全 文 ：2.6　稳定性实验 取供试液 ,按上述方法操作 , 每隔 30 min测定
1次吸收度 ,连续 4 h考察其稳定性。结果表明供试液在 4 h显
色稳定 , RSD=0.37%。
2.7　加样回收率实验 精密称取鱼腥草样品 0.25 g, 加入适量葡
萄糖对照品 , 置同一烧杯中 , 按供试液制备与含量测定法操作。
测定结果葡萄糖的平均回收率为 99.7% , RSD=0.37%(n=6)。
2.8　样品含量测定 取各供试品溶液 , 按 “ 2.3”项下方法操作 ,
测定吸收度 , 从回归方程中求出供试液中葡萄糖的含量 , 按下式
计算样品中多糖含量:多糖含量(%)=C×D×F×100/W。结果
见表 1。
表 1　不同营养器官多糖含量测定 %
样品 多糖含量 RSD
野生　　　根　 8.45 1.23
　　　　　嫩条 24.26 0.35
　　　　　老条 1.57 1.12
　　　　　叶　 18.92 0.11
人工栽培　嫩条 27.98 0.28
3　讨论
野生和人工栽培的齿瓣石斛嫩条多糖含量均较高 , 采收
时以嫩条作为主要药用部位比较合理 , 老条可用于分株繁殖
和压条繁殖 。
叶片富含多糖 ,应充分利用。
人工栽培齿瓣石斛富含黏液 , 多糖含量高于野生 ,说明现有
的栽培模式是可行的。
齿瓣石斛多糖含量较高 , 与传统评价方法中认为其富含黏
液 , 品质较好相一致。但是 ,仅通过测定多糖含量不足以评价其
品质 , 应借助现在广泛开展的指纹图谱研究技术 , 建立其与中药
质量疗效的内在联系 ,尝试从不同角度关注齿瓣石斛的品质 , 确
保其有效性和安全性。
参考文献:
[ 1 ] 　包雪声 ,顺庆生 ,陈立钻.中国药用石斛彩色图谱 [ M] .上海:上海
医科大学出版社 、复旦大学出版社 , 2001:87.
[ 2 ] 　郑志新 ,李　昆 ,张昌顺 ,等.云南龙陵齿瓣石斛化学成分分析测定
及栽培方式选择 [ J] .安徽农业科学 , 2008, 36(4):1426.
[ 3 ] 　李满飞 ,徐国钧 ,平田义正 ,等.中药石斛类多糖的含量测定 [ J].中
草药 , 1990, 21(10):10.
收稿日期:2009-06-19;　修订日期:2009-10-28
基金项目:广西科学基金项目(No.0848008)
作者简介:韦相忠(1963-),男(汉族),广西桂平人 ,现任广西中医学院副
教授 ,硕士学位 ,主要从事中药相关的研究工作.
＊通讯作者简介:李耀华(1978-), 男(汉族),广西合浦人 , 现任广西中医
学院助理实验师 ,硕士学位 ,主要从事中药 、民族药的质量分析研究工作.
广西莪术微波炮制品中 牛儿酮含量的研究
韦相忠 ,蔡　卓 ,李耀华＊ ,秦松梅 ,劳　深 ,王　建
(广西中医学院·药学院 ,广西 南宁　530001)
摘要:目的 研究微波炮制方法和传统炮制方法对广西莪术中 牛儿酮含量的影响。 方法 采用 HPLC法 ,色谱柱为大
连依利特 HypersilODS2柱(4.6 mm×250mm, 5 μm);柱温:35℃;流动相为乙腈 -水(35∶65);紫外检测波长为 210nm。
结果 牛儿酮在 0.095 ～ 0.95 μg范围内具有良好的线性关系 , r=0.999 9;加样平均回收率 101.86%, RSD为 2.2%(n
=6);含量测定结果为 0.735 6 ～ 1.166 mg/g。结论 不同的微波炮制热力学参数条件对广西莪术中 牛儿酮含量有明
显影响 , 选择适当的微波热力学参数的微波炮制品 2号与传统炮制方法醋制品中 牛儿酮含量基本相同 ,为筛选莪术微
波炮制工艺提供了有一定价值的实验参考数据。
关键词:广西莪术;　微波炮制品;　 牛儿酮;　高效液相色谱法
中图分类号:R284.2　　文献标识码:B　　文章编号:1008-0805(2010)05-1073-02
　　广西莪术为姜科植物广西莪术 CurcumakwangsiensisS.G.
