全 文 ：巴山重楼化学成分研究
张志港 1 ,赵　德2 ,邓　君 1＊
(1.西南大学药学院 ,重庆 400715;2.北大国际医院集团重庆大新药业 ,重庆 400700)
　　摘要　目的:为寻找中药重楼的替代资源 , 研究巴山重楼根茎的化学成分。 方法:依次用正相硅胶柱色谱 、
SephadexLH-20凝胶柱色谱 、反相硅胶柱色谱 、反相制备 HPLC等手段 , 从巴山重楼根茎的正丁醇提取部分分离纯
化单体化合物 , 并运用 MS、1H-NMR、13C-NMR、2D-NMR等波谱技术鉴定所得化合物的结构。结果:从巴山重楼的
正丁醇提取部分中分离得到 5个化合物 , 分别鉴定为:β-蜕皮激素(1)、pinnatasterone(2)、偏诺皂苷元-3-O-α-L-鼠李
吡喃糖(1※ 2)-[ α-L-阿拉伯呋喃糖(1※4)] -β-D-葡萄吡喃糖苷(3)、薯蓣皂苷元-3-O-α-L-鼠李吡喃糖(1※ 2)-[ α-L-
阿拉伯呋喃糖(1※ 4)] -β-D-葡萄吡喃糖苷(4)、偏诺皂苷元-3-O-α-L-鼠李吡喃糖(1※ 4)-α-L-鼠李吡喃糖(1※ 4)-
[ α-L-鼠李吡喃糖(1※ 2)] -β-D-葡萄吡喃糖苷(5)。结论:化合物 1 ～ 5为首次在该植物中分离得到。
关键词　巴山重楼;化学成分
中图分类号:R284.1/R284.2　　文献标识码:A　　文章编号:1001-4454(2011)03-0389-04
StudiesontheChemicalConstituentsofParisbashanensis
ZHANGZhi-gang1 , ZHAODe2 , DENGJun1
(1.ColegeofPharmaceuticalSciences, SouthwestUniversity, ChongQing400715, China; 2.PKUDaxinPharmaceuticalCo., Ltd,
Chongqing400700, China)
Abstract　Objective:StudythechemicalconstituentsoftherhizomesofParisbashanensistosearchafterthealternativeresource
fortheChinesemedicinalmaterialRhizomaParidis.Methods:Then-BuOHextractsofP.bashanensiswasappliedtosilicagelcolumn
andelutedwithEtOAc-EtOH, thenthegainedfractionswerefurtherpurifiedbychromatographyonSephadexLH-20 columnandPre-
RP-HPLCtogivepurecompoundswhosestructureswereelucidatedmainlyonthebasisofanalyzingthespectraldataofMS, 1H-NMR,
13C-NMR, 2D-NMR.Results:Fivecompoundswereisolatedandidentifiedasβ-ecdysone(1), pinnatasterone(2), pennogenin-3-O-α-L-
rhamnopyranosyl(1※ 2)-[ α-L-arabinofuranosyl(1※ 4)] -β-D-glycopyranoside(3), diosgenin-3-O-α-L-rhamnopyranosyl(1※ 2)-[ α-L-
arabinofuranosyl(1※ 4)] -β-D-glycopyranoside(4), pennogenin-3-O-α-L-rhamnopyranosyl(1※ 4)-α-L-rhamnopyranosyl(1※ 4)-[ α-L-
rhamnopyranosyl(1※ 2)] -β-D-glycopyranoside(5).Conclusion:Compound1 ～ 5areobtainedfromthisplantforthefirsttime.
