全 文 ：32 李 熠：地梢瓜叶中总黄酮提取及含量测定
地梢瓜叶中总黄酮提取及含量测定
李 熠，张 力，包玉敏，刘 妍
（巴彦淖尔西部铜业有限公司质检中心，内蒙古 巴彦淖尔 015000）
李 熠：地梢瓜叶中总黄酮提取及含量测定
摘 要：采用超声波乙醇浸提法从地梢瓜叶提取总黄酮，单因素实验分析了提取剂浓度及提取时间、料液
比 3个因素对得率的影响得到超声法最佳提取工艺，即乙醇 80%提取时间 30(min)，料液比为(g/ml) 1:30
在此工艺下，提取总黄酮含量为 2.116(mg/g)，平均回收率 99.12% RSD=0.94%(n=4)此结果为地梢瓜药效
功能的进一步研究和资源开发利用提供了科学依据
关键词：地梢瓜叶；黄酮；超声提取；分光光度法


地梢瓜（Semen Cynanchi）别名地梢花，羊不奶棵，小
丝瓜，浮瓢棵，属于萝藦种植物，多年生草本植物。地梢瓜
资源较为丰富，适应性较强，为其开发利用提供了一定的物
质基础。地梢瓜有清热降火，消炎止痛等功效，提取物有某
些抗病毒作用。对于地梢瓜中总黄酮提取相关研究目前报道
尚少，本文在单因素实验影响地梢瓜叶中总黄酮提取率主要
因素上进行研究。在最佳提取工艺条件下，对地梢瓜叶中总
黄酮含量进行测定，为其在医药，食品等领域应用提供理论
依据[1]
1 实验部分
1.1 仪器、试剂与实验材料
仪器：T6新世纪紫外可见分光光度计（北京普析通用
仪器有限责任公司）
FZ102 型微型植物粉碎机（天津市泰斯特仪器有限公
司）
KQ-205B 型超声波清洗器 (昆山市超声仪器有限公司)
FA2104N 电子天平（上海民桥精密科学仪器有限公司）
KQ-B 型玻璃仪器烘干器（河南省巩义市英峪予华仪器
厂）
试剂：二次蒸馏水；乙醇等试剂均为分析纯（A.R）
材料：芦丁对照品（中国药品生物制品检定所批号
10080-200306）
地梢瓜叶（内蒙古巴彦淖尔市本地新鲜地梢瓜经清洗、
干燥、粉碎得地梢瓜叶粉末）
1.2 实验方法
1.2.1 标准曲线绘制
标准品溶液制备：准确称取芦丁标准品于 25.00mg 小烧
杯，加少量 80%乙醇超声溶解，定容至 100ml 容量瓶，摇匀
得浓度为 0.250mg/ml 芦丁标准溶液。
标准曲线绘制：准确称取芦丁标准溶液 0.00、0.40、
0.80、1.20、1.60、2.00、2.40ml分别置于 10ml比色管中，
均用水稀释至 2.40ml，各加5%亚硝酸钠0.4ml，混匀，放
置 6(min)，加 10% 硝酸铝0.40ml 混匀，放置 6(min)，加
4.30%氢氧化钠 4.00ml最后用水稀释至刻度混匀，放置
15(min)。以试剂空白为参比，在 506nm 处测定吸光度值 A
为纵坐标，浓度 C为横坐标绘制标准曲线[2]得回归方程
9993.0)10(1.0434C-0.01587A  Rmlmg
1.2.2 提取方法[2]
准确称取 1.0000g地梢瓜粉于 100ml锥形瓶中，加入一
定浓度的乙醇适量浸泡 20h，超声提取，过滤，洗涤，滤液
用该浓度的乙醇定容于 50ml容量瓶，得到黄酮类化合物提
取液，待测。
1.2.3 测定方法
精确量取提取液适量于 10ml比色管，加水 2.40ml，5%
亚硝酸钠 0.40ml，混匀放置6(min)，加 10%硝酸铝0.40ml
混匀放置 6(min),加 4.30%氢氧化钠4.00ml,最后用水稀释
至刻度，混匀放置 15(min)。以试剂空白为参比，在 506nm
处测定吸光度值 A，带入回归方程计算提取液中黄酮类化合
物的含量
1.2.4 回收率的测定方法
精确量取提取液适量于 10ml 比色管，加芦丁标准液
0.50ml，按 1.2.3 步骤操作，得加入芦丁标准液的样品的吸
光度值，根据下列公式计算回收率

2012 年 第 4期
2012 年 4月
化学工程与装备
Chemical Engineering & Equipment
李 熠：地梢瓜叶中总黄酮提取及含量测定 33
%100-  芦丁的加入量
样品中总黄酮的含量含量样品加标样测得总黄酮回收率

2 结果与讨论
2.1 最佳提取条件选择[ 3]
2.1.1 乙醇浓度对超声法提取效果影响
准确称取1.0000g地梢瓜粉末4份用不同浓度的乙醇溶
液 30ml 超声提取60(min)，测定提取液的吸光度值，计算
提取液中黄酮的得率

表 1 乙醇浓度对能率影响
Table 1 Effect of the ethanol concentration
on extraction rate
序号 1 2 3 4
乙醇浓度(%) 20% 40% 60% 80%
吸光度值(A) 0.244 0.470 0.301 0.472
总黄酮得率(%) 12.45 23.28 15.18 23.38

