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夜来香根茎提取物镇痛作用的实验观察



全 文 :赣南医学院,!附属医院骨外科,药理教研室,江西省赣州市 #$!%%%
刘午阳,男,!&’’年生,江西省赣州市人,汉族,!&(& 年江西医学院毕业,
学士,副教授,副主任医师,主要从事骨外科的临床与科研方面的研究。
中图分类号:)$$!*! 文献标识码:+ 文章编号:!’,!-.&’-/%%.0#,-%%#.-%#
收稿日期1%%.-%’-%, 修回日期1%%.-%,-$ /%& 2 34 2 560
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&,-./0)
刘午阳,曾靖,刘海丽,叶和杨67夜来香根茎提取物镇痛作用的实验观察E. d*中国
临床康复,!#1%&’()*’#+( 2333456789:48;<=
摘要:
目的:探讨夜来香根茎提取物对小鼠的镇痛作用及其机制,为临床(骨
科)疼痛治疗寻找新药。
方法:实验于 %%.-%# 2 %$ 在赣南医学院科研中心实验室完成。!小鼠
/!]$%0,随机分为 $ 组,每组 !% 只,分别腹腔注射 %*% ?V 2 J 生理盐水,
夜来香根茎提取物 %*! ?J 2 J,%* ?J 2 J,%*! ?J 2 J氨基比林,!. ?F@ 后腹腔
注射 ’ J 2 V冰醋酸 %*%! ?V 2 J,观察记录给药后 !. ?F@内小鼠扭体次数。
雌性小鼠/!]$%0,随机分为 $ 组,每组 !% 只。分别腹腔注射 %*% ?V 2 J
生理盐水,%*!,%* ?J 2 J 夜来香根茎提取物,%*%! ?J 2 J 吗啡,用热板法
测定小鼠 !.,#%,’% ?F@ 痛觉反应。#雌性小鼠/!]#%0,随机分为 # 组,
每组 !% 只,分别腹腔注射 %*% ?V 2 J 生理盐水,%*%%$ ?J 2 J 纳洛酮‘
%*%! ?J 2 J吗啡,%*%%$ ?J 2 J纳洛酮‘%*! ?J 2 J夜来香根茎提取物,用热
板法测定小鼠 !.,#%,’% ?F@ 痛觉反应。$小鼠/!]$%0,随机分为 $ 组,
每组 !% 只,分别给予夜来香根茎提取物 %*! ?J 2 J,%* ?J 2 J 及 ! J 2 V 的
吗啡和生理盐水于 %,#.,.%,,% ?F@ 重复电刺激,用电刺激法测定痛
觉反应。
结果:各实验组小鼠无脱失情况。在热板法致痛作用实验中如有小鼠跳
出给予排除。!小鼠扭体反应次数:%*! ?J 2 J,%* ?J 2 J夜来香根茎提取
物及 %*! ?J 2 J氨基比林对醋酸诱发小鼠扭体反应有非常显著的镇痛作
用,给药后扭体反应次数均少于生理盐水组(%*a!%*(,!$*.a,*’,
,*’a$*.,.%*’a!.*., b %*%!),且夜来香根茎提取物的镇痛效果呈剂量
依赖性。热板法致小鼠痛觉反应的时间:%*! ?J 2 J,%* ?J 2 J 夜来香根
茎提取物对热板致痛有显著的镇痛作用,给药后 !.,#%,’% ?F@ 痛觉反
应的时间均长于生理盐水组 c(*!a’*),($*’a(*(),/*&a(*’0H;
(’*a(*%),(#!*!a!%*#),(&*$a(*,)H;(!*!a#*!),(!!*&a*(),(!*(a#*%)H,
b %*%.g%*%!d,且呈剂量依赖性。纳洛酮 %*%%$ ?J 2 J ‘夜来香根茎提取
物 %*! ?J 2 J 组给药后各时间点痛觉反应的时间均长于生理盐水组
c((*#a’*&),(*$a.*(),(%*!a.*.)H;(!*.a#*!),(!*(a*(),(!*!a#*%)H,
b %*%.g%*%!d。纳洛酮 %*%%$ ?J 2 J ‘吗啡 %*%! ?J 2 J 组给药后各时间点
痛觉反应的时间c(!#*!a#*#),(!*&a#*!),(!#*a*()Hd与生理盐水组相
比接近。#电刺激法致小鼠镇痛率:%*! ?J 2 J,%* ?J 2 J夜来香根茎提取
