全 文 ：模型组大鼠前列腺内 IL-1β 、TNF-α含量显著高于正常
对照组(P<0.01), 用药后 ,四黄前列片各剂量组均可降低
IL-1β、TNF-α含量。见表 3。
表 3 对大鼠前列腺组织匀浆 IL-1β 、TNF-α含量
的影响(x±s)
组别 n IL-1β(ng/L) TNF-α(ng/L)
正常组 10 10.89±3.12 86.98±35.32
模型组 10 45.84±7.84＊＊ 201.68±49.11＊＊
四黄前列片低剂量组 10 30.22±6.18＊ 115.74±32.71■
四黄前列片中剂量组 10 27.10±5.13■ 103.03±20.59■
四黄前列片高剂量组 10 15.67±4.26■ 101.53±30.35■
与正常组比较:＊P<0.05;＊＊P<0.01;与模型组比较:■P<
0.01。
3 讨论
CP的病因复杂 , 在慢性炎症过程中 ,自始至终都伴有细
胞因子的异常表达。 Alexander等报告 [4] , 慢性前列腺炎 /盆
底疼痛综合征(chronicprostatitis/chronicpelvicpainsyndrome,
CP/CPPS)患者精液中 TNF-α及 IL-1β 水平显著高于同龄组
正常男子。本实验表明 , CP模型大鼠前列腺组织中 TNF-α
及 IL-1β 含量明显升高 ,而四黄前列片可降低细胞因子的含
量 , 从而减轻炎细胞浸润 ,抑制成纤维细胞的增殖和 ECM在
前列腺间质内的沉积 ,发挥重要的抗炎 、抗纤维化作用。
四黄前列片由黄柏 、大黄 、黄芪 、黄精 、蛇床子等 12药物
组成。方中黄柏主要含小檗碱 、黄柏碱等多种生物碱。 小檗
碱体外试验对金黄色葡萄球菌 、痢疾杆菌等均有抑制作用;
具有 α-肾上腺素受体阻滞剂作用 , 可缓解平滑肌痉挛 , 减轻
尿道阻力 , 从而缓解前列腺炎症状 [ 5];同时黄柏煎剂还可抑
制 IL-1、TNF-α、IL-2等细胞因子的产生和分泌 , 从而抑制免
疫反应 ,减轻炎症损伤 [ 6] 。大黄苦寒清热解毒 、抗菌消炎功
效显著 ,对导致 CP常见的大肠埃希菌 、金黄色葡萄球菌等
病原体有较强的抑制作用 , 并有活血化瘀 、通便排毒之功 ,为
治疗 CP重要药物。黄芪益气扶正 , 能增加网状内皮系统的
吞噬功能 ,可明显降低 TNF水平 , 诱导 γ干扰素的产生 , 提
高机体抗病能力。综上所述 ,现代药理研究表明四黄前列片
的组成药物具有抗炎 、抑菌 、改善微循环和调节机体免疫功
能等作用。
总之 , CP病因和发病机制非常复杂 , 细胞因子的异常表
达参与了本病的发生 、发展 , 而减少炎症细胞因子(IL-1β 、
TNF-α)产生可能是四黄前列片治疗 CP的作用机理之一。
参考文献:
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蕨麻对脾气虚证小鼠防治作用的实验研究
贾守宁
(青海省中医药研究所 ,西宁 810000)
收稿日期:2005-02-16
作者简介:贾守宁(1966～ ),副主任药师 ,研究方向:中药药理和毒理的研究 ,电话:0971-3679010。
关键词:蕨麻;药效学;脾虚证
中图分类号:R285.6 文献标识码:B 文章编号:1001-1528(2006)07-1044-02
蕨麻为蔷薇科植物鹅绒萎陵菜(PotentilaanserinaL)的
干燥根 , 始载于《四部医典》 , 是藏医的常用药材 , 具有补气
血 , 健脾胃 ,生津止渴 , 利湿之功效 , 主治病后贫血 , 营养不
良 , 脾虚腹泻 ,风湿痹痛等症 [ 1] 。本研究观察了蕨麻对脾气
虚证小鼠的防治作用 ,结果满意。现将实验结果总结报告如
下:
1 实验材料
