全 文 ：湖 北 农 业 科 学 2015 年
随着生命科学的发展和生活水平的提高，人类对
药物质量提出了更高要求［1］。在开发高效、低毒绿色
新药的过程中，一些少数民族特色药用植物越来越
受到研究者的青睐，对民族药用植物开展系统研究
是解释其药用功效和挖掘新药资源的重要途径 ［2］。
点地梅、阴地蕨、地桃花、华中铁角蕨、白马骨、刺三
甲、飞龙掌血等是中国西南地区白族、苗族等少数
民族的常见名族药，其使用历史悠久、疗效确切 ［3－8］，
但目前均未对其开展系统研究。 槲皮素及山奈酚是
重要的黄酮苷元，近年研究表明，槲皮素具有抗菌、
祛痰、止咳、降血压、降血脂等功效；山奈酚具有抗
菌、抗炎、止咳、抗癌等活性，常见于药用植物 ［9，10］。
本试验采用 HPLC法测定了点地梅等 7 种民族药用
植物中的槲皮素及山奈酚含量，以期为相关民族药
的开发提供参考。
1 材料与方法
1．1 材料
点地梅、阴地蕨、地桃花、华中铁角蕨、白马骨、
刺三甲、飞龙掌血等样品信息见表 1，标本保存于贵
收稿日期：2014－07－25
基金项目：国家社会科学基金项目（12XMZ033）
作者简介：何可群（1971－），女，云南云龙人，副教授，硕士，主要从事药用植物学和分析化学研究，（电话）13984334546（电子信箱）
hekequn2004＠163．com。
HPLC法对点地梅等七种民族药的槲皮素
和山奈酚的测定
何可群，吕 昱，杨 琼，赵宇中，卫亚丽
（贵州民族大学化学与环境科学学院，贵阳 550025）
摘要：利用 HPLC 法测定了 7 种民族药——点地梅、阴地蕨、地桃花、华中铁角蕨、白马骨、刺三甲、飞龙掌
血中的槲皮素和山奈酚含量。 以 C18色谱柱（100 mm×4．6 mm，5 μm）为固定相，以甲醇－0．4％磷酸水（45∶55，
V/V）为流动相，柱温 30 ℃，流速 0．8 mL ／ min，检测波长 360 nm。 结果表明，槲皮素和山奈酚的线性范围为
2．5～25．0 mg ／ mL，相关系数分别为 0．999 8 和 0．999 9；精密度试验 RSD（n＝5）和稳定性试验 RSD（n＝5）均
小于 3％，加样回收率（n＝5）达到 98％以上。 该法简单可靠，重现性好，适用于点地梅等民族药中的槲皮素
及山奈酚分析。
关键词：HPLC；民族药；槲皮素；山奈酚
中图分类号：R917 文献标识码：A 文章编号：0439－8114（2015）10－2486-03
DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2015.10.049
Determination of Quercetin and Kaempferol in 7 Kinds of
National Medicines by HPLC
HE Ke－qun，LU Yu，YANG Qiong，ZHAO Yu－zhong，WEI Ya－li
（Chemistry ＆ Environmental Science Department，Guizhou Minzu University，Guiyang 550025，China）
Abstract： The contents of quercetin and kaempferol in 7 kinds of national medicine，including Diandimei，Yindijue，Ditaohua，
Huazhong tiejiaojue，Baimagu，Cisanjia，Feilongzhangxue，were analyzed by HPLC．The samples were separated on a C18 column
（100 mm×4．6 mm，5 μm） at 30 ℃．The mobile phase was a mixture of methanol and 0．4％ phosphoric acid water solution （45∶55，
V ／ V） with a flow rate of 0．8 mL ／ min and the detection wavelength was 360 nm．The results showed that the calibration curves
of two flavonoids were both linear in the range of 2．5～25．0 mg ／ mL （r＝0．999 8 ，0．999 9）．RSDs of precision， stability were all
lower than 3％ ，the recoveries all above 98％．This method is accurate，sensitive for determining quercetin and kaempferol in
national medicines．
Key words： HPLC； national medicine； quercetin； kaempferol
第 54卷第 10期
2015年 5月
湖北农业科学
