全 文 :第48卷第3期 华中师范大学学报(自然科学版) Vol.48 No.3
2014年6月 JOURNAL OF HUAZHONG NORMAL UNIVERSITY(Nat.Sci.) Jun.2014
收稿日期:2013-11-29.
基金项目:国家自然科学基金项目(21272136).
*通讯联系人.E-mail:zhiyongguoctgu@hotmail.com.
文章编号:1000-1190(2014)03-0366-04
吉祥草中化学成分研究!
王玉婷,王 倩,郭志勇*,邹 坤,黄年玉
(三峡大学 天然产物研究与利用湖北省重点实验室,湖北 宜昌443002)
摘 要:为了研究吉祥草新鲜根茎中的化学成分,采用正相和反相硅胶柱层析等方法,从吉祥草中
分离得到6个化合物,经理化性质和波谱解析鉴定其结构分别为腺嘌呤核苷(1)、腺嘌呤脱氧核苷
(2)、色氨酸(3)、ponasterone-3-O-β-D-glucopyranoside(4)、22(S)-cholest-5-ene-1β,3β,16β,22-te-
traol-1-O-β-D-xylopyranoside 16-O-β-D-glucopyranoside(5)、槲皮素(6),其中化合物1~化合物5为
首次从该植物中分离得到.
关键词:吉祥草;化学成分;结构鉴定
中图分类号:R284.1/R284.2 文献标识码:A
吉祥草[Reineckia carnea(Andr.)Kunth]又
名观音草、松寿草、玉带草等,为百合科吉祥草属
植物[1],是苗族常用中草药.吉祥草味甘,性凉,
具有清肺止咳、凉血止血、解毒利咽等功效[2],用
于治疗肺热咳嗽、咳血、慢性支气管炎、哮喘、风
湿性关节炎及跌打损伤等.目前国内外对吉祥草
进行了大量研究,发现其化学成分主要为甾体皂
苷类[3]、萜类[4]、黄酮类[5]、木脂素类[6]等化合
物.本课题组经过前期研究,从吉祥草根茎中分
离得到一个具有良好诱导肿瘤细胞凋亡的甾体
皂苷化合物RCE-4,并通过 HPLC测定出该化合
物含量为0.1229%[7].本课题继续研究吉祥草根
茎的化学成分,并从中分离到6个化合物,通过
理化性质和波谱解析等方法鉴定为腺嘌呤核苷
(1)、腺嘌呤脱氧核苷(2)、色氨酸(3)、ponaster-
one-3-O-β-D-glucopyranoside(4)、22(S)-cholest-5-
ene-1β,3β,16β,22-tetraol-1-O-β-D-xylopyrano-
side 16-O-β-D-glucopyranoside(5)、槲皮素(6),其
中化合物1~化合物5为首次从该属植物中分离
得到.
1 仪器与材料
低温冷冻干燥机,美国 LABCONCO公司;
DIONEX Ultimate 3000高效液相色谱仪,美国戴
安液相色谱有限公司;Waters 1525EF高效液相
色谱仪,美国 Waters公司;色谱柱 Ultimate?
AQ-C18(10×250mm,10μm)(制备柱),Ulti-
mate? AQ-C18(4.6 × 250mm,5μm)(分析
柱);Bruker-ARX-400 核 磁 共 振 光 谱 仪,瑞 士
Bruker公司;柱色谱硅胶,烟台化学工业研究所;
薄层色谱硅胶,青岛海洋化工有限公司;其余试
剂均为分析纯.
吉祥草药材采自湖北长阳乐园,经三峡大学生
物与制药学院杨进副教授鉴定为吉祥草(Reineck-
ia carnea Kunth),该 植 物 标 本 编 号 为 KN-
PD220060628,现保存于三峡大学天然产物研究与
利用湖北省重点实验室.