昆明种小鼠:♀♂各半 , 体重 18 ～ 20 g,购自青海省实验
动物中心。 2, 4-二硝基氯苯:上海试剂一厂生产 , 批号:
980204。蕨麻:购自青海省药材市场 , 经鉴定为鹅绒委陵菜
(PotentillaanserinaL)的块根。
2 实验方法和结果
2.1 蕨麻对气虚证小鼠耐寒能力的影响
小鼠 120只 ,随机均分 6组 , 分别为盐水对照组 , 模型
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组 , 人参组 ,大 、中 、小 3个实验组。除对照组灌服生理盐水
外 , 其余各组按文献方法制作脾气虚证动物模型 [ 2] ,具体方
法为;实验小鼠喂饲大黄水煎剂 , 剂量为 1.2g/kg体重 , 连续
10天 , 造模第 4天 , 开始灌胃(ig)给药 , 模型组 ig20 mL/kg
生理盐水 , 人参组按 8g/kg体重 ig人参水煎液 ,蕨麻大 、中 、
小剂量组分别按 5.0 g/kg、10 g/kg、 20 g/kgig蕨麻水煎液 ,
给药体积均为 20 mL/kg。连续给药 7 d, 末次给药后 30min,
将各组实验动物同时置于 -10°C的冰箱中 , 观察当模型组
小鼠死亡约 2/3时 , 取出小鼠 , 记录各组死亡数 , 并进行 X2
检验。结果见表 1。
表 1 蕨麻对脾气虚证小鼠耐寒能力的影响
组别 剂量(g/kg) 动物数 死亡数 死亡率( )
对照组 — 20 10 50.0＊
模型组 — 20 17 85.0
人参组 8.0 20 11 55.0＊
大剂量组 20.0 20 10 50.0＊
中剂量组 10.0 20 14 70.0
小剂量组 5.0 20 15 75.0
同模型组比较:＊P<0.05。
结果表明:蕨麻大剂量组同模型组比较 , 能够明显提高
实验小鼠的抗寒能力 ,降低小鼠冻死率 , 说明蕨麻有明显的
抗寒作用。
2.2 蕨麻对脾气虚证小鼠游泳耐力的影响
小鼠 60只 ,随机均分 6组 ,分别为盐水对照组 , 模型组 ,
阳性对照组 , 大 、中 、小三个实验组。造摸分组和给药剂量均
与 2.1的方法相同 , 末次给药后 1h,每只小鼠负重 2.0 g, 于
15 °C的水温中游泳 ,以小鼠沉入水中溺死为指标 ,记录小鼠
负重游泳时间。结果见表 2。
表 2 蕨麻对脾气虚证小鼠游泳耐力的影响(x±s)
组别 剂量(g/kg) 动物数 游泳耐力时间(min)
对照组 — 10 48.5±8.94＊＊
模型组 — 10 23.5±6.58
人参组 8.0 10 33.51±8.02＊＊
大剂量组 20.0 10 33.23±7.84＊＊
中剂量组 10.0 10 30.20±5.76＊
小剂量组 5.0 10 29.31±6.52
同模型组比较:＊P<0.05, ＊＊P<0.01。
结果表明:蕨麻大 、中两个剂量组同模型组比较 ,都有明
显提高实验小鼠游泳耐力的作用 ,并具有很好的量效关系。
2.3 蕨麻对脾气虚证小鼠淋巴细胞功能的影响
小鼠 60只 ,随机均分 5组 , 分别为模型对照组 , 环磷酰
胺组 , 大 、中 、小三个实验组。按 2.1项方法制作脾气虚模
型 , 造模开始第 2 d, 以 1.25 二硝基氯苯丙酮溶液背部皮
下注射 0.02ml/只致敏 ,致敏当天开始 ig给药 ,每日一次 , 连
续 10天 , 环磷酰胺组于致敏当天 , 第 3, 5, 7, 9天皮下注射环
磷酰胺。致敏后第 8天 ,以 0.25 二硝基氯苯丙酮溶液皮下
注射足右后垫中间 , 0.02 ml/只 , 30h后取后双足 , 剪切等长
度部分 , 精确称重 ,以双足的重量差作为肿胀度 ,评价迟发性
超敏反应指标 , 结果见表 3。
表 3 蕨麻对脾气虚证小鼠迟发性超敏反应的影响(x±s)
