全 文 ：收稿日期:2002-10-17
基金项目:国家自然科学基金资助项目(30070919)
作者简介:王红燕(1961-), 女(汉族),辽宁沈阳人 ,副教授 ,博士 , Tel:(024)23897443;徐绥绪(1937-),男(汉族),
山东蓬莱人 ,教授 , 博士生导师 , Tel:(024)23843711-3715 , E-mail:ykdxXSX@mail.sy.ln.cn。
文章编号:1006-2858(2003)03-0181-03
滇黄芩化学成分的分离与鉴定
肖丽和 , 王红燕 , 宋少江 , 张广平 , 宋海秀 , 徐绥绪
(沈阳药科大学中药学院 ,辽宁 沈阳　110016)
摘要:目的 研究滇黄芩(Scutellaria amoena C.H.Wright)化学成分。方法 利用各种色谱技术进行
分离纯化 ,根据理化性质和光谱数据进行结构鉴定。结果 分离得到 8个化合物 , 分别鉴定为:5 , 7-
二羟基-6-甲氧基二氢黄酮(dihydrooroxy lin A , Ⅰ)、5 , 7 , 4′-三羟基-8-甲氧基黄酮(5 , 7 , 4′-trihydroxy-
8-methoxyflavone , Ⅱ)、千层纸素 A(o roxylin A , Ⅲ)、汉黄芩素(wogonin , Ⅳ)、白杨素(chrysin , Ⅴ)、黄
芩素(baicalein , Ⅵ )、去甲汉黄芩素(norwogonine , Ⅶ )、(2 S)-5 , 7 , 2′, 6′-四羟基二氢黄酮[(2S)-5 , 7 ,
2′, 6′-tetrahydroxy flavanone , Ⅷ] 。结论 化合物 Ⅰ 、Ⅱ为该植物中首次分得。
关键词:滇黄芩;化学成分;5 , 7-二羟基-6-甲氧基二氢黄酮;5 , 7 , 4′-三羟基-8-甲氧基黄酮
中图分类号:R 284.2　　　文献标识码:A
　　滇黄芩(Scutellaria amoena C.H.Wright)为唇
形科黄芩属植物 ,又名西南黄芩 ,是我国西南地区
黄芩商品的主要来源 ,资源丰富 ,是质量较好 、最有
利用价值的地方品种之一[ 1] 。现已从滇黄芩中分
离出 31种黄酮及 5种其他成分[ 2～ 5] ,为了更深入
地研究该药用植物的化学成分 ,作者对其根的化学
成分进行研究 ,共分离得到 8个化合物 ,分别鉴定
为:5 ,7-二羟基-6-甲氧基二氢黄酮(Ⅰ)、5 ,7 ,4′-三羟
基-8-甲氧基黄酮(Ⅱ)、千层纸素 A(Ⅲ)、汉黄芩素
(Ⅳ)、白杨素(Ⅴ)、黄芩素(Ⅵ)、去甲汉黄芩素(Ⅶ )、
(2S)-5 , 7 ,2′, 6′-四羟基二氢黄酮(Ⅷ)。其中化合
物Ⅰ和Ⅱ为首次从该植物中分离得到。
1　仪器与材料
　　Yanaco 显微熔点测定仪(未校正);Shimadzu
UV —260 型紫外-可见分光光度计;Bruker AC
(E)—300 型核磁共振光谱仪;GCMS—QP5050A
(日本 SHIMADZU)质谱仪。硅胶 GF254、聚酰胺
11F254(美国 ,MERCK);硅胶(200 ～ 300 目 ,青岛海
洋化工厂);聚酰胺(德国 , Riedel-de Haen);色谱用
试剂均为AR级。植物材料为滇黄芩(购于云南),
经沈阳药科大学中药鉴定教研室许春泉高级工程
师鉴定为 Scutellaria amoena C.H.Wright的根。
2　提取分离
　　滇黄芩根(5.0 kg)粉碎后 , 5倍量乙醇(w =
0.95)回流提取 3 次 ,每次2 h ,回收乙醇 ,乙酸乙
酯萃取 。萃取物通过硅胶柱色谱 ,氯仿洗脱得化
合物 Ⅲ及馏份 Ⅰ 、Ⅱ ,氯仿-甲醇(100∶1 , 80∶1 , 60∶
1)梯度洗脱分别得馏份Ⅲ ,化合物 Ⅵ ,馏份Ⅳ、Ⅴ;
馏份 Ⅰ 、Ⅲ 、Ⅳ、Ⅴ分别通过聚酰胺柱色谱 ,氯仿-
甲醇梯度洗脱得化合物Ⅰ 、Ⅴ 、Ⅷ 、Ⅱ;馏份Ⅱ又经
硅胶柱层析 ,氯仿-甲醇梯度洗脱得化合物Ⅳ。
3　结构鉴定
化合物 Ⅰ为淡黄色针状结晶(氯仿-甲醇),
mp 181 ～ 183℃。盐酸-镁粉反应呈樱红色 ,盐酸-
锌粉反应阴性 。UVλMeOHmax nm 291 , 328 ,显示为二
氢黄酮类化合物的吸收峰 。EI-MS m / z 286
[ M] + ,提示该化合物为具有 2个羟基和1个甲氧
基的二氢黄酮类成分 , m / z 182[ A1] +提示 A 环
有 2个羟基和 1个甲氧基 , m/ z 209[ M-Ar] +和
m/ z 105[B2] + ,提示 B环无取代基。 1H-NMR谱
低场区 12.5和 10.69的 2个单峰信号 ,可分别归
属为 5 位和 7 位羟基的质子信号;7.50 ～ 7.37
