全 文 ：2012 Vol.13 No.2
聚合草又名爱国草、友谊草、紫草等，为紫草科
聚合草属牧草［1］。聚合草植株可做药用，聚合草在西
方做药用以有多年历史，主治皮肤病，胃溃疡，呼吸
系统疾病等［2］。针对目前国内外市场对聚合草功能
性成分开发利用的需求及其研究进展，研究聚合草
中黄酮类化合物的提取具有重要的理论意义与应用
价值。本文以黄酮的含量为考察指标，采用浸提正交
实验设计对聚合草中黄酮的提取工艺进行了研究，
确定最佳提取工艺，以提高对黄酮类成分的有效利
用率，为聚合草的深度开发提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 实验材料
试验用聚合草采集于山西农业大学；主要试剂：
芦丁（批号：100080-200707），亚硝酸钠（分析纯），硝
酸铝（分析纯），氢氧化钠（分析纯），无水乙醇（分析
纯）等。主要仪器及设备：DK-98-Ⅱ电热恒温水域
锅，Sartrius电子天平，WFJ2100型可见分光光度计，
漏斗；容量瓶；烧杯等。
1.2 实验方法
1.2.1 提取工艺 聚合草→洗净并晒干→揉碎→水
浸提→过滤→黄酮类物质浸提液→计算黄酮类物质
含量［3］。
1.2.2 单因素实验方法 每个单因素分 5个水平，
在做相应单因素实验前，应先适当的选取其他两个
因素的值，最后按着实验方法做出该单因素 5个不
同水平的提取量。
1.2.3 试验方法与设计 本研究以聚合草提取液中
聚合草中黄酮类物质的提取工艺研究
李宝霞 1，董双涛 1，霍乃蕊 2
（1.山西生物应用职业技术学院，山西 太原 030031； 2.山西农业大学食品科学与工程学院，山西 太谷 030801）
摘要 目的：采用浸提正交实验设计优化聚合草中黄酮的提取工艺。方法：以水为提取溶剂采用正交试验设计探讨提取
温度、料液比、提取时间等因素对聚合草中黄酮类物质提取量的影响。结果：聚合草黄酮类物质的最佳提取工艺参数为：
浸提温度 90 ℃、料液比 1∶40、浸提时间 2.5 h，在此条件下聚合草提取液中黄酮类物质百分含量为 3.01%。结论：优选得
到的工艺确实可行，适合聚合草中黄酮类物质的提取。
关键词 聚合草；黄酮；提取工艺；正交试验
中图分类号：R285.5 文献标识码：A 文章编号：1671- 0258（2012）02- 0034- 03
［基金项目］山西省科技攻关项目（20100312015）；山西省回国留学人员科研项目（2009038）
［作者简介］李宝霞，女，在职研究生，从事质量标准研究
［通讯作者］霍乃蕊，博士，教授，从事食品生物技术方面的研究工作
［收稿日期］2012-01-12
Study on Extraction Technique of Flavonoids From
Symphytum Officinal Linn
Li Baoxia1，Dong Shuangtao1，Huo Nairui2
（1.Shanxi Biological Application Vocational Technical College，Taiyuan Shanxi 030031； 2.Food Science and Engineering College，
Shanxi Agricultural University，Taigu Shanxi 030801）
Abstract Objective：To establish the optimum preparation procedure of flavonoids from Symphytum Officinal Linn by
orthogonal design. Method：Using water as extracting liquid，the effect factors of temperature，time of extraction and ratio of
material to solvent on the flavonids extracted from Symphytum Officinal Linn were studied through orthogonal design.
Results：The optimum extraction conditions of flavonoids from Symphytum Officinal Linn were as follows：water as
extraction solvent at 90 ℃ for 2.5 h，the ratio of material to solvent was 1∶40. Under the above conditions，percent content
of flavonoids in Symphytum Officinal Linn extraction was 3.01%. Conclusion：This technological process is feasible and
can be used for extracting flavonoids from Symphytum officinal Linn.
