全 文 :讨 论
用 HPLC法测定黄芩苷含量 ,文献中有多种流
动相[ 2 , 3] ,比较多种比例的甲醇-醋酸-水的分离效
果 ,以甲醇-醋酸-水(42∶1∶58)为优 ,其与杂峰分
离度为 2.5;保留时间适中 。用 50%甲醇超声处理
20min 后的样品 ,继续用 50%甲醇超声 10min 提
取 ,同法测定 ,结果几乎测不到黄芩苷 ,表明本法可
提取完全 ,无需复杂的提取方法。
[ 作者简介] 韩云国(1964-)男 ,主管药师 , 主要从事医院制
剂工作。联系电话:(0543)5326817。
[ 参 考 文 献 ]
[ 1] 王本祥.现代中药药理学[ M ].天津:天津科学技术出版社 ,
1997.299-301.
[ 2] 宋宁宁.高效液相色谱法测定复方鱼腥草颗粒中黄芩苷的含
量[ J].药物分析杂志 , 1999 , 19(1):63-64。
[ 3] 卫生部药典委员会.卫生部药品标准新药转正第 16册[ S] .
1998.6-7.
(收稿日期:2004-05-08)
序叶苎麻多糖的提取及含量测定
李仲昆1 ,尹为民2 ,王崇静1 ,王 珩1 ,李 冰1
(1 云南省昆明市延安医院药剂科 ,昆明 650051;2 云南省第一人民医院 ,昆明 650032)
[ 摘要] 目的:研究提取和测定序叶苎麻多糖的方法 。方法:应用硫酸-苯酚比色法对多糖的含量进行了测定。
结果:叶提取物中多糖的含量为 50.18%, 茎提取物中多糖的含量为 47.16%。结论:提取和测定序叶苎麻多糖的
方法简便易行 ,稳定可靠。
[ 关键词] 序叶苎麻;多糖;提取;测定
[ 中图分类号] R972.1 [ 文献标识码] A [ 文章编号] 1003-3734(2004)12-1378-02
Extraction and determination of
polysaccharides in Bochmeria clidemioides var diffusa
LI Zhong-kun1 , YIN Wei-min2 ,WANG Chong-jing1 ,WANG Heng1 , LI Bing 1
(1 Department o f P harmacy ,Yanan Hospi tal o f K unming City , K unm ing 650051 ,China;
2 The First Peoples Hospi tal o f Yunnan P rovince , K unming 650032 ,China)
[Abstract] Objective:To study methods of ext raction and determination of polysaccharides in Boe-
hmeria clidemioides var diffusa.Methods:The poly saccharides was determined by colourimetry with sul-
furic acid-phenol as colourimetric reagent.Results:The content of polysaccharides w as 50.18% and
47.16% for the leaf and haulm respectively.Conclusion:The method of ex traction and determination of
poly saccharides in Boehmeria clidemioides var diffusa is simple , reliable and stable.
[ Key words] Boehmeria clidemioides var diffusa;poly saccharide;ex traction;determination
荨麻科中苎麻属植物序叶苎麻 ,具有祛风湿 、解
痉 、解毒的作用[ 1] ,且分布广泛 ,具有很高的开发价
值。德国的风湿安就是由异株荨麻的提取物制作
的[ 2] 。多糖是该类植物抗炎 、抗癌的主要活性成分之
一 ,至今国内仅见有关裂叶荨麻多糖的研究[ 3] ,未见
有关序叶苎麻中多糖的提取方法及含量测定的研究
报道 ,对此我们做了相关研究 ,现报告如下。
材料和方法
原料
序叶苎麻(Boehmeria clidemioides var diffusa)采
自云南大理宾川县 ,经中科院昆明植物所李锡文教
授鉴定 。
仪器
UV-2401-PC紫外分光光度计(日本岛津)。
试药
D-无水葡萄糖(中国药品生物制品检定所 ,
0833-9501),其它试剂均为分析纯。
多糖提取
分别取序叶苎麻的叶 、茎各 65g ,加水浸泡24h ,
煮沸提取 2 次 , 每次 30min ,合并提取液 ,浓缩至
250mL ,离心 10min(2500r·min-1),上清液滤过后
