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收稿日期：2016-01-04
赤苍藤和密蒙花多糖的含量测定及抗氧化研究
潘乔丹1，黄元河1，*，唐海燕2，农静羽1，韦贤1，陆海峰1，黄锁义1
（1.右江民族医学院，广西百色 533000；2.梧州职业学院，广西梧州 543000）
摘 要：采用苯酚-硫酸比色法测定两种药食同源植物赤苍藤和密蒙花多糖的含量，并采用 DPPH法、水杨酸法、ABTS
法以及 FRAP法测定其粗多糖的抗氧化性能。结果表明，赤苍藤和密蒙花的多糖含量分别为 30.78、190.89 mg/g；赤苍藤
多糖和密蒙花多糖清除·OH和 ABTS+·的能力均强于 VE，其 Fe3+还原/抗氧化能力均强于 VC，且赤苍藤多糖的清除
DPPH·能力和 Fe3+还原/抗氧化能力均强于 VE，密蒙花多糖清除·OH能力强于 VC。
关键词：赤苍藤；密蒙花；多糖含量；抗氧化
Content Determination and Antioxidant Activity of Polysaccharides of Erythropalum scandens Bl. and
Buddleja officinalis Maxim
PAN Qiao-dan1，HUANG Yuan-he1，*，TANG Hai-yan2，NONG Jing-yu1，
WEI Xian1，LU Hai-feng1，HUANG Suo-yi1
（1.Youjiang Medical University for Nationalities，Baise 533000，Guangxi，China；2. Wuzhou Vocational
College，Wuzhou 543000，Guangxi，China）
Abstract：The contents of polysaccharides of Erythropalum scandens Bl. and Buddleja officinalis Maxim were
食品研究与开发
Food Research And Development
2016年 11月
第 37卷第 22期
DOI：10.3969/j.issn.1005-6521.2016.22.002
基金项目：中医药公共卫生专项“国家基本药物所需中药原料资源调查和监测项目”（财社[2011]76号）；中医药行业科研专项“我国代表性
区域特色中药资源保护利用”（201207002）；广西高校中青年教师基础能力提升项目（KY2016YB350）
作者简介：潘乔丹（1980—），女（汉），副教授，硕士，主要从事天然产物化学研究。
*通信作者：黄元河（1979—），硕士，主要从事中药资源研究。
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基础研究
6
药食同源植物赤苍藤（Erythropalum scandens Bl.）
为铁青树科植物，别名为蚂蟥藤、十丈藤、龙须藤等。
其性平，微苦，具清热利湿、祛风活血的功效，主治水
肿、小便不利、黄疸、半身不遂、风湿骨痛和跌打损伤等[1]，
在民间用于清热利湿、去黄疸，其嫩叶、茎可食用。药
食同源植物密蒙花（Buddleja officinalis Maxim）为马钱
科植物，又名小锦花、蒙花、黄饭花等。其味甘，性微寒，有
清热养肝、明目退翳之功，具有治疗眼部疾病、抗炎、降
糖等生物活性[2]，“三月三”节日期间，广西壮族人民喜用
其煮水，作为黄色染料，浸泡糯米染色，制作五色糯米
饭。至今为止有关赤苍藤和密蒙花的多糖含量及其抗
氧化性能方面的研究鲜见报道。因此本研究测定赤苍
藤和密蒙花多糖的含量，并对其抗氧化性能进行考察，
为赤苍藤和密蒙花的进一步开发利用提供理论参考。
1 材料与方法
1.1 仪器
DHG-9070A型电热恒温鼓风干燥箱、HHS-21-4
电热式恒温水浴锅：江苏金坛宏凯仪器厂；FA1004型电
子天平：上海舜宇恒平科学仪器有限公司；KQ5200DB型
数控超声波清洗器：昆山市超声仪器有限公司；RE-
52AA型旋转蒸发仪：上海亚荣仪器厂；TU-1800紫外
