全 文 :基金项目:湖北长江大学科学发展基金项目 CD20060525
作者简介:谢秋萍(1985-),女 ,学生 ,主要从事预防兽医学研究。通讯作者:赵红梅,主要从事兽医生物技术的研究。
收稿日期:2007-05-10
毛地黄甙对钉螺生理生化的影响
谢秋萍 赵红梅* 苏加义
(长江大学动物科学学院 ,湖北荆州 434025)
摘 要:本实验研究了毛地黄强心甙对钉螺糖原和总蛋白含量的影响:大于 0.8g/L毛地黄强心甙能够显著降低钉螺
体内的糖原含量 , 减少幅度从 10.69%到 74.94%;毛地黄强心甙也能够在一定程度上降低钉螺体内的蛋白质含量(从
5.79%到 14.22%), 但减少量不及糖原显著;灭螺植物对钉螺的致死作用可能更多与钉螺组织细胞中的能量代谢有
关。
关键词:毛地黄;钉螺;糖原;蛋白质
中图分类号 S966.28 文献标识码 B 文章编号 1007-7731(2007)11-50-02
PhysiologicalandBiochemicalEffectsofL.heterophylusStachydrineonOncomelaniaHupensis
XieQiupingZhaoHongmeiSuJiayi (ColegeofanimalscienceYangtzeuniversity, Jingzhou, Hubei434025, China)
Abstract:Thisexperimentstudytheefectsofdigitalisstrongheartglucosideontooncomelaniaglycogenandtotalprotein.
TheLdigitalisstrongheartglucosidewhichisbiggerthan0.8 g/canremarkablyreduceoncomelaniainvivotheglycogen
content, andthescopeisfrom10.69% to74.94%;Thedigitalisstrongheartglucosidealsocanreducetheproteincontent
inoncomelaniainvivointhecertaindegree(from5.79% to14.22%), butthedecrementislessremarkablethanthegly-
cogen;Extinguishesthespiralplanttobepossiblymoretooncomelaniaslethalfunctionwiththeoncomelaniaorganizationcell
inenergymetabolismconcerns.
Keywords:Digitalis;Oncomelania;Glycogen, Protein
湖北省荆州市太湖农场是血吸虫病流行区 ,每年 5 -
6月份太湖港河滩出现钉螺 。钉螺是日本血吸虫惟一的
中间寄主 ,灭螺阻断传播是预防血吸虫病的有效措施 。目
前化学药物灭螺虽有较明显效果 ,但易造成严重的环境污
染 ,也不适合冬陆夏水和开放型的滩地 [ 5] ,故积极推进筛
选灭螺植物和利用植物他感作用进行生物生态灭螺的研
究是较有意义的。毛地黄是非常优良的抑螺草本植物 ,是
构建人工灭螺植物群落的理想材料 ,强心甙是毛地黄的灭
螺活性成分之一。本实验研究了毛地黄提取物强心甙对
钉螺糖原和总蛋白的影响以探讨其对钉螺的杀伤机理 ,为
生物生态灭螺提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 实验材料 实验用钉螺采自湖北荆州太湖港河滩 ,
转入 23℃温室饲养 ,选取 7-8旋成螺 ,于无氯清水中喂养
备用。毛地黄采自湖北荆州长江外滩 ,开花前采收全草 ,
去除杂物 ,洗净泥沙 ,鲜用或阴干备用 。
1.2 毛地黄强心甙的提取 、分离与纯化 按强心总甙提
取方法 [ 10] 。 ①将毛地黄新鲜叶洗净 ,加 75%乙醇适量灭
活 ,搅碎后 ,用 10倍于鲜叶重量的 70% -75%乙醇加热
至 70℃温度浸泡 12 h,提取 3次后去除残渣 ,减压回收乙
醇 ,沉淀过滤除杂质;②接着用乙醚处理浓缩滤液 ,弃醚
层;③再在水溶液中加饱和碱式醋酸铅水溶液 ,过滤去沉
淀;④然后将滤液通入 H2S气体之后再次过滤去沉淀;⑤
浓缩滤液静置可析出结晶或快速风干成固体状物质 ,便得
到毛地黄强心总甙。从 200g新鲜叶中获得 1.3121g毛地
黄强心总甙 。
1.3 糖原样品的制备与测试方法 采集的钉螺分 6组 ,
另正常饲养螺作为对照组 ,每组使用 20只大小基本一致
的成螺 ,在不同浓度水苏碱溶液中浸杀 4d后取出整个软
体组织 ,称量湿重 ,烘箱常温吹干 ,再称量干重 ,磨粉。每
次取样 15mg左右 ,在 10%三氯乙酸溶液中匀浆并定容至
4ml,静置过夜 ,然后离心 15min,取上清液 1ml,加 95%乙
醇 5ml,离心 20min。去除上清液 ,将离心管倒置 30min,用
1ml双蒸水溶解沉淀物 ,以此作为整体糖原制备物 。测试
采用蒽酮显色法 。反应呈现的绿色 ,用 722分光光度计在
620nm处比色 ,读取光密度值。用葡萄糖作标准曲线。实
验重复 3次 ,平均值作为实验结果 。
1.4 蛋白质样品制备与测试方法 样品制备与糖原测试