Keywords　ParisbashanensisWangetTang;Chemicalconstituents
收稿日期:2010-10-28作者简介:张志港(1986-),男,在读硕士研究生 ,主要从事微生物与生化药学研究;Tel:15923098991, E-mail:zzgbest007@ 163.com。＊通讯作者:邓君 , Tel:13637701279, E-mail:dengjcq@163.com。
　　中药重楼为百合科重楼属(ParisL.)植物的干
燥根茎 ,具有清热解毒 、消肿止痛 、凉肝定惊之功效 ,
用于治疗疔疮痈肿 、咽喉肿痛 、毒蛇咬伤 、跌扑伤痛 、
惊风抽搐等症 〔1〕。重楼的基源植物包括七叶一枝
花 ParispolyphylaSmithvar.chenensis(Franch.)Hara
和滇重楼 ParispolyphylaSmithvar.yunnanensis
(Franch.)Hand.-Mazz.〔2〕 ,至今对其化学成分及药
理活性都已有了较深入的研究〔3-7〕。重楼因为具有
重要的药用价值 ,故被大量采挖;而重楼的繁殖难度
大 ,资源再生困难 ,致使重楼资源受到严重破坏 ,中
药重楼的供需矛盾日益紧张。除广泛开展重楼的人
工快繁 、种植研究外 ,寻找新的替代药源是解决目前
重楼资源匮乏的一条重要途径 。
重楼的同属植物巴山重楼 Parisbashanensis
WangetTang在民间用于治疗蚊虫咬伤 ,分布于湖
北与四川 ,具有一定的资源量 ,但迄今尚未见关于其
化学成分 、药理作用等的研究报道 。故本实验对巴
山重楼进行化学成分研究 ,以比较重楼和巴山重楼
的活性物质基础 ,以期为扩大中药重楼的资源 、合理
开发重楼属植物提供科学依据。
1　仪器与材料
Bruker500核磁共振仪(瑞士 Bruker公司);硅
胶 GF254薄层板(烟台江友);柱色谱硅胶 G(200 ～
300目和 300 ～ 400目 ,青岛海洋化工厂);反相硅胶
板(Merck公司), C18反相硅胶(Merck公司 , 40 ～ 60
μm),葡聚糖凝胶 SephadexLH-20(美国 Amersham
PharmaciaBiotech公司),岛津半制备高效液相色谱
仪。 95%乙醇 ,医用级;其他试剂均为分析纯 。
巴山重楼于 2006年 8月采集自缙云山 ,经邓君
博士鉴定为百合科重楼属植物巴山重楼 Parisbas-
hanensisWangetTang的干燥根茎 ,凭证标本(标本
采集号为 PBS200608)保存于西南大学药学院中医
·389·JournalofChineseMedicinalMaterials　　第 34卷第 3期 2011年 3月
DOI :10.13863/j.issn1001-4454.2011.03.022
药教研室。
2　提取分离
取晾晒干燥的巴山重楼根茎 3kg,粉碎成粗粉 ,
用 95%乙醇室温渗漉提取 ,渗漉液减压回收乙醇得
浸膏 423 g。取浸膏 400 g,用 2 000 mL水混悬 ,依
次用石油醚(2 000 mL×4)、乙酸乙酯(2 000 mL×
4)和水饱和的正丁醇(2 000 mL×4)萃取 ,各萃取
液分别回收溶剂 ,得石油醚部分 94g、乙酸乙酯部分
162g、正丁醇部分 117g。取正丁醇萃取部分 110 g
上硅胶(拌 20%水 , w/v)柱 ,以水饱和的乙酸乙酯-
乙醇(98∶2、95∶5、90∶10、80∶20、60∶40、0∶100)进行
梯度洗脱 , 合并成分相似的洗脱流分 , 得 Fr.1 ～
Fr.11;取 Fr.7再经反复硅胶柱色谱 、半制备 RP-
HPLC,分离得到了化合物 1(196 mg);取 Fr.8经反
复硅胶柱色谱 ,分离得到化合物 2(10 mg)、 4(68
mg);取 Fr.9经反复硅胶柱色谱 、葡聚糖凝胶柱色
谱 ,分离得到化合物 3(45mg)、5(47 mg)。
3　结构鉴定
化合物 1:白色针晶 ,溶于甲醇 。香兰素 -硫酸
显色呈青紫色 。1H-NMR(DMSO-d6 , 500 MHz)δ:
0.77(3H, s, 18-CH3), 0.84(3H, s, 19-CH3), 1.06
