全 文 ：JO U R N A L O F S H E N Y A N G C O L L E G E O F P H A R M A C Y
( 5 u nl 1 4 ) D
e e . 19 8 1
大丁草及大丁贰抗菌作用的实验研究
冯玉书 施一鸣
(药理研 完室 ) (药化教研室 )
提要 : 本文证明 大丁草水煎剂 、 醉浸 剂和有效成分大丁式对绿脓杆菌等 7 种细 菌有
直接抑制作用。 对体 内感染绿脓 杆菌的 小鼠存活 率分别为 56 . 6、 1 7 . 9 、 57 . 8一 17 . 0% ,
大丁戒 的 E D S 。为 4 6 . 2 m g / k g 。 其作 用原理除有抑菌作用外 , 尚有增 加机体 网状 内皮 系
统功能的作 用。
绿脓杆菌败血症是危害健康 的严重病症 , 在防治败血症药物筛选中发现 , 本地野生
植物大丁草 〔 G e r b e r a a n a n d r i a ( L . ) S e h u l t z B i p . 〕 具有一定疗效 。 后从该植
物中分 离出一种抗绿脓杆菌有效单体称大丁试 , 其化学结构确定为 : ` ’ 〕
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本文对大丁草制剂和大丁试的药理作用进行如下初步研究 。
材 料
磺胺眯隆 东北制药六厂生产 , 配成 10 %注射液应用 。
大丁草水煎剂 大丁草水煎沸 30 分钟 , 二次 , 滤液配成 1 0 % (生药 ) 灭菌水溶液 。
大丁草醉漫剂 大丁草 乙醇回流 2 小时 , 回收醇后配成 10 % (生药 ) 灭菌水溶液 。
大丁试 由本院天然药物研究室提供 。 用尸H S . 5蒸馏 水配成 0 . 2%溶液用于动 物治
疗实验 。 用 8 . 2 %吐温水溶液配成 0 . 2 %大丁试溶液供体外抗菌实验 。
绿脓杆菌 取 自中国医科大学附属第一医院化验室的致病菌株 , 经肉琼脂斜面培养
18 ~ 2 0小时后配成适宜浓度应用 。
动物 体重 18 ~ 2 克小 鼠 , 体重 2 . 0一 2 . 5公斤家兔均由本院动物室供应 。
DOI : 10. 14066 /j . cnki . cn21 -1349 /r . 1981. 14. 008
实 验 与 结 果
一 、 体外抗菌作用
用 5 0%、 1 0%大丁草水煎剂 , 5 · l 。’ ` 一 2 · 工o 一 “ 大丁试 和试元 ,对绿脓杆菌等 8种菌种用杯
碟法进行体外抗菌实验 , 结果列于表 l 。对配制大丁贰元的溶剂 , 同样对上述菌种进行抑菌
·对照实验 , 没发现该溶剂有抑菌作用 。 从表 1 证明 , 大丁草煎剂 、 大丁贰和试元除对大
肠杆菌无效外 , 对其余 7 种菌均有一定抑制作用 。 实验看到 , 绿脓杆菌在大丁试和试元
作用下 , 于 1 6小时内显抑菌作用 , 1 6小时后在抑菌圈内又有部分细菌生长 , 水煎剂没发现
此种现象 。
表 1 大丁草及大丁 戒体外杭菌作用
(生药 % )菌 种
杆
球
球
杆
寒 杆
寒 不卜
杆
杆
{
一 ~ ~乏万百可瓜了一不弓一厂石 ~ , 1· 。 · OJ . 5 一甲 . 0 10J . 。菌 … · … · { 一 ` , ` · 。 { , 2 · 。 …, 。 · 。 { · } ·哼 …` 5· 。 …` 3· 5 { 一 { ` 5· 5 …1 5 · 2 …“ · 5 { }困 … … 1 …` 7 · 3 } ` 7 · 。 J ` 6· ` J画 1 1` · 0 …` 3 · 0 1 一 …` 8 · ` 1 ` 7 · o 一`搜· 2 …菌 A } + … 士 一 { ` 3 · 。 … + … 一 … 一蔓B 、 C … · { 士 { 一 … + { 十 … 一 { ·困 } 一 … 一 } - 一 { 一 { 一 {菌 { 1 3 · 0 { 1 2· 0 { 一 { 1 6 · 5 } 1 5 · 0 { 1 3· 5 !
