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黑草醇提物的药理作用研究



全 文 :(总 )广西中医药 2012年 2月第 35卷第 1期
黑草为玄参科植物鬼羽箭
Buchbera cruciata Ham. 的干燥全
草,在我国分布于江西、福建、湖
南、湖北、广东、广西、贵州和云南,
在广西各地区均有分布。其味微
苦、寒,性凉,具有清热、凉血、解毒
·实验研究·
黑草醇提物的药理作用研究
李燕婧 钟正贤 张 颖 卢文杰 牙启康
广西中医药研究院 530022 南宁市东葛路20-1号
摘 要 目的:探讨黑草醇提物的药理作用。方法:采用小鼠凝血时
间、耳廓肿胀法、扭体法、皮肤过敏试验和急性毒性试验,观察黑草醇提物
的抗凝、抗炎、镇痛、抗过敏作用及其毒性作用。结果:黑草醇提物高、中、
低剂量组均能延长凝血时间,减少小鼠扭体次数(P <0.05或P <0.01);黑
草醇提物高、中剂量组能减轻小鼠耳廓肿胀程度,降低皮肤过敏反应(P <0.05)。
急性毒性试验表明,黑草醇提物的最大给药量为390 g生药/kg体重。结论:
黑草醇提物具有一定的抗凝、抗炎、镇痛和抗过敏作用,且毒性小。
关键词 黑草醇提物;药理试验;急性毒性试验
中图分类号:R285.5 文献标识码:A
文章编号:1003-0719(2012)01-0049-03
Research on Pharmacological Action of Ethanol-extractive
from Buchbera Cruciata Ham.
Li Yanjing Zhong Zhengxian Zhang Ying, et al
(Guangxi TCM research institute, Nanning 530022, China)
Abstract Objective:To explore the pharmacological action of ethanol -
extractive from Buchbera cruciata Ham. Methods: Coagulation time, swelling
of auricle method, body twisting method, allergic skin test and acute toxicity
test on mice were used to observe the effect of ethanol -extractive from
Buchbera cruciata Ham. for anti-coagulation, anti-inflammatory, analgesia,
anti -anaphylaxis and toxicity. Results: Ethanol -extractive from Buchbera
cruciata Ham. with high, medium and low dose could extend coagulation time,
and reduce body twisting on mice(P <0.05 or P <0.01). Besides, both high
and medium dose could reduce swelling of auricle and skin allergic reaction
on mice(P <0.05). Acute toxicity test showed that the maximum dose was
390 g crude drugs/kg. Conclusion: Ethanol-extractive from Buchbera cruciata
Ham. has effects of anti -coagulation, anti -inflammatory, analgesia, anti -
anaphylaxis, to a certain extent.
Key words ethanol-extractive from Buchbera cruciataHam.;pharmacological
test;acute toxicity test
功效,诸药互相配合,使血活气行、
瘀化郁解。临床配合随证加减,从
而能更好地改善症状,增强疗效。
现代药理学研究证实,活血化瘀药
可显著改善脑部血管舒缩功能。血
府逐瘀汤可调整脑血管的不稳定
性,促进脑血管弹性和脑血流供应
平衡[4]。
现代医学认为,血管性头痛是
由于脑血管的舒缩异常,血管痉挛
引起血流障碍,造成局部血流阻
滞,血行不畅,累及痛觉神经所致。
盐酸氟桂利嗪胶囊作为选择性钙
