全 文 ：　［收稿日期］　２０１５－０３－１０；２０１５－０９－０５修回
　［基金项目］　贵州省农业攻关项目“织金竹荪以草代木栽培优良菌株筛选及应用示范”［黔科合 ＮＹ字（２０１１）３０３２］；贵州省科技支撑计划
（农业攻关）项目“利用松杉废料及梢头枝丫栽培红托竹荪大田示范”［黔科合ＮＺ（２０１３）３０１０］；贵州省农业攻关项目“织金竹荪
袋装菌种生产工艺及菌种质量标准研究”［黔科合ＮＹ（２０１４）３０３７］
　［作者简介］　龚光禄（１９８５－），男，硕士，从事食药用菌育种与驯化栽培研究。Ｅ－ｍａｉｌ：ｇｏｎｇｇｕａｎｇｌｕ０９２３＠１６３．ｃｏｍ
　＊通讯作者：朱国胜（１９７１－），男，研究员，博士，从事药用植物伴生菌及食药用真菌研究。Ｅ－ｍａｉｌ：ｚｇｓａｈ＠１６３．ｃｏｍ
［文章编号］１００１－３６０１（２０１５）１１－００６１６－００７４－０９
红托竹荪培养基及培养条件优化
龚光禄１，２，桂 阳１，２，卢颖颖１，２，朱国胜１，２＊
（１．贵州省农作物品种资源研究所，贵州 贵阳５５０００６；２．贵州省农业生物技术重点实验室，贵州 贵阳５５０００６）
　　［摘　要］为了筛选红托竹荪最适培养基与培养条件，提高红托竹荪菌种的生产效率，利用单因素试验
及正交试验分别对红托竹荪培养基及培养条件进行优化。结果表明：葡萄糖为最适速效碳源，果糖为最适迟
效碳源；蛋白胨为最适速效氮源，硫酸铵为最适缓释氮源；最佳Ｃ／Ｎ比为２３；ＺｎＳＯ４、竹叶煮汁、ＶＢ６和ＩＡＡ
能显著地促进菌丝的萌动与生长；最适ｐＨ为６．０，最佳培养温度２５℃且避光，但２８℃能刺激菌丝快速萌动。
结论：影响菌丝生长的因素主次关系为ＩＡＡ＞竹叶＞速效与迟效氮源的配比＞ＶＢ６＞速效与迟效碳源的配
比，最优组合葡萄糖５ｇ，果糖２５ｇ，蛋白胨２．５ｇ，硫酸铵２．５ｇ，竹叶２０ｇ（煮汁），ＶＢ６０．１６ｇ，生长素（ＩＡＡ）
１．６ｍｇ，水１０００ｍＬ。
［关键词］红托竹荪；理化因子；培养条件；最适培养基
［中图分类号］Ｑ９３９．５ ［文献标识码］Ａ
Ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｍｅｄｉｕｍ　ａｎｄ　Ｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ　ｏｆ　Ｄｉｃｔｙｏｐｈｏｒａ　ｒｕｂｒｏｖｏｌｖａｔａ
ＧＯＮＧ　Ｇｕａｎｇｌｕ１，２，ＧＵＩ　Ｙａｎｇ１，２，ＬＵ　Ｙｉｎｇｙｉｎｇ１，２，ＺＨＵ　Ｇｕｏｓｈｅｎｇ１，２＊
（１．Ｇｕｉｚｈｏｕ　Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ　ｏｆ　Ｃｒｏｐ　Ｇｅｒｍｐｌａｓｍ　Ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ，Ｇｕｉｙａｎｇ，Ｇｕｉｚｈｏｕ　５５０００６；２．Ｇｕｉｚｈｏｕ　Ｋｅｙ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ
ｏｆ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｇｕｉｙａｎｇ，Ｇｕｉｚｈｏｕ５５０００６，Ｃｈｉｎａ）
