全 文 ： 实验研究
棘 托 竹荪乙酸 乙酯提取 物的抑 菌作用 研究
檀东飞　苏燕卿　吴若菁　林跃鑫　吴国欣 (福建师范大学生物工程学院 福州 350007)
摘要: 目的　研究棘托竹荪乙酸乙酯提取物的抑菌效果。方法　棘托竹荪子实体用乙酸乙酯常温和 80℃提取 ,抑菌试验采用牛津小杯法。结果
　其得率分别为 2. 11%和 3. 79% 。提取物对三类受试菌均有抑制作用 ,桔青霉、黑曲霉最敏感 ,啤酒酵母次之 ,白色假丝酵母 ,金黄色葡萄球菌和
大肠杆菌稍差。用食物试验效果良好。结论　棘托竹荪乙酸乙酯提取物可开发成天然的微生物拮抗剂。
关键词: 棘托竹荪 ;乙酸乙酯 ;提取物 ;抑菌作用
中图分类号: Q939. 92; R915　文献标识码: A　文章编号: 1006-3765( 2002) 05-0101-03
Studies on Antimicrobial Activity of Dictyophora Echinovolvata Extracted with
Ethyl Acetate
TAN Dong-fei , SU Yan-qing ,WU Ruo -jing , LIN yue-xin ,Wu Guo-xin (Bioengineering College , Fujian Teachers
University ,Fuzhou　 350007)
ABSTRACT: OBJECTIVE　 To studiy on antimicrobial effect of D. echinovolvata ex tracted with ethyl acetate.
METHODS　D. echinovolvata is ex t racted by ethy l acetate in room temperature and at 80℃ . The antimicrobial
activity test applied Ox fo rd cipm methods. RESULTS　 The ex t raction rate came are 2. 11% and 3. 79% . The
antimicrobial test results show ed that P. citrinum and A. niger were most sensitiv e, nex t came S. cerevisiae , and
then E. col i , S. aureas and C. albicans. Food test of the ex t ractions go t good effect. CONCLUSION　 The
ex tractions a re natural antimicrobial substance.
KEY WORDS: Dictyophora echinovolvata; ethyl acetate; ex traction; antimicrobial activity
　　棘托竹荪 (Dictyophora echinovolvata M. Zang )属
担子菌亚门、腹菌纲、鬼笔目、鬼笔科、竹荪属〔 1〕 ,是
1986年在我国湖南省会同县发现 ,于 1988年定名的
新种〔 2〕。竹荪是一种名贵的食用菌 ,为国宴和高级宴
席上的著名山珍之一 ,又是医学上的新秀 ,具抗炎 ,
抑制癌细胞发展 ,降低高血压和胆固醇 ,并具有防止
食品腐败的作用〔 3〕。
有关竹荪生物活性成分的研究多见长裙竹荪
(D. indusiata Fisch)子实体和菌丝体的多糖类的抗
肿瘤研究〔 4. 5〕及长裙竹荪、短裙竹荪 (D. duplicata
Fisch )多糖的分离、纯化及化学结构的研究〔 6. 7〕。谭敬
军等研究了长裙竹荪的乙酸乙酯 ,丙酮 ,乙醇浸提浓
缩液的抑菌作用〔8〕。而对棘托竹荪的生物活性物质
的研究仅见于檀东飞等的棘托竹荪挥发油化学成分
及抑菌作用的研究〔9〕 ,棘托竹荪乙酸乙酯提取物的
抑菌作用未见报道。本文用弱极性溶剂乙酸乙酯从
棘托竹荪中提取脂溶性成分进行抑菌试验 ,为棘托
竹荪的进一步开发利用奠定基础 ,为食品保藏和新
药开发提供依据。
1　材料与方法
1. 1　材料
1. 1. 1　棘托竹荪子实体干品购于福建古田。
1. 1. 2　受试菌种:金黄色葡萄球菌 ( Staph ylococous
aureus ) ,大肠 杆菌 ( Escherichia coli ) ,啤酒 酵母
( Saccharomyces cerevisiae ) ,白色假丝酵母 ( Candida
albicans ) , 黑 曲 霉 ( Aspergil lus niger ) , 桔 青 霉