LeeetC.F.Liang的干燥块茎 , 性辛 、苦 、温 , 归肝脾经 , 具有行气
破血 、消积止痛功能 ,用于癥瘕痞块 ,瘀血经闭 , 食积胀痛 ,早期宫
颈癌 , 是临床上较为常用的活血化瘀药 [ 1] 。近年来研究发现 ,其
挥发油具有抗肿瘤 、抗早孕 、保肝 、抗肝纤维化 、抗病毒 、抗菌等功
用 , 目前已从中分离出有桉油精 、樟脑 、异龙脑 、β -榄香烯 、莪术
烯 、 牛儿酮 、α-松油醇等三十多种成分 [ 2 ～ 4] 。本文研究微波
炮制方法和传统炮制方法对广西莪术中 牛儿酮含量的影响。
1 　仪器与试药
Agilent1100型高效液相色谱仪 ,包括:四元泵 , 真空脱气机 ,
自动进样器 , VWD检测器(可变波长检测器), Agilent1100 LC化
学工作站;B3500S-MT型超声波清洗器(上海必能信仪器有限
公司);赛多利斯 BP211D电子天平;G80W23YSP-Z型微波炉。
乙腈 、甲醇为色谱纯(美国 Fisher), 水为超纯水 ,其它试剂均为分
析纯。 牛儿酮对照品(中国药品生物制品检定所提供 , 批号:
111665-200401,供含量测定用 , 含量为 94.96%), 药材由广西中
医学院药用植物教研室王建副教授在南宁郊区五合种植基地提
供 , 经广西中医学院药用植物教研室韦松基教授鉴定为姜科植物
广西莪术 CurcumaKwangsiensisS.G.LeeetC.F.Liang。
2 　方法与结果
2.1 　 样品制备 3种传统炮制品的制备均参照 《中国药典》
2005年版Ⅰ 部关于炮制的有关规定及各地炮制规范 [ 2] 。生莪
术:取药材除去根须杂质 , 略泡 ,洗净 ,切片(3 mm左右), 低温干
燥。水煮莪术:将净制后莪术加水浸没 , 煮至透心(恒温 100℃,
时间 20min), 取出放冷 ,切片(3 mm左右), 低温干燥。醋莪术:
将净制后莪术加陈醋(100∶ 20)拌匀浸没 , 煮至透心(恒温
100℃,时间 20 min), 取出放冷 , 切片(3 mm左右), 低温干燥。
微波炮制品 1:将净制后莪术约 0.7kg,经微波加热(功率 800W,
频率 2 450 MHz,时间 6 min),取出放冷 , 切片(3 mm左右),低温
干燥。微波炮制品 2:将净制后莪术约 0.7kg, 经微波加热(功率
800 W, 频率 2 450 MHz,时间 7 min),取出放冷 , 切片(3 mm左
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LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2010VOL.21NO.5 时珍国医国药 2010年第 21卷第 5期
右),低温干燥。微波炮制品 3:将净制后莪术约 0.7 kg, 经微波
加热(功率 800 W, 频率 2 450MHz,时间 8 min), 取出放冷 ,切片
(3 mm左右), 低温干燥。
2.2 　色谱条件 色谱柱为 HypersilODS2柱(4.6mm×250mm,
5 μm);流动相为乙腈 -水(35∶65), 流速为 1.0 ml· min-1;紫
外检测波长为 210 nm;柱温 35℃;进样体积 10 μl。
2.3　对照品溶液的制备 精密称取 牛儿酮对照品 4.75 mg,用
乙醇溶解并定容至 10 ml量瓶中 , 作为储备液。精密吸取 1 ml,
定容至 10ml, 配制成 1ml含 0.047 5 mg 牛儿酮的溶液。
2.4 　供试品溶液的制备 称取样品莪术粉末(过 2号筛)1 g,精
密称定 , 置具塞锥形瓶中 , 精密加入乙醇 25 ml, 密塞 , 超声处理
30 min, 放冷 ,补重 , 滤过 ,滤液过 0.45 μm滤膜备用。
2.5 　线性关系考察 分别精密吸取对照品溶液(0.047 5 mg/
ml)2, 6, 12, 14, 20μl进行色谱测定 , 按上述色谱条件测定峰面
积 , 以峰面积(mAU)对应 牛儿酮进样量 μg(X)进行线性回
归 , 得回归方程 Y=3 043.5X+3.196, r=0.999 9(n=6), 表明
