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铁筷子多糖抑制小鼠S180肉瘤生长的免疫调节作用



全 文 :1 前言
2 材料与方法
2.1实验材料
2.2实验方法
铁筷子是毛莨科铁筷子属多年生草本植物,野生于甘
肃陇南、甘南及四川西部等地,其根、根茎具有活血散
淤,清热解毒等功效。铁筷子多糖是从优质药材铁筷子中
提取得有效多糖成分,已有实验证实铁筷子多糖有明显抗
肿瘤作用,铁筷子多糖抗肿瘤作用可能与其免疫调节作用
有关 。但是,铁筷子多糖抗肿瘤作用机制并不十分清楚,
本文着重观察铁筷子多糖对荷瘤鼠体内细胞因子的影响与
抑瘤率的关系,以期为铁筷子多糖在肿瘤免疫治疗方面的
应用提供理论依据。
(1)实验动物与瘤株:健康清洁级昆明种雄性小鼠,
体重18~22g,由兰州大学医学部实验动物室提供。S180小
鼠肉瘤细胞由兰州大学血液病研究所提供。
(2)铁筷子多糖:优质铁筷子,洗净晾干粉碎,分次
用7倍、5倍、3倍量的蒸馏水回流60、40、20分钟,将
回流液静置、过滤、浓缩,乙醇沉淀,离心(3000rpm)收
集沉淀物,sevag法去蛋白,透析,干燥得铁筷子总多糖。
(3)试剂与仪器:四甲基偶氮唑盐(MTT,上海华舜
生物工程公司),;放线菌素D(AcD,美国Amresco);
DG3022型酶联检测仪,高速离心机(TGL-16G上海安宁科学
仪器厂)。
(1)接种、分组、给药:用1ml无菌注射器抽取最佳
状态的S180腹水瘤(乳白色瘤液)传代细胞,按细胞数为
1×107个/ml,接种小鼠右后肢的腹股沟皮下,接种第二
天随机分组给药;生理盐水对照组,给小鼠灌胃生理盐
水;铁筷子多糖组小鼠灌胃铁筷子多糖(用蒸馏水配
制),铁筷子多糖Ⅰ组剂量2.0g/kg体重,Ⅱ组1.0g/kg体
重 , Ⅲ 组 0.5g/kg体 重 ; 各 组 小 鼠 每 次 灌 胃 量 为
0.1ml/10g体重,每天1次,连续给药2周。
(2)计算多糖对荷瘤小鼠S180肉瘤的生长,胸腺、脾
脏指数的影响。待瘤细胞在小鼠体内生长两周后,每组取
小鼠8只(除对照组外,其余各组均要求右腋部有肿块生
长,肿块表面皮肤无破溃 ,未出现胸水)称重后,无菌眼
球取血,静置5小时,3000r/min离心20分钟,无菌操作
下,吸取血清,eppendorf管分装,-20℃冻存。取血后,
断颈处死小鼠,无菌取胸腺、脾脏、骨髓后,剥离局部肿
块,称重。抑瘤率=(对照组平均瘤重—实验组平均瘤重)
/对照组瘤重×100%。胸腺指数=胸腺重量/小鼠体重×
100%。脾脏指数=脾脏重量/小鼠体重×100%。
(3)荷瘤小鼠淋巴细胞转化率的测定。给药后第11
天,每组小鼠每日肌注PHA8mg/kg,连续3天小鼠剪尾取
血,推片,姬姆萨-瑞士染液染色,油镜观察,计算外周血
淋巴细胞转化率。
(4)检测细胞因子:IL-2活性的测定(MTT法) ;
TNFα活性检测(结晶紫法) ;γIFN活性测定(微量病变
[1]
[2]
[3]
铁筷子多糖抑制小鼠S180肉瘤生长
的免疫调节作用
王振军 刘立伟 杨雷英
(泰山医学院,山东泰安271000)
摘 要:本文通过观察荷瘤小鼠体内细胞因子水平与荷瘤小鼠体内肿瘤大小的关系,探讨铁筷子多糖(Helleborus
thibetanusFranchpolysaccharoseHFPS)抑制小鼠S180肉瘤生长的有关免疫学机制。得出结论:铁筷子多糖可能通过促进荷
瘤小鼠免疫细胞及体内免疫分子的作用增强荷瘤小鼠免疫功能,从而达到抗肿瘤作用。
关键词:铁筷子;多糖;抗肿瘤;细胞因子
Immune regulation of Helleborus thebetanus Franch Polysaccharide (HFPS) on growth of tumor in Tumor Mice S180
WANG Zhen-jun LIU Li-wei YANG Lei-ying
(Taishan medical college,Taian Shandong 271000)
Abstract:The immune rugulation of Helleborus thebetanus Franch Polysaccharide (HFPS) in tumor mice was studied. Conclusion:
Helleborus thebetanus Franch Polysaccharide can improve the immune ability of tumor mice by adjusting the immunocyte and
cytokine in tumor mice.