　　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ　ｍｅｄｉｕｍ　ａｎｄ　ｃｕｌｔｕｒａｌ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ　ｏｆ　Ｄ．ｒｕｂｒｏｖｏｌｖａｔａ　ｗｅｒｅ　ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ　ｂｙ　ｓｉｎｇｌｅ－ｆａｃｔｏｒ　ｔｅｓｔ
ａｎｄ　ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ　ｔｅｓｔ　ｔｏ　ｓｃｒｅｅｎ　ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ　ｍｅｄｉｕｍ　ａｎｄ　ｃｕｌｔｕｒａｌ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ　ｆｏｒ　ｉｍｐｒｏｖｉｎｇ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ
ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ　ｏｆ　Ｄ．ｒｕｂｒｏｖｏｌｖａｔａ　ｓｔｒａｉｎｓ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｇｌｕｃｏｓｅ　ａｎｄ　ｆｒｕｃｔｏｓｅ　ａｒｅ　ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍｕｍ　ｒａｐｉｄ－ａｃｔｉｎｇ　ａｎｄ
ｓｌｏｗ－ａｃｔｉｎｇ　ｃａｒｂｏｎ　ｓｏｕｒｃｅ　ｂｕｔ　ｐｅｐｔｏｎｅ　ａｎｄ　ａｍｍｏｎｉｕｍ　ｓｕｌｆａｔｅ　ａｒｅ　ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍｕｍ　ｒａｐｉｄ－ａｃｔｉｎｇ　ａｎｄ　ｓｌｏｗ－
ｒｅｌｅａｓｅ　ｎｉｔｒｏｇｅｎ　ｓｏｕｒｃｅ　ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍｕｍ　Ｃ／Ｎ　ｒａｔｉｏ　ｉｓ　２３．ＺｎＳＯ４，ｂａｍｂｏｏ　ｌｅａｆ　ｅｘｔｒａｃｔ，ＶＢ６ａｎｄ
ＩＡＡ　ｃａｎ　ｉｍｐｒｏｖｅ　ｈｙｐｈａｌ　ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｇｒｏｗｔｈ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ．Ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍｕｍ　ｐＨ　ａｎｄ　ｃｕｌｔｕｒａｌ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ
ａｒｅ　６．０ａｎｄ　２５℃ｕｎｄｅｒ　ｔｈｅ　ｄａｒｋ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ　ｓｅｐａｒａｔｅｌｙ　ｂｕｔ　２８℃ｃａｎ　ｓｔｉｍｕｌａｔｅ　ｒａｐｉｄ　ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｍｙｃｅｌｉａ．
