全 文 :鸭舌草中抗氧化活性物质的分离与鉴定*
周勇军 1 徐效华 2 乔凤云 1 张建萍 1 余柳青 1**
(1中国水稻研究所水稻生物学国家重点实验室 , 杭州 310006;2南开大学元素有机化学国家重点实验室 , 天津 300071)
摘 要 采用溶剂萃取法将鸭舌草 75%乙醇提取物浸膏分成 4个不同组分 ,并用碘量法测定
其抗氧化活性.结果表明 ,高极性组分正丁醇相具有最强的抗氧化活性 ,与天然抗氧化剂茶多
酚和化学合成抗氧化剂 BHT的抗氧化活性相当 ,显著高于对照.利用柱层析技术对具有高抗
氧化活性组分正丁醇相进一步分离纯化 ,并确定为豆甾醇葡萄糖甙. 以 BHT为对照对羟自由
基进行清除试验 ,结果表明 ,与对照抗氧化剂 BHT相比 ,它们对羟自由基具有更高的清除率.
关键词 鸭舌草 抗氧化活性 分离 鉴定 食品安全
文章编号 1001 -9332(2007)03 - 0509 - 05 中图分类号 Q949. 9;S451 文献标识码 A
Isolation and identification of an antiox idant from Monochoria vaginalis. ZHOU Yong-jun1 ,
XU X iao-hua2 , Q IAO Feng-yun1 , ZHANG Jian-ping1 , YU Liu-q ing1(1S tate Laboratory ofR iceB i-
ology , China Nationa lR iceR esearch Institute, Hangzhou 310006 , China;2S ta teK ey Labora tory of
E lemento-organicChem istry, Nankai University, Tianjin 300071 , Ch ina). -Chin. J. Appl. Ecol. ,
2007, 18(3):509 - 513.
Abstract:W ith so lven t ex traction, a to tal o f four frac tions w ere separa ted from 75% a lcoho l extract
o fMonochoria vagina lis, and the ir antiox idative ac tiv ities w ere measured by iodineme thod. The re-
sults show ed that among the fractions, n-butano l fraction exhibited the highe st an tioxidative activity,
wh ich w as no t only significantly h ighe r than CK (wa te r), bu t a lso equivalen t to the natural antiox i-
dant tea po lypheno ls and syn thetic antiox idan tbuty la ted hydroxy l to luene (BHT). A compound w as
iso lated from the n-butano l fraction by using column chrom atog raphy, and iden tified as stigmaste ro l
3-O-β-D-g lucopy ranoside. Its an tioxidative activity estim ated by the de te rm ination of the percentage
o f scavenged free radicals indica ted that th is compound exhibited a higher activity than BHT in
scaveng ing free rad ica ls.
Key words:Monochoria vag ina lis;antiox ida tive activity;iso lation;identifica tion;food safe ty.
*国家自然科学基金资助项目(30571231).
**通讯作者. E-m ail:liu qyu53@yahoo. com. cn
2006-02-13收稿 , 2006-12-26接受.
1 引 言
目前常用的抗氧化剂以化学合成为多 ,如二丁
基羟基甲苯 (BHT)、丁基羟基茴香醚 (BHA)、没食
子酸内酯(PG)等 ,但这些化学物质对人体肝 、肺等
器官均有不良影响. 而从天然植物中提取的抗氧化
剂对人类健康无不良影响 [ 1, 9, 21, 24] .天然抗氧化物质
主要为酚类或多酚化合物 ,如生育酚 、类黄酮类化合
物以及肉桂酸 、磷脂 、绿原酸 、咖啡酸和其他有机酸
的衍生物等.其中黄酮类化合物具有很强的清除氧
自由基的能力;植酸类物质如柠檬酸和多聚磷酸等 ,
具有极强的螯合金属的能力 ,可减少金属离子所催
化的氧化反应;含氮化合物如咖啡碱 、咖啡因以及分
子中含有 - SH基的蛋白质及其衍生物类 、多肽 、氨
基酸等也具有较高的抗氧化活性.
