全 文 ：第 20卷第 6期 华　夏　医　学 V ol. 20 No. 6
2007年 10月 Acta Medicinae Sinica Oct. 2007
广西苦玄参不同药用部位的薄层鉴别与含量测定①
陈　君 1② , 甄汉深 2 , 韦建华 2
( 1.柳州医学高等专科学校 ,广西 柳州　 545006; 2.广西中医学院药学院 ,广西 南宁　 530001)
摘要: 目的: 对苦玄参的根、茎、叶、花进行薄层鉴别和含量测定研究 ,为进一步的应用研究提供科学依据。 方法:采用
薄层层析法对中苦玄参不同部位进行定性鉴别 ;采用反相高效液相色谱法 ( RP-HPLC)对其不同部位进行含量测定。
结果: TLC鉴别均表明:茎、叶、花的乙酸乙酯∶甲醇 ( 5∶ 1)提取物的主斑点一致 ,提示根、茎、叶、花中所含部分成分
有可能相同。含量测定结果显示苦玄参苷Ⅰ A在 0. 0242～ 0. 1694μg /μl范围内线性良好。结论:广西龙州县苦玄参药
材中苦玄参苷Ⅰ A在根、茎、叶花中的平均含量分别为 0% , 0. 11% , 1. 63% , 1. 12%。
关键词: 苦玄参 ;定性鉴别 ;含量测定
中图分类号: R927. 2; R282. 5　　　文献标识码: A　　　文章编号: 1008-2409( 2007) 06-1179-03
Identification and content assay of Picria fel-tarrae lour with high performance liquid chromotography /CHEN Jun,
ZHEN Han-shen, WEI Jian-hua∥ Liuzhou Medical School, Liuzhou 545006, China
Abstract: Objec tiv e: To a ssay the contents of r oo t, stem , leaf and flow er o f picria fel-tar rae lour with high per fo rmance
liquid chromoto g raphy( HPLC) . Methods: The differ ent pa rts of picria fel-ta rra e lour w ere identified and the contents
w ere detected by RP-HPLC. Results: The ex trac ts from roo t, stem, leaf and flow er had the same main spo ts. It sug-
gested tha t they have the sam e compositions. In contents a ssay , ther e w as a good linear rela tionship a t range of 0. 0242
～ 0. 1694μg /μl o f pacria fel-ta rra e lour. Conclusion: The ave rage contents o f pacria fe-tar rae lour in r oo t, stem, lea f
and flow er are 0% , 0. 11% , 1. 63% and 1. 12% , respectiv ely.
Key words: pac ria fe-te-ta rr ae; identifica tion; content assa y
　　广西道地药材苦玄参 ( Picria fel-tar rae Lour)为玄参科苦
玄参属植物 ,又名苦草 ,蛇总管、鱼胆草、苦胆草。 主要分布于
广西、广东、贵州及云南等地 ,印度至菲律宾也有分布 [1] ,在广
西民间作为药用已有很长历史。据文献记载 ,苦玄参具有抑菌
抗炎之功效。由于苦玄参使用的药用部位为全草 ,其不同药用
部位的比较未见报道 ,因此 ,本实验对苦玄参的根、茎、叶、花
进行薄层鉴别及含量测定研究 ,为更好地利用苦玄参植物资
源提供参考。
1　仪器与试药
PBQ2I型自动薄层铺板器 (重庆 ) ; Agilent HPLC1100高