( Penicilliumcitrinum ) ,以上受试菌种由福建师范大学
生物工程学院微生物生化教研室提供。
1. 1. 3　培养基:牛肉膏蛋白胨培养基 ,查氏培养基 ,
沙氏培养基 ,麦芽汁培养基
1. 1. 4　乙酸乙酯、吐温- 80等试剂为 AR或 CP
1. 2　方法
1. 2. 1　提取: 100. 00g棘托竹荪干子实体加 1000ml
乙酸乙酯组织捣碎机捣碎 2min,分别在 80℃水浴回
流抽提 8h和常温 ( 20～ 28℃ )浸提 24h (不时摇动 ) ,
过滤 ,滤渣再分别加 700m l乙酸乙酯按原条件提取 ,
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Strai t Pharmaceutical Journal Vol 14 No. 5 2002
过滤 ,弃滤渣分别合并两次滤液 42～ 50℃减压薄膜
浓缩至恒重 ,置具塞试管充氮气 - 18℃保存备用。
1. 2. 2　比旋光度〔α〕20D 测定:无水乙醇溶解提取物 ,
用 WZZ- 1型自动旋光仪 (上海精密科学仪器有限
公司 )测定〔 10〕。
1. 2. 3　抑菌试验: ①受试菌的准备: 将受试菌接入
斜面培养基活化一代。霉菌、啤酒酵菌母用血球计数
板计数 ,霉菌菌悬液孢子数为 105个 /ml,啤酒酵母数
达 106个 /m l,细菌类和白色假丝酵母采用勾一环于
液体培养基中 37℃培养 6～ 8h,使菌数达到 106个 /
m l〔11〕。② 4%提取液的配制:用 10%乙醇+ 3%吐温 -
80的水溶液把提取物稀释成乳化液。③分别吸取菌
悬液 0. 1ml涂布于Υ9cm培养皿的固体培养基上 ,抑
菌实验采用牛津小杯法〔11〕。霉菌 26℃培养 65h,酵母
菌 30℃培养 36h,细菌 37℃培养 18h,测量抑菌圈直
径 ,每个组合 3个重复。
1. 2. 4　食物防腐试验: 将石膏水豆腐切块、猪里脊
肉切片 ,用 4%提取液涂于表面 ,阳春面、干饭捞熟冷
却 ,置于Υ9cm培养皿一满皿 ,加 4% 2. 5ml提取液拌
匀 ,空白加 2. 5ml水 ,试剂空白加 10%乙醇+ 3%吐
温 - 80水溶液 2. 5ml,暴露于 20～ 30℃ ( 6月初的霉雨
季节中 )空气中观察。
2　结果
2. 1　提取物的部分物理指标　棘托竹荪乙酸乙酯
提取物的部分物理指标 (见表 1)。
表 1　棘托竹荪乙酸乙酯提取物的部分物理性质
提取液 颜色 状态 气　味 比旋光度〔α〕20D
提取率
(% )
常温 浅棕色 油膏状 香味较淡伴有刺鼻酸味 + 4. 45° 2. 11
80℃ 棕色 油膏状膏状物多 香味淡伴有刺鼻酸味 + 4. 85° 3. 79
2. 2　提取物的抑菌试验　棘托竹荪乙酸乙酯提取
物对几种微生物的抑制作用结果 (见表 2)。
表 2　棘托竹荪乙酸乙酯提取物的抑菌效果 (抑菌圈直径 /mm)
菌　　种 空白对照 试剂对照 常温提取物
20～ 28℃ 80℃提取物
桔青霉 8. 0 9. 3 39. 8 31. 8
P. citrinum
黑曲霉 8. 0 8. 0 28. 0 24. 5
A. niger
啤酒酵母 0 0 17. 0 18. 0
S. cerecisiae
白色假丝酵母 0 0 11. 5 12. 0
C .albicaus金黄色葡萄球菌 0 0 14. 0 15. 3
S. aureus
大肠杆菌 0 0 15. 8 17. 4
E. coli
　　从表 2可以看出 ,棘托竹荪乙酸乙酯提取物对桔
青霉抑制效果最好 ,啤酒酵母次之 ,白色假丝酵母、
金色葡萄球菌和大肠杆菌稍差。
2. 3　食物防腐试验
棘托竹荪乙酸乙酯提取物对几种食物的防腐作
用结果 (见表 3)。
　　从表 3可知 ,棘托竹荪乙酸乙酯常温和 80℃提取
物都具有延缓食品腐败的功能。
3　讨论
本实验的抑菌试验结果与檀东飞等的棘托竹荪
挥发油的抑菌结果基本一致 ,即对青霉、曲霉、啤酒
酵母等真菌抑制效果较好 ,白色假丝酵母、金黄色葡
萄球菌和大肠杆菌稍差 ,说明棘托竹荪乙酸乙酯提
取物与其挥发油的抑菌主要化学成分比较一致。然
而本实验与谭敬军等用长裙竹荪乙酸乙酯提取液的
抑菌结果差异大〔8〕。他们的结果是对细菌效果好 ,而
对酵母菌和霉菌基本无抑制作用。说明不同种的竹
荪其脂溶性化学成分差异大。
表 3　棘托竹荪提取物对食物的防腐效果
食物 时间 /h 空白对照 试剂对照 常温提取物 80℃提取物
石膏水豆腐 24 酸味重 酸味较重 无酸味 无酸味
48 开始长霉 开始长霉 未长霉无酸味 未长霉且味纯