目前已开发利用的植物源抗氧化剂主要用于医
药 、饮料 、果蔬和香料等. 如从大豆中提取的黄酮类
物质 ,可显著地提高大鼠抗氧化酶活性[ 12] ,从茶叶
中提取的茶多酚具有降血脂 、降血糖 、抗动脉粥样硬
化 、抗病毒以及抗菌等保健和药理作用[ 3, 13] ,但大豆
和茶叶等经济作物作为抗氧化剂的原料 ,成本较高.
而杂草资源丰富 ,并且含有丰富的功能物质[ 2, 7] ,如
能从杂草植物中提取抗氧化剂 ,可以降低成本 ,获得
较高的经济效益.中国水稻研究所对 12种稻田杂草
的抗氧化作用进行了评价 ,确定鸭舌草 (Monochoria
vag ina lis)乙醇提取物的抗氧化作用显著[ 15] . 鸭舌草
是重要的稻田杂草 ,广泛分布于我国长江中下游地
区 ,资源量巨大.本研究测定了鸭舌草乙醇提取物不
应 用 生 态 学 报 2007年 3月 第 18卷 第 3期
Ch inese Jou rna l of App lied E co logy, M ar. 2007, 18(3):509 - 513
同溶剂萃取相的抗氧化活性 ,分离鉴定了抗氧化活
性化合物分子结构 ,为探明鸭舌草的抗氧化作用机
理提供理论依据.
2 材料与方法
2.1 供试材料
鸭舌草采自浙江省富阳市 ,采集后用自来水冲
洗 ,在 45℃下烘烤 2 d ,研磨成粉末[ 24] . 茶多酚 80%
粉剂 ,由中国农业科学院茶叶研究所提供.二叔丁基
对甲酚 (BHT),分析纯. 大豆油 ,市售. 各种试剂为
分析纯.
2.2 试验方法
2.2.1不同溶剂提取物的抗氧化活性测定 室温下
用 75%的乙醇将烘干的鸭舌草粉末浸提 3次 ,每次
24 h ,将浸提液合并 ,并在旋转蒸发仪上蒸干得鸭舌
草的 75%乙醇浸提物 ,溶于水后 ,先后用石油醚 、二
氯甲烷 、乙酸乙酯和正丁醇按 1∶1萃取 ,每种溶剂萃
取 3次 ,同一种溶剂的 3次萃取液合并 ,在旋转蒸发
仪上分别浓缩得到 4种溶剂萃取相. 密封 ,并于 4℃
冷藏备用[ 6, 18] .
抗氧化活性测定采用碘量法 [ 14, 22 -23] :称取试样
为 2 g含萃取物 0.08%和 0.12%的大豆油 ,置于
250m l碘量瓶中 ,加 30 m l三氯甲烷-冰乙酸混合
液 ,使油样完全溶解. 加入 1.00 m l饱和碘化钾溶
液 ,紧密塞好瓶塞 ,并轻轻振摇 0.5m in,然后在暗处
放置 3 m in. 取出加 100 m l水 ,摇匀 ,立即用 0.002
mo l L -1硫代硫酸钠标准溶液滴定 ,至淡黄色时 ,加
1 m l淀粉指示液 ,继续滴定至淡蓝色消失为止. 以
含 0.02% BHT的大豆油作为化学合成的抗氧化剂
对照 ,以含茶多酚 0.02%的大豆油作为天然抗氧化
剂对照 ,并设水为空白对照.每 2 d定期测定豆油样
品的过氧化值 (POV), 3次重复 ,结果取平均值. 计
算公式如下:
X1 =(V1 -V2)×N ×1000×M - 1
式中:X1为样品的过氧化值 (mol kg- 1);V1为样品
消耗硫代硫酸钠标准溶液的体积 (m l);V2为对照消
耗硫代硫酸钠标准溶液的体积 (m l);N为硫代硫酸
钠标准溶液的当量浓度;M 为样品质量 (g). 以其过
氧化值升高快慢来衡量抗氧化活性的强弱.
