全 文 ：第 33 卷
Vol． 33
第 5 期
No． 5
微 量 元 素 与 健 康 研 究
Studies of Trace Elements and Health
2016 年 09 月
Sep． 2016
收稿日期:2016 － 01 － 11
基金项目:广西高校右江流域特色民族药研究重点实验室开
放课题(右医科字［2014］2 号) ;国家中医药管理局“十二五”
中医药重点学科中药化学建设项目(国中医药人教发［2012］
32 号) ;广西重点学科药物化学建设项目(桂教科研［2013］
16 号) ;广西高校科技创新能力提升工程建设项目(桂教科
研〔2014〕14 号) ;自治区级创新创业民族医药教学团队项目
(桂教高教［2015］93 号、桂教高教［2016］6 号)
作者简介:冯小雄(1994 －) ，男，医学检验专业本科在读，研究方
向:天然产物化学、药物化学。通讯作者:黄锁义，教授，硕士研究生
导师。
土人参根多糖提取及含量测定
冯小雄1，4，莫 璐2，4，马小庭3，4，黄锁义3，4，李 琳1，李月仕3，谭 冰1
(右江民族医学院:1．临床医学院;2．检验学院;3．药学院;4．广西高校右江流域特色民族药研
究重点实验室:广西 百色 533000)
摘要:目的:提取土人参根的多糖并进行含量测定。方法:采用水提醇沉法提取土人参根多糖，以葡萄糖标准
液绘制标准曲线，用苯酚—硫酸法，分光光度法在 484 nm波长处测定土人参根多糖的含量。结果:回归方程
为 y = 7. 4625x － 0. 0484，相关系数 r = 0． 9999，平均回收率 98. 9%，ＲSD = 0. 31%(n = 5)。结论:土人参根多糖
含量为 3． 7%，方法操作简便、重现性好、准确、可靠，可作为检测土人参根多糖含量的优选方法。
关键词:土人参根;多糖;含量测定;苯酚—硫酸法
中图分类号:Ｒ284． 2 文献标识码:A 文章编号:1005 － 5320(2016)05 － 0039 － 02
Determination for the content of polysaccharide and extract of the Talinum paniculatum roots
FENG Xiao － xiong1，4，MO Lu2，4，MA Xiao － ting3，4，et al
(Youjiang Medical University for Nationalities:1． College of Laboratory and Clinical of Medicine Sciences;2． College of
Clinical Medicine;3． College of Pharmacy;4． Key Laboratory of Chinese Medicinal Materials in Youjiang Basin(National
Medicine)Ｒesearch ，Guangxi Universities:Baise Guangxi 533000，China)
Abstract:Objective:Extraction of Artemisia capillaries polysaccharide，and content determination of polysaccharide from Talinum panic-
ulatum roots． Methods:Water extracting and alcohol precipitation extraction for content polysaccharides from Artemisia capillaries． Using
phenol － sulfuric acid method and Spectrophotometric method to make glucose as standard substance． Ｒesults:The regression equation for