(5H ,m)可指定为 B环 2′～ 6′五个质子信号 ,进一
步表明 B 环无取代;6.00(1H , s)为 C-8的质子信
号;5.52(1H , dd , J =10.9 , 2.79 Hz)、3.15(1H ,
dd , J =17.1 ,10.9 Hz)和 2.80(1H , dd , J =17.1 ,
2.79 Hz)分别为典型二氢黄酮 C-2 的质子信号
和 C-3上的反式及顺式的质子信号;3.66(3H , s)
为甲氧基的质子信号。化合物Ⅰ的13C-NMR谱数据
第 20 卷 第 3 期
2 0 0 3 年 5 月
沈　阳　药　科　大　学　学　报
Journal of Shenyang Pharmaceutical University
Vol.20 　No.3
May 2003 p.181
DOI :10.14066/j.cnki.cn21-1349/r.2003.03.008
与5 ,7-二羟基-6-甲氧基二氢黄酮 7-O-葡萄糖醛酸
甲酯的苷元部分13C-NMR谱数据相比较[ 6] ,除 7位
羟基成苷后向低场位移外 ,其余数据基本一致(见
表1)。根据以上的信息 ,化合物Ⅰ的结构可推定为
5 ,7-二羟基-6-甲氧基二氢黄酮(5 , 7-dihydroxy-6-
methoxy flavanone ,dihydrooroxylin A)。
化合物 Ⅱ为黄色针状结晶(甲醇-氯仿), mp
303 ～ 305℃。盐酸-镁粉反应呈樱红色 ,Molish反
应阴性 。UVλMeOHmax nm 277 , 328 ,显示为黄酮类化
合物的吸收峰 。ESI-MS:m/ z 299.4[ M-H] -表
明该化合物为含 3个羟基 1个甲氧基的黄酮类成
分;EI-MS:m/ z 167[ A1-CH3] +及 m /z 139[ A1-
CH3-CO] +表明甲氧基连在 A 环上 , m/ z 119
[ B1+H] +表明 B 环有 1个羟基 。 1H-NMR谱低
场区 12.60 , 10.83和 10.46的 3个单峰信号 ,可
分别归属为 5位 、7 位和 4′位羟基质子信号;7.92
(2H ,d , J =9.0 Hz), 6.93(2H ,d , J =9.0 Hz),构
成AA′BB′系统 ,可分别指定为 2 ,′6′位与 3′,5′位
4个质子信号 ,进一步表明 B环为 4′羟基取代结
构;6.76(1H , s)为 C-3 位质子信号;6.28(1H , s)
为C-6位质子信号;3.83(3H , s)为甲氧基信号。
化合物 Ⅱ的13C-NMR谱数据与 5 , 7 , 4′-三羟基-8-
甲氧基黄酮的13C-NMR谱数据基本一致[ 7](见表
1)。根据以上的信息 ,化合物 Ⅱ的结构可推定为
5 ,7 , 4′-三羟基-8-甲氧基黄酮(5 , 7 , 4′-t rihydroxy-
8-methoxyf lavone)。
Table 1　13C-NMR spectral data of compoundⅠ and Ⅱ
No.dihydroor xylinA-7-O-
glcUA methy lester
Ⅰ 5 , 7 , 4′-T rihydroxy-
8-methoxyflavone Ⅱ
2　 78.7 78.5 163.8 164.0
3 42.0 42.2 102.9 103.0
4 197.5 196.7 182.1 182.2
5 154.7 155.1 156.5 156.5
6 130.4 128.6 99.1 99.3
7 157.8 159.6 157.2 157.4
8 94.3 95.1 127.9 128.1
9 158.1 157.9 149.7 149.8
10 103.5 101.9 103.7 103.8
1′ 138.6 138.8 121.5 121.6
2′ 126.8 126.6 128.5 128.7
3′ 128.7 128.6 116.3 116.5
4′ 128.7 128.6 161.5 161.5
5′ 128.7 128.6 116.3 116.5
6′ 126.8 126.6 128.5 128.7
OMe 60.3 60.0 61.1 61.4
　　化合物 Ⅲ为黄色针状结晶(氯仿), mp 202 ～
204℃。盐酸-镁粉反应呈樱红色 , Molish 反应阴
性。 UVλMeOHmax nm 271 , 317。 EI-MS:m/ z 284
[M ] + , m/ z 167 [ A1-CH3] +、m/ z 139[ A1-CH3-
CO] + 、m/ z 103[B1+H] +提示 A环有 2个羟基和