物及吗啡组给药后 %,#.,.%,,% ?F@ 镇痛率均高于生理盐水对照组
c($.a.)e,($%a!%)e,(#.a.)e,(%a.)e;((.a!.)e,((%a.)e,(’%a!%)e,
(#%a.)e;(&%a!%)e,((.a!%)e,(,.a!.)e,($.a!.)e;%, b %*%!d。
结论:夜来香根茎提取物具有明显的镇痛作用,其镇痛强度与氨基比林
相当,且呈剂量依赖性。阿片受体拮抗剂纳洛酮可拮抗吗啡的镇痛作
用,但阿片受体拮抗剂纳洛酮不能拮抗夜来香根茎提取物对热板致痛
法小鼠的镇痛作用,表明夜来香根茎提取物的镇痛作用机制并非激动
阿片受体而镇痛的。
主题词:根茎;植物提取物;镇痛
E 引言
夜来香/Q:H>=I? @AG>I=@I? V* QYV0属夜来香树属
植物,民间用于祛蚊。作者曾报道夜来香水提取物抗心
律失常作用,局部麻醉作用,中枢抑制作用c!,d。本文只
探讨夜来香根茎提取物的镇痛作用。
F 材料和方法
设计:随机对照观察。
单位:赣南医学院附属医院骨外科和药理教研室。
·中医康复研究·
夜来香根茎提取物镇痛作用的实验观察
刘午阳 !,曾 靖 ,刘海丽 !,叶和杨
中国临床康复 第 %卷第 ’(期 %%.-!%-%,出版
.$)!/0/ 1%’2!+3 %- .3)!)*+3 4/$+5)3)6+6)%!8 7*6%5/2 8 9::; <%3= > ?%=@8 ’#
材料:实验于 !#$% & ’ 在赣南医学院科研中
心实验室完成。药品:夜来香根茎提取物由沈阳药科
大学植化教研室提供。实验动物:健康成年昆明种小
鼠(由江西省医学实验动物中心提供),清洁级 (#
只,雌雄兼用,体质量 ()*!! +,标准饲料,自由饮食。
实验动物合格证号:,-. !#!/。实验动物机构许可
证号:!(012%。仪器:3,0)’!型热板测痛仪;药理生
理多用仪。药品:盐酸吗啡注射液4沈阳第一制药厂,批
号 %#5;盐酸纳洛酮注射液6盐侨(湖南)制药有限
公司,批号 !!((17。
设计、实施、评估者:实验设计为第一作者;所有
作者均参加了实验实施。
方法:夜来香根茎提取物对醋酸引起小鼠扭体反
应的实验法 6%$)7:小鼠 ’ 只,随机分为 ’ 组,每组 (
只,分别腹腔注射 8! 9: & + 生理盐水,8(,8! 9+ & +
夜来香根茎提取物,8( 9+ & +氨基比林。(# 9;<后腹
腔注射 / + & : 冰醋酸 8( 9: & +,观察记录 (# 9;< 内
各组小鼠扭体反应次数,并计算药物对扭体反应次数
的抑制百分率。
夜来香根茎提取物对小鼠热板的实验法:取雌性
小鼠,用 3,0)’! 型热板测痛仪致痛(##8=8#)>,以
小鼠舔后足作为痛反应指标,选择痛阈潜伏期不超过
/ ?的小鼠 ’只,随机分为 ’组,每组 (只。分别腹
腔注射 8! 9: & + 生理盐水,8(,8! 9+ & + 夜来香根
茎提取物,8( 9+ & + 吗啡,在 (#,%,/ 9;< 各测一次
痛觉反应。
纳洛酮对吗啡、夜来香根茎提取物对小鼠热板的
实验法:取雌性小鼠,采用上述小鼠热板致痛法,选择
痛阈合格的小鼠 % 只,随机分为 % 组,每组 ( 只,分
别腹腔注射 8! 9: & + 生理盐水,8’ 9+ & + 纳洛酮@
8( 9+ & + 吗啡),8’ 9+ & + 纳洛酮@8( 9+ & + 夜来香
根茎提取物,在 (#,%,/ 9;<各测一次痛觉反应。
夜来香根茎提取物对电刺激致痛的实验法:取小
鼠,用 2# 9: & : 乙醇擦洗鼠尾,置刺激电极(两铜片
组成,铜片宽 8/ A9,长 !8% A9,间距 (8# A9,固定在木
板上)于小鼠尾部,在电极板上涂 # + &:盐水,用药理生
理多用刺激仪刺激(电压 ( B,频率 ( CD,波宽 ( 9?),
以 % 次皆有嘶叫反应者为合格小鼠。取 ’ 只合格小
鼠,随机分为 ’ 组,每组 ( 只,分别给予夜来香根茎
提取物 8( 9+ & +,8! 9+ & + 及 ( + & : 的吗啡和生理盐
水于 !,%#,#,2 9;< 重复电刺激,连续两次刺激不