(3H, s, 27-CH3), 1.07(3H, s, 21-CH3), 1.08(3H, s,
26-CH3), 2.20(1H, dd, J=4.5, 13.0 Hz, H-5), 2.26
(1H, t, J=9.0 Hz, H-17), 3.01(1H, brt, J=9.0
Hz, H-9), 3.12(1H, d, J=10.0 Hz, H-22), 3.61
(1H, brd, J=12.0 Hz, H-2), 3.77(1H, brs, H-3),
5.63(1H, d, J=2.0 Hz, H-7);13C-NMR数据见表 1。
以上数据与文献 〔8〕报道数据相符 ,故确定该化合物
为 β-蜕皮激素。
化合物 2:白色针晶 ,溶于甲醇 。香兰素 -硫酸
显色呈青紫色 。1H-NMR(DMSO-d6 , 500 MHz)δ:
0.73(3H, s, 18-CH3), 0.84(3H, s, 19-CH3), 1.00
(3H, s, 27-CH3), 1.05(3H, s, 26-CH3), 1.13(3H, s,
21-CH3), 2.16(1H, t, J=9.0 Hz, H-17), 2.20(1H,
dd, J=4.0, 13.0 Hz, H-5), 3.77(1H, brs, H-3),
5.63(1H, d, J=2.0 Hz, H-7);13C-NMR数据见表 1。
以上数据与文献 〔9〕报道数据相符 ,故确定该化合物
为 pinnatasterone。
　　化合物 3:白色针晶 ,易溶于甲醇。香兰素 -硫
酸显 色呈黄色 。 HR-ESI-MSm/z:[ M +Na] +
893.5,分子式为 C44H70O17。1H-NMR(CD3OD-d4 , 500
MHz)δ:0.82(3H, d, J=6.5 Hz, CH3-27), 0.85(3H,
s, CH3 -18), 0.91(3H, d, J=7.0 Hz, CH3 -21), 1.07
(3H, s, CH3 -19), 1.26(3H, d, J=3.0 Hz, Rha-
CH3), 3.41(1H, t, J=9.0Hz, Rha-H-4), 3.43(1H,
　表 1　　　　　化合物 1、2的 13C-NMR数据
(DMSO-d
6
, 125MHz)
C 化合物 1 化合物 2 C 化合物 1 化合物 2
1 37.1 36.7 15 30.8 30.3
2 67.2 66.7 16 20.7 20.8
3 67.1 66.7 17 49.2 51.7
4 32.0 31.7 18 17.6 17.4
5 50.6 50.2 19 24.3 24.0
6 203.2 203.0 20 76.2 73.4
7 120.9 120.5 21 21.4 26.7
8 165.7 165.7 22 76.7 41.8
9 33.6 33.3 23 26.6 26.7
10 38.1 37.8 24 41.9 78.4
11 20.5 20.2 25 69.2 71.9
12 31.3 30.9 26 29.4 25.7
13 47.3 46.5 27 30.4 24.5
14 83.5 83.5
t, J=8.0Hz, Glc-H-2), 3.54(1H, t, J=9.0 Hz, Glc-
H-4), 3.65(1H, t, J=9.0 Hz, Glc-H-3), 3.68(1H,
dd, J=3.0 , 9.5 Hz, Rha-H-3), 3.89(1H, dd, J=
4.5, 6.0 Hz, Ara-H-3), 3.92(1H, dd, J=1.5, 3.0
Hz, Rha-H-2), 4.00(1H, dd, J=2.0, 4.0 Hz, Ara-H-
2), 4.03(1H, dd, J=7.0, 7.5 Hz, H-16), 4.10(1H,
m, Ara-H-4), 4.15(1H, m, Rha-H-5), 4.53(1H, d,
J=8.0 Hz, Glc-H-1), 5.05(1H, d, J=2.0 Hz, Ara-