Key words Symphytum Officinal Linn；flavonoids；technological process；orthogonal design
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2012年 第 13卷 第 2期
黄酮类物质的含量为评价指标，通过对水浸提温度
（A）、浸提时间（B）、料液比（C）3种影响因素［4］进行
单因素试验及设定三因素三水平正交试验，如表 1
所示，确定聚合草中黄酮类物质提取的最佳的工艺
参数。
1.2.4 标准液的制备及标准曲线的绘制 芦丁标准
液：准确称取在 120 ℃条件下干燥至恒重的芦丁标
准品 10.00 mg，将其置于 100 mL的容量瓶中，以无
水乙醇溶液溶解，60%乙醇定容，摇匀，作为标准品
溶液备用。准确吸取上述标准液 0.0 mL（空白对照
管）、1.0 mL、2.0 mL、3.0 mL、4.0 mL和 5.0 mL于 10
mL容量瓶中，补充蒸馏水使成 5 mL，精密加入 5%
NaNO2 0.3 mL，摇匀后放置 5 min，加入 AL（NO3）3
0.3 mL，摇匀后再放置 6 min，加入 4%NaOH 2 mL，
补充蒸馏水，使总体积为 10 mL，摇匀，放置 10 min，
在 510 nm处测其吸光度。结果见表 2，芦丁标准曲
线见图 1。标准曲线的回归方程为：A=11.48C-0.008
8，C为样品浓度，mg/mL，A为吸光度，得出相关系数
R2=0.999 4。
1.2.5 样品提取液中黄酮类物质含量的计算 精确
称取样品 5 g于 250 mL烧杯中，加入蒸馏水，在不
同时间条件下水浴浸提，接着对提取液进行过滤，过
滤后将溶液在 250 mL容量瓶中用蒸馏水稀释，分
别取 1 mL溶液于 10 mL容量瓶中，加入 2 mL蒸馏
水稀释，然后精密加入 5%NaNO2 0.3 mL，摇匀后放
置 5 min，再加入 10%Al（NO3）3 0.3 mL，摇匀后再放
置 6 min，最后加入 4%NaOH 2 mL，分别用蒸馏水
定容至刻度，摇匀，放置 10 min，以蒸馏水按上述操
作加入各试剂后作为空白参比，测定其吸光度值，根
据标准曲线回归方程求出浓度 C，并计算提取液黄
酮类物质含量。
2 结 果
2.1 单因素试验
2.1.1 料液比对提取液中黄酮类物质含量的影响
选取料液比为 1∶10、1∶20、1∶30、1∶40、1∶50，浸提
温度 90 ℃、浸提 1.5 h，研究不同料液比对提取液中
黄酮类物质含量的影响，结果如图 2所示。
由图 2可知，当料液比达到 1∶40时，提取液中
黄酮类物质含量最高。
2.1.2 浸提温度对提取液中黄酮类物质含量的影响
选取温度为 60 ℃、70 ℃、80 ℃、90 ℃、95 ℃，料
液比 1∶30、浸提 1.5 h，研究不同温度对提取液中黄
酮类物质含量的影响，结果如图 3所示。
由图 3可以看出，当温度达到 90 ℃时，黄酮类
物质的提取量达到最大值。
2.1.3 浸提时间对提取液中黄酮类物质含量的影响
浸提温度 90 ℃、料液比 1∶30，选取每次的浸提时
间为 1.5 h、2 h、2.5 h、3 h、3.5 h，研究不同浸提时间对
提取液中黄酮类物质含量的影响，结果如图 4所示。
由图 4可以看出，浸提时间为 2.5 h时达到最大峰值。
2.2 正交试验
在单因素试验的基础上，为获得更理想的提取
条件，提高提取液中黄酮类物质含量，对提取条件进
表 2 芦丁标准溶液与吸光度
芦丁浓度(mg/mL） 0.01 0.02 0.03 0.04 0.05
吸光度（X） 0.106 0.221 0.339 0.443 0.569
表 1 试验因素水平表
水平 A浸提温度（℃） B浸提时间（h） C料液比
1 70 1.5 1∶20
2 80 2 1∶30
3 90 2.5 1∶40
