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(2007-11-26收稿/编辑 陈明伟)
苦玄参体外抗菌作用的实验研究
黄 燕 肖艳芬 甄汉深 陈 君
广西中医学院 530001 南宁市明秀东路 179号
摘 要 目的:研究苦玄参根 、茎 、叶体外抗菌作用。方法:采用连续
稀释法对苦玄参根 、茎 、叶的水煎液和醇提液进行 MIC 、 MBC的实验研
究。结果:苦玄参根 、茎 、叶的水煎液和醇提液在体外对金黄色葡萄球菌
(ATCC209)、金黄色葡萄球菌耐药株 、表皮葡萄球菌(ATCC26029)、乙型溶
血性链球菌(ATCC32210)等均有一定的抗菌作用;醇提液的体外抗菌作
用优于水提液 。结论:苦玄参根 、茎 、叶的醇提液具有明显的抗菌作用。
关键词 苦玄参;抗菌作用;体外实验
中图分类号:R285.5 文献标识码:A
文章编号:1003-0719(2008)01-0046-02
广西道地药材苦玄参 (Picria
fel-tarrae Lour.)为玄参科苦玄参
属植物 , 又名苦草 、蛇总管 、鱼腥
草 、苦胆草。主要分布于广西 、广
东 、贵州及云南等地 , 印度及菲律
宾也有分布[ 1]。苦玄参具有抑菌抗
炎之功效 。由于苦玄参使用的药用
部位为全草 , 其不同药用部位的抗
菌作用研究尚未见报道 。因此本文
对苦玄参的根 、茎 、叶的抑菌作用
进行研究 , 为今后合理开发和利用
苦玄参提供依据 ,现报道如下 。
1 实验材料
1.1 药材 苦玄参采于广西龙
州 , 经广西中医学院药用植物教研
室刘寿养副教授鉴定为玄参科苦
玄参属植物苦玄参 (Picria fel-tar-
rae Lour),标本存于广西中医学院药
用植物教研室。
1.2 菌种及培养基
1.2.1 金黄色葡萄球菌(ATCC209)、
金黄色葡萄球菌耐药株 、绿脓杆菌
(ATCC10104)、 表 皮 葡 萄 球 菌
(ATCC26029)、肺炎克雷伯氏菌 、白
色念珠菌 、 甲型溶血性链球菌
(ATCC32205)、 乙型溶血性链球菌
(ATCC32210)、 丙型链球菌均购自
中国药品生物制品检定所 。实验菌
种经血平板分离培养 16 ～ 24h后 ,
挑取数个菌落置于生理盐水管中 ,
校正浓度至 0.5麦氏标准 , 再用
MH肉汤 1∶100稀释 , 使含菌量达
到 106 CFU/ml为工作浓度。(注:本
文凡甲 、乙型溶血性链球菌实验用
培养基均加入无菌兔血清)
1.2.2 水解酪蛋白(Mueller-Hin-
ton ,MH)肉汤(北京陆桥商检新技术
公司 ,批号 020117);营养肉汤(国药
集团化学试剂有限公司 , 批号
ZK050621);营养琼脂(国药集团化
学试剂有限公司 ,批号20061109)。
1.3 实验仪器设备 无菌净化工
作台(苏净集团苏州安泰空气技术
有限公司);电热恒温培养箱(上海
医疗器械七厂);压力蒸汽灭菌器
(上海医用核子仪器厂);电热蒸馏
水器(北京市医疗设备厂);电热恒
温鼓风干燥箱(上海跃进医疗器械
厂)。
46
基金项目:国家中医药管理局项目(04-05ZM01)
·47·(总 )广西中医药 2008年 2月第 31卷第 1期
菌种 MIC MBC根 茎 叶 根 茎 叶
金黄色葡萄球菌 31.25 31.25 31.25 62.5 62.5 62.5
金黄色葡萄球菌耐药株 31.25 31.25 31.25 62.5 62.5 62.5
绿脓杆菌 125 125 125 250 250 250
表皮葡萄球菌 31.25 31.25 31.25 62.5 62.5 62.5
肺炎克雷伯氏菌 125 125 125 250 250 250
白色念珠菌 500 500 500 — —— —
甲型溶血性链球菌 500 500 500 — —— —
乙型溶血性链球菌 31.25 31.25 31.25 62.5 62.5 62.5
丙型链球菌 500 500 500 — —— —