H-1), 5.25(1H, d, J=1.5 Hz, Rha-H-1), 5.41(1H,
d, J=5.0 Hz, H-6);13C-NMR数据见表 2。以上数
据与文献 〔10〕报道数据相符 ,故确定该化合物为偏诺
皂苷元-3-O-α-L-鼠李吡喃糖(1※2)-[ α-L-阿拉伯呋
喃糖(1※4)] -β-D-葡萄吡喃糖苷。
　　化合物 4:白色针晶 , 易溶于甲醇 。香兰素-硫
酸显色呈 黄色。 HR-ESI-MSm/z:[ M +Na] +
877.4 ,分子式为 C44H70O16。1H-NMR(CD3OD-d4 ,
500 MHz)δ:0.83(6H, brs, CH3 -27, 18), 0.98(3H,
d, J=7.0 Hz, CH3-21), 1.07(3H, s, CH3-19), 1.26
(3H, d, J=6.0 Hz, Rha-CH3), 4.53(1H, d, J=7.0
Hz, Glc-H-1), 5.04(1H, brs, Ara-H-1), 5.24(1H, br
s, Rha-H-1), 5.31(1H, brs, H-6);13C-NMR数据见
表 2。对照文献 〔10〕 ,确定该化合物为薯蓣皂苷元-3-
O-α-L-鼠李吡喃糖(1※2)-[ α-L-阿拉伯呋喃糖(1※
4)] -β-D-葡萄吡喃糖苷。
化合物 5:白色针晶 ,易溶于甲醇。香兰素-硫
酸显色呈黄色。 HR-ESI-MSm/z:[ M +Na] + 1
053.3 ,分子式为 C51H82O21。1H-NMR(CD3OD-d4 , 500
·390· JournalofChineseMedicinalMaterials　　第 34卷第 3期 2011年 3月
MHz)δ:0.70(3H, d, J=6.0 Hz, CH3-27), 0.73(3H,
s, CH3 -18), 0.79(3H, d, J=7.0 Hz, CH3 -21), 0.95
(3H, s, CH3 -19), 1.14(3H, d, J=5.5 Hz, Rha -
CH3), 1.15(3H, d, J=5.5 Hz, Rha″-CH3), 1.19
(3H, d, J=6.0Hz, Rha″-CH3), 3.60(1H, m, Rha-H-
5), 3.90(1H, dd, J=6.5, 7.5 Hz, H-16), 3.95(1H,
m, Rha -H-5), 4.02(1H, m, Rha″-H-5), 4.40(1H, d,
J=8.0 Hz, Glc-H-1), 4.73(1H, d, J=1.5 Hz, Rha″-
H-1), 5.08(1H, d, J=1.5 Hz, Rha -H-1), 5.09
(1H, d, J=1.5 Hz, Rha″-H-1), 5.29(1H, d, J=5.0
Hz, H-6);13C-NMR数据见表 2。与文献 〔10〕相对照 ,
确定该化合物为偏诺皂苷元 -3-O-α-L-鼠李吡喃糖(1
※4)-α-L-鼠李吡喃糖(1※ 4)-[ α-L-鼠李吡喃糖 (1
※2)] -β-D-葡萄吡喃糖苷 。
　　表 2 　化合物 3 ～ 5的 13C-NMR数据(DMSO-d6 , 100 MHz)
C 化合物 3 化合物 4 化合物 5 C 化合物 3 化合物 4 化合物 5
1 36.9 37.3 39.1 Sugar1 Glc GLc Glc
2 29.0 29.5 31.3 1 98.0 98.5 100.9
3 76.3 76.9 78.5 2 76.1 76.8 79.9
4 37.6 38.1 39.9 3 76.1 76.6 79.8
5 140.2 140.8 142.4 4 75.9 76.4 79.9
6 121.3 121.8 123.1 5 74.9 75.4 77.2
7 31.5 31.9 33.8 6 59.9 60.5 62.4
8 31.4 31.4 32.6 Sugar2 Rha Rha Rha″
9 49.5 50.0 51.9 1 100.1 100.6 103.7
10 36.3 36.9 38.5 2 70.4 70.9 73.4
11 20.0 20.9 22.2 3 70.5 71.1 72.9
