全 文 ：赣南医学院，!附属医院骨外科，药理教研室，江西省赣州市 #$!%%% 刘午阳，男，!&’’年生，江西省赣州市人，汉族，!&(& 年江西医学院毕业， 学士，副教授，副主任医师，主要从事骨外科的临床与科研方面的研究。 中图分类号：)$$!*! 文献标识码：+ 文章编号：!’,!-.&’-/%%.0#,-%%#.-%# 收稿日期1%%.-%’-%, 修回日期1%%.-%,-$ /%& 2 34 2 560
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>B7 D,@=;#<7 (>C =#;(#<7 !67 ,9=;’C= 67 #$%!&&’% ()!*$’+!& ,+!&-’ !#$%&’()*’#+( &,-./0) 刘午阳，曾靖，刘海丽，叶和杨67夜来香根茎提取物镇痛作用的实验观察E. d*中国 临床康复，!#1%&’()*’#+( 2333456789:48;<= 摘要： 目的：探讨夜来香根茎提取物对小鼠的镇痛作用及其机制，为临床（骨 科）疼痛治疗寻找新药。 方法：实验于 %%.-%# 2 %$ 在赣南医学院科研中心实验室完成。!小鼠
/!]$%0，随机分为$ 组，每组 !% 只，分别腹腔注射 %*% ?V 2 J 生理盐水，
夜来香根茎提取物 %*! ?J 2 J，%* ?J 2 J，%*! ?J 2 J氨基比林，!. ?F@ 后腹腔
注射 ’ J 2 V冰醋酸 %*%! ?V 2 J，观察记录给药后 !. ?F@内小鼠扭体次数。
雌性小鼠/!]$%0，随机分为$ 组，每组 !% 只。分别腹腔注射 %*% ?V 2 J
生理盐水，%*!，%* ?J 2 J 夜来香根茎提取物，%*%! ?J 2 J 吗啡，用热板法
测定小鼠 !.，#%，’% ?F@ 痛觉反应。#雌性小鼠/!]#%0，随机分为 # 组，
每组 !% 只，分别腹腔注射 %*% ?V 2 J 生理盐水，%*%%$?J 2 J 纳洛酮‘ %*%! ?J 2 J吗啡，%*%%$ ?J 2 J纳洛酮‘%*! ?J 2 J夜来香根茎提取物，用热
板法测定小鼠 !.，#%，’% ?F@ 痛觉反应。$小鼠/!]$%0，随机分为 $组， 每组 !% 只，分别给予夜来香根茎提取物 %*! ?J 2 J，%* ?J 2 J 及 ! J 2 V 的 吗啡和生理盐水于 %，#.，.%，,% ?F@ 重复电刺激，用电刺激法测定痛 觉反应。 结果：各实验组小鼠无脱失情况。在热板法致痛作用实验中如有小鼠跳 出给予排除。!小鼠扭体反应次数：%*! ?J 2 J，%* ?J 2 J夜来香根茎提取 物及 %*! ?J 2 J氨基比林对醋酸诱发小鼠扭体反应有非常显著的镇痛作 用，给药后扭体反应次数均少于生理盐水组（%*a!%*(，!$*.a,*’，
,*’a$*.，.%*’a!.*.， b %*%!），且夜来香根茎提取物的镇痛效果呈剂量 依赖性。热板法致小鼠痛觉反应的时间：%*! ?J 2 J，%* ?J 2 J 夜来香根 茎提取物对热板致痛有显著的镇痛作用，给药后 !.，#%，’% ?F@ 痛觉反 应的时间均长于生理盐水组 c（*!a’*），（$*’a(*(），/*&a(*’0H；