拮抗剂,对脑血管有选择性扩张作
用,能预防由缺血、缺氧引起的神
经细胞内Ca2+增多所致的细胞损
害,具有解除血管痉挛收缩,增加
血流量,改善脑血氧供应的作用。
总之,本研究采用血府逐瘀汤
加减配合西药治疗血管性头痛疗
效肯定,值得在临床推广应用。
参考文献
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(2011-07-25 收稿/编辑 熊 瑜)
基金项目:广西科学基金项目(桂科攻自0991068)
·49·49
(总 ) 广西中医药 2012年 2月第 35卷第 1期
等功效,主治流行性感冒、中暑腹
痛、身发癍痧、伤寒、癫痫、皮肤风
毒肿痛等[1]。其化学成分的初步研
究证明,黑草石油醚部位主要含长
链脂肪烃和脂肪酸[2],但其药理作
用研究未见报道。本文根据其民间
功用,对黑草提取物进行相关药理
试验,以期为临床应用提供科学依
据。现将研究报道如下。
1 实验材料
1.1 药物 黑草醇提物(每克浸膏
含14.65 g生药,批号:20091118)由
本院中药化学研究所提供,实验时
用蒸馏水研磨配制成药液备用。阿
司匹林肠溶片为武汉远大制药集
团股份有限公司产品,批号:
081101。息斯敏为西安杨森制药有
限公司产品,批号:090218967。
1.2 动物 昆明种小鼠,体重18~
22 g,雌雄各半,由广西医科大学实
验动物中心提供,清洁级,许可证
号:SCXK桂2003-0003。小鼠分性
别饲养于空调实验室内,室温:
22±2 ℃;相对湿度:60±2%;喂颗粒
标准饲料,自由饮水和摄食。
1.3 仪器 722型光栅分光光度
计,上海分析仪器三厂产品。
FA1004型万分之一电子天平,上海
精密科学仪器有限公司产品。
1.4 统计学方法 采用PEMS3.1
统计软件分析数据。所得实验数据
以均数±标准差(x±s)表示,采用t检
验作组间比较。
2 方法与结果
2.1 对小鼠凝血时间的影响[3] 取
18~22 g小鼠50只,雌雄各半,随机
分为空白对照组,黑草醇提物高、
中、低剂量组(39.0,19.5,13.0 g/kg)
和阳性药阿司匹林组(0.2 g/kg),每
组10只小鼠。用药各组均予灌胃给
药,空白对照组给予等量的蒸馏
水,每天1次,连续7 d。末次给药1 h
后,用内径为1 mm的玻璃毛细管插
表1 黑草醇提物对小鼠凝血时间的影响 (x±s)
组别 n 剂量(g/kg) 凝血时间(s)
空白对照组 10 - 4.55±0.65
阿司匹林组 10 0.2 6.11±0.46②
黑草醇提物高剂量组 10 39.0 5.93±0.62②
黑草醇提物中剂量组 10 19.5 5.33±0.54②
黑草醇提物低剂量组 10 13.0 5.14±0.60①
注:与空白对照组比较,①P <0.05,②P <0.01(下同)
入小鼠眦球后静脉丛取血,至毛细
玻璃管血柱达5 cm为止,每隔30 s
折断毛细玻璃管一小段,同时用肉
眼观察血柱是否移动,仔细检查有
无凝血丝出现,计算从毛细管采血
到凝血丝出现的时间,进行组间比
较。结果见表1。
表2 黑草醇提物对醋酸所致小鼠扭体反应的影响 (x±s)
组别 n 剂量(g/kg) 扭体次数
空白对照组 10 - 20.8±10.7
阿司匹林组 10 0.2 7.6±4.3②
黑草醇提物高剂量组 10 39.0 9.5±7.3①
黑草醇提物中剂量组 10 19.5 9.9±7.3①
黑草醇提物低剂量组 10 13.0 9.8±8.2①
结果表明,与空白对照组比
较,黑草醇提物高、中、低剂量组及
阿司匹林组均能明显延长小鼠凝
血时间(P <0.05或P <0.01),提示黑
草醇提物具有抗凝血作用。
2.2 对醋酸所致小鼠扭体次数的
影响[4] 取18~22 g小鼠50只,雌雄
各半,随机分为空白对照组 ,黑
草醇提物高、中、低剂量组(39.0,
19.5,13.0 g/kg) 和阳性药阿司
匹林组(0.2 g/kg),每组10只小
鼠。用药各组均予灌胃给药,空白
对照组给予等量的蒸馏水,每天1
次,连续7 d。于末次给药后1 h,每
只小鼠腹腔注射0.6%醋酸溶液
0.2 ml,立即观察并记录20 min内
各小鼠的扭体次数。比较给药各
组与空白对照组之间的差异,评
价受试药物的镇痛作用。结果见
表2。
结果表明,与空白对照组比
较,黑草醇提物高、中、低剂量组及
阿司匹林组均能明显减少小鼠扭
体次数(P <0.05或P <0.01),提示
黑草醇提物具有镇痛作用。
2.3 对巴豆油所致小鼠耳廓肿胀
的抑制作用[5] 取18~22 g小鼠50
只,雌雄各半,随机分为空白对照
组,黑草醇提物高、中、低剂量组