72 长满白色霉菌 ,味臭 长满白色霉菌 ,味臭 未长霉 未长霉味纯
猪里脊肉 24 稍有胺味 无胺味 无胺味 无胺味
48 胺味较浓 稍有胺味 无胺味 无胺味
72 胺味浓 ,长蛆 胺味重 ,长蛆 稍有异味 ,不长蛆 无异味 ,不长蛆
阳春面 24 馊味 无馊味 无馊味 无馊味
48 霉味重 ,长小霉菌落 霉味重 ,长小霉菌落 无霉味 ,无霉菌 无霉味 ,无霉菌
72 长满杂菌并有大量孢子 长满杂菌并有孢子 长少量针尖大的黑点 小黑点和两小簇霉菌
干饭 24 无馊味 无馊味 无馊味 无馊味
48 霉味 ,细小黑色霉菌落 稍有异味 ,红色菌落 无霉馊味 ,无霉菌落 无霉馊味 ,无霉菌落
72 长满杂菌有大量孢子 桔红色霉菌多 ,少量小黑点 针尖大黑点 ,红色杂菌 针尖大黑点 ,一小簇桔红色霉菌
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海峡药学　 2002年　第 14卷 第 5期
　　从食物防腐试验结果看 ,棘托竹荪乙酸乙酯提
取物对蛋白质类和淀粉类食品都有防腐作用。对蛋
白质类食物的防腐效果 80℃提取物比常温的更好 ,
淀粉类食物常温比 80℃稍好。与抑菌试验结果一致。
综上所述 ,我们认为:棘托竹荪子实体含有广谱
抗菌成分 ,特别对主要的致腐真菌:青霉、曲霉、啤酒
酵母等效果好 ,可将其开发成天然防腐剂。还可进行
进一步的药物实验将其开发成抗真菌药物 ,但必须
对其抑菌的化学成分进行全面了解后 ,再制定出最
佳提取方案。
参考文献
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版社 , 1993, 199～ 204.
大 肠 埃 希 菌 耐 药 性 分 析
黄美星 1　黄心宏 2　房 榕 3 ( 1.福建卫生学校 福州 350001; 2.福建医科大学附属协和医院 福州 350001; 3.福
建省药品检验所 福州 350001)
摘要: 目的　了解大肠埃希菌的耐药现状 ,为临床合理用药提供科学依据。方法　用常规法分离鉴定细菌 ,采用 K- B纸片扩散法进行药敏试
验。结果　大肠埃希菌对氨苄西林、阿莫西林 /克拉维酸的耐药率已高达 85%以上 ;对喹喏酮类 ,妥布霉素 ,庆大霉素的耐药率也高达 58% ～
84% ;对头孢类抗菌素的耐药率高于 32% ;耐药率低的分别是亚胺培南 ( 0% )、头孢哌酮 /舒巴坦 ( 4% )、哌拉西林 /他唑巴坦 ( 4% )。产超广谱 β-
内酰胺酶的大肠埃希菌占 33% 。结论　大肠埃希菌对多种抗生素具有高度耐药性 ,须根据药敏结果合理选用抗生素。亚胺培南、头孢哌酮 /舒巴
坦、哌拉西林 /他唑巴坦可作为该菌抗感染治疗的最佳选择。
关键词: 大肠埃希菌 ;抗生素 ;耐药性
中图分类号: R969. 3　文献标识码: A　文章编号: 1006-3765( 2002) 05-0103-02
　　大肠埃希菌是肠道正常菌群 ,但在机体抵抗力
下降或侵入肠道外组织或器官可作为条件致病菌引
起肠外感染〔 1〕。近几年 ,大肠埃希菌已成为医院感染
的主要病原菌 ,同时由于广谱抗生素的广泛应用 ,大
肠埃希菌的耐药问题日趋严重 ,尤其是产超广谱 β -
内酰胺酶 ( ESBLs )的菌株给临床治疗带来困难。为了
及时了解大肠埃希菌的耐药现状 ,我们对 2001年从
临床标本中分离的大肠埃希菌进行体外抗菌活性试
验 ,结果如下。
1　材料与方法
1. 1　标本来源　 2001年 1月～ 12月从福建医科大学
附属协和医院临床标本中 (粪便标本除外 )分离的大
肠埃希菌 315株 ,其中分离自尿液标本的 122株 ,血液
标本的 41株 ,胆汁标本 49株 ,痰标本 33株 ,其他标本
70株。
1. 2　抗生素　阿莫西林 /克拉维酸 ( AMC)、头孢哌
酮 ( CFP)、头孢他啶 ( CAZ)、头孢噻肟 ( CTX)、头孢
曲松 ( CRO )、左旋氧氟沙星 ( OFX )、亚胺培南
( IPM )、头孢他啶 /克拉维酸、头孢噻肟 /克拉维酸纸
片为 OXOID公司产品。氨苄西林 ( AM P)、氨曲南
( ATM)、头孢西丁 ( FOX)、头孢唑啉 ( CFZ)、庆大霉
素 ( GEN)、阿米卡星 ( AMK)、奈替米星 ( N ET)、妥布
霉素 ( TOB)、环丙沙星 ( CIP)、培氟沙星 ( PEF)购自
杭州天和微生物试剂公司。头孢哌酮 /舒巴坦 ( AM S)
由辉瑞制药公司提供。哌拉西林 /他唑巴坦 ( TZP)由
惠氏公司提供。
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