12 31.5 39.7 33.8 4 71.9 72.4 81.3
13 44.3 39.8 46.3 5 67.9 68.4 69.6
14 51.9 56.2 54.4 6 17.7 18.2 18.5
15 30.8 31.9 33.3 Sugar3 Ara Ara Rha
16 88.3 80.7 91.0 1 107.7 108.2 102.8
17 88.9 62.3 91.8 2 81.4 81.9 72.6
18 16.6 16.5 18.0 3 76.5 76.9 72.9
19 18.9 19.4 20.3 4 84.5 84.9 74.4
20 43.6 41.6 46.0 5 61.3 61.8 70.3
21 9.3 15.1 9.6 6 18.3
22 108.7 108.9 111.4 Sugar4 Rha″
23 31.2 31.4 33.0 1 103.1
24 28.1 28.9 29.9 2 72.9
25 29.7 30.3 31.8 3 73.4
26 65.8 66.4 68.2 4 74.4
27 17.1 17.6 19.1 5 70.9
6 18.0
参 考 文 献
[ 1] 张霄霖 ,刘月婵 .重楼的研究与应用 [ J] .中国中医药
科技 , 2000, 7(5):346-347.
[ 2] 国家药典委员会 .中华人民共和国药典 [ S] .一部 .北
京:中国医药科技出版社 , 2010:243.
[ 3] ZhaoY, KangLP, LiuYX, etal.Steroidalsaponinsfrom
therhizomeofParispolyphyllaandtheircytotoxicactivities
[ J] .Planta.Med., 2009, 75(4):356-363.
[ 4] ZhaoY, KangLP, LiuYX, etal.Threenewsteroidalsap-
oninsfromtherhizomeofParispolyphylla[ J] .Magn.Re-
son.Chem., 2007, 45(9):739-744.
·391·JournalofChineseMedicinalMaterials　　第 34卷第 3期 2011年 3月
[ 5] NguyenVT, DarbourN, BayetC, etal.Selectivemodula-
tionofP-glycoproteinactivitybysteroidalsaponinesfrom
Parispolyphylla[ J] .Fitoterapia, 2009, 80(1):39-42.
[ 6] 颜璐璐 ,张彦军 , 高文远 , 等 .滇重楼皂苷对 10种肿瘤
细胞株的细胞毒谱及构效关系研究 [ J] .中国中药杂
志 , 2008, 33(16):2057-2060.
[ 7] MatsudaH, PongpiriyadachaY, MorikawaT, etal.Protec-
tiveefectsofsteroidsaponinsfromParispolyphyllavar.
yunnanensisonethanolorIndomethacin-inducedgastricmu-
cosallesionsinrats:structuralrequirementforactivityand
modeofaction[ J] .Bioorg.Med.Chem.Let., 2003, 13:
1101-1106.
[ 8] 徐任生 , 叶阳 , 赵维民 .天然产物化学 [ M] .第二版 .
北京:科学出版社 , 2005:286-287.
[ 9] SuksamrarnA, KumpunS, YingyongnarongkulB.Ecdyste-
roidsofVitexscabrastembark[ J] .J.Nat.Prod., 2002,
65(11):1690-1692.
[ 10] 黄贤校 ,高文远 , 谷克仁 ,等 .毛重楼的化学成分研究
[ J].中草药 , 2009, 40(9):1366-1369.