Ｉｎ　ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ，ｆａｃｔｏｒｓ　ａｆｆｅｃｔｉｎｇ　ｍｙｃｅｌｉａ　ｇｒｏｗｔｈ　ａｒｅ　ＩＡＡ ＞ｂａｍｂｏｏ　ｌｅａｆ　ｅｘｔｒａｃｔ＞ｒａｐｉｄ－ａｃｔｉｎｇ／ｓｌｏｗ－ａｃｔｉｎｇ
ｎｉｔｒｏｇｅｎ　ｓｏｕｒｃｅ　ｒａｔｉｏ ＞ ＶＢ６ ＞ｒａｐｉｄ－ａｃｔｉｎｇ／ｓｌｏｗ－ａｃｔｉｎｇ　ｃａｒｂｏｎ　ｓｏｕｒｃｅ　ｒａｔｉｏ．Ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍｕｍ　ｍｅｄｉｕｍ
ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ　ｉｎｃｌｕｄｅ　５ｇ　ｇｌｕｃｏｓｅ，２５ｇ　ｆｒｕｃｔｏｓｅ，２．５ｇ　ｐｅｐｔｏｎｅ，２．５ｇ　ａｍｍｏｎｉｕｍ　ｓｕｌｆａｔｅ，２０ｇ　ｂａｍｂｏｏ　ｌｅａｆ
ｅｘｔｒａｃｔ，０．１６ｇ　ＶＢ６，１．６ｍｇ　ＩＡＡ　ａｎｄ　１　０００ｍＬ　ｗａｔｅｒ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｄｉｃｔｙｏｐｈｏｒａ　ｒｕｂｒｏｖｏｌｖａｔａ；ｐｈｙｓｉｃａｌ　ａｎｄ　ｃｈｅｍｉｃａｌ　ｆａｃｔｏｒ；ｃｕｌｔｕｒａｌ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ；ｏｐｔｉｍａｌ
ｍｅｄｉｕｍ
　　红托竹荪（Ｄｉｃｔｙｏｐｈｏｒａ　ｒｕｂｒｏｖｏｌｖａｔａ）隶属真
菌门（Ｅｕｍｙｃｏｔａ）、担子菌亚门（Ｂａｓｉｄｉｏｍｙｃｏｔｉｎａ）、
腹菌纲（Ｇａｓｔｅｒｏｍｙｃｅｔｅｓ）、鬼笔目（Ｐｈａｌａｌｅｓ）、鬼笔
科（Ｐｈａｌａｃｅａｅ）、竹荪属（Ｄｉｃｔｙｏｐｈｏｒａ）真菌［１］。该
菌风味独特，含有丰富的多糖和蛋白质等营养型成
分，及醛类、酮类、醇类、酚类、酸类、烃类、杂环类等
挥发性成分，对小鼠Ｓ－１８０有一定的抑制作用和抗
氧化作用［２－６］，具有较高的食用、保健以及药用价值。
野生红托竹荪主要生长于贵州、云南、四川和浙江等
竹林的腐殖土。红托竹荪主产于贵州、云南、福建等
地，贵州织金县种植起步早，并获得织金竹荪地理标
志，织金竹荪已成为贵州最具特色的食用菌。
生产中一直采用木屑培养基生产红托竹荪母
种、原种和栽培种［７］，这种方法不易纯化菌种，菌种
常因污染和退化而影响产量。琼脂培养基母种［８－９］、
麦粒原种［１０］、枝条原种和栽培种［１１］等研究表明，这
些方法培养周期长，导致菌丝易老化和污染。近年
来，为解决这些问题，关于竹荪菌丝营养特性的研究
已得到重视。黄义勇等［１２－１３］研究表明，红托竹荪菌
丝生长过程中可利用多种单糖、双糖、多糖和糖醇，
多种无机氮和有机氮，最适Ｃ／Ｎ比为３０∶１，需要
大量元素钾、镁、磷和微量元素铁、钼、锌、铜、钴等，
最适温度２３～２５℃，ｐＨ　５．５，光照有害；杜昱光
等［１４］研究表明，竹荪深层发酵最适温度２８℃，ｐＨ
６．５，可利用半乳糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、甘露醇和
可溶性淀粉，对纤维素利用能力弱，几乎不能利用木
糖；蛋白胨和黄豆粉是比较理想的氮源，硝酸氨和硝
酸钾几乎不能被利用；胡萝卜提取物、镁、锌、钙、维
　贵州农业科学　２０１５，４３（１１）：７４～８２