表 1 苦玄参根 、茎 、叶水煎液抑菌 、杀菌结果 (mg/ml)
表 2 苦玄参根 、茎 、叶醇提液抑菌 、杀菌结果 (mg/ml)
菌种 MIC MBC根 茎 叶 根 茎 叶
金黄色葡萄球菌 125 125 62.5 250 250 125
金黄色葡萄球菌耐药株 125 125 62.5 250 250 125
绿脓杆菌 250 250 125 500 500 250
表皮葡萄球菌 125 125 62.5 250 250 125
肺炎克雷伯氏菌 250 250 125 500 500 250
白色念珠菌 500 500 500 — —— —
甲型溶血性链球菌 500 500 500 — —— —
乙型溶血性链球菌 125 62.5 31.5 250 125 62.5
丙型链球菌 500 500 500 — —— —
2 实验方法与结果
2.1 苦玄参根 、茎 、叶提取物的制
备
2.1.1 水煎液 取苦玄参根 、茎 、
叶各 100g , 分别加 10倍量蒸馏水
浸泡 20min后 ,加热煮沸 1h ,过滤 ,
药渣再加 8倍量蒸馏水煮沸 1h ,将
两次滤液合并 ,浓缩至 1g/ml ,放置
备用 。
2.1.2 醇提液 取苦玄参根 、茎 、
叶各 100g , 分别加 10倍量 60%乙
醇浸泡 20min后 , 回流提取 1h , 过
滤 , 药渣再加 8倍量 60%乙醇回流
提取 1h , 将两次滤液合并 , 浓缩至
1g/ml ,放置备用。
2.2 最低抑菌浓度(MIC)和最低
杀菌浓度(MBC)测定 [ 2] 用无菌
MH肉汤分别将苦玄参的根 、茎 、叶
的水煎液和醇提液作二倍递减系
列浓度稀释 , 分装于小试管内 , 每
管各 1ml。取浓度为 106 CFU/ml的
各种细菌工作液 , 于上述系列浓度
药液内 , 每管加入细菌工作液
0.1ml。各抗菌药物浓度各留 1管
作为药物对照管不加细菌。另分装
一小试管 ,加肉汤培养基 1ml ,再加
入 0.1ml细菌工作液作为细菌对
照管 。将试验管和对照管置于 35℃
培养箱内培养 18h检查结果 , 并与
药物对照管比较。以完全无细菌生
长的最低药物浓度作为细菌对该
药物的敏感度 , 即为该药物的最低
抑菌浓度(MIC)。分别取各有效抑
菌浓度药液 0.1ml移种至不含药
的营养琼脂平皿上 , 轻轻推开药
液 , 置 35℃培养过夜 , 观察有无细
菌生长。按一般规定 , 平皿培养基
中 , 计数少于 5个菌落者作为该药
物的最低杀菌浓度(MBC)。结果见
表 1 ,表 2。
苦玄参根 、茎 、叶的水煎液和
醇提液对本实验菌株均有不同程
度的抑制作用 ,且苦玄参根 、茎 、叶
的 60%乙醇提取物的抑制作用均
优于水煎液 。
3 讨 论
药物抗菌效力的测定对于抗
菌药物的筛选具有重要意义。由于
药物含有抗菌物质 , 能干扰和抑制
细菌代谢(如蛋白质代谢 、糖代谢)
的各个环节 , 使细菌的生长受到抑
制 , 故可通过观察试管内细菌生长
情况来判定药物有无抗菌作用。测
定抗菌药物在体外对病原微生物
有无抑制作用的方法 , 称为药物敏
感实验 。以抑制细菌生长为评定结
果时 , 常以最低抑菌浓度(MIC)表
示;以杀灭细菌为标准时 , 使活菌
总数减少 99%或 99.9%以上 ,称为
最低杀菌浓度(MBC)。
苦玄参的临床使用主要是用
于治疗上呼吸道炎 、扁桃体炎 、支
气管炎 、咽喉炎及肺炎等 。本实验
选择了对咽喉部常见致病菌如金
黄色葡萄球菌 、乙型溶血性链球菌
等菌株。抑菌实验结果表明 , 苦玄
参根 、茎 、叶的水煎液和醇提液对
本实验菌株均有不同程度的抑制
作用 , 其中对金黄色葡萄球菌 、金
黄色葡萄球菌耐药株 、乙型溶血性
链球菌抑制作用较强。
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(2007-05-24收稿/编辑 陈明伟)
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