2.2.2抗氧化活性物质的分离与鉴定 通过对鸭舌
草不同萃取组分的抗氧化活性比较 ,将具有高抗氧
化活性组分的正丁醇相 300 g拌等量 200 ~ 300目
硅胶晾干 ,在研钵中研磨成均匀粉末后 ,在硅胶柱上
用乙酸乙酯∶乙醇进行梯度洗脱 ,洗脱梯度为:50∶0,
50∶1, 20∶1, 5∶1, 2∶1, 1∶1, 2∶1, 5∶1, 20∶1, 50∶1,
50∶0,所得流分在 TLC监测下相同部分合并. 再对
分离较好的流分进行多次柱层析分离 ,后得到一个
白色固体粉末 ,在薄层板上为一个点.对该分离白色
固体进行了 ES I-MS , 1H NMR, 13 C NMR的测定 ,但
分析谱图显示该物质结构复杂. 于是对该固体做了
水解反应 ,在盐酸甲醇溶液中水解 ,再对水解产物进
行分离 ,并对所得到的晶体之一进行了结构鉴定 ,结
合对固体所测得的 ESI-MS, 1H NMR, 13C NMR图谱
反推分离固体的分子结构.
2.2.3纯化合物的抗氧化活性测定 将分离所得化
合物以 0.02%的浓度溶解于 95%的乙醇溶液中 ,记
作 a溶液;同时配制同浓度的 BHT 95%乙醇溶液作
为对照 ,记作 b溶液 ,装瓶备用. 取 4支 10 m l(下
同)比色管 ,分别依次加入 0.3m l的 7.5mmol L - 1
硫酸亚铁溶液 、0.3 m l的 7.5 mmo l L -1邻二氮菲
溶液 、1m l pH =7.47的 Tris-HC l缓冲液 ,在 2、3和 4
号比色管中各加入 0.2m l的 7.5mmol L -1 H2O 2 ,
然后在 3和 4号比色管中分别加入 0.3m l的 a、b溶
液 ,用二次纯化水定容至刻度 ,在 37 ℃水浴中反应
1 h,在 450 ~ 550 nm波长范围内扫描 ,得最大吸收
波长为 546 nm ,并在此波长下测其吸光度 ,结合以
下公式[ 16, 19] :
E =(A样品 -A损 ) ×(A未损 -A损)-1 ×100%
式中 , E为清除率 , A样品 、A未损及 A损 分别为加入化合
物的羟自由基体系 、不加 H2O2及加入 H2O2的吸光
度值.
计算清除率以评价它们的抗氧化活性.
2.3 数据分析
所有数据用 DPS软件 [ 20]中的 Duncan法进行方
差分析和差异显著性检验.
3 结果与分析
3.1 不同溶剂提取物的抗氧化活性
由表 1可以看出 ,在加有石油醚相 、二氯甲烷相
以及乙酸乙酯相的大豆油的两个浓度下 ,不同处理
时间的过氧化值都显著高于加有茶多酚和 BHT的大
豆油的过氧化值. 且加有正丁醇相的大豆油在 2 d、4
d、6 d和 8 d的过氧化值升高最慢 ,与加有茶多酚和
BHT的大豆油的过氧化值变化趋势相近 ,而加其他几
种溶剂萃取相的大豆油及对照的过氧化值升高明显.
这说明正丁醇相对大豆油具有最高的抗氧化活性 ,且
与茶多酚和 BHT对大豆油的抗氧化活性相近.
510 应 用 生 态 学 报 18卷
表 1 鸭舌草粗组分提取物的抗氧化活性 *
Tab. 1 Ant iox idation activity of ex trac ts fromM. vagina lis
序号
N o.