1个甲氧基 ,而 B环无取代基 。1H-NMR谱:12.90
(1H , s ,C5-OH),10.78(1H , s ,C7-OH), 8.07(2H ,m ,
C2′,6′-H), 7.58(3H , m , C3′, 4′,5′-H), 6.96(1H , s , C3-
H), 6.62(1H , s , C8-H), 3.73(3H , s ,-OCH3)。化合
物Ⅲ的13C-NMR谱数据(见表 2)与千层纸素 A
13C-NMR谱数据基本一致[ 8] ,故化合物Ⅲ可推定为
千层纸素 A(5 , 7-dihydroxy-6-methoxyflavone , orox-
ylin A)。
化合物Ⅳ为黄色针状结晶(氯仿), mp 190 ～
193℃。盐酸-镁粉反应呈樱红色 , Molish 反应阴
性。 UVλM eOHmax nm 275 , 324。 EI-MS:m / z 284
[ M ] +、 m/ z 269 [ M-CH 3 ] + 、 m /z 167 [ A1-
CH3] + 、m /z 139[A1-CH3-CO ] + 、m/ z 103[ B1+
H] +提示 A环有 2个羟基和 1个甲氧基 ,而 B环
无取代基 。 1H-NMR谱:12.50(1H , s , C5-OH),
10.82 (1H , s , C7-OH), 8.06(2H , m , C2′, 6′-H),
7.58(3H ,m ,C3′,4′, 5′-H),7.00(1H , s , C3-H), 6.31
(1H , s , C6-H), 3.84(3H , s ,-OCH3)。化合物Ⅳ的
13C-NMR谱数据(见表 2)与汉黄芩素13C-NMR谱
数据基本一致[ 9] ,故化合物Ⅳ可推定为汉黄芩素
(5 ,7-dihydroxy-8-methoxyf lavone , wogonin)。
化合物 Ⅴ为黄色针状结晶(氯仿-甲醇), mp
274 ～ 276℃。盐酸-镁粉反应呈樱红色 ,Molish 反
应阴性 。 UVλMeOHmax nm 269 , 313。 EI-MS:m/ z
254[ M] + 、m /z 226[ M-CO] + 、m / z 152[A1] +提
示A 环有 2 个羟基 , B 环无取代。 1H-NMR谱:
12.83(1H , s ,C5-OH),10.94(1H , s ,C7-OH), 8.08
(2H ,m , C2′,6′-H), 7.61(3H , m , C3′, 4′,5′-H), 6.98
(1H , s , C3-H), 6.52(1H , d , J =2 Hz ,C8-H), 6.21
(1H ,d , J =2 Hz ,C6-H)。化合物Ⅴ的13C-NMR谱
数据(见表 2)与白杨素13C-NMR谱数据基本一
致[ 10] ,故化合物 Ⅴ可推定为白杨素(5 , 7-dihy-
droxy flavone , chrysin)。
化合物 Ⅵ 为黄色针状结晶(氯仿-甲醇), mp
273 ～ 275℃。盐酸-镁粉反应呈樱红色 ,Molish反
应阴性 。 UVλMeOHmax nm 278 , 314。 EI-MS:m/ z
270[M] + 、m /z 168[A1] + 、m /z 140[A1-CO] +、
m/ z 102[ B1] +提示 A 环有 3个羟基 , B 环无取
182 　　　沈　阳　药　科　大　学　学　报 第 20卷
代。 1H-NMR谱:12.70(1H , s , C5-OH), 10.60
(1H , s , C7-OH), 8.48(1H , s , C6-OH), 8.04(2H ,
m ,C2′, 6′-H), 7.57(3H , m , C3′, 4′,5′-H), 6.91(1H ,
s , C3-H), 6.62(1H , s , C8-H)。化合物 Ⅵ 的
13C-NMR谱数据(见表 2),聚酰胺和硅胶薄层色
谱的结果也表明化合物Ⅵ 与黄芩素的 Rf值相同 ,
故化合物 Ⅵ 可推定为黄芩素(5 , 6 , 7-trihydrox-
y flavone ,baicalein)。
化合物 Ⅶ 为桔红色针状结晶(氯仿-甲醇),
mp 264 ～ 265℃。盐酸-镁粉反应呈樱红色 , Mol-
ish 反应阴性。 UVλM eOHmax nm 267 , 360 。EI-MS:
m/ z 270[ M] + 、m/ z 168[ A1] + 、m / z 140[ A1-
CO] +、m/ z 102[ B1] +提示 A 环有 3 个羟基 , B
环无取代 。 1H-NMR谱:12.24(1H , s , C5-OH),