Hubei Agricultural Sciences
Vol． 54 No.10
May.，2015
第 10 期
表 1 供试药用植物
样品
点地梅
阴地蕨
地桃花
华中铁角蕨
白马骨
刺三甲
飞龙掌血
拉丁文学名
Androsace umbellata （Lour．） Merr．
Botrychium ternatum （Thunb） Sw．
Urena lobata L．
Asplenium sarelii Hook．
Serissa serissoides （DC．） Druce
Acanthopanax trifoliatus （L．） Merr
Toddalia asiatica Lam．
采集地
云南云龙县
云南云龙县
云南云龙县
贵州贵阳花溪区
贵州贵阳花溪区
贵州贵阳花溪区
贵州贵阳花溪区
采集时间
1~2 月
1~2 月
1~2 月
5~6 月
5~6 月
5~6 月
5~6 月
部位
全草
全草
叶
叶
叶
叶
叶
州民族大学化学与环境科学学院药学教研室。
槲皮素（117－39－5）及山奈酚（520－18－3）均购
于贵州迪大科技有限责任公司。 磷酸、无水甲醇均
为色谱纯，浓盐酸为分析纯，去离子水。
1．2 仪器与试剂
高效液相色谱仪（Agilent 1260 LC，美国安捷
伦仪器有限公司 ）， 配备可变波长紫外检测器 ，
756PC紫外－可见分光光度计（上海舜宇恒平科学仪
器有限公司），METTLERAE240 分析天平（上海天平
仪器厂），数显恒温水浴锅（常州博远实验分析仪器
有限公司）
1．3 方法
1．3．1 对照品储备液的配制 称取槲皮素、山奈酚
各 20 mg 于 50 mL 容量瓶中，以甲醇定容，摇匀，得
400 mg ／ mL的单一对照品储备液备用。
1．3．2 供试品溶液制备 参照文献［11，12］，将自
然晾干的点地梅等样品于 60 ℃放置 3 h，粉碎过 40
目筛，称取适量样品粉末，用体积分数 80％的甲醇
溶液 20 mL浸泡，75 ℃水浴回流提取 2次，每次 1 h，
合并提取液，冷却过滤，滤液用 80％甲醇溶液补足
至 40 mL，加 10 mL 35％（V ／ V）浓盐酸，85 ℃水浴回
流水解 1 h，迅速冷却，用甲醇定容至 50 mL，摇匀，
临用前过 0．45 μm 滤膜。
1．3．3 色谱分析 Agilent Eclipse plus C18 色谱柱
（100 mm×4．6 mm，5 μm）， 流动相为甲醇－0．4％磷酸
水溶液 （45∶55，V/V），流速 0．8 mL ／ min，检测波长
360 nm，柱温 30 ℃，进样量 10 μL。
2 结果与分析
2．1 色谱分析
对照品及样品色谱图见图 1。由图 1可知，在该
色谱条件下，目标物得到较好的分离。
图 1 样品的高效液相色谱图
2.5 5.0 7.5 10 12.5 15 17.5 20
时间//min
30
25
20
15
10
5
0
峰
高
//m
Au
A 混合对照品
1
1.槲皮素
2.山奈酚
18
.6
65
2
10
.11
1
2.5 5.0 7.5 10 12.5 15 17.5 20
时间//min
16
14
12
10
8
6
4
2
0
峰
高
//m
Au
B 点地梅
1
10
.1
03
18
.6
58
2
2.5 5.0 7.5 10 12.5 15 17.5 20
时间//min
50
40
30
20
10
0
峰
高
//m
Au
C 阴地蕨
110
.2
20
18
.8
95
2
1.
32
4
1.
76
6 2.
76
3
2.
59
5
2.
24
7
3.
73
3
4.
74
6
12
.9
34
2.5 5.0 7.5 10 12.5 15 17.5 20
时间//min
40
35
30
25
20
15
10
5
0
峰
高
//m
Au
D 地桃花
1
18
.8
45
2
10
.2
101.
32
0
1.
74
5
2.
03
1
2.3
69
2.
80
4 3
.2
74
4.
74
6
5.
11
1
8.
49
5
2.5 5.0 7.5 10 12.5 15 17.5
时间//min
80
70
60
50
40
30
20
10
0
峰
高
//m
Au
E 华中铁角蕨
18
.6
60
2
1.
32
8
1.
43
2 1.
54
9
1.7
77
3.
20
6
3.
65
1
4.
18
7
2.5 5.0 7.5 10 12.5 15 17.5
时间//min
40
30
20
10
0
峰
高
//m
Au
F 白马骨
11
0.
11
6
18
.6
56
28.
74
9
1.
32
7
1.
43
5
1.
54
8
1.
20
0
1.7
47 2.
11
2
2.
72
1
2.5 5.0 7.5 10 12.5 15 17.5 20
时间//min
200
175
150
125
100
75
50
25
0
峰
高
//m
Au
H 飞龙掌血
18.
70
4
6.
04
1
4.
28
8
1.5
43
1.
43
0
1.
32
4
3.
63
8
2.
11
1
2.
