全 文 ：　山 东 农 业 科 学　2010, 4:34 ～ 36 ShandongAgriculturalSciences
收稿日期:2010-02-03
基金项目:山东省自然科学基金项目 “几种植物抑癌成分的提取 、分离 、纯化及分子结构的追踪 ”(Y2006B27)。
作者简介:王　雪(1984-),女 ,在读硕士 ,研究方向:植物生理及分子生物学;E-mail:kinow-wang@ 163.com
＊通讯作者:李桂凤(1953-),女 ,研究员 ,研究方向为天然产物-分子追踪。E-mail:tianshu1858@sina.com
寻骨风化学成分研究
王　雪1 ,刘为忠 2 ,沈云修2 ,毛江胜 3 ,王乐军 3 ,李桂凤3＊
(1.山东师范大学生命科学院 ,山东 济南　250014;2.滨州医学院 ,山东 滨州　256603;
3.山东省农业科学院中心实验室 , 山东 济南　250100)
　　摘　要:为探明马兜铃科植物寻骨风(AristolochiamollissimaHance)的有效成分 , 从而为制定中药寻骨风
的质量标准提供科学依据。采用硅胶柱层析 、SephadexLH-20凝胶柱分离等色谱技术分离纯化其化合物 ,并
根据光谱数据进行结构鉴定 。结果共分离鉴定了马兜铃内酯 、马兜铃酸 A、马兜铃酸萜酯Ⅰ 、β -谷甾醇 、银袋
内酯乙五种化合物。
关键词:寻骨风;化学成分;结构鉴定
中图分类号:R282.71;Q501　　文献标识号:A　　文章编号:1001-4942(2010)04-0034-03
StudyonChemicalConstituentsofAristolochiamolisimaHance
WANGXue1 , LIUWei-zhong2 , SHENYun-xiu2 , MAOJiang-sheng3 ,
WANGLe-jun3 , LIGui-feng3＊
(1.ColegeofLifeScience, ShandongNormalUniversity, Jinan250014, China;
2.BinzhouMedicalUniversity, Binzhou256603, China;
3.CentralLaboratoryofShandongAcademyofAgriculturalSciences, Jinan250100, China)
Abstract　TheefectivechemicalconstituentsinAristolochiamolisimaHancewerestudiedtoprovide
scientificbasisforformulatingitsqualitystandard.Theconstituentswereisolatedandpurifiedbythesilicagel
columnchromatography, SephadexLH-20gelcolumndetectionandsoon, andthentheirstructureswerei-
dentifiedaccordingtothephysicochemicalpropertiesandthecomparisontoauthenticsamples.Fiveknown
compoundswereisolatedfromtheextractofAristolochiamolisimaHance, whichwereidentifiedasAristolo-
lactone, AristolochicacidA, AristoloterpenateⅠ , β -sitosterolandVersicolactoneB.
Keywords　AristolochiamolissimaHance;Chemicalconstituents;Structuralidentification
　　寻骨风是一种中药 , 药用历史悠久 [ 1, 2] 。主
治肺热咳嗽 ,痰结喘促 ,血痔瘘疮 ,能够清肺气 ,补
肺 ,去肺中湿热;去风湿 、通络 、止痛 ,用于肢体麻
木 、风湿痺痛 、胃痛 、跌打损伤疼痛;还具有抗肿
瘤 、抗炎 、抗风湿 、抗早孕等作用 。动物实验结果
表明其对小鼠 -S37肿瘤有抑制作用 。本试验对
其化学成分进行了较为详细的研究 ,从中发现了
马兜铃内酯 、马兜铃酸 A、马兜铃酸萜酯Ⅰ 、β -谷
甾醇 、银袋内酯乙五种有效成分 ,为制定中药寻骨
风的质量标准提供科学依据。
1　仪器与材料
超导核磁共振仪 BrukerAM-400型;柱层析
硅胶(200 ～ 300目),薄层层析硅胶 GF254(10 ～
40 μm,青岛海洋化工厂);薄层(TLC)检测用 254
nm紫外灯 , SephadexLH-20凝胶柱 ,辅以 5%
H2SO4 -乙醇溶液 ,加热显色;旋转蒸发仪全套装
置(HeidolphLaborata4000eficient);所用试剂均
为分析纯。
试验样品寻骨风于 2007年 8月 18日采集于
DOI :10.14083/j.issn.1001-4942.2010.04.040
沂南县 ,由山东师范大学生命科学学院李法曾教
授鉴定 。洗净后在 50℃下烘干 ,粉碎过 20目筛
备用。标本保存于山东省农业科学院中心实验室