（’*a(*%），（#!*!a!%*#），（&*$a(*,）H；（!*!a#*!），（!!*&a*(），（!*(a#*%）H， b %*%.g%*%!d，且呈剂量依赖性。纳洛酮 %*%%$ ?J 2 J ‘夜来香根茎提取
物 %*! ?J 2 J 组给药后各时间点痛觉反应的时间均长于生理盐水组
c（(*#a’*&），（*$a.*(），（%*!a.*.）H；（!*.a#*!），（!*(a*(），（!*!a#*%）H， b %*%.g%*%!d。纳洛酮 %*%%$ ?J 2 J ‘吗啡 %*%! ?J 2 J 组给药后各时间点
痛觉反应的时间c（!#*!a#*#），（!*&a#*!），（!#*a*(）Hd与生理盐水组相
比接近。#电刺激法致小鼠镇痛率：%*! ?J 2 J，%* ?J 2 J夜来香根茎提取
物及吗啡组给药后 %，#.，.%，,% ?F@ 镇痛率均高于生理盐水对照组
c（$.a.）e，（$%a!%）e，（#.a.）e，（%a.）e；（(.a!.）e，（(%a.）e，（’%a!%）e，
（#%a.）e；（&%a!%）e，（(.a!%）e，（,.a!.）e，（$.a!.）e；%， b %*%!d。 结论：夜来香根茎提取物具有明显的镇痛作用，其镇痛强度与氨基比林 相当，且呈剂量依赖性。阿片受体拮抗剂纳洛酮可拮抗吗啡的镇痛作 用，但阿片受体拮抗剂纳洛酮不能拮抗夜来香根茎提取物对热板致痛 法小鼠的镇痛作用，表明夜来香根茎提取物的镇痛作用机制并非激动 阿片受体而镇痛的。 主题词：根茎；植物提取物；镇痛 E 引言 夜来香/Q:H>=I? @AG>I=@I? V* QYV0属夜来香树属 植物，民间用于祛蚊。作者曾报道夜来香水提取物抗心 律失常作用，局部麻醉作用，中枢抑制作用c!，d。本文只 探讨夜来香根茎提取物的镇痛作用。 F 材料和方法 设计：随机对照观察。 单位：赣南医学院附属医院骨外科和药理教研室。 ·中医康复研究· 夜来香根茎提取物镇痛作用的实验观察 刘午阳 !，曾 靖 ，刘海丽 !，叶和杨 中国临床康复 第 %卷第 ’(期 %%.-!%-%,出版 .$)!/0/ 1%’2!+3 %- .3)!)*+3 4/$+5)3)6+6)%!8 7*6%5/2 8 9::; <%3= > ?%=@8 ’# 材料：实验于 !#$% & ’ 在赣南医学院科研中
心实验室完成。药品：夜来香根茎提取物由沈阳药科
大学植化教研室提供。实验动物：健康成年昆明种小
鼠（由江西省医学实验动物中心提供），清洁级 (#
只，雌雄兼用，体质量 ()*!! +，标准饲料，自由饮食。
实验动物合格证号：,-. !#!/。实验动物机构许可
证号：!(012%。仪器：3,0)’!型热板测痛仪；药理生
理多用仪。药品：盐酸吗啡注射液4沈阳第一制药厂，批
号 %#5；盐酸纳洛酮注射液6盐侨（湖南）制药有限
公司，批号 !!((17。
设计、实施、评估者：实验设计为第一作者；所有
作者均参加了实验实施。
方法：夜来香根茎提取物对醋酸引起小鼠扭体反