样品干粉相同。测试采用 KND-04全自动凯氏定氮仪 ,
上样量 30mg左右。按蛋白质含量 =6.25×氮含量计算 。
实验重复 3次 ,平均值作为实验结果。
2 结果与分析
2.1 强心总甙处理对钉螺糖原影响的测试结果及分析
钉螺经不同浓度强心总甙处理后的软体组织平均干重 、湿
50 安徽农学通报 , AnhuiAgri.Sci.Bul.2007, 13(11):50-51
DOI :10.16377/j.cnki.issn1007-7731.2007.11.023
重 、干湿比如表 1所示 。由表 1可知 ,不同浓度强心总甙
处理后钉螺软体的含水量未见明显变化 ,其干重约为湿重
的 1/5到 1/3之间。钉螺经强心总甙处理 4d后糖原含量
的变化如表 2所示:经强心总甙 0.20 -0.60g/L处理的钉
螺软体糖原含量有明显的上升 ,增加幅度从 6.77%到
59.23%,说明微量的强心总甙促进了钉螺的能量代谢;而
在 0.80-1.00g/L处理后 ,钉螺软体的糖原含量有显著的
下降 ,减少幅度从 10.69%到 74.94%,说明此时水苏碱作
用的强度超过了其生理阀值 ,影响钉螺的能量代谢而抑制
其生长 。
表 1 强心总甙处理后钉螺的软体组织重量
强心总甙浓度
(g/L) 0.2 0.4 0.6 0.8 1.00 对照
湿重 /mg 27.25 34.32 30.22 20.31 36.98 41.54
干重 /mg 6.87 9.88 7.91 3.98 10.97 12.56
干湿比% 25.21 28.79 26.17 19.60 29.66 30.24
表 2 强心总甙处理后钉螺软体组织的糖原含量
强心总甙浓度
(g/L) 0.2 0.4 0.6 0.8 1.00 对照
糖原含量 0.8896 0.7022 0.5965 0.4990 0.1400 0.5587
处理后的变化率
/(以干粉计 , %)+59.23+25.68 +6.77 -10.69-74.94 ―
表 3 强心总甙处理后钉螺软体组织蛋白质的含量
强心总甙浓度
(g/L) 0.2 0.4 0.6 0.8 1.00 对照
干粉含量 /% 39.55 38.11 37.21 36.65 36.01 41.98
处理后减少
率 /% 5.79 9.22 11.36 12.70 14.22
2.2 强心总甙处理对钉螺蛋白质影响的测试结果及分析
钉螺经强心总甙处理 4d后蛋白质含量的变化如表 3所
示 。由表 3可知 ,经强心总甙处理 4d后 ,钉螺软体的蛋白
质含量均有下降 ,减少幅度为 5.79%-14.22%,其变化幅
度较小 ,不能与其死亡率体现相应的变化 ,强心总甙灭螺
活性与作用后蛋白质的减少似乎没有太大的关系。
3 讨论
经低浓度(≤0.60g/L)强心总甙处理后钉螺软体的
糖原含量上升 ,增加幅度从 6.77%到 59.23%,表明低浓
度强心总甙处理钉螺 ,促进了钉螺的能量代谢;而在高浓
度(≥0.80g/L)处理后的钉螺软体的糖原含量下降 ,减
少幅度从 10.69%到 74.94%,表明高浓度强心总甙处理
影响钉螺的能量代谢而抑制其生长 。影响糖代谢的因素
错综复杂 ,王宏(2005)认为植物提取物使钉螺软体糖原
减少的原因可能有 [ 5] :①影响钉螺的肝功能 ,使局部肝细
胞坏死 ,直接影响糖原合成;②激活或钝化某些酶 ,促进
糖原分解和抑制糖原合成 ,导致糖原含量下降;③影响消
化道功能 ,引起摄食量减少 ,细胞摄取葡萄糖减少 ,糖原
合成下降 。
强心总甙能够在一定程度上降低钉螺体内的蛋白质
含量(5.79%到 14.22%),与夹竹桃枫杨等灭螺植物提取
物的效果差不多 ,但较正常螺的减少量不及糖原那样显
著 ,不能与其死亡率体现相应的变化。但彭卫平(1995)研
究表明兴林垦种区钉螺的总蛋白含量显著降低 [ 3] ,林地螺
营养不良可能是螺口密度下降的主要原因之一 ,两者的作
用机理可能不同 。
王根法(1989)报道有机灭螺药物溴乙酰胺对钉螺软
体蛋白质和脂类基本无影响 [ 4] ,说明不是所有具有灭螺活
性的药物都能减少钉螺软体的蛋白质含量 ,但都能显著降
低钉螺软体的糖原含量 ,表明灭螺药物对钉螺的致死作用
可能更多地与钉螺组织细胞中的能量代谢有关 ,但对钉螺
能量代谢过程的影响还需进一步探讨。
参考文献
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究.长江流域资源与环境 , 2005, 14(1)119-122. (魏凤编)
(上接 192页)是语文教学的组成部分 ,它与课堂教学既相
对独立 ,又相得益彰 ,它是以在教学过程中建构具有教学
性 、创造性 、实践性的学习主体活动为要求 ,以激励学生主
动参与 ,主动实践 、主动思考 、主动探索 、主动创造为特征 ,
以提高学生创新精神和实践能力为目的的教学形式 ,其具
体形式多样:(1)广泛开展语文活动 ,如开展读书活动 、开
设选修课 、举行辩论大赛 、创办学生文学社等 ,在活动中提
高学生语文创新能力。(2)投身社会实践 ,如开展社会调
查 、考察名胜古迹等 ,让学生充分展示语文创新才能 。让
学生关注社会 ,积极参与社会实践 ,也是提高学生创新能
力的有效方法 。
参考文献
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