脓葡寒伤肠疾绿黄金伤付大痢
表内数字为抑菌圈直径 ( m m )。 + 有效 , 抑菌圈直径为 10 m m 以下 。 土有效 ,但作用 杯明显 。 一 无效
二 、 大丁草制剂及大丁试对绿脓杆菌体内感染的治疗作用
实验分批进行 一 “ ’ “ , 用小 鼠34 7只 , 于实验前日下午给药组动物腹腔注射药物一次 , 盐
水对照组注同容积生理盐水 2次 日两组动物均腹腔注射使动物产生 9 0咒以上死亡剂量的绿
脓杆菌 ( 5 · 1 0 9菌 /鼠 ) ,于注菌后 1 、 6小时各注药一次 ,第二天注药两次 , 对照组注同容积生
理盐水 ,观察四天内动物死亡情况 。 结果 (表 2 ) 盐水对照组小 鼠于腹腔感染绿脓杆 菌后四
天 内死亡 9 3 . 6%大丁草制剂和大丁试预防治疗组均见明显治疗作用 ,疗效以大丁试最好 ,
大 一 r 草水煎剂其次 , 均优于磺胺胖隆 , 大丁草醇浸剂可能有药物毒性作用 ,存活率较低 。
表 2 大丁 草及 大丁戒对绿脓杆菌体内感染的治 疗作用
组 别 药 物 剂 量( m g /k g ) 实 验 次 数 ! 功 物 数 …存活动物数 1存活率 ( % ’ P值…!ógn6C弓口尸QnU,Jū了`9妇5月口né J任
一.上
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张
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大丁草醇浸剂
大丁草水煎剂
人 丁 试
磺 月交 脉 T童
同 容
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三 、 大丁戒抗绿脓杆菌体内感染的疗效与剂量关系
小 鼠 80 只 , 分 7 组 , 给药组动物腹腔注射不同剂量大丁试一次 , 对照组注同容积生
理盐水 , 次日给药组与对照组动物均腹腔注射致死量绿脓杆菌 , 注后 1 、 6 小时和次 日
上下午各腹腔注射药物一次 , 对照组注同容积生理盐水 , 记录四 天内死亡情况 。 结果盐
水对照组动物全部死亡 , · 给药组动物随药物剂量增大 死亡率明显降低 (表 3 ) 。 本实验
各组剂量按等比级数相差 , 故按改良寇氏法计算其半数有效量 ( E D 。 。 ) 为 4 6 . 2 m g / k g 。
表 3 大丁戒对绿脓杆菌体 内感染动物治疗作用与剂量关 系
生理盐水对 照 组 大 丁 贰 各 剂 量 组
绿脓杆菌感史量 (乞菌 /只 )
药 动 剂 量 ( m g / k g )
物 剂 数 (只 )
四大 内 存 活 数 (只 )
存 活 率 ( % )
{
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四 、 大丁试对网状内皮系统吞噬功能的影响
1
、 小鼠炭末法 , 29 只小鼠 , 给药组 ( 18 只 ) 每天腹腔注射大丁试 56 m g / k g一次 ,
连注四天 , 对照组 ( n 只 ) 注同容 积药物溶剂 , 第五天用印度墨汁法实验 〔` ’ 、 测 定吞
噬系数 〔 5 〕 。 结果对照组和给 药组小鼠对炭末吞噬 系数分别为 0 . 7 5 士 0 . 0 5 7和 0 . 5了3 土
0
.
05 2
, 两组差异显著 ( P < 。 . 肠 ) 。 表明大丁试能明显增加小鼠网状内皮系统吞噬功能 。
2
、 家免刚果红法 ` 5 , : 四只家兔 , 于给药 前测定对刚果 红的吞噬系 数为 0 . 4 8 7 土
。 . 0 3 9 , 然后每天腹腔注射大丁试 20 m g / k g 一次 , 连注四天 , 第五天测定对刚果红的吞
噬系数为 0 . 4 14 士 0 . 03 2 , 比给药前减小 ( P > 。 . 05 ) , 可见大丁试对家兔网状内皮系统
吞噬功能有一定增加 。
五 、 大丁贰的毒性观察
1
、 小鼠急性毒性测定 : 15 只小鼠腹 腔注射大丁试 1 50 m g / k g , 观察三天无 死亡 。
另用 了组小鼠腹腔注射大丁贰 2 0 一 s 0 0 0 m叮 k g , 观察三天无死亡 , 第四天剖析看到 ,
剂量在 I O O0 m g / k g以上者腹腔内残存少量尚没吸收的药物 。
2