嘶叫者,表示药物有镇痛效果,计算镇痛百分率。
主要观察指标:!小鼠扭体反应次数。热板法
致小鼠痛觉反应的时间。#电刺激法致小鼠镇痛率。
统计学分析:数据用 !# 表示,组间比较采用传统
方法 $ 检验。处理,由本院药理学教研室曾靖教授处
理。
! 结果
!8( 实验动物数量分析 各实验组小鼠无脱失情况。
在热板法致痛作用实验中如有小鼠跳出给予排除。
!8! 夜来香根茎提取物对醋酸引起小鼠扭体反应的
影响 见表 (。
8(E8! 9+ & + 的夜来香根茎提取物有明显对抗由
/ + & : 冰醋酸引起小鼠扭体反应,其镇痛效果呈剂量
依赖性。
!8% 夜来香根茎提取物对小鼠热板法致痛作用的影
响 见表 !。
8(E8! 9+ & + 的夜来香根茎提取物有明显的对抗
由热板法致痛作用,其镇痛效果呈剂量依赖性。
!8’ 纳洛酮对吗啡、夜来香根茎提取物镇痛作用的影
响 见表 %。
8’ 9+ & + 纳洛酮可拮抗 8( 9+ & + 吗啡的镇痛
作用,8’ 9+ & + 纳洛酮不能拮抗 8( 9+ & + 夜来香根
茎提取物的镇痛作用。
!8# 夜来香根茎提取物对电刺激法致痛作用的影响
见表 ’。
8(,8! 9+ & + 的夜来香根茎提取物有明显的对抗
由电刺激引起镇痛作用,其镇痛效果呈剂量依赖性,但
镇痛效果不如 8( 9+ & +吗啡。
表 % 纳洛酮对夜来香根茎提取物镇痛作用的影响 (!#%&F(E?)
组别
生理盐水组
纳洛酮 8’ 9+ & +
@吗啡 8( 9+ & + 组
纳洛酮 8’ 9+ & +
@夜来香根茎提取物 8( 9+ & +组
(!8%=%8/
(!82=%8!
(!8(=!81
(!8#=%8(
(%8(=%8%
!)8%=/81G
(!8)=!8)
(!81=%8(
!!8’=#8)H
(!8(=%8
(%8!=!8)
!8(=#8#H
$(给药前后痛觉反应)
给药后(9;<)
给药前
%(# /
与生理盐水组比较EH$F!8#%%,!8//%,’ I 8#;G$F%8/)#,’ I 8(
表 ( 夜来香根茎提取物对醋酸引起小鼠扭体反应的影响(!#%&F()
生理盐水组
夜来香根茎提取物 8( 9+ & +组
夜来香根茎提取物 8! 9+ & +组
氨基比林组
组别
#8/=(#8#
!8!=(8)H
(’8#=28/H
28/=’8#H
给药后扭体反应次数
((# 9;<内)
/8(H
2(8%H
)#8H
抑制率(J)
与生理盐水组比较,H$F%8#)(*%82!!E’ I 8(
生理盐水组
夜来香根茎提取物 8( 9+ & +组
夜来香根茎提取物 8! 9+ & +组
吗啡组
表 ! 夜来香根茎提取物对小鼠热板法致痛作用的影响 (!#%&F(E?)
组别
$(给药前后痛觉反应)
给药后(9;<)
给药前
%(# /
(!8%=!8/
(!8(=!8
((81=!8’
(!8!=!8#
(!8(=%8(
!!8(=/8!H
!/8!=)8G
!(8!=)8!G
((81=!8)
!’8/=)8)G
%(8(=(8%G
%’8#=/8/G
(!8)=%8
!!81=)8/H
!18’=)82G
%(8!=181G
与生理盐水组比较,H$F!8#/%,!82)#,’ I 8#;G$F%8##)*%82/!,’ I 8(
表 ’ 夜来香根茎提取物对电刺激小鼠的镇痛作用 (!#%&F(EJ)
与生理盐水组比较,H$F%8#%!*%8/))E’ I 8(
组别
生理盐水组
夜来香根茎提取物 8( 9+ & +组
夜来香根茎提取物 8! 9+ & +组
吗啡组

’#=#H
)#=(#H
1=(H

’=(H
)=#H
)#=(H

%#=#H
/=(H
2#=(#H

!=#H
%=#H
’#=(#H
给药后镇痛率
! 9;< %# 9;< # 9;< 2 9;<
KLLM (/2($#1!/ NM !($(’2 & O
((()*+,-./)-01 ./233456437#8&9)-01 夜来香根茎提取物镇痛作用的实验观察刘午阳E 等8!