应的实验法 6%$)7：小鼠 ’ 只，随机分为 ’ 组，每组 ( 只，分别腹腔注射 8! 9: & + 生理盐水，8(，8! 9+ & + 夜来香根茎提取物，8( 9+ & +氨基比林。(# 9;<后腹 腔注射 / + & : 冰醋酸 8( 9: & +，观察记录 (# 9;< 内 各组小鼠扭体反应次数，并计算药物对扭体反应次数 的抑制百分率。 夜来香根茎提取物对小鼠热板的实验法：取雌性 小鼠，用 3,0)’! 型热板测痛仪致痛（##8=8#）>，以 小鼠舔后足作为痛反应指标，选择痛阈潜伏期不超过 / ?的小鼠 ’只，随机分为 ’组，每组 (只。分别腹 腔注射 8! 9: & + 生理盐水，8(，8! 9+ & + 夜来香根 茎提取物，8( 9+ & + 吗啡，在 (#，%，/ 9;< 各测一次 痛觉反应。 纳洛酮对吗啡、夜来香根茎提取物对小鼠热板的 实验法：取雌性小鼠，采用上述小鼠热板致痛法，选择 痛阈合格的小鼠 % 只，随机分为 % 组，每组 ( 只，分 别腹腔注射 8! 9: & + 生理盐水，8’ 9+ & + 纳洛酮@ 8( 9+ & + 吗啡），8’ 9+ & + 纳洛酮@8( 9+ & + 夜来香 根茎提取物，在 (#，%，/ 9;<各测一次痛觉反应。 夜来香根茎提取物对电刺激致痛的实验法：取小 鼠，用 2# 9: & : 乙醇擦洗鼠尾，置刺激电极（两铜片 组成，铜片宽 8/ A9，长 !8% A9，间距 (8# A9，固定在木 板上）于小鼠尾部，在电极板上涂 # + &:盐水，用药理生 理多用刺激仪刺激（电压 ( B，频率 ( CD，波宽 ( 9?）， 以 % 次皆有嘶叫反应者为合格小鼠。取 ’ 只合格小 鼠，随机分为 ’ 组，每组 ( 只，分别给予夜来香根茎 提取物 8( 9+ & +，8! 9+ & + 及 ( + & : 的吗啡和生理盐 水于 !，%#，#，2 9;< 重复电刺激，连续两次刺激不 嘶叫者，表示药物有镇痛效果，计算镇痛百分率。 主要观察指标：!小鼠扭体反应次数。热板法 致小鼠痛觉反应的时间。#电刺激法致小鼠镇痛率。 统计学分析：数据用 !# 表示，组间比较采用传统 方法$ 检验。处理，由本院药理学教研室曾靖教授处
理。
! 结果
!8( 实验动物数量分析 各实验组小鼠无脱失情况。
在热板法致痛作用实验中如有小鼠跳出给予排除。
!8! 夜来香根茎提取物对醋酸引起小鼠扭体反应的
影响 见表 (。
8(E8! 9+ & + 的夜来香根茎提取物有明显对抗由
/ + & : 冰醋酸引起小鼠扭体反应，其镇痛效果呈剂量
依赖性。
!8% 夜来香根茎提取物对小鼠热板法致痛作用的影
响 见表 !。
8(E8! 9+ & + 的夜来香根茎提取物有明显的对抗
由热板法致痛作用，其镇痛效果呈剂量依赖性。
!8’ 纳洛酮对吗啡、夜来香根茎提取物镇痛作用的影
响 见表 %。
8’ 9+ & + 纳洛酮可拮抗 8( 9+ & + 吗啡的镇痛
作用，8’ 9+ & + 纳洛酮不能拮抗 8( 9+ & + 夜来香根
茎提取物的镇痛作用。
!8# 夜来香根茎提取物对电刺激法致痛作用的影响
见表 ’。
8(，8! 9+ & + 的夜来香根茎提取物有明显的对抗
由电刺激引起镇痛作用，其镇痛效果呈剂量依赖性，但
镇痛效果不如 8( 9+ & +吗啡。
表 % 纳洛酮对夜来香根茎提取物镇痛作用的影响 （!#%&F(E?）
组别
生理盐水组
纳洛酮 8’ 9+ & +
@吗啡 8( 9+ & + 组
纳洛酮 8’ 9+ & +
@夜来香根茎提取物 8( 9+ & +组
(!8%=%8/
(!82=%8!