8.13(2H , m , C2′,6′-H), 7.58(3H , m , C3′, 4′,5′-H),
6.91(1H , s ,C3-H), 6.29(1H , s ,C6-H)。化合物 Ⅶ
的13C-NMR谱数据(见表 2)与去甲汉黄芩素
13C-NMR谱数据基本一致[ 6] ,故化合物 Ⅶ 可推定
为去甲汉黄芩素(5 , 7 , 8-trihydroxy flavone , nor-
wogonine)。
化合物Ⅷ为粉红色粉末。盐酸-镁粉反应呈
樱红色 ,盐酸-锌粉反应阴性 。UVλMeOHmax nm 287 ,
319。EI-MS:m /z 288[ M] +表明该化合物为具
有 4 个羟基二氢黄酮类成分 , m/ z 270 [ M-
H2O] +、m/ z 269[M-H2O-H] + ,提示有 2′(或 6′)
羟基存在 , m/ z 153[ A1 +H] + ,提示 A 环有 2个
羟基 。1H-NMR谱:12.25(1H , s)、10.67(1H , s)和
9.61(2H , s)可分别归属为 5位 、7位和 2′、6′位羟
基的质子信号;6.97(1H , t , J =8.1 Hz)和 6.34
(2H ,d , J =8.1 Hz)分别为 4′和 3′、5′位的质子信
号;5.83 ～ 5.88(3H ,br d)分别为 6 、8和 2位上的
质子信号;3.94(1H , dd , J =17.4 Hz , 13.5 Hz)和
2.69(1H ,dd , J =17.4 Hz ,3.0 Hz)分别为 C-3上
的反式和顺式的质子信号 。化合物 Ⅷ的13C-NMR
谱数据(见表 2)与(2S)-5 , 7 ,2′, 6′-四羟基二氢黄
酮的13C-NMR谱数据基本一致[ 5] ,故化合物 Ⅷ可
推定为(2S)-5 , 7 , 2′, 6′-四羟基二氢黄酮[(2S)-
5 ,7 , 2′, 6′-tet rahydroxy flavanone] 。
Table 2　13C-NMR spectral data of compound Ⅲ to Ⅷ
No. Ⅲ Ⅳ Ⅴ Ⅵ Ⅶ Ⅷ
2 163.3 163.1 163.3 163.0 163.0 71.5
3 104.8 105.1 105.3 104.6 104.7 39.3
4 182.3 182.1 182.0 182.2 182.3 197.4
5 152.8 156.3 161.6 147.1 145.7 164.0
6 130.8 99.2 99.0 129.4 99.0 95.5
7 157.6 157.3 164.4 153.7 153.9 166.4
8 94.4 127.8 94.3 94.1 125.4 94.7
9 152.6 149.7 161.3 149.9 153.3 163.7
10 104.4 103.8 104.1 104.4 103.7 101.6
1′ 130.8 130.9 130.8 131.0 131.1 110.2
2′ 126.5 126.3 126.5 126.3 126.7 157.3
3′ 129.2 129.3 129.3 129.1 129.3 106.9
4′ 132.0 131.1 132.2 131.8 132.2 130.0
5′ 129.2 129.3 129.3 129.1 129.3 106.9
6′ 126.5 126.3 126.5 126.3 126.7 157.3
OMe 60.0 61.1
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183第 3 期 肖丽和等:滇黄芩化学成分的分离与鉴定　　　
Simultaneous determination of three components in
compound salicylic acid tincture Ⅱ by orthogonal
function-partial least squares
XU Ya-jie1 , JIANG Ming-yan1 , SUN Ling-ling2 , LU Dong-hong3
(1.Department of Pharmacy , The First Af f il iated Hospital of China Medical University , Shenyang　
110001 , China;　2.Laoning Province Inst itute for Drug Control , Shenyang 　110023 , China;　
3.Baotou Kangli Pharmaceut ical Limi ted Liabili ty Co.Ltd., Baotou 　014010 , China)