! 讨论
一般认为在伤害性刺激的作用下,组织释放各种致
痛因子,如 !#$、组织胺、缓激肽、前列腺素等,这些致痛
因子刺激神经末稍产生痛觉冲动,在中枢引起痛觉。扭体
法、热板法和电刺激法是研究药物镇痛作用较为常用的
方法。腹腔注射冰醋酸后,醋酸中电离出的微量 !可引
起腹腔深部大面积较持久的疼痛刺激(内脏痛),致使小
鼠产生扭体反应。热板法和电刺激法均为物理性刺激法,
小鼠由于受热和电刺激使体表皮产生肤痛。夜来香根茎
提取物能非常显著减少由醋酸引起小鼠扭体反应次数,
还能非常显著提高热板法致痛小鼠痛阈值,也能非常显
著提高电刺激法致痛小鼠的镇痛率。以上结果表明夜来
香根茎提取物具有明显的镇痛作用,其镇痛强度与氨基
比林相当。实验结果还显示,阿片受体拮抗剂纳洛酮可拮
抗吗啡的镇痛作用,但阿片受体拮抗剂纳洛酮不能拮抗
夜来香根茎提取物对热板致痛法小鼠的镇痛作用,这表
明夜来香根茎提取物的镇痛作用机制并非激动阿片受体
而镇痛的。其镇痛作用机制有待进一步研究。
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解放军第三军医大学大坪医院!野战外科研究所眼科,#野战外科研究
所三室,重庆市, $%%%$#
谢 琳!,女,&’’ 年生,重庆市人,汉族,解放军第三军医大学在读博
士,副教授,副主任医师,主要从事白内障、青光眼视神经保护方面的研
究。 ()*+),-&./01234516
重庆市科委自然科学基金资助项目( 7897:#%%$;;<%.#)=
中图分类号:>--收稿日期:#%%#$$%&’()%’*+,-+&-+./0,1’-/+$0-2) -/2&3+, ’( 1/+ 2,1*’-41+,
0& -*05*0(’*$ 6)21+ 7%+ 1’ /03/ 0&1*2’-%)2* 6*+,,%*+ 0& *21,
!# $%:? I*? J)K,L:L* :? MK? N)K, :O213 :P Q1,L? RK):S3, #:? F3? GK:6),#:?
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谢琳,贺翔鸽,马建洲,龙在云,伍亚民,王永堂4大鼠高眼压后筛板区星形胶质细
胞的免疫荧光组织化学变化hN j4中国临床康复,&’’(,*( ,-):,-0*
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摘要
目的:观察大鼠青光眼和正常眼视乳头筛板区星形胶质细胞标志物
神经胶质纤维酸性蛋白和 a1L1:7的表达。
方法:实验于 #%%$A %.E%-A # 在第三军医大学大坪医院野战外科研究所
眼科和第三军医大学大坪医院野战外科研究所第三研究室完成。步骤:
!用 <.#A 二极管激光对 ’ 只正常 8U大鼠的右眼行跨越角膜缘小梁
网激光光凝。91,1V*,眼压计测量双眼眼压变化。#应用免疫荧光组
织化学 A 激光共聚焦显微镜观察星形胶质细胞标志物神经胶质纤维酸
性蛋白和 a1L1:7的表达变化。
结果:大鼠模型组 ’ 眼和非模型组 ’ 眼均进入结果分析。!大鼠模型
组、非模型组眼压情况:模型组激光光凝之后的眼压呈上升趋势,第 .
天显著高于非模型组h( .4#;%4%),( #4#&;%4%.)g^K,!iP%4%j,一直持
续 ’%PZ 均显著高于非模型组h( .4#&;%4%.),( #4.%;%4%#)g^K,!iP%4%j。
大鼠模型组、非模型组眼球标本免疫荧光组织化学染色结果:大鼠高
眼压后 ’%PZ,视乳头筛板区星形胶质细胞标志物神经胶质纤维酸性蛋
白和 a1L1:7表达强、密度高,模型组星形胶质细胞标志物神经胶质纤
维酸性蛋白红色荧光、a1L1:7P绿色荧光以及红色和绿色叠加后的黄色
荧光( 灰度值)显著高于非模型组( &4.;%4#,-4k#;%4#.,k4.%;%4$
比 .4;%4<:P’4<#;%4’,$4’;%4#%,! iP%4%)。
结论:星形胶质细胞可能参与了青光眼神经纤维的进一步损害和抑制
了神经纤维轴索再生。
大鼠高眼压后筛板区星形胶质细胞的免疫荧光组织化学变化 =
谢 琳 :P贺翔鸽 :P马建洲 :P龙在云 #:P伍亚民 #:P王永堂 #
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中国临床康复 第 *卷第 ,-期 *++1.%+.+/出版
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