课题组(编号:zxs-190)。
2　提取与分离
将干燥粉碎的寻骨风室温下用工业甲醇浸泡
提取 4次 ,每次浸泡 5天 ,期间经常摇晃。合并提
取液 ,真空减压浓缩得到粘稠浸膏 。总浸膏依次
用石油醚 、乙酸乙酯 、正丁醇各萃取 3次。分别合
并各萃取液 , 真空减压浓缩得到石油醚部位
87.69 g, 乙酸乙酯部位 76.91 g, 正丁醇部位
40.00g。
石油醚部位 ,拌样上硅胶柱(300目),经硅胶
柱层析 ,以石油醚 -氯仿 -甲醇梯度洗脱(溶剂
体系依次为石油醚 /氯仿 100∶0, 100∶1, 50∶1,
25∶1, 10∶1, 5∶1, 2∶1, 1∶1;氯仿 /甲醇 100∶
0, 100∶1, 50∶1, 25∶1, 10∶1, 5∶1, 2∶1 , 1∶1,
0∶100),洗脱液经减压浓缩 ,薄层检测后合为
136个组分 。其中 ,从石油醚 /氯仿(1∶1)洗脱分
离的 52 ～ 81号组分中 ,得到白色针状晶体Ⅳ。
乙酸乙酯部位 ,拌样上硅胶柱(300目),经多
次硅胶柱层析 ,以纯氯仿开始梯度洗脱 ,共得 184
个组分 。其中 ,氯仿 /甲醇 (200∶1)洗脱时得到
化合物 Ⅲ。合并 177 ～ 183号 ,拌样上硅胶柱(300
目)层析 ,以氯仿 /甲醇(500∶1)开始梯度洗脱 ,
在氯仿 /甲醇 (500∶20)洗脱时获得化合物 Ⅱ。
经多次硅胶柱层析以及凝胶柱 SephadexLH-20
分离 ,依次获得化合物 Ⅰ和化合物Ⅴ。
3　结构鉴定
化合物 Ⅰ:白色针状晶体(氯仿)。1H-NMR
(600MHz, CDCl3)δ:4.604(d, H-2), 6.662(s,
H-6), 4.713(s, H-7), 1.924(s, H-8), 1.493
(s, H-12), 1.827(s, H-14), 4.834 (s, H-
15a), 4.987(s, H-15b)。13 C-NMR(600 MHz,
CDCl3)δ:132.8000(s, C-1), 128.978(d, C-
2), 26.447(t, C-3), 52.625(d, C-4), 137.249
(s, C-5), 152.816(d, C-6), 82.749(d, C-7),
25.441(t, C-8), 20.336(q, C-9), 41.173(t, C
-10), 150.738(s, C-11), 15.807 (q, C-12),
173.842(s, C-13), 24.697(t, C-14), 110.708
(t, C-15)。氢 、碳谱数据与文献 [ 4]值相符 ,故
该化合物应为马兜铃内酯(Aristololactone),结构
式见图 1。
化合物 Ⅱ:黄色针晶 ,与 10%硫酸反应呈绿
色 。1H-NMR(600MHz, DMSO)δ:7.799(s, H-
2), 8.588(d, H-5), 7.812(t, H-6), 7.330(d, H
-7), 8.561(s, H-9), 6.469(s, CH2 4.036(s, CH3 -O)。13C-NMR(600MHz, DMSO)
δ:129.867(C-1), 119.537(C-2), 146.041(C
-3), 145.650(C-4), 117.281(C-4a),
118.796(C-4b), 112.223 (C-5), 118.431(C-
6), 108.895(C-7), 146.041(C-8), 124.253(C
-8a), 131.643(C-9), 156.339(C-10),
116.852(C-10a), 167.792(-COOH), 103.015
(CH2 文献 [ 4]值一致 ,故化合物 I为马兜铃酸 A(Aris-
tolochicacidA),结构式见图 1。
化合物 Ⅲ:黄色细针状晶体 (氯仿)。1H-
NMR(600MHz, CDCl3)δ:7.723(s, H-2), 8.668
(d, H-5), 7.702(t, H-6), 7.097(d, H-7),
8.842(s, H-9), 6.366(s, H-12), 4.062 (s, H-
13), 10.264(s, H-1′), 6.084(d, H-3′), 6.377
(dt, H-4′), 2.390 ～ 2.728(mq, dm, H-5′),
5.044(dm, H-7′), 2.001 ～ 2.339(m, m, H-8′),
2.020 ～ 2.190(m, dm, H-9′), 4.818(dm, H-
11′), 2.055 ～ 2.429(m, m, H-12′), 1.789 ～
2.840(td, dm, H-13′), 1.621(s, H-14′), 1.330
(s, H-15′)。13 C-NMR(600 MHz, CDCl3)δ:
123.261(C-1), 112.831(C-2), 145.857(C-
3), 146.637(C-4), 118.364(C-4a), 130.801
(C-4b), 119.059 (C-5), 131.031(C-6),
107.892(C-7), 156.844(C-8), 120.060(C-