(39.0,19.5,13.0 g/kg) 和阳性药阿
司匹林组(0.2 g/kg),每组10只小
鼠。用药各组均予灌胃给药,空白
对照组给予等量的蒸馏水,每天1
次,连续7 d。于末次给药0.5 h后,
用微量注射器取0.05 ml 2%巴豆油
溶液涂于小鼠右耳。4 h后处死小
鼠,立即用口径为8 mm的打孔器,
沿着小鼠左右耳廓相同部位打孔
取材,然后在电子天平上分别称
重,以两耳片重量(mg)的差值作为
肿胀程度指标,并求出百分抑制
率(%)。结果见表3。
结果表明,与空白对照组比
·50· 50
(总 )广西中医药 2012年 2月第 35卷第 1期
表4 黑草醇提物对小鼠被动皮肤致敏反应的影响 (x±s)
组别 n 剂量(g/kg) 光密度值(OD)
空白对照组 10 - 0.311±0.049
息斯敏组 10 0.01 0.106±0.040②
黑草醇提物高剂量组 10 39.0 0.248±0.051①
黑草醇提物中剂量组 10 19.5 0.251±0.055①
黑草醇提物低剂量组 10 13.0 0.261±0.058
表3 黑草醇提物对巴豆油所致小鼠耳廓肿胀的影响 (x±s)
组别 n 剂量(g/kg) 肿胀程度(mg) 抑制率(%)
空白对照组 10 — 18.43±6.82 —
阿司匹林组 10 0.2 13.16±3.38① 28.6
黑草醇提物高剂量组 10 39.0 13.00±4.69① 29.5
黑草醇提物中剂量组 10 19.5 12.90±2.56① 30.0
黑草醇提物低剂量组 10 13.0 13.40±6.35 27.3
较,黑草醇提物高、中剂量组及阿
司匹林组均能明显降低小鼠耳廓
肿胀程度(P <0.05),提示黑草醇提
物具有抗炎作用。
2.4 对小鼠被动皮肤过敏试验[6]
抗原:医用天花粉。佐剂:4%
氢氧化铝凝胶。临用时以3.75 mg
天花粉溶于1.5 ml氢氧化铝凝胶
中。致敏:健康小鼠10只,体重18~
22 g,将上述天花粉氢氧化铝凝胶
混悬液予脚掌注射,每只小鼠的两
只后脚掌各注入0.05 ml,共注射
0.1 ml。15天后,断头取血,离心取
抗血清备用。
被动皮肤致敏试验:取18~22 g
小鼠50只,雌雄各半,随机分为空
白对照组,黑草醇提物高、中、低剂
量组(39.0,19.5,13.0 g/kg) 和阳性
药息斯敏组(0.01 g/kg),每组10只
小鼠。用药各组均予灌胃给药,空
白对照组给予等量的蒸馏水,每天
1次,连续7 d。取上述血清(10只致
敏小鼠的混合抗血清)加生理盐水
稀释成1∶5,每鼠腹壁皮内注射两个
点(相距0.2 cm),每点0.03 ml。再
连续给药2天,于末次给药12 h后,
每只小鼠进行抗原攻击,尾静脉注
射天花粉2.5 mg/ml(用1%伊文思
蓝-生理盐水配制),0.2 m l /只,
20 min后处死动物,剪下腹部蓝斑
皮肤(0.5 g),剪碎,浸泡于丙酮生
理盐水溶液(7∶3)5 ml中48 h,离心
取上清液,用分光光度计于610 nm
波长处测定吸收度,并作组间比
较,评价药物的抗过敏作用。结果
见表4。
结果表明,与空白对照组比
较,黑草醇提物高、中剂量组及息
斯敏组均能明显降低小鼠皮肤蓝
斑吸光度(P <0.05或P <0.01),提示
黑草醇提物具有抗皮肤过敏作用。
2.5 急性毒性试验 取昆明种小
鼠40只,雌雄各半,分为空白对照
组和黑草醇提物组各20只,小鼠禁
食24 h,不禁水。将黑草醇提物用
蒸馏水配制成最大浓度,以最大给
药体积(0.4 ml/10 g体重)的药液灌
胃给药,24 h内给药3次,空白对照
组给予蒸馏水,连续观察14天,记
录动物体重、外观、食欲、行为活
动、死亡等毒副反应情况。结果黑
草醇提物组小鼠体重正常增长,
测出黑草醇提物的最大给药量为
390 g生药/kg体重,结果表明黑草
的毒性很小。
3 讨 论
根据黑草清热祛湿的功效及
民间应用,临床上也有用复方黑草
治疗湿热症取得良效的报道[7],本
研究对黑草提取物设计了抗凝、抗
炎、镇痛、抗过敏等实验。结果表
明,黑草醇提物能延长凝血时间,
减轻小鼠耳廓肿胀程度,减少小鼠
扭体次数,降低皮肤过敏反应,具
有一定的抗凝、抗炎、镇痛、抗过敏
等药理作用,且毒性很小。目前研
究也从黑草中分离出多种化学成
分,推测这些药理作用可能与该植
物所含的生物碱、黄酮类等化学物
质有关,至于其他方面的药理作用
仍待进一步研究。
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(2011-10-28 收稿/编辑 陈明伟)
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