溶剂
So lvent
浓 度
C oncentrat ion (%)
过氧化值 Peroxide valu e (%)
2 d 4 d 6 d 8 d
1 石油醚 Petroleum ether 0. 08 12. 6474ab 24. 3334 a 18. 2264b 33. 3088d
2 石油醚 Petroleum ether 0. 12 13. 5851a 27. 7770 a 21. 9143a 40. 5505 c
3 二氯甲烷 CH2C l2 0. 08 13. 0650a 17. 3360b 16. 4692c 29. 8494 e
4 二氯甲烷 CH2C l2 0. 12 13. 2148a 19. 0302b 16. 3195c 28. 0219 e
5 乙酸乙酯 E thyl acetate 0. 08 13. 2069a 10. 8665 cd 19. 3927b 32. 0795d
6 乙酸乙酯 E thyl acetate 0. 12 11. 9224bc 12. 1194 c 18. 8962b 53. 5682b
7 正丁醇 n-butanol 0. 08 9. 3536e 9. 9997 cd 11. 3078d 12. 2619 f
8 正丁醇 n-butanol 0. 12 9. 5033e 10. 5671 cd 11. 8515d 12. 3480 f
9 茶多酚 Tea Po lypheno ls 0. 02 11. 3708cd 9. 7397 cd 11. 2054d 11. 8121 f
10 二叔丁基对甲酚 BH T 0. 02 11. 1502cd 10. 7562 cd 11. 0241d 12. 4819 f
11 对照 CK 0 10. 3307de 18. 8253b 27. 6352a 52. 2208 a
*同列不同字母表示在 5%水平差异显著 Valu esw ith in the sam e colum n fo llow ed by d ifferen t lettersm ean t s ign ifican t dif feren ce at 0. 05 level by Dun-
can’ sm u ltip le range tes.t
3.2 鸭舌草中的抗氧化活性物质
经分离得到 1个白色固体粉末.它在多种溶剂
体系条件下的高效 TLC都显示为一个点 ,所以对其
进行了 ESI-MS, 1H NMR, 13 C NMR的测定. 但分析
图谱结果显示该物质结构复杂.于是对该固体做了
水解反应 ,对水解产物分离得到了一个白色针状晶
体 , mp 167℃ ~ 168 ℃.该晶体遇磷钼酸显蓝色 ,易
溶于氯仿和乙酸乙酯等溶剂. 其 E I-MS:m /z394
(M-18), m /z379 (M-18-15), m /z255, m /z207, m /
z159,说明该化合物分子量可能为 412. m /z255, m /
z207, m /z159这些典型的碎片峰暗示该化合物可能
含有甾体骨架.其 1H NMR:δH 4.9 ~ 5.5之间出现
典型的烯氢信号 , δH 5.35(1H , d, j=4.8)和 δH
5.07(2H , dddd, J=15, 8.4),暗示分子中存在三取
代烯氢和反式双取代烯氢;δH 3.52(1H , m)是连羟
基的 H ,多重峰暗示该骨架可能是甾体而非三萜 ,因
为三萜在这一位置的 H裂分相对简单;在高场区的
包峰里可以观察到 4个仲位甲基 , 分别为 δH 0.7
(3H , d)、δH 0.8(3H , d)和 δH 1.0(6H , d),伯位甲
基不 显 示. 13 C NMR:δC 140.76, δC 138.33,
δC129.28, δC 121.72显示了分子存在 2个双键 ,这
与氢谱相符;δC 71.81为连氧碳. DEPT图谱显示有
10个-CH-:138.57, 129.45, 121.94, 72.04, 57.06,
56.14, 51.46, 50.33, 40.76, 32.10;8 个-CH 2-:
42.49, 39.88, 37.47, 31.85, 29.18, 25.65, 24.59,
21.30; 5个-CH3:21.45, 19.63, 19.21, 12.52,
12.27;3个-C-:140.76, 42.22, 36.52. 通过分析并
参考相关文献[ 8]可以推测该化合物为豆甾醇 ,分子
量为 412,分子式为 C29H48O. 整个碳谱中重叠了 3
个碳信号 ,分别为 1个甲基 、1个亚甲基和 1个次甲
基.可以推导其结构式如图 1.