8a), 121.311(C-9), 145.531(C-10), 118.181
(C-10a), 166.072(C-11), 102.366 (C-12),
55.942(C-13), 191.185(C-1′), 141.780(C-
2′), 144.440(C-3′), 67.607(C-4′), 44.934
(C-5′), 128.508(C-6′), 130.64(C-7′),
25.076(C-8′), 39.660(C-9′), 135.045(C-
10′), 125.235(C-11′), 25.974 (C-12′),
31.698 (C-13′), 15.965(C-14′), 14.930(C-
15′)。氢 、碳谱数据与文献 [ 6]值一致 ,故鉴定该
化合物为马兜铃酸萜酯 Ⅰ (AristoloterpenateⅠ ),
结构式见图 1。
35　第 4期　　　　　　　　　王　雪等:寻骨风化学成分研究
化合物 Ⅳ:白色 针晶 (氯 仿 ), 分子 式
C29H50O。 10%硫酸溶液显色呈紫红色。1H-NMR
(600MHz, CDCl3)δ:3.529(m, H-3), 5.368(m,
H-6), 0.691(s, Me-18), 1.020(s, Me-19),
0.927(d, Me-21)。13C-NMR(600 MHz, CDCl3)
δ:37.205(C-1, t), 31.240(C-2, t), 71.814(C
-3, d), 42.314(C-4, t), 140.763(C-5, s),
121.731(C-6 , d), 31.904(C-7, t), 31.674(C-
8, d), 51.240(C-9, d), 36.508(C-10, s),
21.084(C-11, t), 39.771(C-12, t), 42.314(C
-13, s), 56.765(C-14, d), 24.306(C-15, t),
28.251(C-16, t), 56.046(C-17, d), 11.863(C
-18, q), 19.404(C-19 , q), 36.149(C-20 , d),
18.780(C-21, q), 33.940(C-22, t), 26.053(C
-23, t), 45.830(C-24, d), 29.138(C-25, d),
19.827(C-26, q), 19.029(C-27, q), 23.060(C
-28, t), 11.984(C-29, q)。氢 、碳谱数据与文
献 [ 7]值一致 ,故鉴定该化合物为 β -谷甾醇(β
-sitosterol),结构式如图 1。
化合物 Ⅴ:白色冰花状结晶 (氯仿)。1H-
NMR(600MHz, CDCl3)δ:4.241(dd, H-1b),
6.740(s, H-5), 5.069(s, H-5), 4.895(d, H-
9), 1.894(dd, H-12), 4.902(m, H-13a), 5.005
(s, H-13b), 1.602(t, H-14)。13 C-NMR(600
MHz, CDCl3)δ:79.360(C-1), 24.254(C-2),
25.424(C-3), 136.032(C-4), 150.013(C-
5), 83.587(C-6), 46.030(C-7), 28.139(C-
8), 132.086(C-9), 131.653(C-10), 147.042
(C-11), 21.332(C-12), 112.528(C-13),
10.057(C-14), 173.215(C-15)。氢 、碳谱数据
与文献值 [ 8]一致 ,故鉴定该化合物为银袋内酯
乙(VersicolactoneB),结构式见图 1。
图 1　化合物Ⅰ ～ Ⅴ的结构
参　考　文　献:
[ 1] 　李时珍著 ,紫图编绘 .图解本草纲目 [ M] .西安:陕西师范
大学出版社 , 2007, 319.
[ 2] 　张秀成编著 .现代实用抗癌中药 [ M] .北京:北京科学技
术出版社 , 1999, 61-62.
[ 3] 　吴立军主编 .有机化合物波谱解析 [ M] .北京:中国医药
科技出版社 , 2009, 117-170.
[ 4] 　王夕红,韩桂秋 .昆明马兜铃的化学成分 [ J].云南植物研
究 , 1993, 15(3):306-308.
[ 5] 　楼凤昌 ,彭国平 ,李红阳 .木通马兜铃中马兜铃酸萜酯Ⅰ的
结构解析[ J] .南京中医药大学学报 , 1996, 12(4):22-24.
[ 6] 　彭国平 ,楼凤昌 ,王　颖 ,等 .马兜铃酸的倍半萜的酯类化
合物 Ⅶ 绵毛马兜铃中马兜铃酸萜酯Ⅰ的结构鉴定 [ J] .药
学学报 , 1996, 31(6):446-450.
[ 7] 　黄　帅 ,周先礼 ,王洪燕 ,等 .西昌万寿菊花中化学成分的
研究 [ J] .天然产物研究与开发 , 2006, 18(1):57-59.
[ 8] 　张　玖 ,何林兴 .变色马兜铃中银袋内酯乙 、丙的结构测定
[ J].药学学报 , 1986, 21(4):273-278.
36 山 东 农 业 科 学　　　　　　　　　　　　　　2010年