可见分光光度计：北京普析通用仪器有限责任公司。
1.2 药材
赤苍藤（Erythropalum scandens Bl.）的茎和密蒙花
（Buddleja officinalis Maxim）的花：均采自广西百色，干
燥粉碎后备用。
1.3 试剂
葡萄糖标准品：J＆K CHEMICAL LTD；1，1-二苯
基-2-苦基肼自由基（DPPH）：上海楷洋生物技术有限
公司；2，2＇-连氨-（3-乙基苯并噻唑林-6-磺酸）二氨
盐（ABTS）：生工生物公司；三吡啶三吖嗪（tripyridyl-
triazine，TPTZ）：Aladdin；VC：天津博迪化工股份有限公
司；VE：上海楷洋生物技术有限公司；其他试剂均为分
析纯。
1.4 方法
1.4.1 多糖的提取
称取赤苍藤和密蒙花的干燥粉末各 50.0 g，分别
先用石油醚回流脱脂两次（1 h/次），再用 95 %乙醇回
流提取两次（2 h/次），以除去单糖和低聚糖，将药渣烘
干备用。将已处理好的药渣加入蒸馏水后用超声波提
取两次，合并提取液浓缩至一定量后加 4倍量的 95 %
乙醇，置低温（4 ℃）静置过夜后，在 3 000 r/min下离心
20 min，收集沉淀，沉淀物经醇沉后真空干燥至恒重，
再加适量蒸馏水重新溶解，再用 Sevage法重复多次脱
蛋白（直至 260 nm 和 280 nm 处紫外扫描无吸收为
止），过滤，浓缩干燥后得赤苍藤和密蒙花粗多糖分别
为 1.454 1、2.85 3 g。分别称取赤苍藤和密蒙花多糖各
0.05 g，用蒸馏水稀释至 0.50 mg/mL的溶液备用。
1.4.2 葡萄糖标准曲线的绘制
配置标准葡萄糖浓度为 1.0 mg/mL，稀释成不同浓
度，采用苯酚-硫酸法测定[3]，在最大吸收波长 490 nm
处测定吸光度。以吸光度 A与浓度 C进行直线回归，
得回归方程。将供试溶液稀释成 0.005 mg/mL，并吸取
2.0 mL进行多糖含量的测定，通过葡萄糖回归方程计
算赤苍藤和密蒙花中多糖的含量，其计算公式为：
多糖含量（mg/g）＝多糖质量（mg）/原料质量（g）
1.4.3 抗氧化性能考察
1.4.3.1 DPPH法
参照 Kim 和杨强等 [4-5]的方法，取 2.0 mL 样品溶
液，加入 0.4 mmol/L DPPH溶液 2.0 mL，避光 30 min后
于 515 nm处测吸光度。计算对 DPPH·的清除率：
清除率/%= A0-（A1-A1′）A0
×100
式中：A0为溶剂代替样品的吸光度；A1为样品的
吸光度；A1′为无水乙醇代替 DPPH的空白对照组。
1.4.3.2 水杨酸法
利用Wei Zheng反应法[6]。取 2.0 mL样品溶液，加
determined by phenol-sulfuric acid colorimetry method，and their antioxidant activity was estimated by DPPH，
salicylic acid，ABTS and FRAP method. The results showed that the content of polysaccharides of E. scandens
and B. Maxim were 30.78 mg/g and 190.89 mg/g respectively. The polysaccharides of E. scandens and B. Maxim
scavenging·OH and ABTS+·activity were higher than VE，reducing Fe3+ antioxidant activity were higher than
VC. The polysaccharides of E. scandens scavenging DPPH·activity and reducing Fe3+ antioxidant activity were
higher than VE，and the polysaccharides of B. Maxim scavenging·OH activity was higher than VC.