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金钱利胆丸是由丹参、金钱子、鸡内金、茵陈、虎
杖、大黄、郁金、柴胡、延胡索等药味组成的复方制
剂，具有疏肝清热，利胆排石的功效［1］。本品为医院
制剂，临床主要用于治疗胆囊结石、胆总管结石、肝
行了正交优化研究，采用 L9（33）正交表进行正交试
验，试验设计及结果如表 3所示。
由表 3的极差分析可知，3 种因素的最佳组合
为 A2B3C2。从表 3计算的 K值可以知道，最佳水平
组合为 A3B3C3，因此用 A3B3C3做验证性试验，即浸提
温度 90 ℃、料液比 1∶40、浸提时间 2.5 h，试验结果
为聚合草提取液中黄酮类物质含量是 3.01%。所以
最终确定最佳的提取工艺条件为 A3B3C3。
3 讨 论
通过单因素试验和正交试验，确定聚合草黄酮类
物质的最佳提取工艺参数为：浸提温度 90 ℃、料液比
1∶40、浸提时间 2.5 h，在此提取工艺条件下聚合草提
取液中黄酮类物质含量为 3.01%。且该方法设备简
单，操作简便，是一种较为理想的提取方法。不仅黄酮
含量高，像蛋白质和多糖等其他物质含量也很高。在
今后的开发利用过程中，我们可以尝试对该草中的各
种物质进行提取做一些保健和美容的产品。
参考文献
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用［J］. 江西饲料，2004，6（4）：19-21.
［3］杨玉琼，王伟，华高民，等. 杜仲叶中黄酮提取、检查方法研究进
展［J］. 中药材，2009（2）：875-879.
［4］程力惠，李晓蒙. 贯叶连翘中总黄酮提取工艺的研究［J］. 中药材，
2008，22（6）：904-907.
表 3 正交试验设计及结果
试验号 A（℃） B（h） C 黄酮类物质量（%）
1 1（70） 1（1.5） 1（1∶20） 1.43
2 1（70） 2（2） 2（1∶30） 1.81
3 1（70） 3（2.5） 3（1∶40） 2.13
4 2（80） 1 3 2.44
5 2（80） 2 1 1.95
6 2（80） 3 2 2.96
7 3（90） 1 2 2.55
8 3（90） 2 3 2.86
9 3（90） 3 1 2.51
K1 5.37 6.42 5.89 T=20.64
K2 7.35 6.62 7.32
K3 7.92 7.60 7.43
k1 1.79 2.14 1.96
k2 2.45 2.21 2.44
k3 2.64 2.53 2.48
R 0.85 0.39 0.52
影响因素主次关系：A>C>B
HPLC法测定金钱利胆丸中丹酚酸 B的含量
张府君，程永杰，杨兴鑫，李晓妮
（山西医科大学药学院，山西 太原 030001）
摘要 目的：建立金钱利胆丸中丹酚酸 B含量的测定方法。方法：采用反相高效液相色谱法，Kromasil ODS C18分析柱（5
μm，250 mm×4.6 mm），流动相：甲醇-乙腈-甲酸-水（30∶10∶1∶59），检测波长 286 nm，流速 1.0 mL/min，柱温 25 ℃。结果：
丹酚酸 B在 0.126 8 μg/mL~2.536 μg/mL范围内线性关系良好（r=0.999 4），平均回收率为 96.5%，RSD=1％（n=5）。结论：
该法操作简便、准确，适用于金钱利胆丸的质量控制。
关键词 高效液相色谱法；金钱利胆丸；丹酚酸 B
中图分类号：R285.5 文献标识码：A 文章编号：1671- 0258（2012）02- 0036- 03
［作者简介］张府君，女，在读硕士，从事中药质量标准研究
［通讯作者］李晓妮，E-mail：ninili1235@163.com
［收稿日期］2011-11-12
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