y = 7． 4625x － 0． 0484，the correlation coefficient r = 0． 9999． The average recovery rate was 98. 9%，ＲSD = 0. 31%(n = 5)． Conclu-
sion:Artemisia polysaccharide Content was 3． 7% ． The results show that the proposed method was simple，reproducible and accurate，
and reliable
Key Words:Talinum paniculatum lroots;polysaccharide;content;phenol － sulfuric acid method
土人参(学名:Talinum paniculatum (Jacq．)Gaertn．)又
名:假人参、参草、土高丽参等，属中央种子目，马齿苋科一年
生或多年生草本，可供观赏。土人参根，出自《滇南本草》，
为双子叶植物药马齿芜科植物护兰的根，别名紫人参，资源
丰富，具有健脾益气之功［1］，根入药，滋补强壮。肉质根，是
一种药用补品，具有滋补强壮作用，能补气血、助消化、生津
止渴、治咳痰带血。多糖是自然界中含量最丰富的生物聚合
物，几乎存在于所有的生物中，是构成生命活动的四大基本
物质之一［2］。大量的药理和临床研究表明，多糖类化合物是
一种免疫调节剂，它能激活免疫细胞，提高机体的免疫功能，
而对正常细胞几乎没有毒副作用［3］。近年来，对多糖的深入
研究表明，多糖具有多种生物活性［4］，多糖具有免疫调节、抗
肿瘤、降糖、保肝、抗感染、抗消化道溃疡、抗衰老、降血脂、抗
凝血等作用［5］。植物多糖的药理作用为:免疫调节、抗病毒、
延缓衰老，抗肿瘤，抗辐射等作用［6］。有研究表明，羊栖菜多
糖右(SFPS － B2)通过线粒体途径介导诱导 SGC － 7901 细胞
的凋亡，对 SGC － 7901 胃癌细胞具有抑制增殖的作用［7］等。
随着人们对多糖认识的不断加深，多糖的作用越发显得突
出。糖类是极性大的中药成分，能溶于水和稀醇，不溶于极
性小的溶剂，从中药提取糖时，一般都用水或稀醇提取［8］。
本实验利用水提醇沉法提取土人参根多糖，以葡萄糖标准液
绘制标准曲线，用苯酚—硫酸法［9］、紫外分光光度法于 484
nm波长处测定土人参根多糖的含量，实验所得的结果可为
该药进一步开展药理实验提供可靠的科学依据。
1 仪器与试剂
1． 1 材料
土人参根采集于广西来宾市忻城县，干燥粉碎备用。
1． 2 试剂
950 ml /L乙醇 AＲ，无水乙醇 AＲ，乙醚 AＲ，苯酚 AＲ，浓
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硫酸 AＲ，葡萄糖标准品(成都科龙化工试剂厂，批号
20041102)。
1． 3 仪器
722N型分光光度计(上海菁华科技有限公司) ;电子天
平(上海舜宇恒平科学仪器有限公司) ;ZKJ － 1002 循环水真
空抽气泵(巩义市子华仪器有限公司) ;ＲE － 52AA电热式恒
温水浴锅(江苏金坛宏凯仪器厂) ;DHG －9070A型电热式恒
温鼓风干燥箱(上海精宏实验设备有限公司)。
2 结果分析
2． 1 土人参根多糖的提取
称取土人参根粉末 30 g，放入 200 ml 的烧杯中，加入蒸
馏水 150 ml，将其置于电热恒温水浴锅中，温度控制在 65℃
左右，3 h 后，用循环水式多用真空泵进行抽滤，将滤液放入
另外的 500 ml大烧杯中;用同样的方法重复提取三次;合并
三次滤液，用电热恒温水浴锅加热浓缩至 32 ml，冷却至室温
后，加入 90 ml的 95%乙醇，背光处静置 24 h 后。用真空抽
滤，沉淀物依次用无水乙醇和乙醚洗两次，得到粉末状多糖
固体 2． 7742 g。
2． 2 5%苯酚溶液的配制
精确称取 12. 5 ml苯酚，置于 250 ml 的容量瓶中，用蒸
馏水定容至刻度，得 5． 0%苯酚溶液。