77
6 3
.0
87
2.5 5.0 7.5 10 12.5 15 17.5
时间//min
40
30
20
10
0
峰
高
//m
Au
G 刺三甲
1
1.
32
8
10
.1
20
1.
19
7 1
.4
32
1.
55
0
3.
09
8
2.
09
2
何可群等：HPLC 法对点地梅等七种民族药的槲皮素和山奈酚的测定 2487
湖 北 农 业 科 学 2015 年
2．2 线性关系考察
取标准溶液母液配制成槲皮素、山奈酚浓度均
为 2．5，5．0，10．0，15．0，20．0，25．0 mg ／ mL 的混合标准
溶液，以 0．45 μm 滤膜过滤后，分别进样 10 μL，在
上述色谱条件下测定峰面积， 以对照品溶液浓度 X
（mg ／ mL）为横坐标，峰面积 YmAu·S 为纵坐标绘制标
准曲线，得槲皮素、山奈酚标准曲线回归方程、相关
系数及线性范围分别为：槲皮素 Y＝43．86X－19．94，r＝
0．999 8；山奈酚 Y＝29．85X－13．24，r＝0．999 9。 结果表
明，槲皮素及山奈酚在 2．5～25．0 mg ／ mL 范围内呈良
好线性关系。
2．3 精密度试验
将质量浓度均为 20．0 mg ／ mL的槲皮素、山奈酚
混合对照品溶液，同上法分析，连续进样 5 次，槲皮
素及山奈酚峰面积的 RSD 分别为 0．98％、0．79％，表
明方法精密度良好。
2．4 重复性试验
取同一批点地梅样品 5 份，同上法测定，计算
槲皮素及山奈酚的平均质量分数， 其 RSD 分别为
1．86％和 1．92％，表明方法重复性良好。
2．5 稳定性试验
将同一供试品溶液在 0、2、4、8、10 h 时，同上法
测定， 计算槲皮素及山奈酚的 RSD 分别为点地梅
1．46％、1．92％；阴地蕨 1．53％、1．39％；地桃花 1．45％、
1．79％； 华中铁角蕨 1．53％、2．18％； 白马骨 1．56％、
2．07％； 刺三甲 1．97％、1．89％； 飞龙掌血 1．76％、
2．09％。 表明供试品溶液在 10 h内稳定性良好。
2．6 回收率试验
称取 5 份已知含量的阴地蕨样品各 0．250 g，分
别加入山奈酚标准溶液适量；称取 5 份已知含量的
阴地蕨样品各 0．125 g，分别加入槲皮素标准溶液适
量。 同上法分析，结果见表 2。
2．7 样品测定
称取 7 种民族药供试样品各 3 份， 同上法分
析，结果见表 3。
3 小结
点地梅、阴地蕨、地桃花、华中铁角蕨、白马骨、
刺三甲、 飞龙掌血等是我国西南地区多个少数民族
民间常用草药，但迄今为止，相关资源开发利用较为
缓慢。 本研究用 HPLC法对它们的槲皮素及山奈酚
含量进行研究，结果表明，点地梅、阴地蕨、地桃花中
都含有丰富的槲皮素及山奈酚； 华中铁角蕨含丰富
的山奈酚而不含槲皮素； 白马骨含有少量山奈酚而
含槲皮素的量低于本方法检测下限； 刺三甲及飞龙
掌血都只含槲皮素而不含山奈酚。 该结果可为挖掘
上述民族药资源、研究民族药抗病机理提供参考。
参考文献：
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表 3 点地梅等民族药中槲皮素、山奈酚的测定结果（n=3）
样品
点地梅
阴地蕨
地桃花
华中铁角蕨
白马骨
刺三甲
飞龙掌血
槲皮素含量//mg/g
3.17
3.84
1.02
未检出
未检出
1.47
1.33
RSD//%
2.08
1.37
2.03
未检出
未检出
2.17
1.58
山奈酚含量//mg/g
6.96
1.26
1.23
5.41
0.69
未检出
未检出
RSD//%
1.78
1.75
1.64
1.76
1.93
未检出
未检出
表 2 阴地蕨样品回收率测定结果（n=5）
成分
槲皮素
山奈酚
原有量
mg
240.19
240.19
240.19
240.19
240.19
157.37
157.37
157.37
157.37
157.37
加标量
mg
180
180
250
250
290
110
110
130
130
170
测得量
mg
413.87
414.74
494.16
494.2
520.82
269.05
264.17
284.2
285.28
322.45
回收率
%
96.49
96.97
101.59
101.6
96.77
101.53
97.09
97.56
98.38
97.11
平均回收率
%
98.68
98.34
RSD
%
2.7
1.89
（责任编辑 周有祥）
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