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广西匙羹藤茎95%乙醇提取物降血糖作用及其机制的初步研究



全 文 :[ 收稿日期]  2006-07-10
[ 基金项目]  广西自然科学基金项目(桂科自 0229044);广西教
育厅科研项目(桂教科研[ 2001] 401号);广西中医
学院重点科研项目(ZD2004010)
[ 通讯作者]  *甄汉深 , Tel:(0771)2219867;E-mail:8zhen@163.
com
广西匙羹藤茎 95%乙醇提取物降血糖作用
及其机制的初步研究
甄汉深* ,梁 洁 ,周 芳
(广西中医学院药学院 ,广西 南宁 530001)
  [ 摘要]  目的:研究广西匙羹藤茎 95%乙醇提取物(GSEE)的降血糖作用及其机制。方法:采用正常小鼠 ,四氧嘧啶性糖
尿病小鼠 ,肾上腺素性高血糖小鼠 , 用放射免疫分析和葡萄糖氧化酶等方法进行研究。结果:GSEE 对正常小鼠血糖在较高剂
量时有一定影响;可使四氧嘧啶性糖尿病小鼠的血糖值降低 、血清胰岛素水平升高;它还可使肾上腺素性高血糖小鼠血糖降低
(P<0.01);增强正常小鼠的葡萄糖耐受能力 , 耐受时间在 1 h 左右。结论:GSEE 对四氧嘧啶性糖尿病小鼠及肾上腺素性高血
糖小鼠有明显的降血糖作用 ,并且能增强正常小鼠的葡萄糖耐受。其降血糖的作用机制可能是促进胰岛 β 细胞分泌胰岛素。
[ 关键词]  匙羹藤茎醇提取物;四氧嘧啶;肾上腺素;血糖;胰岛素
[ 中图分类号]  R285.5  [文献标识码]  B  [ 文章编号]  1005-9903(2007)01-0032-03
Studies on Anti-hyperglycemic Effect of Ethanolic Extracts
from Gymnema sylvestre(Retz.)Schult
ZHEN Han-shen* ,LIANG Jie , ZHOU Fang
(Department of Pharmacy , Guangxi Traditional Chinese Medical University , Nanning , Guangxi 530001 , China)
[ Abstract]  Objective:To study the anti-hyperglycemic effect of Gymnema sylvestre(Retz.)Schult 95%Ethanolic
Extracts(GSEE).Method:Normal mice , alloxan-induced diabetic mice , adrenaline-induced hyperglycemic mice were
used.The anti-hyperglycemic action was studied with radio-immunoassay and glucoseoxidase.Result:High dosage of GSEE
could decrease fasted blood sugar in normal mice.It could increase serum insulin level , decrease fasted blood sugar in
alloxan-induced diabetic mice.It could also decrease fasted blood sugar in adrenaline-induced hyperglycemic mice.It
could improve glucose tolerance in normal mice , and the duration was about 1 hour.Conclusion:GSEE has obvious anti-
hyperglycemic effect in alloxan-induced diabetic mice and adrenaline-induced hyperglycemic mice.It could improve
glucose tolerance in normal mice.Its mechanism is stimulating of insulin secretion from β cells.