2 提取与分离
吉祥草新鲜根茎35kg,切碎后用95%的工业
酒精在室温下冷浸提取3次,每次6天.提取液减
压浓缩得浸膏2.6kg,浸膏经水悬浮后依次用石
油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取多次,分别得到石油醚
部位10g,乙酸乙酯部位241g,正丁醇部位605g.
取正丁醇部位浸膏460g用水溶解,以D-101大孔
树脂进行初步分离,得30%乙醇洗脱部位25g,
60%乙醇洗脱部位98g,90%乙醇洗脱部位89g.
60%乙醇洗脱部位(80g)经 HP20大孔树脂、正相
和反相柱层析、HPLC制备,最终得到化合物1
(8mg),化合物2(4.5mg),化合物3(3.5mg),化
合物4(6.5mg),化合物5(7.0mg),化合物6
(4mg),其结构如图1所示.
第3期 王玉婷等:吉祥草中化学成分研究 367
图1 化合物1~化合物6的结构式
Fig.1 The structures of compounds 1~compounds 6
3 结构鉴定
化合物1:白色粉末,m.p.232~237℃,分
子式C10H13N5O4.TOF-MS-ES+(m/z):268[M+
H]+.1 H NMR (DMSO-d6,400 MHz):δ8.13
(1H,s,H-8),8.34(1H,s,H-2),7.30(2H,s,
NH2),5.88(1H,d,J=6.4Hz,H-1′),5.43
(1H,d,J=5.0Hz,OH-2′),5.37(1H,dd,J=
4.7,6.8Hz,OH-5′),5.16(1H,d,J=3.1Hz,
OH-3′),4.61(1H,dd,J=4.9,9.8Hz,H-2′),
4.15(1H,d,J=2.8Hz,H-3′),3.96(1H,dd,
J=3.4,6.6Hz,H-4′),3.69(1H,m,H-5a′),
3.57(1H,m,H-5b′);13C NMR (DMSO-d6,
100MHz):δ152.3(C-2),149.1(C-4),119.3(C-
5),156.1(C-6),140.0(C-8),87.9(C-1′),73.4
(C-2′),70.6(C-3′),85.8(C-4′),61.6(C-5′).波
谱数据与文献[8]中的腺嘌呤核苷一致.故鉴定化
合物1为腺嘌呤核苷,是首次从吉祥草中分离
得到.
化合物2:白色粉末,m.p.186~188℃,分
子式C10H13N5O3.TOF-MS-ES+(m/z):252[M+
H]+.1 H NMR (DMSO-d6,400 MHz):δ8.14
(1H,s,H-8),8.35(1H,s,H-2),7.30(2H,s,
NH2),6.34(1H,dd,J=6.3,7.6Hz,H-1′),
5.29(1H,brs,OH-3′),5.21(1H,brs,OH-
5′),4.41(1H,brs,H-3′),3.89(1H,dd,J=
4.1,6.6Hz,H-4′),3.62(1H,m,H-5a′),3.53
(1H,m,H-5b′),2.72(1H,m,H-2a′),2.29
(1H,m,H-2b′);13C NMR (DMSO-d6,100
MHz):δ152.5(C-2),148.8(C-4),119.3(C-5),
156.5(C-6),139.6(C-8),84.1(C-1′),40(C-
2′),70.9(C-3′),88.1(C-4′),62.0(C-5′).波谱
数据与文献[8]中的腺嘌呤脱氧核苷一致.故鉴定
化合物2为腺嘌呤脱氧核苷,是首次从吉祥草属植
物中分离得到.
