秘模型对照组的差异均具有显著性(P
<0.01 或 P<0.05), 表明雪灵芝具有促进小鼠的小肠运动
的作用(表 4)。
3 讨论
雪灵芝作为传统藏药 ,广泛分布于西藏的黄南 、果洛 、玉
树 、海东地区及格尔木以及青海省的高山草甸和砾石地带。
虽生长环境恶劣 ,却是青藏高原垫状植被群系中一种非常重
要的植物。它们的存在是自然环境长期选择的结果 , 同时也
是适应环境的产物 ,有研究表明西藏雪灵芝富含皂甙 、黄酮
类 、生物碱(β-咔波啉)、甾体类 、三萜类 、阿魏酸 、环肽 、香豆
素 、氨基酸 、糖类以及维生素等多种有生物活性的化学成
分[ 3] 。
消化系统疾病是我国常见病 、多发病 , 有文献报道:10%
的人在一生中患过消化性溃疡 ,病死率最高的前 4位恶性肿
瘤中 ,有 3 种是消化系统肿瘤[ 4] 。小儿厌食症是临床上的一
种常见病 ,直接影响儿童的生长发育[ 5] 。所有这些都应引起
医学工作者的高度重视 , 研发更多安全 、有效的药物或保健
食品。多一种能治愈此种恶疾的方法 ,就能让痛苦的患者多
一份希望。
我们的实验研究结果提示西藏雪灵芝具有促进消化的
功效 ,能促进实验大鼠的体重增长 , 提高大鼠的食物利用率 ,
提高胃蛋白酶活性和胃蛋白酶排出量;能明显促进便秘模型
小鼠的小肠推进运动 。这一功效与西藏雪灵芝富含多种生
物活性化学成分有关 , 其作用机理有待进一步研究。我们可
以将这一宝贵的藏药资源开发成保健食品或药品 ,用于治疗
或辅助治疗成千上万的消化不良患者 , 提高人群的健康质
量 , 同时产生良好的经济效益。
4 参考文献
[ 1] 赵 鹏 , 李 彬 , 姚思宇.雪灵芝对酒精性肝损伤保
护作用的实验研究[ J] .中华中西医杂志 , 2004 , 5
(17):1901-1902.
[ 2] 曹熙德.雪灵芝开发研究[ J] .中国肿瘤 , 2001 , 10
(4):227-229.
[ 3] 雷 宁 , 张文生 , 杜树山.蚤缀属植物的种群分布 、
化学及药理研究进展[ J] .中国中医药信息杂志 ,
2004 , 11(10):929-931.
[ 4] 张澍田.多学科联合促进消化专业的发展[ J] .中华
内科杂志 , 2004 , 43(1):5.
[ 5] 郝爱真 , 刘 萍 , 梅世昌.儿童开胃乐口服液促进消
化功能的实验研究[ J] .军医进修学院学报 , 2003 ,
23(1):64-66.
＊基金项目:广西壮族自治区疾病预防控制中心资助课题
(20020001)
收稿日期:2006-01-06;修回日期:2007-03-28
作者简介:姚思宇(1983-), 女, 广西岑溪人 , 技士 , 主要从事
保健食品毒性与功能检验。
364 Chin J Appl physiol 2007;23(3)