[ Key words]  Gymnema sylvestre(Retz.)Schult 95%Ethanolic Extracts;alloxan;adrenaline;blood sugar;insulin
  广西民间传统中草药匙羹藤 Gymnema sylvestre
(Retz.)Schult ,取干燥全株 。匙羹藤 ,又名武靴藤 、羊
角藤 、金刚藤 ,分布于印度 、印尼 、非洲 、越南和我国
广东 、广西 、福建 、台湾和云南等省区[ 1] 。其性平 ,味
苦 ,具有清热解毒 、生肌消肿 ,祛风止痛等功效[ 2] 。
现代研究表明 ,匙羹藤具有降血糖 、降血脂 、抑制甜
味反应 、抗龋 、抗病毒 、抗过敏等作用[ 3~ 6] 。本文研
究匙羹藤茎 95%乙醇提取物的降血糖作用 ,并初步
探讨其作用机制 ,为充分利用匙羹藤植物资源提供
实验依据。
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第 13卷第 1 期
2007年 1 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol.13 , No.1
Jan., 2007
DOI :10.13422/j.cnki.syf jx.2007.01.014
1 材料
1.1 动物 昆明种小白鼠 ,体重 20±2 g ,雌雄兼
用 ,普通级(广西中医学院实验动物中心 ,合格证号:
桂医动字第11004号)。
1.2 药物 匙羹藤茎95%乙醇提取物 ,每 g含生药
51g 。由匙羹藤茎提取制得 。使用前加数滴吐温
-80和蒸馏水研磨配制成不同浓度的混悬液 ,各给
药剂量为临床人用剂量的 100倍 、50倍 、25倍 ,给药
剂量均折合生药 g kg 表示 。
1.3 试剂 四氧嘧啶(alloxan ,美国 Sigma公司);盐
酸苯乙双胍片(降糖灵片 ,江苏林海药业有限公司制
造分公司 ,批号 0209112);格列本脲片(优降糖片 ,湖
南洞庭药业股份有限公司 ,批号 010716);盐酸肾上
腺素(天津金耀氨基酸有限公司 ,批号 0211211);葡
萄糖(C6H12O6 ·H2O , 广东汕头新宁化工厂 , 批号
20000905);葡萄糖氧化酶法测定试剂盒(四川省迈
克科技有限责任公司 ,批号 020924);125 Ⅰ-胰岛素放
射免疫分析药盒(中国原子能科学研究院 , 批号
20030712)。
1.4 仪器 AE1001 10000电子分析天平(日本岛津
公司);UV-160A紫外-可见分光光度计(日本岛津公
司);SN-695B智能放射免疫 γ测量仪(上海原子核
研究所日环仪器一厂):放免专用冷冻离心机(TDL-
5000B ,上海安亭科学仪器厂)。
2 方法与结果
2.1 匙羹藤茎 95%乙醇提取物对正常小鼠血糖的
影响 取正常昆明种小鼠 , 50只(♀♂各半),均匀
分为 5组:优降糖阳性对照组(优降糖 15 mg kg);匙
羹藤茎95%乙醇提取物高 、中 、低剂量组(剂量依次
为80 g kg 、40 g kg 、20 g kg ,下同);正常对照组(给予
等容积的蒸馏水)。连续给药 10 d 后 ,于末次给药
前小鼠禁食不禁水 8 h ,给药后继续禁食不禁水 2 h
后 ,眼眶后静脉丛采血0.2 mL ,待血液凝固析出血清
后 ,3 500 r min离心 15 min ,取血清 10 μL ,按葡萄糖
试剂盒的GOD-POD法测空腹血糖值 。结果见表 1。
表 1 匙羹藤茎 95%乙醇提取物对
正常小鼠血糖的影响( x±s , n=10)
组别 剂量(g kg) 给药后血糖值(mmol L)
正常对照组 — 5.35±0.61
优降糖组 0.015 2.48±0.882)
95%乙醇提取物 80 4.28±1.191)
40 4.39±1.25
20 4.89±1.37
  注:与正常对照组比较 , 1)P<0.05 , 2)P<0.01(表 2同)。
2.2 匙羹藤茎 95%乙醇提取物对四氧嘧啶性糖尿
病小鼠体重 、血糖和血清胰岛素的影响 正常小鼠