收稿日期:2010-10-15作者简介:卢金清(1955-),男,教授 ,主要从事中药及其制剂有效成分的研究;Tel:027-68890109, E-mail:ljq59169@sohu.com。＊通讯作者:何冬黎 , Tel:13469958696, E-mail:cordyceps.1986@163.com。
黄腺香青挥发油化学成分 GC-MS分析
卢金清 ,何冬黎＊ ,许家琦 ,阮小云 ,王　琴
(湖北中医药大学 ,湖北 武汉 430065)
　　摘要　目的:分析菊科香青属植物黄腺香青挥发油化学成分。方法:采用水蒸气蒸馏法提取挥发油 , 用气相色
谱-质谱法对其成分进行分析。结果:挥发油中主要含有 4(14), 11-桉叶二烯 、α-红没药醇 、6, 10, 14-三甲基-2-十五
烷酮 、氧化石竹烯 、α-芹子烯等。结论:首次采用气相色谱-质谱法分析黄腺香青挥发油的化学成分 , 为黄腺香青的
进一步研究及开发利用提供了科学依据。
关键词　黄腺香青;水蒸气蒸馏;气相色谱-质谱
中图分类号:R284.1/R284.2　　文献标识码:A　　文章编号:1001-4454(2011)03-0392-04
AnalysisoftheChemicalConstituentsofEssentialOilfromAnaphalisaureopunctatabyGC-MS
LUJin-qing, HEDong-li, XUJia-qi, RUANXiao-yun, WANGQin
(HubeiUniversityofTraditionalChineseMedicine, Wuhan430065, China)
Abstract　Objective:ThechemicalcomponentsofessentialoilfromAnaphalisaureopunctatawereanalyzedbyGC-MS.Methods:
Essentialoilwasextractedbystemdistilation(SD).ThechemicalcomponentsofessentialoilwereanalyzedbyGC-MS.Results:The
maincomponentsintheoilwereEudesma-4(14), 11-diene, α-Bisabolol, 6, 10, 14-trimethyl-2-Pentadecanone, Caryophylleneoxide, α-
Selineneandsoon.Conclusion:ThisisthefirsttimetoadoptGC-MStoanalyzethechemicalcomponentsofvolatileoilofAnaphalisau-
reopunctata, andthisstudycanprovidesciencebasisforfurtherresearchdevelopmentofAnaphalisaureopunctata.
Keywords　AnaphalisaureopunctataLingelshetBorza;Stemdistillation;GC-MS
　　黄腺香青为菊科香青属植物黄腺香青 Anapha-
lisaureopunctataLingelshetBorza的全草。多生于海
拔 800 ～ 2 950 m的山坡林下 、路边或草地 ,是鄂西
北土家族的民间常用药 ,在神农架地区和土家族中
享有盛誉 〔1〕。全草入药 , 具有清热解毒 、利湿消肿
的攻效 ,可用于口腔炎 、小儿惊风 、疮毒 、赤白痢 、水
肿 、蛇咬伤等症。目前未见有关黄腺香青挥发油化
学成分的研究报道 ,因此本文采用气相色谱 -质谱法
分析黄腺香青挥发油的化学成分 ,以期为黄腺香青
的进一步研究及开发利用提供科学依据。
1　仪器和材料
美国 Hewlet-Packard公司 6890 /5973型气相色
谱-质谱联用仪;乙醚(AR,中国上海振兴一厂)。黄
腺香青于 2010年 7月采自湖北省神农架 ,经中国科
学院武汉植物园赵子恩教授鉴定为菊科香青属植物
黄腺香青 AnaphalisaureopunctataLingelshetBorza
的全草 ,原植物标本现存于湖北省药用植物校企共
建研发中心。
2　方法
2.1　挥发油的提取　取黄腺香青 300 g,剪碎 ,加
12倍量的水 ,按中国药典 2010版附录 XD挥发油测
定法提取挥发油 ,连续提取 12 h,得油状物 2.5 mL,
·392· JournalofChineseMedicinalMaterials　　第 34卷第 3期 2011年 3月