、 对家兔连续多次给药的毒性观察 : 家兔 6 只 , 均分两组 , 给 药组静 注 0 . 2%大
丁试水 i容液 20 m g / k g , 每 日两次 , 连注 7 天 , 对照组注同客积生理盐水 , 测定给药前后
血象 、 肝肾功能 、 尿常规 和一般状态 。 给药前和给药后 2 、 4 、 8 、 2 4,J 、时 和 2 、 3 、
7天的血象测定表明 , 给药组与对照组白血球总数变化分别在 1 1 . 6一 1 1 . 4和 1 2 . 」一 1 0 . 。
(千 / ; 1: ,1飞 3 ) 之间 ; 两组红血球总数变化分另IJ在 5 49一 4 5 6 和 5 7 7一 3 5 7 (万 / :二 ,: , 3 )之间 。
两组红 、 白血球总数变化无明显差异 。 其中红血球总数两组同样略有 降低 , 可能与每日
注入大量液体有关 。 于给药前和给药后 2 、 3 、 7 天分别进行了血清摩香草酚浊度试验 ,
结果两组动物均无明差异 。 给药后第 8 天测定两组动物酚红排泄率 , 在静注酚红后收集
30
、
6 0
、
1 2 0
、
24 0分钟尿液 , 测定尿中酚红浓度 , 结果给药组与对照组酚红排泄曲线相
近 , 于 2 40 分钟内尿中酚红排出 量分别为注入量的 6 0%和 56 % , 两组无明显 差异 。 给药
后两组动物作尿常规检查 ( 间 日检查 ) 和实验后对动物作大体解剖检查 , 均未发现 明显
异常改变 。 本实验表明大丁试对家兔连续多次给药 ( 14 次 ) 没见有明显毒性反应 。
讨 论 与 小 结
我们对 40 多 种中草药进行体外 和体内抗绿脓杆菌作用的筛选 , 发现大丁草制剂在体
外对绿脓杆菌仅有较弱的抑菌作用 , 但对体内感染绿脓杆菌动物的实验治疗中 ,可 改善染
菌动物的一般状态 ,其醇浸剂可保护部分动物存活 ,水煎剂可使 50 % 以上动物免于死亡 。
从该植物中分离出的大丁贰 , 对绿脓杆菌体外抑菌作用仍不很强 (该药溶解度很小 , 可
能有影响 ) , 对绿脓杆菌体内 感染动物的疗效却很显著 , 其 E D 。 。为 4 6 . 2 m g / k g 。 大丁
试和大丁草制剂对体外 、 体内抗绿脓杆菌作用具有平行关系 , 并随剂量增大疗效增加 ,
表明大丁贰是该植物抗绿脓杆菌的主要有效成分之一 。
绿脓杆菌感染的危害 主要有细菌繁殖和放出内毒 素两个 因素 , 临床对败血症 治疗
中 , 见有抗菌素将细菌基本杀灭后 , 病人尚存严重病症甚至死亡 , 其原因多因细菌毒素
中毒所致 。 本实验用腹腔注射大量绿脓杆菌造成体内急性感染 , 感染强度大 , 动物死亡
快 , 多在 12 ~ 24 小时内死亡 , 此种感染方式有大量绿脓杆菌内毒素进入机体 。 该毒素能
使动物血压 、 白血球和体温降低 , 能抑制机体免疫机能 , 降低网状 内皮系统的吞噬功能
等 〔” 吕 , , 严重影响机体代谢和生理功能 , 是造成动物 死亡的原 因之一 。 本实验 看到 ,
大丁贰能明显增加小鼠对炭末的吞噬功能 , 对家兔刚果红的吞噬作用也有一定增 强 , 表
明大丁试能刺激机体网状内皮系统的吞噬功能 , 可能这是该药抗菌作用的原因之一 。
该药对绿脓杆菌内毒素是否有直接或间接解毒作用尚待进一步研究 。
参 考 文 献
1
. 朱廷儒 、 苏世文等 : 大丁草中一种新葡糖贰的分离和鉴别 。 (见本期学报第 35 页 )
2
. 余庆等 : 第二军医大学 《学术资料汇编》 ( 1 3 ) : 72 , 19 6 2 。
3
. 竹内富雄等 : J 。 A n t i b i o t 。 1 8 ( 2 ) : 1 0 7 , 1 9 6 5 。
4
. 贵州省药检所药理室 : 中国药学会 《中药理论研究方法讨论会资料汇编》 , 第
3 3页 , 1 9 8 0 。
5
。 田村丰幸: 药理学实验法 ( 日 ) P . 3 5 7 、 协同医书出版社 , 1 9 6 3 。
6
。 冯玉书 , 张汝华: 沈阳药学院学报 , n : 73 , 1 9 7 9 。
7
。 板原 : 综合临床 ( 日 ) , 1 6 ( 2 ) : 7 2 6 , 1 9 6 7 。
8
. 杨春明 : 《中华医学内科杂志》 12 ( 6 ) : 46 , 1 9 6 4 。
( 1 9 8 1年 9 月收稿 )