全 文 ：VETERINARYPHARMACEUTICALS&FEEDADDITIVES
营养与饲料兽药与饲料添加剂 2005年第10卷第5期
蕨麻又名人参果,为蔷薇科植物鹅绒委陵菜的
干燥块根,始载于《西藏常用中药材》,藏医称“卓老
洒曾”。该药具有健脾益胃,生津止咳,益气补血之
功,用于各种出血及下痢、脾胃虚弱等症。据文献记
载,蕨麻中含有糅质、糖类、蛋白质、脂肪酸及委陵
菜苷等化学成分,药理实验结果表明蕨麻水提物具
有提高机体免疫力、抗疲劳、耐缺氧和止泻抑菌的
作用,推测蕨麻多糖(PAP)为蕨麻活性成分之一。杨
桦等从蕨麻中提取分离出了多糖成分,并测定了总
糖含量[1]。本实验应用环磷酰胺(Cy)复制免疫抑制
模型,观察了PAP对Cy引起的免疫抑制的拮抗作
用,以期探讨PAP的免疫药理学活性。
1 材料与方法
1.1 动物
昆明种小鼠,体重 18～20g,雄性,由中牧股份
兰州生物药厂实验动物室提供。
1.2 药物
蕨麻购自青海玉树藏族自治州名贵中药材贸
易公司。PAP由本所新兽药工程研究室分离提取,
为灰白色粉末,易溶于水,不溶于乙醇、丙酮、乙醚
等有机溶剂。用时配制为0.4%生理盐水溶液,高压
灭菌备用。Cy为上海华联制药有限公司产品。
1.3 仪器和试剂
岛津UV-3000紫外可见光分光光度计;谷胱甘
肽(GSH)、一氧化氮(NO)及丙二醛(MDA)水平测定
试剂盒购自南京建成生物工程研究所。
1.4 实验方法
选用 8周龄、体重 18～20g的昆明种小鼠 60
只,随机均分为 6组,每组 10只,分笼饲喂。第Ⅰ
组:生理盐水对照组,腹腔注射 0.9%NaCl灭菌溶
液0.5mL,每日1次,共7次;第Ⅱ组:Cy对照组,腹
腔注射Cy灭菌溶液,100mg/kg体重,一次给药;第
Ⅲ组:腹腔注射Cy100mg/kg体重和PAP50mg/kg
体重,每日 1次,共 7次;第Ⅳ组:腹腔注射 Cy100
mg/kg体重和 PAP100mg/kg体重,每日 1次,共 7
次;第Ⅴ组:腹腔注射 Cy100mg/kg体重和 PAP
200mg/kg体重,每日1次,共 7次;第Ⅵ组:PAP对
照组,腹腔注射 PAP200mg/kg体重,每日 1次,共
7次。用药第8天,所有供试鼠断椎处死,按常规方
法采集血样并分离血清备用;取脾脏、胸腺称重后
于冰浴中制备匀浆,离心后取上清液备用。检测指
标:体重,脾脏指数,胸腺指数,脾脏、胸腺匀浆和血
清中 NO(Griess法)、GSH (DTNB显色法)、MDA
(TBA显色法)的含量。
2 结果
注射Cy后,小鼠脾脏指数和胸腺指数均明显
降低,PAP处理后小鼠脾脏指数明显提高,但对Cy
引起的胸腺指数降低无作用,见表1。PAP能升高免
疫抑制小鼠脾脏和胸腺中 GSH含量、降低 MDA水
平,也能降低胸腺中NO含量,但对小鼠脾脏NO含
量无影响,详见表2、3。
基金项目:国家自然科学基金项目“天然多糖免疫调控
与活性氧信号转导关系的研究”(30371056)
蕨麻多糖的免疫药理实验研究
陈炅然,胡庭俊,程富胜,梁纪兰
(中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所,甘肃 兰州 730050)
摘 要 蕨麻多糖50～200mg/kg体重腹腔注射,能提高小鼠脾脏指数,提高免疫抑制小鼠脾脏和胸腺中谷胱甘
肽水平,能降低丙二醇水平,并降低免疫抑制小鼠胸腺中一氧化氮含量,表明蕨麻多糖能不同程度地拮抗环磷酰胺
引起的免疫抑制,并可通过调节机体内自由基水平及氧化还原信号的传递而影响机体免疫系统的功能。
关键词 蕨麻多糖 环磷酰胺 免疫调节 谷胱甘肽 一氧化氮 丙二醛
中图分类号:S853.74 文献标识码:A 文章编号:1007-9157(2005)05-0001-02
试 验 研 究
1
营养与饲料 兽药与饲料添加剂 2005年第10卷第5期
VETERINARYPHARMACEUTICALS&FEEDADDITIVES
3 讨论
(1)脾脏指数和胸腺指数是反映动物机体免疫
功能的指标,被广泛用于评价机体的整体免疫状
态。本研究结果表明,体内注射PAP能提高小鼠脾
脏指数,表明该多糖能促进免疫抑制小鼠脾脏淋巴
细胞的增殖,对抗环磷酰胺引起的免疫抑制。这种
免疫增强作用,可能是蕨麻作为补益药物的重要药
理作用之一。
(2)GSH是一种由甘氨酸、半胱氨酸和γ-谷氨
酰基组成的含巯基的非蛋白抗氧化剂,也是机体内
所含的非蛋白巯基化合物数量最多和巯基数最高
的化合物。GSH在整个机体氧化还原链中和维持机
体内环境自稳态方面起着关键作用[2]。生物膜是由
脂质和蛋白质组成的流动镶嵌结构,过氧化可使膜