2． 3 葡萄糖对照品溶液的配制
精密称取干燥(105℃)至恒重的葡萄糖 0. 040 g，加蒸馏
水定容至 100 ml，摇匀，得 0. 4 mg /ml的葡萄糖溶液。
2． 4 标准曲线的制备
精确量取葡萄糖对照品溶液 2、4、6、8、10 ml，分别加入
到 50 ml 的容量瓶中定容，摇匀，得 0. 016、0. 032、0. 048、
0. 064、0. 080 mg /ml的 5 个不同浓度的对照品溶液，精确量
取 1. 0 ml置于 5 支试管中，再加入 5%苯酚溶液 1. 5 ml，摇
匀，再迅速加入浓硫酸 7. 5 ml，摇匀，室温放置 30 min ，用
722N可见分光光度计在 484 nm 处测定吸光度，以多糖的量
(C mg /ml )为横坐标，以吸光度(A )为纵坐标，绘制标准曲
线，建立线性回归方程(表 1)。
表 1 可见光分光光度计测定葡萄糖对照液吸光度
浓度 C(mg /ml)0． 0 0． 016 0． 032 0． 048 0． 064 0． 08．
吸光度(A) 0． 000 0． 071 0． 189 0． 312 0． 429 0． 548
经线性回归得标准曲线方程为 y = 7. 4625x － 0. 0484，回
归系数 r = 0. 9999。
2． 5 土人参根多糖含量测定
精确称量土人参根粗多糖 0. 010 g 置于试管中，加 1
mol /L H2SO4 2 ml加热水解 2 h，冷却至室温，稀释至刻度，
作为供试样品溶液。按照绘制标准曲线的方法，分别精密量
取 1． 0 ml样品液 5 份，分别置于 5 支试管中，加 1. 5 ml苯酚
溶液，再加 7. 5 ml浓硫酸溶液，混合均匀后放置 20 min，测
定相应吸光度值(表 2)。
由回归方程及以上表数据可计算出土人参根多糖含量
为 3. 0%。
2． 6 稳定性试验
精密量取土人参根溶液 1 ml，按照 2． 4 项下方法操作，
分别在 15、30、60、90、120、150、180 min 处测定吸光度值，算
出 ＲSD(表 3)。
表 2 可见光分光光度计平行测定土人参根多糖溶液吸光度
份数 吸光度 A 土人参根多糖质量浓度 C(mg /ml)
1 0． 167 0． 028
2 0． 172 0． 029
3 0． 178 0． 030
4 0． 163 0． 028
5 0． 164 0． 028
表 3 土人参根多糖溶液稳定性试验(常温)
T(min) 15 30 60 90 120 150 180
吸光度 0． 167 0． 166 0． 167 0． 167 0． 167 0． 166 0． 165
由上表数据计算得 ＲSD为 0． 47% ，即土人参根多糖溶
液在 2 h内稳定性良好。
2． 7 精密度试验
精密量取土人参根溶液 1 ml，按照 2． 4 项下方法操作，
测定吸光度，连续测定 5 次，算出 ＲSD(表 4)。
表 4 土人参根多糖溶液精密度试验
测定
次数
吸光度
(A)
ＲSD
(%)
多糖质量浓度
C(mg /ml)
多糖含量
(%)
1 0． 175 0． 029 2． 9
2 0． 176 0． 030 3． 0
3 0． 176 0． 31 0． 030 3． 0
4 0． 175 0． 029 2． 9
5 0． 176 0． 030 3． 0
由上表数据得出 ＲSD 为 0． 31%，说明土人参根供样液
精密度良好。
2． 8 回收率的测定
分别精密称取土人参根粗多糖溶液 1 ml (5 份) ，然后
分别加入葡萄糖对照品溶液 0. 1、0. 2、0. 3、0. 4、0. 5 ml，用蒸
馏水补足 2. 0 ml。取 2. 0 ml 蒸馏水同法操作做空白，按照
上述方法测定出平均回收率 98. 9%。
3 讨 论
本实验的主要依据是多糖不溶于有机溶剂但能溶于水，
所以实验采用水提醇沉淀法和苯酚 －硫酸法对土人参根多
糖进行提取、显色，在波长为 484 nm出测定其吸光度值。根
据实验结果可知土人参根多糖含量为 3. 7%，平均回收率为