表 1知，地梢瓜叶中总黄酮类物质随乙醇浓度增大其得
率有所提高，当乙醇浓度 80%时，总黄酮类物质的得率最高，
提取效果最好。
2.1.2 提取时间对超声法提取效果影响
准确称取1.0000g地梢瓜叶粉末4份分别用80%的乙醇
溶液 30ml浸泡，选取不同的超声提取时间测定提取液的吸
光度值

表 2 提取时间对得率影响
Table 2 Effect of extracting duration
on extraction rate
序号 1 2 3 4
提取时间(min) 30 40 50 60
吸光度值(A) 0.510 0.478 0.465 0.463
总黄酮得率(%) 25.20 23.67 23.04 22.95

表 2知，在其他条件相同情况下，提取时间30min时
地梢瓜叶中总黄酮类物质的得率最高。
2.1.3 料液比对超声法提取效果的影响
准确称取 1.0000g地梢瓜叶粉末 4份，分别用 80%的乙
醇溶液，以不同料液比(g/ml)超声提取 30(min)，测定提取
液的吸光度值。

表 3 料液比对得率影响
Table 3 Effect of rate of solid to liquid
on extraction rate
序号 1 2 3 4
料液比(g/ml) 1：10 1：20 1：30 1：40
吸光度值(A) 0.4038 0.3975 0.4265 0.4160
总黄酮得率(%) 20.11 19.81 21.20 20.70

由表 3知，地梢瓜叶中总黄酮类物质的得率在料液比值
为(g/ml) 1:30 时最高。
由以上单因素实验结果：80%的乙醇在料液比(g/ml)
1:30,提取时间为30(min)的条件下,地梢瓜叶中总黄酮的
提取效果最佳。
2.2 黄酮含量测定[4]
准确称取地梢瓜叶粉末 1.0000g,在最佳提取条件下提
取,得待测液.按 1.2.3 方法操作,计算提取液中总黄酮含量.
结果见表 4。

表 4 总黄酮含量测定结果(n=4)
Table 4 The determination of the total flavonoid content
序号 加入量(ml) 吸光度值(A) 总黄酮含量(mg/g) 平均含量(mg/g) RSD(%)
1 1.00 0.438 2.175
2 1.00 0.423 2.103 2.116 0.94
3 1.00 0.422 2.098
4 1.00 0.420 2.089

2.3 回收率测定
分别精确量取地梢瓜叶待测溶液 1.0000ml 8 份,按
1.2.4 方法操作,测定各吸光度 A,计算样品回收率.结果见
表 5
34 李 熠：地梢瓜叶中总黄酮提取及含量测定
表 5 回收率测定结果(n=4)
Table 5 The results of the test about recovery rate
序号 样品量(mg) 加入量(mg) 测得值(mg) 回收率(%) 平均回收率(%)
1 0.3976 0.125 0.5212 98.88
2 0.3947 0.125 0.5203 100.48 99.12
3 0.3938 0.125 0.5165 98.16
4 0.3899 0.125 0.5136 98.96

3 结论
黄酮类化合物具有众多生理功能和药用价值,其主要作
用有活血化淤,保肝抗炎,抗菌,抗病毒,抗辐射及抗肿瘤及
延缓衰老,增强心血管功能等生理活性[5]。因此，地梢瓜叶
中总黄酮的有效提取及含量测定，是了解其药理作用和综合
开发利用的重要基础工作。试验结果表明：总黄酮提取的最
佳条件是用 80%乙醇超声波提取 30(min)，料液比(g/ml)
1:30。地梢瓜叶中总黄酮的含量为 2.116mg/g，平均回收率
为 99.12%，RSD=0.94%(n=4)。此结果为地梢瓜叶总黄酮的
提取方法，药效功能的进一步研究及资源开发利用提供科学
依据。

参考文献

[1] 张德权, 台建祥, 付 勤, 等. 生物类黄酮的研究及应
用概况[J]. 食品与发酵工业, 1999, 25(6): 25.
[2] 房 芳, 张广强, 谢新年. 用分光光度法进行黄酮类化
合物含量测定的研究[J]. 河南中医药学刊, 1997,
12(2): 17-19.
[3] 黄俊盛, 任乃林, 郑楚珊. 桑叶中总黄酮类化合物提
取工艺的研究[J]. 食品研究与开发, 2005(2): 82-84.
[4] 杨小凤, 仇佩虹, 叶筱琴. 马蹄金中黄酮成分分析[J].
光谱实验室, 2005, 22(6): 1211-1215.



Extraction and Determination of Total Flavone In
Leaf of Semen Cynanchi
LI Li ZHANG Li BAO Yu- Min LIU Yan
(Bayinnaoer western copper Co., LTD. Quality inspection center, Bayinnaoer 015000, China)

Abstract: This experiment adopts ultrasonicwave aided extraction from leaf of Semen Cynanchi to immerse
ethanol.Three factors including concentration of solvent,time and ratio of solid to liquid were investigated
by using single factor experiment.The optimal process conditions were obtained:ethanol concentration 80%，ratio
of solid to liquid 1:30，and extracting duration 30min.The flavonoid in leaf of Semen Cynanchi was determined
by spectrophotometry as 2.116 mg/g with average recovery of 99.12% and the relative standard deriation of 0.94%
(n=4), which offers scientific evidence for further studies of medicinal efficiency and comprehensive
utilization of Semen Cynanchi.
Key words:Leaf of Semen Cynanchi ; Flavonoid ; Ultrasonic extraction; Spectrophotometry