不饱和脂肪酸减少,膜的流动性变低,导致膜功能
异常。MDA是不饱和脂肪酸过氧化产物之一,其产
量反映过氧化的程度[2,3]。PAP能提高免疫抑制小鼠
脾脏和胸腺中GSH水平,并能降低 MDA水平,表
明PAP可清除自由基或是一种自由基反应抑制剂,
通过调节机体内自由基水平及氧化还原信号的传
递而影响机体免疫系统的功能。
(3)自 1987年 Palmer等报道 NO为内皮细胞
松弛因子以来,大量的有关NO的研究相继报道。研
究发现,NO除具有扩张血管,松弛平滑肌等血管活
性外,还具有信号传递、酶活性调节、免疫调节、抑
制血小板聚集及抗氧化损伤等生物学活性;此外,
NO可导致多种氧化损伤,是许多病理过程的重要
原因之一。研究表明,NO过量诱生可能是严重感染
诱发全身性炎症反应的最后共同通路。因此,从多
个环节、不同水平对NO的产生和作用进行干预,有
望为严重感染的防治提供有效的辅助治疗措施[4]。
NO的前体物质是左旋精氨酸,NO是亲脂性物质,
直接扩散至邻近靶细胞,与其胞内的可溶性鸟苷酸
环化酶结合,促使三磷酸鸟苷转化为环磷酸鸟苷
(cGMP);NO还可能通过多种非 cGMP依赖性途径
影响基因转录,信使核糖核酸翻译和蛋白质翻译后
加工,从而发挥生物学作用。而持续大剂量NO释放
可致组织细胞明显损伤,成为一种细胞毒性分子。
本研究表明,PAP能降低免疫抑制小鼠胸腺中 NO
含量,说明该多糖对NO介导的胸腺细胞氧化应激
具有调节作用,从而调控免疫细胞的生理功能。
参 考 文 献
[1] 杨桦,贾旭,易红.藏药蕨麻中多糖的含量测定研究[J].中草
药,2001,32(1):29～31.
[2] 孙存普,张建中,段绍瑾.自由基生物学导论[M].第1版.合肥:
中国科学技术大学出版社,1999.280～281.
[3] 郑荣梁.自由基生物学[M].第 1版.北京:高等教育出版社,
1992.96～97.
[4] 方允中,郑荣梁.自由基生物学的理论与应用[M].第 1版.北
京:科学出版社,2002.49.
作者简介:陈炅然(1968-),女,硕士,副研究员,现从事中药免
疫药理方面研究工作。电话:0931-2651548,E-mail:chenjion-
gran@yahoo.com.cn。
[收稿日期:2005-05-31]
表1 不同剂量PAP对Cy致免疫抑制小鼠胸腺指数
及脾脏指数的影响(X±SD) mg·g-1
组别 胸腺指数 脾脏指数
Ⅰ组 5.89±0.80 9.65±0.70
Ⅱ组 3.38±0.80 6.80±0.80#
Ⅲ组 3.72±0.70 12.97±0.40*
Ⅳ组 3.41±0.60 13.58±0.50**
Ⅴ组 3.21±0.98 17.66±1.20**
Ⅵ组 4.16±0.80 11.25±0.70**
注:*P<0.05和**P<0.01表示与单一Cy处理组(Ⅱ组)比较,
差异显著和极显著;#P<0.05,##P<0.01表示与生理盐水对照组(Ⅰ
组)比较,差异显著和极显著。以下同。
表2 PAP对小鼠胸腺GSH、MDA、NO水平的影响(X±SD)
组别 GSH/ng·mg-1
c(MDA)
/nmol·mL-1
c(NO)
/nmol·mL-1
Ⅰ组 110.22±2.90 0.498±0.10 148.88±12.36
Ⅱ组 82.67±3.70# 0.684±0.20 275.62±21.89#
Ⅲ组 121.64±4.80* 0.472±0.15 209.71±12.56*
Ⅳ组 118.79±6.80* 0.660±0.13 165.21±17.53*
Ⅴ组 115.91±5.80* 0.540±0.18 173.66±14.23*
Ⅵ组 117.18±4.86* 0.350±0.14* 125.22±13.68*
表3 PAP对小鼠脾脏GSH、MDA、NO水平的影响(X±SD)
组别 GSH/ng·mg-1
c(MDA)
/nmol·mL-1
c(NO)
/nmol·mL-1
Ⅰ组 96.20±2.90 0.48±0.11 51.14±12.36
Ⅱ组 41.66±3.70## 0.73±0.22# 58.89±21.80
Ⅲ组 88.73±4.80** 0.35±0.15* 60.29±11.56
Ⅳ组 80.89±6.80** 0.48±0.14* 66.63±10.53
Ⅴ组 75.41±5.80** 0.20±0.17** 66.63±7.23
Ⅵ组 100.01±4.80** 0.42±0.15* 54.66±8.68
试 验 研 究
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