效液相色谱仪。苦玄参采于广西龙州 ,经广西中医学院药用植
物教研室刘寿养副教授鉴定为玄参科苦玄参属植物苦玄参。
分取根、茎、叶、花四部分粉碎 ,过二号筛备用。苦玄参苷Ⅰ A对
照品由广西植物研究所成桂仁教授提供 ,并经鉴定为单体纯
品。 薄层层析用硅胶 G( 200～ 300目 ) ,青岛海洋化工厂 ;甲醇
为优级纯 ,中国医药集团上海化学试剂公司出品 ;色谱流动相
用乙腈为色谱纯 ,天津市四友生物医学技术有限公司出品 ;其
余实验试剂均为分析纯 ;水为超纯水 ,均经过 0. 45μm微孔滤
膜过滤后使用。
2　薄层鉴别
2. 1　供试品溶液制备
分别取苦玄参根、茎、叶、花各约 1g ,加乙酸乙酯∶甲醇 ( 5
∶ 1) 25ml,超声提取 30min,滤过 ,滤液挥干 ,残渣加甲醇 1ml
使溶解即得。
2. 2　苦玄参苷Ⅰ A对照品溶液制备
取苦玄参苷Ⅰ A对照品适量 , 加甲醇适量使溶解制成浓
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①
② 作者简介:陈君 ( 1980- ) ,女 , 2006年毕业于广西中医学院药学院 ,现任柳州医学高等专科学校助教。
基金项目:国家中管局项目 ( 04- 05ZM01) ;广西壮族自治区科学技术厅项目 (桂科攻 0235022- 4) ;广西壮族自治区教育厅项目 [桂教科研
( 2003) 22号 ]。
度约 ( 2. 51mg /ml)溶液。
2. 3　薄层层析
照薄层色谱法实验 [2] ,分别取上述各溶液分别点于 CMC-
Na( 0. 7% ) -硅胶 G板上 ,以氯仿∶甲醇 ( 4∶ 1)为展开剂 ,展距
为 10cm,取出晾干 ,以 1%香草醛浓硫酸试液显色 , 105℃加热
5min,茎、叶、花溶液色谱与苦玄参苷ΙA对照品溶液色谱相应
位置上显一个相同的紫色斑点 (见图 1)。
图 1　苦玄参不同部位 TLC图
1.根 ; 2.茎 ; 3.叶 ; 4.花 ; 5.对照品
3　含量测定
3. 1　色谱条件
Lichr osph erC18,色谱柱 ( 4. 6m m× 250mm, 5μm ) ;流动
相: 乙腈 -0. 5%冰醋酸 ( 36∶ 64) ;检测波长: 264nm;流速:流速
1ml /min [3]。
3. 2　供试品溶液制备
分别取苦玄参药根、茎约 1g ,花、叶约 0. 5g ,精密称定后置
于 100ml锥形瓶中 ,加入 25ml 75%甲醇浸泡 10min,称定重量 ,
超声 30min,称定重量 ,摇匀 ,补足减失的重量。 取该样品溶液
1ml于微型离心管 ,以 10000r /min速度离心 10min,取上清液
进样 HPLC分析。
3. 3　苦玄参苷Ⅰ A对照品溶液制备
精密称取苦玄参苷Ⅰ A 12. 10mg置 50ml容量瓶中 ,用甲醇
溶解并稀释至刻度 ,摇匀 ,得浓度为 0. 242mg /ml的对照品溶液。
3. 4　苦玄参苷Ⅰ A标准曲线制备
精密吸取上述苦玄参苷Ⅰ A对照品溶液 1, 2, 3, 4, 5, 6,
7ml,分别定容于 10ml量瓶中 ,精密吸取 10μl,注入高效液相色
谱仪 ,按上述色谱条件测定峰面积 (见图 2) ,以峰面积积分值
为纵坐标 ,苦玄参苷Ⅰ A浓度为横坐标 ,绘制标准曲线 (见图
3) , 得到方程 A= 8111. 72929× Amt - 3. 4766006, r =
0. 99994,线性范围 0. 0242～ 0. 1694μg /μl
图 2　苦玄参苷Ⅰ A的 HPLC色谱图
图 3　苦玄参苷Ⅰ A的标准工作曲线图
3. 5　精密度试验
取同一供试品溶液 ,连续进样 5次 ,计算得到苦玄参苷Ⅰ A
峰面积的 RSD= 0. 83%
3. 6　稳定性试验
取同一份供试品溶液 ,于配制后 0, 2, 4, 6, 8, 12h依法测定
苦玄参苷Ⅰ A峰面积的 RSD= 1. 16% ( n= 6) ,说明样品在 12h
内稳定。
3. 7　重现性实验
取 5份苦玄参叶 ,每份约 0. 5g ,精密称定 ,依照 3. 2样品溶
液制备项下提取 ,分别进样 10μl,测定苦玄参的含量 , RSD=