Key words:helleborus thebetanus franch;polysaccharide;anti-tumor;cytokine
, ,
收稿日期: 修回日期:
作者简介:
2008-05-30 2008-06-28
王振军(1973-),女,山东陵县人,讲师,从事病理学教学与科研工作。
48
中国西部科技 2008年7月(中旬)第07卷第20期 第145期总
抑制法) ;IL-3活性的测定 。
采用SPSS10.0软件处理实验数据,组间比较采用F检
验,p<0.05为差异有统计学意义。
(1)铁筷子多糖抑制荷瘤小鼠S180肉瘤的生长。铁筷
子多糖有抗肿瘤作用,其抗肿瘤最适剂量是1.0g/kg体重,
且抑瘤率为50.82%。与对照组比较p〈0.01,下表同。
(3)铁筷子多糖对荷瘤鼠体内细胞因子的影响。铁筷
子多糖可提高荷瘤鼠体内细胞因子水平,与生理盐水对照
组有显著性差异。
多种植物多糖可以通过增强患瘤机体的免疫功能而达
到抗肿瘤作用。免疫器官的脏器指数是衡量机体免疫功能
的初步观察指标。胸腺和脾是机体重要的免疫器官,主要
参与机体细胞和体液免疫。实验表明,铁筷子多糖在一定
剂量下增加荷瘤小鼠胸腺和脾脏重量,并且可明显提高荷瘤
小鼠体内细胞因子IL-1、TNFα和γIFN。因此我们认为铁
筷子多糖可能通过调节荷瘤小鼠体内免疫细胞和免疫分子
等发挥其正向免疫调节作用抑制体内肿瘤细胞生长。并且
铁筷子多糖抗肿瘤作用的有效剂量是1.0g/kg.d,符合《现
代肿瘤治疗药物学》关于抗肿瘤中草药有效性的标准(抑瘤
率>30%)。另外,铁筷子多糖Ⅱ组(剂量是1.0g/kg体重)
可明显提高荷瘤小鼠体内IL-3水平,促进骨髓干细胞增
殖,此作用在缓解肿瘤患者化疗、放疗后的骨髓造血功能
抑制有一定的应用价值。
[4] [5]
2.3统计处理
3结果
4讨论
表1铁筷子多糖抑制荷瘤小鼠S180肉瘤的生长
参考文献:
表2铁筷子多糖对荷瘤鼠胸腺、脾脏指数和淋巴细胞转化率的影响
表3铁筷子多糖对荷瘤鼠体内细胞因子的影响
(2)铁筷子多糖对荷瘤鼠胸腺、脾脏指数的影响。铁
筷子多糖可以增加荷瘤小鼠胸腺、脾脏重量,从而提高其胸
腺、脾脏指数。
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也应规定严格技术标准,如供精者的健康状
况,是否有传染病史和遗传性疾病史,是否有不良习惯和行
为,精液常规是否正常,精液冷冻后是否在准确使用,对已
设立的精子库应联网,保存供精者及其精子使用情况的档案
等。这样,不育者才可能会放心、大胆、没有后顾之忧地去
享受AID,享受医学技术进步所带来的种种益处。
(3)由于上述两个因素,可能导致医疗费用惊人增
长。这不仅使整个医疗费用在整个社会支出中比例增高,
而且使个人医疗费用也一直呈现成倍增长趋势,其中有不
法分子作祟,也有一些所谓有钱人从中作梗,借助ART钻法
律的空子生育多胞胎。医院也可能在利益驱动下,利用人
工受精技术为其达到生育双胞胎甚至三胞胎的目的。对于
想要多个小孩,而又不想违法的某些人,这也许就是所谓
的“万全之策”。这不仅破坏了卫生秩序,造成医药费用
大幅上涨,卫生资源浪费,而且给医院乃至社会都带来很
多负面影响。由此可见,技术不当使用,不仅会带来人口
增长负面效应,带来医疗费用的不正当竞争,而且也给那
些急需就医生育小孩而没有条件得到就医的贫困女性来
说,所带来身体与精神上的痛苦是无法形容的。
公益原则的实质是如何使利益分配更合理,更符合大
多数人的利益,它体现的是更大意义和范围上的公正。医
务人员应该从社会、人类和后代的利益出发,公正合理地
解决医疗活动中出现的各种利益矛盾,用恰当的国家干预
来确保医疗卫生秩序的良性运行,实行诸如财政、社会、
福利政策等来实现或满足绝大多数人的共同利益,才能在
ART的实际操作中,更好的满足不育人群生育的迫切需要。
参考文献:
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49
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