98. 9%，稳定性 ＲSD为 0. 31%(n = 5)。由此可见，本实验采
用的方法能够有效的从土人参根中提取到稳定的多糖。
天然多糖来源丰富、价格低廉、加工制备简单有很高的
推广应用前景［10］，作为食品添加剂，具有安全性高、自然鲜
艳的特点，而且有些天然多糖对人体的多种疾病还具有治
疗、预防等药理作用和保健功能。多糖是当前药物研究的热
点，多糖质量的稳定可靠是保证期药效实验可信的重要前
提［11］。广西是土人参的主产地，土人参作为一种药食同源
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的野菜对人体确有益处，所以研究其多糖含量对广西土人
参的进一步开发和利用具有重要意义，应进一步推广应用。
参考文献:
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收稿日期:2016 － 05 － 09
基金项目:佳木斯大学研究生科技创新重点项目(LZＲ2014
－ 033)
作者简介:谷 娜(1987 －) ，女，在读硕士，主要从事中药活性成
分与结构修饰研究。通讯作者:高金波，教授。
山药多糖及其硒多糖抗氧化性的比较研究
谷 娜1，侯艳秋2，郑晓凤1，李贵森1，廉亚楠1，赵胜男1，高金波1
(1．黑龙江省教育厅生物药制剂重点实验室;2．佳木斯红十字中心血站:黑龙江 佳木斯 154007)
摘要:目的:比较山药多糖和山药硒多糖的抗氧化活性。方法:采用邻苯三酚自氧化法测定两者对超氧阴离
子自由基的清除作用，水杨酸法测定羟自由基清除作用，HPLC 法测定 DPPH 浓度评价对 DPPH 自由基的清
除作用，并与维生素 C进行了比较。结果:山药多糖、山药硒多糖和 Vc对超氧阴离子自由基清除的 IC50 值分
别为 1. 852 mg /ml、1. 515 mg /ml和 0. 6124 mg /ml。对羟基自由基清除 IC50 值分别为 1. 130 mg /ml、0. 988 mg /
ml和 0. 075 mg /ml;对 DPPH基清除的 IC50 值分别为 0. 68 mg /ml、0. 62 mg /ml和 0. 33 mg /ml。结论:山药硒
多糖比山药多糖的抗氧化活性强。
关键词:山药多糖;山药硒多糖;抗氧化
中图分类号:Ｒ284． 2 文献标识码:B 文章编号:1005 － 5320(2016)05 － 0041 － 03
硒是人体中的重要微量元素，缺硒会引发多种疾病，如:
能量缺乏性营养不良、血溶性贫血、克山病、高血压、肝硬化、
癌症、糖尿病、白内障等［1 ～ 3］。硒是人体内不可缺少的微量
元素，它是红细胞中谷胱甘肽过氧化酶的重要成分，充足的
硒可促使谷胱甘肽过氧化酶有效地将人体内的过氧化氢转
变为水。硒可消除自由基，使参与人体血压调节的儿茶酚胺
保持正常水平;含有硒的多种酶能够调节甲状腺的工作，参
与氨基酸和精子尾部蛋白的合成。补充硒有利于人体健康，
减少疾病的发生发展。无机硒毒性较强，同时其营养剂量的
范围较小，致使很难控制其使用剂量［4］。一般，人体摄入硒
的安全剂量为 500 μg /d，中毒量为 750 μg /d。当摄入的硒过
量时，可给体内带来一定的累积毒性和致畸变性。有机硒和
无机硒相比，其有生物活性强、环境污染小、毒性低的优点，
目前有机硒成为国内外一些学者研究的一个热点［5］。硒多
糖为有机硒化合物，是硒与多糖的结合产物，具有更高的生
物活性［6］，目前已有复方硒多糖胶囊、香菇硒多糖胶囊等产
品上市。硒多糖能够充分的发挥多糖和硒的生理活性，两者
相互协调作用使得其抗肿瘤、抗衰老、免疫调节、降糖等作用
更强［7 ～ 9］。为了探究山药硒多糖的抗氧化作用的能力，本实
验主要比较了山药多糖和山药硒多糖对羟基自由基、超氧自
由基以及 DPPH·自由基的清除作用，旨在为开发山药提升
山药的经济价值，探索山药硒多糖的抗氧化性奠定一定的物
质基础。
1 材料、试剂与仪器
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