图 1 豆甾醇
Fig. 1 Stigm aste ro.l
水解产物中含有豆甾醇 ,说明固体化合物中含
有豆甾醇的甙元 ,返回到对固体化合物的分析 , ESI-
MS碳谱显示了非常明显的信号峰:m /z 619(M-1 +
2Na).这指出了该化合物分子量可能为 574. 从氢谱
中可以看出 ,与豆甾醇的氢谱相比较 ,该固体化合物
除了在 δH 4.22(1H , d, J=7.8)和 δH 2.8 ~ 3.6(糖
环质子)处多出信号外 ,其它区域相同. 碳谱中 δC
100.77, δC 79.93, δC 76.65, δC 73.33, δC 69.95和
δC 60.96的出现说明该化合物中存在 1个葡萄糖
残基 ,其它部分与豆甾醇相似.这说明该组分的甙元
是豆甾醇.从分子量之差 162(574 - 412)也可以验
证这一推断. δH 4.22(1H , d, J=7.8),异头碳质子
耦合常数为 7.8, 说明糖苷键为 β键 ,结合相关文
献[ 10 -11]推测 ,该化合物为豆甾醇葡萄糖甙. 其结构
式如图 2所示.
3.3 化合物豆甾醇葡萄糖甙的抗氧化活性
由表 2可以看出 ,分离化合物对羟自由基的清
除率达到了 69.32%,远远高于对照 BHT对羟自由
基的清除率 (30.86%),说明该化合物对羟自由基
的清除效果比化学合成抗氧化剂 BHT更好 ,具有更
高的抗氧化活性.
5113期 周勇军等:鸭舌草中抗氧化活性物质的分离与鉴定
图 2 豆甾醇葡萄糖苷
F ig. 2 S tigm astero l-3-O-β-D-g lucopyranoside.
表 2 豆甾醇葡萄糖苷对自由基的清除活性
Tab. 2 Elim inating ab ility of the pure compounds fromM.
vagina lis to free rad ical
序号
No.
处 理
Treatment
吸光度
Ab sorbency
自由基清除率
Percen tage of
elim inating
free rad ical(%)
1 未损伤系统 No dam nif ication system 0. 5802 -
2 损伤系统 Dam nif icat ion system 0. 5397 -
3 豆甾醇葡萄糖苷 s tigm astero l-3-O-β-D-g lucopyranos ide 0. 5678 69.32
4 二叔丁基对甲酚 BHT 0. 5522 30.86
4 讨 论
鸭舌草乙醇粗提物的正丁醇萃取相的抗氧化活
性显著高于其它溶剂萃取相 ,定性确定了正丁醇可
从该杂草的粗提物中萃取数量较多和纯度较高的抗
氧化物质 ,为鸭舌草抗氧化剂的分离提取打下了一
定的基础.溶剂萃取是从植物原料中提取抗氧化剂
的有效方法 ,但不同溶剂提取的化合物纯度存在差
异.采用乙醇从茶叶中提取茶多酚 ,仍需要采用正乙
烷和乙酸乙酯分别萃取 ,才能得到纯度较高的茶多
酚产品 [ 4] .
豆甾醇葡萄糖苷的保健和药理作用显而易见 ,
如大豆甾醇葡萄糖苷能够显著提高药物的肝脏吸
收 ,提高药物的靶向性. Sh im izu等 [ 17]试验发现 ,大
豆甾醇葡萄糖苷能使载药脂质体在肝脏的分布从
15%提高到 80.6%,具有明显的肝细胞靶向性 ,从
而提高抗肿瘤药物的活性. 对豆甾醇溶剂提取工艺
的研究发现 ,正丁醇的富集效果最佳 ,通过调节料液
比和结晶温度 ,以及 4 ~ 5级分步结晶 ,从自制的大
豆混合植物甾醇 (纯度 >95%)分离获得纯度为
85%的豆甾醇[ 5] .本研究从正丁醇萃取相中分离纯
化获得纯化合物豆甾醇葡萄糖苷也进一步验证了这
一结果.但从鸭舌草植株中分离到这一化合物还属
首次.
