全 文 ：第5 1卷 第4 期
14 9 9年 1 0月
韶关大学学报 ( 自然科学版
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不同光质和培养基对毛地黄叶
组织培养中强心普积累的效应研究
冯 敏 毛学文 陈 荃
( 韶关 大学科研设备处 ) ( 天水师专 )
摘要 :通过对五种不同浓度培养基的不 同光照处理 , 测定愈伤组 织 中强心普的含量 。 结
果表明 : 不同光质对毛地黄愈伤组织中强 心普的合量有明显的影响 , 蓝光 、 绿光 、 黄光对强
心普的产生和积累有促进作用 , , 红光有抑制作用 。 在 同一光质中 , 强心普的含量与培养基中
附加激素的浓度密切相关 。
关键词 : 光质 , 培养基 ; 强 心普 ; 毛地黄
已知光质和培养基中激素含量会影响毛地黄叶离体培养过程中器官的发生和对愈伤组织
的诱导 L’ J ` 2 1 , 但光质和培养基对离体培养中次生代谢产物的产生和积累研究至今 未 见 报
导 , 不同光质与不同浓度的激素配比之间是否存在相互影响也不 明确 。
从毛地黄中提取的强心昔类药物是治疗心力衰竭的主选药物 , 同时也是一种重要的化学
试剂 。 目前其药用成份主要从该植物叶片中提取 , 生产成本高 , 价格昂贵。 笔者已应用植物
组织培养方法对离体叶愈伤组织中强心昔含量变化做了初步研究 , 结果表明 : 利用组织培养
方法获得较高含量的强心昔是可行的 。
为了寻求提高愈伤组织中强心昔含量的方尚 本文以五种不同浓度的激素配比的培养基
和不同光质对毛地黄叶进行愈伤组织的诱导和继代培养 , 发现培养基中不同浓度的激素配比
可影响不同光质的效应和强心昔的含量 , 探讨了光质和培养基对植物组织培养过程中次生代
谢产物的影响 , 为工业化生产提供可行性依据 。
l 材料与方法
1
.
1 培养基的配制 :
本实验以毛地黄叶为外植体 , 以 M S为基本培养基 , 附加五种不同浓度 和 比 例 的 6 -
B A和2 . 4 一 D的组 合 , 即 ( 1 ) M S + 6 一 B A O. 5 + 2 . 4一 D o . 5 ,
玫稿日期 : 1 9 94一。 3一 30
第 4期 冯敏 等 :不同光质和培养基对毛地黄叶组织培养中强心普积累的效应研究 · 7卜
乓三井 =二 =二二二一二二一一二一 =二二二二二二二二二二巴二巴二竺巴巴竺竺竺 二巴二二竺竺三竺二二竺巴三二二二二巴竺竺竺巴竺竺巴竺竺竺分( 2 )M S+ 6一 B A O。 5 + 2 .4一 Dl .0,( 3 ) M S + 6 一 B A I 。 0 + 2 . 4 一 D l 。 0 ,( 4 ) 五压S + 6 一 B A O . 1 + 2 . 4 一 D l 。 0 -( 5 ) M S + 6 一 B A O . 5 + 2 。 4 一 D O。 1-
P H值起始为 5 。 8 , 无菌操作接 种 后 选 取 白 光 、 红光 ( 6 3 2 n m ) 、 绿光 ( 5 2 0n m ) 、 蓝光
( 45 5n m )
、 黄光 ( 5 8 0n m ) 五种不同光质的光照培养 , 以黑暗为对照 。
1
.
2 培养条件
温度为 25 土 2 ℃ , 除黑暗外 , 其它处理每天光照 1 0小时 , 各形灯管的外形一致 , 除白色
荧光灯管为市售产品外 , 其它各色灯管均用滤光膜将 4 0W的白炽灯变为红光 、 绿光 、 蓝光 、
黄光 。 每组重复 9 瓶 , 继代一次 , 培养 20 天后测定强心昔含量 。
1
。
3 强 心昔的测定
将充分干燥的愈伤组研碎后 ` 3 ’ , 放入索氏提取器中 , 加入一定量的 80 % 乙 醇 , 于 85 ℃
的水浴中进行液固萃取 10 小时 , 提取液加 P bA 。沉淀色素及杂质 , 再加N a : 5 0 `溶液以沉 淀
过量铅 , 离心弃去沉淀 , 上清液经 3 . 5一二硝基苯甲酸和 N a O H显色 , 用 7 4 分光光度 计 在
5 3 5 o m处比色 , 测得强心昔含量 。
2 结果与讨论
2
.
1 不同光质对强心昔含量的影响
实验结果表明 : 在不同激素配比的培养基中 , 采用不同光质处理后 , 强心昔的形成和积
累具有明显差异 ; 培养基相同 , 所用光照的光质不同 , 强心昔的形成效应亦不相同 。 在五种
光质 中 , 蓝光 、 绿光 、 黄光对强心昔的积累均有促进作用 , 其中蓝光的效应最好 , 其次为绿
光 、 黄光 , 红光则表现为抑制作用 。 如图 1 。
2
.
2 同一光质 , 不同激素配比的培养基对强心昔含量的影响
在同一光质处理 中 , 由于培养基激素浓度配比的差异 , 对强心昔含量的影响也 不 同 。
实验结果表明 : 每种单色光对愈伤组织中强心昔的积累均可产生促进和抑制两种作用 , 这与
培养基中激素配比密切相关。 蓝光在培养基 ( 2 ) 中促进作用最为显署, 在培养基 ( 4 ) 中
表现为抑制效应 ; 绿光最佳效应在培养基 ( 3 ) , 抑制作用产生在培养基 ( 5 ) ; 黄光在培
养基 ( 4 ) 为促进效应 , 培养基 ( 3 ) 则为抑制作用 ; 红光在培养基 ( 5 ) 中略有促进作用
外 , 其余培养基均表现为抑制效应 。 白光和黑暗条件下 , 几乎成平行 直线 。 如图 2 。
光质对植物组织培养中愈伤组织的诱导和器官的发生已有许多报道 , 但对植物次生代谢
产物的影响报道不多。 我们的实验结果表明 , 光质不仅影响植物组织培养物的生长和发育 ,
同时对次生代谢产物的含量也有较大影响 。 在相同培养基中 , 不 同光质的效应主要受不 同波 _
长和辐照度所调控 ; 在不同培养基中 , 光质效应受培养中的成分和激素配比的浓度所控制 ,
激素浓度的差异就会产生相反的结果 。 所 以在 同光照下 , 、 选择适当配比的激素浓度是提高强
心昔含量 的重要因素 。
韶关大学学报 (自然科学版 ) 1白 9 4年
强心昔含量
(r ng/ g干重 )
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。 愈伤组 织 中强心普含量与不同光质的效应
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强心昔含量
( mg/ g千重 )
图 2。 不同激素水平下光质衬强心普含量的影响
参考文献
倪德祥等 , 植物生理学报 , 1 9 8 7 ( 2 )
倪德祥等 , 复旦大学学报 , 1 9 8 8 ( 4 )
中草药有效成分的研究 , 人民卫生出版社 , 1 9 72
231
第 4期 冯敏 等 :不同光质和培养基对毛地黄叶组织培养中强心普积累的效应研究 一7 3.
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