Key words：Erythropalum scandens Bl.；Buddleja officinalis Maxim； the content of polysaccharides；
antioxidant activity
潘乔丹，等：赤苍藤和密蒙花多糖的含量测定及抗氧化研究基础研究
7
入1.0×10-2 mol/L FeSO4 1.0 mL，1.0×10-2 mol/L水杨酸-
乙醇溶液 2.0 mL，最后加入 30 % H2O2 2.0 mL启动反
应 1 h后于 510 nm处测吸光度。平行操作 3次，取均
值，计算对·OH的清除率：
清除率/%= A0-（A1-A1′）A0
×100
式中：A0为以溶剂代替样品液的吸光度；A1为样
品组的吸光度；A1′为蒸馏水代替 H2O2的空白对照组
吸光度。
1.4.3.3 ABTS法
参考 Re[7]等的方法，取 2.0 mL 样品溶液，加入
4.0 mLABTS+测定液，振荡 30 s，测定在 734 nm波长处
的吸光度，平行操作 3次，取均值，计算对 ABTS+·的清
除率：
清除率/%= A 测定液-A 样品A 测定液
×100
1.4.3.4 FRAP法
参照 Orhan[8]的方法，取 2.0 mL样品溶液，加入
2.0 mLFRAP工作液，于 593 nm处测吸光度，平行操作
3次，取均值，计算对 Fe3+还原/抗氧化能力，结果均以
FeSO4当量（即每克样品的总抗氧化能力相当于 FeSO4
的微摩尔数）表示。
2 结果与讨论
2.1 多糖含量的测定
2.1.1 多糖含量测定
葡萄糖的回归方程为A=20.93C－0.084 5（r=0.999 6），
浓度在 0.01 mg/mL~0.05 mg/mL之间呈现良好的线性
关系。根据回归方程计算出赤苍藤和密蒙花干燥粉末
中多糖的含量分别为 30.78、190.89 mg/g。
2.1.2 重复性、精密度、稳定性和加样回收试验
取赤苍藤和密蒙花粉末各 5份，按 2.1项下的方
法制备赤苍藤多糖和密蒙花多糖溶液，测定多糖含
量，其 RSD分别为 1.02 %、0.96 %（n＝5），表明该检测
方法的重现性较好。
精密吸取同一赤苍藤多糖和密蒙花多糖溶液，测
定多糖含量，其 RSD分别为 0.93 %、0.87 %（n＝6），说
明精密度良好。
精密吸取赤苍藤多糖和密蒙花多糖溶液，按标准
曲线制备项方法操作，每隔 30 min测定 1次吸光度，
共测 6次。吸光度在 2.5 h内无明显变化，比较稳定，
RSD分别为 0.94 %、0.98 %。
分别向已知质量分数的赤苍藤多糖和密蒙花多
糖溶液中分别加入一定量的葡萄糖对照品溶液进行
试验，平均回收率分别为 99.52 %、100.35 %，RSD分别
为 0.98 %、1.05 %（n＝5），表明该法回收率良好。
2.2 抗氧化性能测定
2.2.1 DPPH法
赤苍藤多糖和密蒙花多糖清除 DPPH·的半清除
率浓度（IC50）见表 1。
半清除率浓度 IC50与清除能力大小成负相关的关
系（即 IC50越小则清除能力越强），结合表 1，可以得出
清除 DPPH·能力的强弱顺序为：VC＞赤苍藤多糖＞VE＞
密蒙花多糖。
2.2.2 水杨酸法
赤苍藤多糖和密蒙花多糖清除·OH的能力见表 1
和图 1。
从图 1可看出，在试验浓度范围内，赤苍藤多糖和
密蒙花多糖均具有一定的清除·OH的能力，并且呈一
定的量效关系（即清除率随着浓度的增加而增高）。根
据表 1的 IC50值得出清除·OH能力的强弱顺序为：密
蒙花多糖＞VC＞赤苍藤多糖＞VE。
2.2.3 ABTS法
赤苍藤多糖和密蒙花多糖清除 ABTS+·作用见
表 1和图 2。
由图 2可知，在试验浓度范围内，赤苍藤多糖和密
蒙花多糖对 ABTS+·均表现出一定程度的清除能力，并
呈明显的量效关系。由表 1的 IC50值可知清除 ABTS+·
表 1 赤苍藤多糖和密蒙花多糖的抗氧化活性