禁食不禁水 12 h 后 ,尾静脉注射新鲜配制的四氧嘧
啶生理盐水 85 mg kg ,72 h后 ,对禁食不禁水 8 h 的
小鼠眼眶后静脉丛采血测血糖值 ,选取空腹血糖高
于 9.00 mmol L者用于实验。取合格小鼠均匀分为5
组:降糖灵阳性对照组(降糖灵 12 mg kg);匙羹藤茎
95%乙醇提取物高 、中 、低剂量组;糖尿病模型组 ,另
设正常对照组。连续给药 10 d ,每隔 3 d称重 1次 。
于末次给药前小鼠禁食不禁水 8 h ,给药后继续禁食
不禁水 2 h 后 ,摘眼球取血测空腹血糖值并计算血
糖降低百分率 ,按胰岛素放射免疫分析药盒的放射
免疫法测定血清胰岛素。结果见表 2 、表 3。
表 2 匙羹藤茎 95%乙醇提取物对四氧嘧啶性
糖尿病小鼠体重的影响(g , x ±s , n=10)
组别 剂量(g kg) 给药前
给药后
3 d 7 d 10 d
正常对照组 — 21.05±2.28 25.70±2.79 27.80±3.39 29.10±3.57
模型对照组 — 20.25±2.44 21.75±4.451) 22.80±4.401) 22.35±4.672)
降糖灵组 0.012 21.40±2.37 24.15±3.11 26.20±3.29 27.15±2.86
95%乙醇提取物 80 21.85±2.45 23.85±3.02 24.60±4.28 25.25±4.20
40 21.55±3.59 23.95±4.39 24.90±5.27 23.50±5.96
20 21.90±2.42 23.25±2.25 24.25±2.06 23.45±2.54
表 3 匙羹藤茎 95%乙醇提取物对四氧嘧啶性糖尿病小鼠血糖 、
血清胰岛素水平的影响( x±s , n=10)
组别 剂量(g kg)
血糖值(mmol L)
给药前 给药后
血清胰岛素
(IU mL)
血糖降低
百分率(%)
正常对照组 — 4.19±0.302) 4.45±0.412) 9.70±3.952) —
模型对照组 — 22.26±3.38 24.22±3.96 2.76±1.11 —
降糖灵组 0.012 22.76±5.27 12.09±3.642 , 4)11.23±3.362) 45.87
95%乙醇提取物 80 22.85±8.69 14.00±6.152 , 3) 9.23±4.442) 36.91
40 21.66±7.76 12.95±5.282 , 3) 7.64±3.042) 35.75
20 23.52±7.53 19.66±8.75 4.41±1.591) 19.70
  注:与模型对照组比较 , 1)P <0.05, 2)P<0.01;与给药前比较 ,
3)P<0.05, 4)P<0.01(下同)。
2.3 匙羹藤茎 95%乙醇提取物对肾上腺素性糖尿
病小鼠血糖的影响 取正常昆明种小鼠 , 60 只(♀
♂各半),均匀分为 6组:优降糖阳性对照组;匙羹藤
茎 95%乙醇提取物高 、中 、低剂量组;模型对照组和
正常对照组。连续给药 10 d ,于末次给药前小鼠禁
食不禁水8 h ,给药后继续禁食不禁水2 h后 ,除正常
对照组外 ,每只小鼠腹腔注射盐酸肾上腺素 0.2 mg
kg ,正常对照组则腹腔注射等容量的生理盐水 。30
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中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
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min后 ,小鼠眼眶后静脉丛采血 ,测空腹血糖值。结
果见表4 。
表 4 匙羹藤茎 95%乙醇提取物对肾上腺素性
糖尿病小鼠血糖的影响( x±s , n=10)
组别 剂量(g kg) 给药后血糖值(mmol L)
正常对照组 — 4.95±1.152)
模型对照组 — 14.14±2.51
优降糖组 0.015 7.07±1.492)
95%乙醇提取物 80 7.71±2.342)