(!8(=!81
(!8#=%8(
(%8(=%8%
!)8%=/81G
(!8)=!8)
(!81=%8(
!!8’=#8)H
(!8(=%8
(%8!=!8)
!8(=#8#H
$（给药前后痛觉反应） 给药后（9;<） 给药前 %(# / 与生理盐水组比较EH$F!8#%%，!8//%，’ I 8#；G$F%8/)#，’ I 8( 表 ( 夜来香根茎提取物对醋酸引起小鼠扭体反应的影响（!#%&F(） 生理盐水组 夜来香根茎提取物 8( 9+ & +组 夜来香根茎提取物 8! 9+ & +组 氨基比林组 组别 #8/=(#8# !8!=(8)H (’8#=28/H 28/=’8#H 给药后扭体反应次数 （(# 9;<内） /8(H 2(8%H )#8H 抑制率（J） 与生理盐水组比较，H$F%8#)(*%82!!E’ I 8(
生理盐水组
夜来香根茎提取物 8( 9+ & +组
夜来香根茎提取物 8! 9+ & +组
吗啡组
表 ! 夜来香根茎提取物对小鼠热板法致痛作用的影响 （!#%&F(E?）
组别
$（给药前后痛觉反应） 给药后（9;<） 给药前 %(# / (!8%=!8/ (!8(=!8 ((81=!8’ (!8!=!8# (!8(=%8( !!8(=/8!H !/8!=)8G !(8!=)8!G ((81=!8) !’8/=)8)G %(8(=(8%G %’8#=/8/G (!8)=%8 !!81=)8/H !18’=)82G %(8!=181G 与生理盐水组比较，H$F!8#/%，!82)#，’ I 8#；G$F%8##)*%82/!，’ I 8( 表 ’ 夜来香根茎提取物对电刺激小鼠的镇痛作用 （!#%&F(EJ） 与生理盐水组比较，H$F%8#%!*%8/))E’ I 8(
组别
生理盐水组
夜来香根茎提取物 8( 9+ & +组
夜来香根茎提取物 8! 9+ & +组
吗啡组

’#=#H
)#=(#H
1=(H

’=(H
)=#H
)#=(H

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’#=(#H
给药后镇痛率
! 9;< %# 9;< # 9;< 2 9;<
KLLM (/2($#1!/ NM !($(’2 & O
((()*+,-./)-01 ./233456437#8&9)-01 夜来香根茎提取物镇痛作用的实验观察刘午阳E 等8!
! 讨论
一般认为在伤害性刺激的作用下，组织释放各种致
痛因子，如 !#$、组织胺、缓激肽、前列腺素等，这些致痛 因子刺激神经末稍产生痛觉冲动，在中枢引起痛觉。扭体 法、热板法和电刺激法是研究药物镇痛作用较为常用的 方法。腹腔注射冰醋酸后，醋酸中电离出的微量 !可引 起腹腔深部大面积较持久的疼痛刺激（内脏痛），致使小 鼠产生扭体反应。热板法和电刺激法均为物理性刺激法， 小鼠由于受热和电刺激使体表皮产生肤痛。夜来香根茎 提取物能非常显著减少由醋酸引起小鼠扭体反应次数， 还能非常显著提高热板法致痛小鼠痛阈值，也能非常显 著提高电刺激法致痛小鼠的镇痛率。以上结果表明夜来 香根茎提取物具有明显的镇痛作用，其镇痛强度与氨基 比林相当。实验结果还显示，阿片受体拮抗剂纳洛酮可拮 抗吗啡的镇痛作用，但阿片受体拮抗剂纳洛酮不能拮抗 夜来香根茎提取物对热板致痛法小鼠的镇痛作用，这表 明夜来香根茎提取物的镇痛作用机制并非激动阿片受体 而镇痛的。其镇痛作用机制有待进一步研究。 参考文献 % 曾靖，黄贤华，赖飞，等 &夜来香水提取液局部麻醉作用 ’()&赣南医学院学报 # *++,，*,（%）-%., * 曾靖，李访贞，叶和杨，等&夜来香正丁醇提取物的中枢抑制作用’()&赣南医学 院学报 *++,，*,（,）：*,/.0 , 曾靖，单热爱，钟声，等 &拳参水提取物镇痛作用的实验观察 ’()&中国临床康 复，*++1，0234-5+.