牛儿酮在 0.095 ～ 0.95 μg范围内具有良好的线性关系。
2.6　精密度实验 分别精密吸取上述 牛儿酮对照品溶液 10
μl,连续进样 6次。 测峰面积 , 结果 RSD为 0.14%(n=6), 表明
精密度良好。
2.7 　重复性实验 按上述样品液溶制备方法和色谱条件 , 对同
一批样品平行实验 6份 , 得平均含量为 0.733 7 mg/g, RSD为
0.92%(n=6),表明本方法有较好的重复性。
2.8　稳定性实验 精密吸取同一供试品 10μl,按上述色谱条件 ,
分别在 0, 2, 4, 6, 8, 12, 24h测定峰面积 ,结果 RSD为 1.14%(n=
6),表明 24h内稳定。
2.9　回收率实验 称取水煮莪术号样品 6份各 0.5 g,精密称定 ,
精密加入 牛儿酮对照品(0.475 mg/ml)储备液 1 ml。 按供试
品溶液制备项下操作 , 按上述色谱条件测定含量 , 计算回收率 ,得
平均回收率为 101.86%, RSD为 2.2%(n=6)。结果见表 1。
表 1　加样回收率考察结果
序号 取样量m/g
原有量
m/mg
加入量
m/mg
测得量
m/mg
回收率
(%)
平均值
(%)
RSD
(%)
1 0.500 2 0.410 6 0.451 1 0.857 4 99.06
2 0.502 0 0.412 1 0.451 1 0.875 3 102.69
3 0.501 2 0.411 4 0.451 1 0.880 0 103.88 101.86 2.2
4 0.501 8 0.411 9 0.451 1 0.859 5 99.23
5 0.507 2 0.416 4 0.451 1 0.876 5 102.01
6 0.503 0 0.412 9 0.451 1 0.883 2 104.27
2.10　样品测定 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各 10
μl,注入液相色谱仪 , 记录峰面积。 结果见图 1。 计算含量见
表 2。
3　讨论
提取溶剂的选择 分别选用甲醇 、乙醇为溶剂 , 进行超声提
取 , 结果表明两种溶剂的提取含量差异性不大 , 由于乙醇为无毒
性溶剂 ,故选用乙醇为提取溶剂。
1 牛儿酮
图 1　对照品(A)供试品(B)的HPLC图
表 2　广西莪术不同炮制品 牛儿酮含量
样品 牛儿酮含量 C/mg· g-1 RSD(%)
生品 1.025 0.89
水煮 0.852 0 1.6
醋制 1.166 1.4
微波炮制品 1号 0.934 4 1.2
微波炮制品 2号 1.116 1.2
微波炮制品 3号 0.735 6 0.44
提取时间的选择:分别进行了超声提取时间 15, 30, 45 min
的比较 ,结果表明 30 min和 45 min提取含量较高且差异性不大 ,
故选用超声提取 30 min。
通过使用 HPLC方法对广西莪术的 3种传统炮制品和 3种
微波炮制品中 牛儿酮含量的测定 , 实验结果表明不同的炮制
方法和不同的微波炮制热力学参数对广西莪术中 牛儿酮含量
有明显的影响 , 选择适当的微波炮制热参数条件的微波炮制品与
传统炮制方法醋制品中 牛儿酮含量相同 , 为筛选莪术微波炮
制工艺提供了有一定价值的实验参考数据 ,其药效作用比较有待
下一步研究。
参考文献:
[ 1 ] 　国家药典委员会.中国药典 , Ⅰ 部 [ S] .北京:化学工业出版社 ,
2005:194.
[ 2 ] 　邓家刚 ,韦松基.广西道地药材 [ M] .北京:中国中医药出版社 ,
2007:364.
[ 3 ] 　刘　雯 ,王　建 ,张　炜 ,等.广西不同产地莪术挥发油的含量测定
及其 GC-MS分析 [ J] .广西中医学院学报 , 2006, 9(3):73.
[ 4 ] 　王　建 ,刘　雯 ,张　炜 ,等.广西不同产地莪术中吉马酮的含量比
较 [ J] .时珍国医国药 , 2009, 20(5):1091.
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