组别 剂量(g/kg) 动物数 肿胀度(mg)
模型对照组 — 12 37.6±6.21
环磷酰胺组 — 12 30.5±8.41
大剂量组 20.0 12 41.5±8.56＊＊
由剂量组 10.0 12 38.5±7.28＊
小剂量组 5.0 12 38.4±7.31＊
同模型组比较:＊P<0.05, ＊＊P<0.01。
实验结果表明:蕨麻大 、中 、小 3个剂量组都有明显增加
脾气虚证小鼠足肿胀值的作用 ,说明对小鼠细胞免疫有促进
作用 ,并具有明显的量效关系。
2.4 蕨麻对脾气虚证小鼠免疫器官重量的影响
小鼠 60只 , 随机分为 6组 , 其中 5组以大黄水煎剂制作
脾气虚证动物模型 , 另一组正常喂养作为正常对照组 , 气虚
模型组随机分为对照组 ,人参组 , 蕨麻高 、中 、低剂量组 , 从造
模第 5日开始 ig给药 ,连续给药 10 d, 每天 1次 , 于第 15日
称重小鼠并处死 ,取胸腺 、脾脏精确称重 ,计算脏器系数 , 结
果见表 4。
表 4 蕨麻对脾气虚证小鼠免疫器官重量的影响(x±s)
组别 剂量(g/kg) 动物数
胸腺系数
(mg/g)
脾脏系数
(mg/g)
正常对照组 — 10 2.75±0.21＊＊ 5.26±0.74＊＊
模型对照组 — 10 1.84±0.30 3.28±0.54
人参组 8.0 10 2.18±0.28＊＊ 4.18±0.39＊＊
大剂量组 20.0 10 2.13±0.24＊ 4.09±0.41＊＊
中剂量组 10.0 10 2.00±0.35 3.73±0.34＊
小剂量组 5.0 10 2.02±0.28 3.60±0.40＊
同模型组比较:＊P<0.05, ＊＊P<0.01。
结果说明 ,蕨麻对脾气虚证小鼠免疫器官胸腺 , 脾脏的
萎缩有很好的保护作用。
3 讨论
祖国医学认为 ,脾胃为气血生化之源 ,脏腑经络之根 ,是
人体赖以生存的仓廪 , 故称 “脾为后天之本 ”, 同时脾居中
焦 ,为人体气机升降之纽 , 又是人体抗御病邪的重要防卫机
构 ,故曰 “内伤脾胃 ,百病由生。”因此脾胃在人体生理 、病理
以及疾病防治上具有重要作用。 目前脾虚证的动物模型的
制做方法主要有:大黄 、番泻叶法 , 饮食失节法 , 破气苦降 +
饮食失节法 ,过劳 +饮食失节法 , 偏食法和利血平法等。本
研究采用大黄致小鼠脾虚证模型的方法 , 主要是基于该方法
是一种研究较早 ,应用较广 , 被广泛认可的方法。大黄所致
的脾虚证动物模型可模拟出类似临床脾虚症状 , 如便溏 、纳
呆 、体量减轻 、体温偏低 、畏寒 、嗜卧 、脱肛 、背毛枯槁等 , 服用
“四君子汤” 后上述症状减轻或消失 ,机能恢复正常 , 这也充
分说明该实验模型能够在一定程度上代表人类的脾虚证 [ 3] 。
蕨麻是青藏高原特有的一种经济作物 , 虽然全国不少地
区都有鹅绒萎陵菜生长 , 但据《新华本草纲要》记载 “只有在
青藏高原 ,本品才有块根发育”,它即可以作为药物用来治病
强身 ,又可以作为食品以充饥美食。是当地极具开发前景的
药材 [ 4] 。
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参考文献:
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甘草酸二铵抗大鼠免疫性肝纤维化作用研究
欧 强 1 , 陈 良 1 , 谭德明2 , 李 萍 2
(1.上海市复旦大学附属 公共卫生中心感染科 ,上海 201508;2.中南大学湘雅医院感染病科 ,湖南 长沙
410011)
收稿日期:2005-02-10
作者简介:欧 强(1976～ ),男 ,湖南省吉首市人,住院医师 ,医学硕士 ,主要从事肝病和艾滋病防治工作的研究。