40 7.98±1.392)
20 8.59±1.892)
2.4 匙羹藤茎 95%乙醇提取物对正常小鼠糖耐量
的影响 取正常昆明种小鼠 ,90 只(♀♂各半), 均
匀分为 6组:优降糖阳性对照组;匙羹藤茎 95%乙醇
提取物高 、中 、低剂量组;模型对照组和正常对照组 。
连续给药 10 d ,于末次给药前小鼠禁食不禁水 8 h ,
每组随机各取 10只小鼠测零时血糖 ,给药后继续禁
食不禁水 2 h后 ,除正常对照组外 ,每只小鼠 ig 葡萄
糖 2 g kg ,正常对照组则 ig 等容量的生理盐水 。于
灌胃给药后 0.5 ,1 ,2 h ,每组各取 10只小鼠眼眶后
静脉丛采血 ,测定血糖值 ,并以空腹血糖值作为零时
血糖描记血糖值随时间变化曲线。用近似梯形法计
算曲线下面积。结果见表 5。
表 5 匙羹藤茎 95%乙醇提取物对正常小鼠糖耐量的影响( x±s , n=10)
组别 剂量(g kg)
糖耐量(mmol L)
0 h 0.5 h 1 h 2 h
糖耐量曲线下面积
(mmol·h L)
正常对照组 — 5.16±1.06 5.19±1.532) 5.27±1.322) 5.48±1.092) 10.52±2.622)
模型对照组 — 5.06±0.97 18.51±2.01 11.59±1.48 8.77±1.26 24.68±3.07
优降糖组 0.015 2.17±0.792) 11.85±1.602) 7.47±1.152) 5.03±1.172) 15.28±2.492)
95%乙醇提取物 80 3.82±1.011) 13.48±2.462) 9.34±1.542) 7.31±1.61 18.92±3.542)
40 3.89±1.131) 14.30±2.222) 9.58±1.781) 7.69±0.97 19.78±3.372)
20 4.43±1.21 15.35±2.401) 10.03±1.64 7.60±1.94 20.93±3.741)
3 讨论
3.1 本研究结果表明 ,匙羹藤茎95%乙醇提取物能
明显降低四氧嘧啶性糖尿病小鼠的血糖值 ,它能促
进胰岛 β细胞分泌胰岛素 ,提高血清胰岛素水平;同
时对小鼠的体重无明显影响。匙羹藤茎 95%乙醇
提取物只有高剂量组对正常小鼠的血糖有一定的影
响 ,提示该药对正常状态下小鼠胰岛 β细胞功能无
明显加强作用。
3.2 匙羹藤茎 95%乙醇提取物能明显对抗肾上腺
素引起的小鼠血糖升高 ,可能该药具有抑制肾上腺
素引起的肝糖原分解和促进肝糖原合成的作用 ,从
而减少血糖的来源 ,增加血糖的去路 ,降低小鼠的血
糖值 。
3.3 匙羹藤茎 95%乙醇提取物对正常小鼠糖耐量
的实验结果显示 ,各给药组的糖耐量曲线下面积均
明显低于模型组 ,表明该药可增强正常小鼠的负荷
糖耐量 ,也提示该药的降血糖作用是通过刺激胰岛
素分泌来实现的 。
[参考文献]
[ 1]  华青.匙羹藤的开发与利用[ J] .中国野生植物资源 ,
1993 ,(3):35-36.
[ 2]  江苏新医学院.中药大辞典[ M] 上册 ,上海:上海科技出
版社 , 1977.1246.
[ 3]  韦宝伟 , 施骞.匙羹藤的研究概况[ J] .国外医药 , 植物
药分册 , 1996 , 11(3):107-111.
[ 4]  夏玉凤 , 刘欣 , 余国奠.匙羹藤的开发研究[ J] .中国野
生植物资源 , 1999 , 19(3):1-6 , 40.
[ 5]  Porchezhian E , Dobriyal RM.An overview on the advances of
Gymnema sy lvestre:chemistry , pharmacology and patents[ J] .
Pharmazie , 2003 , 58(1):5-7.
[ 6]  覃俊佳 , 甄汉深 ,方红 , 等.匙羹藤酸降血糖作用的研究
[ J] .中国中医药信息杂志 , 2000 , 7(3):28.
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