Table 1 Antioxidant activity of polysaccharides from Erythropalum
scandens Bl. and Buddleja officinalis Maxim
样品
DPPH法
IC50/（mg/mL）
水杨酸法
IC50/（mg/mL）
ABTS法
IC50/（mg/mL）
FRAP法/
（μmol/g）
赤苍藤多糖 0.080 0.044 0.023 4 885.4
密蒙花多糖 0.108 0.033 0.012 12 714.0
VC 0.010 0.035 0.012 43 749.2
VE 0.085 0.186 0.194 11 469.3
图 1 赤苍藤多糖和密蒙花多糖清除·OH作用
Fig.1 Effect of scavenging·OH of polysaccharides from
Erythropalum scandens Bl. and Buddleja officinalis Maxim
50
40
30
20
10
0
清
除
率
/%
0 0.005 0.025
浓度/（mg/mL）
0.010 0.015 0.020
密蒙花多糖
VC
VE
赤苍藤多糖
潘乔丹，等：赤苍藤和密蒙花多糖的含量测定及抗氧化研究 基础研究
8
100
80
60
40
20
0
清
除
率
/%
0 0.005 0.025
浓度/（mg/mL）
0.010 0.015 0.020
密蒙花多糖
VC
VE
赤苍藤多糖
图 2 赤苍藤多糖和密蒙花多糖清除 ABTS+·作用
Fig.2 Effect of scavenging ABTS+·of polysaccharides from
Erythropalum scandens Bl. and Buddleja officinalis Maxim
能力的强弱顺序为：VC＞密蒙花多糖＞赤苍藤多糖＞VE。
2.2.4 FRAP法
在 593 nm 处，FeSO4浓度 X（μmol/L）与吸光度 Y
在一定范围内呈线性剂量关系，线性回归方程为：Y＝
0.000 3X－0.126 1（r＝0.999 5）。根据各样品反应后的吸
光度，在标准曲线上求得相应的 FeSO4当量（μmol/g），
见表 1。由表 1的 FeSO4当量值可知，各样品的 Fe3+还
原/抗氧化能力的强弱顺序为：赤苍藤多糖＞VE＞密蒙花
多糖＞VC。
3 结论
自由基生物学和自由基医学的飞速发展表明，自
由基与癌症、衰老、各种心血管疾病、帕金森综合症等
各种急性和慢性疾病密切相关[9-10]。寻找安全、有效的
天然自由基清除剂已成为当前研究的热题。研究发
现，植物多糖具有免疫调节、抗肿瘤、抗衰老、降血糖等
多种生物活性、毒副作用小和不易造成残留等优点[11]。
鉴于植物多糖的诸多优点，本研究采用超声波提取赤
苍藤多糖和密蒙花多糖，并用苯酚-硫酸比色法测得
赤苍藤多糖和密蒙花多糖的含量分别为 30.78 mg/g、
190.89 mg/g，密蒙花多糖的含量较高，具有较好的开发
应用价值。其测定结果重现性、精确度和稳定性好，可
作为检测赤苍藤多糖和密蒙花多糖含量的优选方法。
本研究还采用了清除 DPPH·、·OH、ABTS+·和 Fe3+的还
原/抗氧化等方法研究赤苍藤多糖和密蒙花多糖的体
外抗氧化性能，通过比较半抑制浓度 IC50值或 FRAP
当量值，并与 VC和 VE这两种天然抗氧化剂比较。结果
表明，赤苍藤多糖和密蒙花多糖清除·OH和 ABTS+·的
能力均强于 VE，其 Fe3+还原/抗氧化能力均强于 VC，且
赤苍藤多糖的清除 DPPH·能力和 Fe3+还原/抗氧化能
力均强于 VE，密蒙花多糖清除·OH能力强于 VC。赤苍
藤多糖和密蒙花多糖均有不同程度的抗氧化性能，且
抗氧化能力很强，若能进一步分离纯化，其抗氧化效
果可能更佳。
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