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得到提取液。
取提取液 100mL ,于水浴锅上浓缩至浸膏状 ,置
于40℃恒温箱中干燥 ,研细后放于干燥器中保存 。
含量测定
5.1 标准品溶液的制备 精密称取 105℃干燥至
恒重的葡萄糖 9.9mg ,置 25mL 量瓶中 ,加蒸馏水稀
释至刻度 ,即得 。
5.2 标准曲线的绘制 精密吸取标准品溶各 0.3 ,
0.5 , 1.0 , 1.5 , 2.0 ,2.5mL 于 10mL 量瓶中 ,加蒸馏
水稀释至刻度 , 摇匀 。取上述溶液各 1.0mL 于
10mL 试管中 ,加入 4%的苯酚溶液 1.0mL ,浓硫酸
7.0mL ,放置 10m in于70℃水浴30min ,冷却至室温
后在 490nm 处测定吸收度 ,以吸收度为横坐标 ,葡
萄糖浓度为纵坐标 , 计算得回归方程:C(μg ·
mL
-1)=116.74A+0.165 4 , r=0.999 9 ,n=6。线
性范围为 1.32 ~ 11μg ·mL-1 。
5.3 样品测定 精密称取干燥的叶 、茎提取物约
0.5g ,置于 25mL 量瓶中 ,加蒸馏水稀释至刻度 ,超
声 10min使充分溶解 ,得样品 1 ,2。
精密吸取样品 1 ,2各 3.0mL ,加 3.0mL 石油醚 ,
旋涡振荡 1min ,超声 10min , 离心 5min(2 500r ·
min
-1);取下层液 2.0mL ,加 3.0mL 乙酸乙酯 ,旋涡
振荡 1min ,超声 10min ,离心 5min(2 500 r ·min-1);
取下层液 1.0mL ,加 4.0mL 蒸馏水 ,加活性炭适量 ,
加热至沸腾 ,冷却后滤过;取滤液 2.0mL ,加 2.0ml
Sevag试剂(氯仿∶丁醇=4∶1),旋涡振荡 1min ,超
声10min ,离心 5min(2 500 r · min-1);取上层液
1.0mL ,加95%乙醇6.0mL ,冰箱放置24h ,离心 5min
(2 500 r · min-1);弃去上层乙醇 , 加 95%乙醇
8.0mL ,离心 5min(2 500 r ·min-1);弃去上层乙醇 ,
挥干剩余乙醇 。残渣加 5.0mL 蒸馏水 ,旋涡振荡
1min ,超声 10min ,精密吸取1.0mL ,于 10mL 试管中 ,
按照标准曲线项下自“加入 4%苯酚溶液 1.0mL”起
相同操作 ,代入回归方程。
5.4 加样回收率 精密称取已知含量的序叶苎麻提
取物 ,分别加入不同量的葡萄糖对照品 ,按照样品含量
测定项下操作 ,计算回收率。回收率测定结果见表 1。
表 1 回收率测定结果
Tab 1 Resul ts of recovery test
编号 多糖含量/ mg
葡萄糖加入量
/mg
测定量
/ mg
回收率
/ %
RSD
/ %
1 30.11 5 34.34 97.81 2.84
2 30.11 10 39.22 97.78 2.56
3 30.11 15 45.25 100.31 2.34
结 果
100mL 叶提取物溶液浓缩干燥后得到 4.5g 样
品 ,样品中多糖的含量为 50.18%;100mL 茎提取物
溶液浓缩干燥后得到 2.8g 样品 ,样品中多糖的含量
为 47.16%。
讨 论
1 浸泡及煮沸的时间直接影响提取物中多糖的
含量
多糖一般为水溶性 ,因此采用水提取。我们试
验过浸泡 0.5h , 2h ,煮沸 0.5h ,结果提取物中多糖
的含量均低于浸泡 24h ,煮沸 0.5h ,2次 。
2 离心沉淀及过滤影响提取物中多糖的含量
如果不离心及过滤就直接浓缩 ,会带入许多杂
质 ,影响多糖的含量。
3 序叶苎麻茎提取物中的多糖含量低于叶中的多
糖含量
因此在采摘时可以主要以采摘叶为主 。我们提
取序叶苎麻多糖的操作简便 ,方便工业化生产。
[ 作者简介] 李仲昆(1967-), 女, 主任药师 ,主要从事药物新
剂型研究。联系电话:(0871)3177468-465 , 13708421039。
[ 参 考 文 献 ]
[ 1] 岳俊山.我国荨麻科的药用植物资源[ J].中草药 , 1987 , 18
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[ 2] 庄林根.荨麻叶浸膏治疗风湿病的临床效果[ J] .国外医药 ·
植物药分册 , 1996 , 11(2)∶66-67.
[ 3] 卫莹芳 ,王梦月 ,史焱 , 等.荨麻多糖的提取及含量测定[ J] .
华西药学杂志 , 2001 , 16(6)∶469-470.
(收稿日期:2003-10-19)
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