2. 34%。
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3. 8　加样回收率实验
取已知苦玄参苷Ⅰ A含量的样品适量 ,精密加入一定量苦
玄参苷Ⅰ A标准品 ,按照“供试品溶液制备”项下条件制备待测
溶液 ,同法测定 ,计算回收率 ,结果见表 1。
表 1　加样回收率 (n= 6)
样品原含
量 ( mg)
加入量
( mg)
加样后测
定值 ( mg )
回收率
(% )
RSD
(% )
1 1. 138 1. 120 2. 210 97. 86
2 1. 064 1. 120 2. 234 102. 3
3 1. 144 1. 120 2. 230 98. 51
1. 83
4 1. 106 1. 120 2. 257 101. 4
5 1. 027 1. 120 2. 112 98. 38
6 1. 164 1. 120 2. 262 99. 02
3. 9　样品测定
分别取梧州苦玄参根、茎、叶、花样品适量 ,精密称定 ,按
3. 2方法制备成样品溶液 ,进样 ,结果见表 2。
表 2　苦玄参苷Ⅰ A含量结果 (n= 3)
样品 含量 (% )第 1次 第 2次 第 3次
平均含量
(% )
RSD
(% )
根 - - - - -
茎 0. 1055 0. 1073 0. 1043 0. 1057 1. 43
叶 1. 6283 1. 6252 1. 6406 1. 6306 0. 50
花 1. 1302 1. 1279 1. 1147 1. 1174 0. 74
4　讨论
4. 1　植物各器官中的成分及成分的含量是有差别的。 苦玄参
叶中含有较多的叶绿素 ,用甲醇提取的提取液有较多的色素杂
质 ,所展的斑点拖尾严重 ;用石油醚或氯仿提走色素杂质后再
用甲醇提取 ,所得效果不理想 ;用乙酸乙酯提取 ,叶的提取液色
素减少 ,斑点清晰 ,但根、茎的成分较少 ,用乙酸乙酯很难提取
出其成分。因此 ,选用乙酸乙酯∶甲醇 ( 5∶ 1)提取。所得的苦玄
参各部位提取液点样 ,用氯仿∶甲醇∶ ( 4∶ 1)展开 ,展开效果
比较理想 ,所得斑点较清晰集中 ,拖尾现象不明显。 结果 ,茎、
叶、花溶液色谱与苦玄参苷ΙA对照品溶液色谱相应位置上显一
个相同的紫色斑点。 提示茎、叶、花中均含有苦玄参苷ΙA。
4. 2　苦玄参药用部位为全草但不同部位含量测定显示 ,苦玄
参部位中苦玄参苷Ⅰ A的含量差异较大 ,苦玄参叶> 花> 茎>
根 ,苦玄参叶的含量最高。 中草药含量的差异与药用部位、药
物产地、采收季节等因素有关。 但本实验中样品品种单一 ,因
此 ,在今后的研究中 ,可对其他不同产地及季节的苦玄参不同
部位的玄参苷Ⅰ A进行比较 ,确定其有效部位。
参考文献:
[ 1]广西壮族自治区卫生厅 .广西中药材标准 [M ] .南宁:广西科学技
术出版社 , 1992: 225.
[ 2 ]蒋明廉 .苦玄参中苦玄参甙ΙA的含量测定 [ J ].桂林医学院学报 ,
1997, 10( 6): 69.
[ 3]邹节明 ,吴敏菊 ,王力生 .苦玄参 HPLC指纹图谱研究 [ J ].中国药
学杂志 , 2005, 40( 9): 664-666.
(收稿日期: 2007- 02- 15)
[责任编辑　王慧瑾　高莉丽 ]
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目的 ( Objectiv e)　简要说明研究的目的及提出问题的缘由 ,表明研究的范围和重要性。
方法 ( Methods)　简要说明研究课题的基本设计 ,使用了什么材料和方法 ,如何分组对照 ,研究范围及精确程度 ,
数据是如何取得的 ,经何种统计学方法处理。
结果 ( Results)　简要列出研究的主要结果和数据 ,有什么新发现 ,说明其价值及局限。叙述要具体、准确 ,并给出
结果的置信值、统计学显著性检验的确切值。
结论 ( Conclusion)　简要说明经验证、论证取得的正确观点及其理论价值或应用价值 ,是否可推荐或推广等。
(本刊杂志社 )
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