从鸭舌草植株中分离获得的豆甾醇葡萄糖苷具
有较高的羟自由基清除率 ,表明豆甾醇葡萄糖苷是
鸭舌草植株中的主要抗氧化活性物质.鸭舌草是我
国长江中下游地区重要的水田杂草 ,其资源量巨大.
从鸭舌草中提取抗氧化物质 ,研制出新的食品保鲜
添加素 ,并开辟在人类保健方面的应用 ,具有广阔的
前景.
参考文献
[ 1] A ro ra A, By rem TM , Na irMG, et al. 2000. M odu la-
tion of lipo som eal memb rane fluidity by flavono ids and
soflavonoids. Archives of B iochem istry and B iophy sics,
373:102 - 109
[ 2] Chen X (陈 欣), Tang J-J(唐建军), Zhao H-M
(赵惠明), et al. 2003. Sustainable utilization o f weed
d ive rsity re sources in ag roeco system. Journal of Na tural
Resources(自然资源学报 ), 18(3):340 - 346 ( in
Chinese)
[ 3] Chen ZY, Chan PT. 1996. Antiox idative activ ity of
g reen tea ca techins in cano la o i.l Chem istry and Physics
of Lipids, 82:163 - 172
[ 4] Dong W-B (董文宾), Hu Y (胡 英), Zhou L (周
玲). 2002. Research on producing tea-po lypheno lics by
o rganic so lven tm ethod. Science and Technology of F ood
Industry (食品工业科技 ), 23(9):44 - 47 ( in Chi-
nese)
[ 5] Gao Y-Y (高瑜莹), Qiu A-Y (裘爱泳 ), Xie G (谢
光), et al. 2000. The enchancem ent of stigm aste ro l
w ith solven .t China O ils and Fats (中国油脂), 25
(6):159 - 162 ( in Chinese)
[ 6] H am id AA, Shah ZM , M use R, et a l. 2002. Cha rac te r-
isa tion o f an tiox ida tive activ itie s o f various ex tracts of
Cen te lla asia tica (L. ) Urban. Food Chem istry, 77:465
- 469
[ 7] H iroe K, Nobu ji N. 1993. An tioxidant e ffects o f some
g inger constituents. Journal of F ood Science, 58:1407
- 1410
[ 8] H u A-M (胡安明), B i Z-M (毕志明), L i P (李
萍 ). 2004. S tudies on the chem ical constituents of
Achyran thes bidentata. J iangsu Pharmaceutical and
C linical R esearch (江苏药学与临床研究), 12(3):18
- 19 ( in Chinese)
[ 9] Jacob RA. 1995. The integrated antiox idant system.