化合物3:淡黄色粉末,m.p.280~283℃,
分子式C11H12N2O2.TOF-MS-ES+(m/z):205[M
+H]+,409[2 M+H]+.1 H NMR (DMSO-d6,
400MHz):δ3.00(1H,dd,J=8.8,14.8Hz,β-
H),3.31(1H,dd,J=5.8,10.7Hz,β-H),3.44
(1H,dd,J=5.2,10.4Hz,α-H),7.35(1H,d,
J=8.0Hz,H-8),6.97(1H,t,J=7.4Hz,H-
6),7.57(1H,d,J =7.8Hz,H-5),7.06(1H,
t,J =7.2Hz,H-7),7.24(1H,s,H-2);13 C
NMR (DMSO-d6,100 MHz):δ124.1 (C-2),
109.5(C-3),127.3 (C-4),118.4 (C-5),118.3
(C-6),120.9(C-7),111.3(C-8),136.4(C-9),
54.8(C-α),27.2(C-β),170.8(COOH).根据以
上数据确定该化合物为色氨酸[9].化合物3为首次
从吉祥草属植物中分离得到.
化合物4:黄色粉末,m.p.277.5~279.5℃,
分子式 C33H54O11.ESI-MS(m/z):649.2[M+
Na]+.体积分数为10%的硫酸乙醇溶液显紫红色,
Liebermann-Burhard 反 应 均 显 阳 性.1 H NMR
(CD3OD,400MHz)显示5个甲基的质子信号δ
0.77(3H,s,H-18),0.86(3H,s,H-19),1.06
368 华中师范大学学报(自然科学版) 第48卷
(3H,s,H-21),0.79(3H,m,H-26),0.81(3H,
m,H-27),以及糖的质子信号δ5.10~3.40,包括
1个糖端基质子信号δ4.31(1H,d,J =7.6
Hz).13 C NMR (CD3OD,100MHz):δ36.1(C-
1),66.0(C-2),76.4(C-3),32.1(C-4),51.8(C-
5),206.2(C-6),122.1(C-7),168.1(C-8),35.0
(C-9),39.5(C-10),21.5(C-11),32.5(C-12),
48.5(C-13),85.2(C-14),31.7(C-15),21.4(C-
16),50.4(C-17),18.1(C-18),24.2(C-19),77.8
(C-20),21.0(C-21),77.9(C-22),30.4(C-23),
29.2(C-24),29.2(C-25),22.8(C-26),23.5(C-
27),102.7 (glc,C-1′),77.8 (glc,C-2′),77.8
(glc,C-3′),71.6(glc,C-4′),75.1(glc,C-5′),
62.7(glc,C-6′).以上数据与文献[10]报道基本
一致,故化合物4的结构鉴定为ponasterone-3-O-
β-D-glucopyranoside,为吉祥草中首次获得.
化合物 5:白色针状结晶,m.p.209 ~
211℃,分子式C38H64O13,ESI-MS(m/z):751.4
[M+Na]+.Molish和Liebermann-Burhard反应
均显阳性.1 H NMR (C5D5N,400MHz)显示5
个甲基的质子信号δ0.93(3H,d,J =6.5Hz,
H-26),0.93(3H,d,J =6.5Hz,H-27),1.15
(3H,d,J =6.8Hz,H-21),1.04(3H,s,H-
18),1.25(3H,s,H-19),以及糖的质子信号δ
5.10~3.40,包括2个糖端基质子信号δ4.75
(1H,d,J=7.6Hz)和4.86(1H,d,J =7.6
Hz).13 C NMR (C5D5N,100MHz):δ83.1(C-
1),37.6 (C-2),68.1 (C-3),43.8 (C-4),139.4
(C-5),124.9(C-6),31.8(C-7),33.2(C-8),50.3
(C-9),42.8(C-10),23.9(C-11),40.6(C-12),
42.2(C-13),55.2(C-14),37.3(C-15),82.7(C-
16),58.1(C-17),13.8(C-18),14.8(C-19),36.0
(C-20),12.6(C-21),73.3(C-22),33.8(C-23),
36.8(C-24),29.0(C-25),23.1(C-26),23.1(C-
27),102.2 (xyl,C-1),75.2 (xyl,C-2),78.8
(xyl,C-3),71.2 (xyl,C-4),67.5 (xyl,C-5),
107.0(glc,C-1),75.7(glc,C-2),78.8(glc,C-
3),71.7(glc,C-4),78.2(glc,C-5),62.9(glc,
C-6).该化合物结构与文献[11]报道一致,可鉴定
为:22(S)-cholest-5-ene-1β,3β,16β,22-tetraol-1-
O-β-D-xylopyranoside 16-O-β-D-glucopyranoside.