Abstract:Objective To eliminate interference and determine the multicomponents simultaneously , their
collinearties were mo re serious by o rthogonal function-partial least squares(OF-PLS)among the the multi-
components.Methods The method w as applied to simultaneous determination of all the components in the
compound salicylic acid tincture Ⅱ.At the same time , the method w as compared w ith PLS.Results The
average recovery and the relative standard deviation of salicylic acid , benzoic acid and rivanolum at tained by
OF-PLS and by PLS were 100.2%, 1.6%;100.1%, 0.37%;100.1%, 0.96% and 99.4%, 2.0%;
100.9%, 1.2%;99.8%, 1.5% respectively .Conclusions OF-PLS is bet ter than the PLS method.
Key words:orthogonal function-partial least squares(OF-PLS);compound salicy lic acid tincture Ⅱ;sali-
cy lic acid;benzoic acid;rivanolum
(上接第 183页)
Isolation and identification of the chemical con-
stituents of roots of Scutellaria amoena C.H.
Wright
XIAO Li-he , WANG Hong-yan , SONG Shao-jiang , ZHANG Guang-ping , SONG Hai-xiu ,
XU Sui-xu
(School of Tradit ional Chinese Materia Medica , Shenyang Pharmaceutical Universi ty , Shenyang 　
110016 , China)
Abstract:Objective To study the chemical composition of roots of Scutellaria amoena C.H.Wright.Meth-
ods Various chromatog raphic techniques were used to separate and purify the constituents.Their st ructures
w ere determined by chemical evidences and spectral analysis.Results Eight compounds w ere isolated and pu-
rified , their st ructures were identified as dihydrooroxylin A(Ⅰ), 5 ,7 , 4′-t rihydroxy-8-methoxyf lavone(Ⅱ),
o roxy lin A(Ⅲ),wogonine(Ⅳ), chrysin(Ⅴ), baicalein(Ⅵ), norwogonine(Ⅶ ), (2S)-5 , 7 , 2′, 6′-tet rahy-
droxy flavanone(Ⅷ).Conclusion Compound Ⅰ and Ⅱare separated f rom Scutellaria amoena C.H.Wright
for the fi rst time.
Keywords:Scutel laria amoena C.H.Wright;chemical constituents;dihydrooro xylin A;5 , 7 , 4′-t rihy-
droxy-8-methoxyflavone
193第 3 期 徐亚杰等:正交函数-偏最小二乘法同时测定复方水杨酸酊Ⅱ号三组分含量