关键词:甘草酸二铵;免疫性;肝纤维化
中图分类号:R285.5 文献标识码:B 文章编号:1001-1528(2006)07-1046-02
肝纤维化是各类肝实质性损害转向肝硬化共同的病理
环节 [ 1] 。阻止病程向肝纤维化进展是治疗各种慢性肝病的
重要手段。甘草酸二铵(商品名 “甘利欣 ”)是从甘草中提取
的 α体甘草酸二铵盐 , 有确切的保肝作用 [ 2, 3] 。 但关于甘草
酸二铵抗肝纤维化作用及其机制的研究报道少见。我们采
用异源血清复制大鼠免疫性肝纤维化模型 ,观察其抗实验性
肝纤维化的作用 , 并探讨其抗肝纤维化的机制 , 现将结果报
道如下。
1 材料与方法
1.1 实验材料
1.1.1 研究动物 SD♀大鼠 24只 , 清洁级 , 体重 100 ～ 120
g, 购于中南大学湘雅医学院动物实验部。普通饮食 ,自由进
食饮水。
1.1.2 药品及试剂 甘草酸二铵(商品名 “甘利欣 ”), 由江
苏正人天晴药业股份有限公司提供。小牛血清 ,购于北京鼎
国生物技术有限责任公司。丙二醛(MDA)、超氧化物歧化
酶(SOD)试剂盒购于南京建成生物研究工程所。 透明质酸
(HA)、层粘连蛋白(LN)放射免疫试剂盒由上海生物技术有
限公司提供。
1.2 方法
1.2.1 动物模型制备 腹腔注射小牛血清 , 0.5 mL/次 /只 ,
每周 2次 , 共 12周 ,复制大鼠免疫性肝纤维化模型 [ 4]。
1.2.2 分组与给药 大鼠按体重随机分为正常对照组 、肝
纤维化模型组和甘草酸二铵干预组各 8只。甘草酸二铵组
干预在造模的同时每日以 7mg/100 g大鼠体重(65 kg成人
临床口服量 450 mg/d, 大鼠用其等体重的 10倍量)灌胃 1
次 , 连续 12周。正常对照组每日灌等量生理盐水(NS), 同
时腹腔注射 NS, 0.5 mL/次 /只 ,每周 2次 , 共 12周。
1.2.3 观察指标 给药 12周末 , 所有动物禁食 , 不禁水 , 24
h后以水合氯醛 1 mL腹腔注射麻醉 , 自前正中线暴露腹腔
及胸腔 , 先用无菌注射器自心脏每只采血 4 mL, 8000 r/min
离 心收取血清 ,试剂盒说明书操作检测 MDA、SOD、HA、LN。
同时取出大鼠肝脏 ,分别做 HE染色及 Masson胶原染色。
1.3 统计学方法
计量资料以 x±s表示 ,采用组间均数 t检验。所有数据
均在计算机中经 SPSS10.0统计软件处理。
2 结果
2.1 甘草酸二铵对血清肝纤维化指标的影响
结果显示甘草酸二铵干预组 HA、LN均较肝纤维化模型
组不同程度降低 , 两组比较有显著性差异(P<0.05或 P<
0.01),见表 1。
表 1 甘草酸二铵对血清肝纤维化指标的影响(x±s)
分组 n HA(ng/mL) LN(ng/mL)
对照组 8 42.1±20.8 36.7±19.2
模型组 8 158.4±57.6＊ 95.4±20.1＊＊
干预组 8 79.5±23.5＊＊ 48.2±24.6##
注:与对照组比较:＊P<0.05, ＊＊P<0.01;与模型组相比:#P<
0.05, ##P<0.01。
2.2 甘草酸二铵对脂质氧化的影响
与肝纤维化模型组相比较 , 甘草酸二铵干预组血清
MDA浓度降低 、SOD浓度升高 , 差异有显著性(P<0.05或
P<0.01), 见表 2。
2.3 甘草酸二铵对肝脏病理变化的影响
正常对照组人鼠肝组织结构正常 , 汇管区 、肝窦结构清
晰 , Masson胶原染色未见纤维结缔组织增生:肝纤维化模型
组大鼠正常肝小叶结构破坏 , 肝组织广泛微泡样脂肪变性 ,
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