% 6 朱素君，胡然，贾永蕊，等&贯叶连翘与 7 族维生素对小鼠甲醛致痛后的镇痛 作用’()&中国临床康复，*++6，5254-%1%5.0 1 李淑惠，胡德耀，李晓辉，等&8.乙酰.1.甲氧色胺镇痛作用的实验研究’()&中 国临床康复，*++6#/254-%*//.5 3 史恒军，徐英槐，侯颖，等&腰宝袋内装药物镇痛效应的试验研究’()&中国临床 康复，*++6#52*,4-60**., / 林坚，金策，陈文照，等&痛风宁镇痛药效研究’()&现代康复，*++%#12%%4-%*5.0 5 陈奇，主编&中药药理研究方法学’9)&*版&北京：人民卫生出版社，*+++-,3+.% ·基础研究· 解放军第三军医大学大坪医院!野战外科研究所眼科，#野战外科研究 所三室，重庆市，$%%%$# 谢 琳!，女，&’’ 年生，重庆市人，汉族，解放军第三军医大学在读博 士，副教授，副主任医师，主要从事白内障、青光眼视神经保护方面的研 究。 ()*+),-&./01234516 重庆市科委自然科学基金资助项目（ 7897:#%%$;;<%.#）=
中图分类号：>--收稿日期：#%%#$$%&’()%’*+,-+&-+./0,1’-/+$0-2) -/2&3+, ’( 1/+ 2,1*’-41+,
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谢琳，贺翔鸽，马建洲，龙在云，伍亚民，王永堂4大鼠高眼压后筛板区星形胶质细
胞的免疫荧光组织化学变化hN j4中国临床康复，&’’(，*（ ,-）：,-0*
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摘要
目的：观察大鼠青光眼和正常眼视乳头筛板区星形胶质细胞标志物
神经胶质纤维酸性蛋白和 a1L1:7的表达。
方法：实验于 #%%$A %.E%-A # 在第三军医大学大坪医院野战外科研究所 眼科和第三军医大学大坪医院野战外科研究所第三研究室完成。步骤： !用 <.#A 二极管激光对 ’ 只正常 8U大鼠的右眼行跨越角膜缘小梁 网激光光凝。91,1V*,眼压计测量双眼眼压变化。#应用免疫荧光组 织化学 A 激光共聚焦显微镜观察星形胶质细胞标志物神经胶质纤维酸 性蛋白和 a1L1:7的表达变化。 结果：大鼠模型组 ’ 眼和非模型组 ’ 眼均进入结果分析。!大鼠模型 组、非模型组眼压情况：模型组激光光凝之后的眼压呈上升趋势，第 . 天显著高于非模型组h（ .4#;%4%），（ #4#&;%4%.）g^K，!iP%4%j，一直持 续 ’%PZ 均显著高于非模型组h（ .4#&;%4%.），（ #4.%;%4%#）g^K，!iP%4%j。 大鼠模型组、非模型组眼球标本免疫荧光组织化学染色结果：大鼠高 眼压后 ’%PZ，视乳头筛板区星形胶质细胞标志物神经胶质纤维酸性蛋 白和 a1L1:7表达强、密度高，模型组星形胶质细胞标志物神经胶质纤 维酸性蛋白红色荧光、a1L1:7P绿色荧光以及红色和绿色叠加后的黄色 荧光（ 灰度值）显著高于非模型组（ &4.;%4#，-4k#;%4#.，k4.%;%4$
比 .4;%4<:P’4<#;%4’，$4’;%4#%，! iP%4%）。 结论：星形胶质细胞可能参与了青光眼神经纤维的进一步损害和抑制 了神经纤维轴索再生。 大鼠高眼压后筛板区星形胶质细胞的免疫荧光组织化学变化 = 谢 琳 :P贺翔鸽 :P马建洲 :P龙在云 #:P伍亚民 #:P王永堂 # ! 中国临床康复 第 *卷第 ,-期 *++1.%+.+/出版 1&,(2#2 3’*4(.5 ’0 15,(,-.5 62&.7,5,8.8,’(# 9-8’724 : ;<<= >’5$ ? @’$A: <==8 %3/%.10*3 >8 *%.%6/+ ?@ BBB$C)5-D0$-’E 中国临床康复 *++1年 %+月 /日 第 0卷 第 ,/期 ,-