Nutrition Research , 15(5):755 -766
[ 10] Ko jim ah H, Noriko S, Akiko H , et al. 1990. S te ro l
g lucosides from Prunella vulgaris. Phy tochem istry, 29
(7):2351 - 2355
[ 11] Lu J-H (陆江海), Zhao Y-Y (赵玉英 ), Qiao L (乔
512 应 用 生 态 学 报 18卷
梁), et al. 2001. Studies on chem ica l constituents from
B udd leja lind leyana Fer.t . China Journa l of Chinese
Materia Medica (中国中药杂志), 26(1):41 - 43 ( in
Chine se)
[ 12] M a D-Y (马得莹), Shan A-S (单安山), Du J(杜
娟). 2004. E ffec ts of soy isoflavone s on anim als pro-
duction, immune and antiox idan t sta tus. Journal of
Northeast Agricultural University (东北农业大学学
报), 35(4):505 - 508 ( in Chinese)
[ 13] Ni L-H (倪立华), QinW-G (秦卫国). 2003. Re-
sea rch on the na tu ra l antiox idan ts extracting from tw o
plan ts. China Oils and Fats (中国油脂), 28(1):47
- 48 ( in Chinese)
[ 14] Ozturk G, Ero lDD, Uzbay T, et a l. 2001. Synthe sis o f
4(1H)-py ridinone derivative s and inve stiga tion o f ana l-
gesic and anti-inflamm atory activ itie s. Pharmacos, 56
(4):251 -256
[ 15] Q iao F-Y (乔凤云 ), Zhou Y-J (周勇军), Tang J-J
(唐建军), et a l. 2006. Na tu ra l antioxidan ts ex trac ted
from w eeds in paddy fie ld. Chinese Journa l of R ice Sci-
ence (中国水稻科学), 20(2):223 - 226( in Chi-
ne se)
[ 16] Sadrzadeh SM , NanjiAA, P rice PL. 1994. The oral i-
ron chela to r 1, 2-dim e thy l-3-hyd roxypyrid-4-one reduces
hepatic-free iron, lip id perox ida tion and fat accum ula-
tion in chronica lly e thano l-fed rats. Journal of Pharma-
cology and Experim enta l Therapeu tics, 269(2):632 -
635
[ 17] Shim izu K , M aitani Y, Takayam a K, et al. 1997. For-
m ula tion o f lipo som es w ith soybean-de rived stery lg lu-
cosidem ix tu re and cho le stero l fo r liver targe ting. B iolog-
ical Pharmaceutical Bu lletin, 20(8):881 -886
[ 18] Shyu YS, Hw ang LS. 2002. Antiox idative activ ity of the
crude ex trac t o f lignan g ly co side s from unroasted Burm a
b lack sesame m ea.l Food Research In ternationa l, 35:
357 -365
[ 19] Sies H , S tah lW. 1995. V itam in E and C , β -caro tene,
and o ther caroteno ids as an tioxidants. Am erican Journal
of C lin ica l Nu trition, 62( supp. ):1315 -1321
[ 20] Tang Q-Y (唐启义 ), Feng M-G (冯明光). 2002.
DPS Data P rocessing Sy stem fo rP ractica l Sta tistics. Bei-
jing:Science P ress. ( in Chinese)
[ 21] W u G , Fang YZ, Yang S. 2003. G luta thione m etabo-
lism in anim a ls:Nu tritiona l regulation and physiologyi-
ca l significance. Trend s in Com parativeB iochem istry and
Physiology, 9:217 - 227
[ 22] W uK-G (吴克刚), Yang L-S (杨连生 ), Chai X-H
(柴向华). 2000. S tudy on the an tiox ida tive effect of
comp lex natura l natiox idant on eel oi.l Ch inese Journal
of MarineD rugs(中国海洋药物), 19(4):1 - 6 ( in
Chinese)
[ 23] Za ino lMK, Abd-H am id A, Yuso f S, et a l. 2003. An-
tiox idative activ ity and to ta l pheno lic com pounds of leaf,
roo t and petio le o f four accessions o fCentella asia tica
(L. ) Urban. Food Chem istry, 81:575 - 581
[ 24] Z in ZM , Abdu l-H am id A, O sm an A. 2002. An tiox ida-
tive ac tivity of extrac ts from M enykudu (Morinda citrifo-
lia L. ) root, fru it and lea.f F ood Chem istry, 78:227 -
231
作者简介 周勇军 , 男 , 1977年生 , 硕士 , 助研. 主要从事杂
草生态学研究 , 已发表论文 8篇. T e l:0571-63370333;E-
m a il:zhy j88888@163. com
责任编辑 李凤琴
5133期 周勇军等:鸭舌草中抗氧化活性物质的分离与鉴定