化合物5为首次从该属植物中获得.
化合物6:黄色针状结晶(甲醇),m.p.314~
316℃,分子式 C15H10O7.1 H NMR (DMSO-d6,
400MHz):δ12.48(1H,s,OH-5′),10.11(1H,
s,OH),9.37(3H,s,OH),7.67(1H,d,J=
2.4Hz,H-2′),7.53(1H,dd,J=8.5,2.2Hz,
H-6′),6.88 (1H,d,J=8.5 Hz,H-5′),6.40
(1H,d,J=2.0Hz,H-8),6.18(1H,d,J=2.0
Hz,H-6).其1 H NMR谱数据与文献[12]中槲皮
素的数据基本一致,与槲皮素标准品TLC对照,二
者Rf 值完全相同,故鉴定化合物6为槲皮素.
4 结论
本实验对吉祥草进行了系统的分离,从乙醇提
取物中分离到6个化合物,通过理化性质和波谱解
析等方法鉴定为3个核苷酸:腺嘌呤核苷、腺嘌呤
脱氧核苷、色氨酸;2个甾体化合物:ponasterone-
3-O-β-D-glucopyranoside、22(S)-cholest-5-ene-1β,
3β,16β,22-tetraol-1-O-β-D-xylopyranoside 16-O-
β-D-glucopyranoside;1个黄酮:槲皮素.除槲皮素
外,其他5个化合物均为首次从该植物中获得.
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第3期 王玉婷等:吉祥草中化学成分研究 369
Studies of chemical constituents fromReineckia carnea
WANG Yuting,WANG Qian,GUO Zhiyong,ZOU Kun,HUANG Nianyu
(Hubei Key Laboratory of Natural Products Research and Development,
China Three Gorges University,Yichang,Hubei 443002)
Abstract:To study the chemical constituents from the fresh rhizomes of Reineckia car-
nea Kunth,six compounds were obtained by normal-phase and reverse-phase silica gel
columns.Based on physico-chemical properties and spectral analysis,their structures
were identified as adenine nucleotide(1),adenine nucleoside(2),tryptophan(3),pon-
asterone-3-O-β-D-glucopyranoside(4),22(S)-cholest-5-ene-1β,3β,16β,22-tetraol-1-O-
β-D-xylopyranoside 16-O-β-D-glucopyranoside(5),quercetin(6).Compounds 1~com-
pounds 5were isolated fromReineckia carneafor the first time.
Key words:Reineckia carnea;chemical constituents;
檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪
structural identification
(上接第365页)
FeCl3·6H2O-Catalyzed synthesis of 2,3-disubstituted-1,3-benzoxazines
and their fungicidal activity
TANG Zilong1,2,XIA Zanwen2,LU Liangqiu1,3
(1.Key Laboratory of Theoretical Chemistry and Molecular Simulation of Ministry of Education,Xiangtan,Hunan 411201;
2.School of Chemistry and Chemical Engineering,Hunan University of Science and Technology,Xiangtan,Hunan 411201;
3.Colege of Chemistry,Huazhong Normal University,Wuhan 430079)
Abstract:A series of 2,3-disubstituted-1,3-benzoxazines were synthesized by reactions
of 2-arylaminomethyl phenols with substituted aromatic aldehydes using FeCl3·6H2O
as catalyst for the first time.The structures of the compounds were characterized by
FT-IR,1 H NMR and 13C NMR.Fungicidal activity of the prepared compounds were al-
so preliminarily evaluated.Most of them exhibited moderate to good activity as shown
by 86.8%activity against B.Cinereaof compound 3c,87.7%activity against R.Sola-
ni of 3f.
Key words:2,3-disubstituted-1,3-benzoxazine;catalysis;synthesis;fungicidal activity