　Ｇｕｉｚｈｏｕ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ
生素Ｂ１２可显著促进菌丝生长；ＩＡＡ、ＧＡ等生长调
节剂作用不明显。刘芳等［９］研究表明，鲜松针添加
到培养基中，红托竹荪母种菌丝萌发时间短，密度
高，菌丝特浓白且生长整齐，整个培养过程中菌丝体
增长速度较快。但在母种培养基或液体培养基中培
养红托竹荪菌丝时仍存在诸多问题，如菌丝生长缓
慢、周期长、菌丝活力差、易发生色变；在母种培养基
上传代２次，菌丝退化不萌发或不吃料等菌种退化
现象普遍。为解决这些问题，笔者较系统地研究各
种理化因子对红托竹荪菌丝生长发育的影响，并通
过正交试验，优化红托竹荪最适母种培养基和培养
条件，以期为红托竹荪的大规模生产提供理论基础。
１ 材料与方法
１．１ 供试菌株
红托竹荪母种，编号ＧＺＡＡＳ．ＺＳ０３６，贵州省农
作物品种资源研究所（贵州省现代中药材研究所）真
菌研究室提供。
１．２ 培养基及其制作
１．２．１ 对照培养基（ＣＫ） 葡萄糖１０ｇ，果糖１５ｇ，
牛肉膏１０ｇ，黄豆粉５ｇ，胡萝卜１０ｇ（煮汁），
ＫＨ２ＰＯ４３ｇ，ＭｇＳＯ４０．５ｇ，ＺｎＳＯ４０．５ｇ、ＶＢ１０．１ｇ、
ＶＢ２０．１ｇ、琼脂粉８ｇ，水１０００ｍＬ，ｐＨ　５．５
［１２，１４－１５］。
１．２．２ 基础培养基 葡萄糖２０ｇ，牛肉膏１０ｇ，琼
脂８ｇ，水１０００ｍＬ，ｐＨ自然。
１．２．３ 培养基制作 将配置的培养基装入３００ｍＬ
三角瓶中，１２１℃，０．１ＭＰａ条件下，灭菌３０ｍｉｎ，冷
却到６０℃左右时，倒入预先灭菌的平板中，每个平
板倒入１５ｍＬ（６０ｍｍ 平板）或２０ｍＬ（９０ｍｍ 平
板），凝固后备用。
１．３ 不同因素对菌丝生长的影响
在基础培养基中，分别以果糖、葡萄糖、麦芽糖、
蔗糖、甘露醇和可溶性淀粉为碳源；以黄豆粉、尿素、
牛肉膏、蛋白胨、ＫＮＯ３、ＮＨ４ＮＯ３和（ＮＨ４）２ＳＯ４为
氮源，设置Ｃ／Ｎ比为１５、２０、２３、２５、２８、３０、３３、３５、
４０和４５；无机盐为 ＭｇＳＯ４、ＺｎＳＯ４、ＣａＣｌ２、ＦｅＳＯ４和
ＫＮＯ３各０．５ｇ；以新鲜的红托竹荪菌托、子实体、菌
盖孢子体、菌丝体（木屑三级菌种）、胡萝卜、松针、腐
竹叶各５０ｇ，煮汁取滤液，培养２周，探讨碳源、氮
源、Ｃ／Ｎ、无机盐天然提取物对菌丝生长的影响。每
个试验处理设３次重复。
在对照培养基（ＣＫ）中，ｐＨ 值设为３．５、４．０、
４．５、５．０、５．５、６．０、６．５、７．０、７．５、８．０、９．０和１０．０，
温度设为４℃、１８℃、２０℃、２２℃、２５℃、２８℃和４０℃，
光照条件设为避光、自然光照（室内）、全光照３个处
理，维生素为０．１ｇ的 ＶＢ１、ＶＢ２、ＶＢ６、ＶＢ１２和 ＶＣ，激
素为１μＬ的６－ＫＴ和ＩＡＡ，探讨ｐＨ、温度、光照、维
生素和激素菌丝生长的影响。每个试验处理设３次
重复。
１．４ 培养条件的优化
在单因素试验的基础上，根据５因素４水平的
正交试验设计原理，以葡萄糖＋果糖（Ａ）、蛋白胨＋
硫酸铵（Ｂ）、竹叶（Ｃ）、ＶＢ６（Ｄ）和ＩＡＡ（Ｅ）为因素。
设计５因素４水平的正交试验，因素水平如表１所
示，并加入０．５ｇ／Ｌ的ＺｎＳＯ４和调节ｐＨ 至６．０，
２８℃下刺激菌丝萌发，然后２５℃继续避光再培养２
周。以菌丝生长速度和菌落特征作为观测值，通过
极差分析获得最佳组合，并进行验证。
表１ 红托竹荪正交试验的Ｌ１６（４５）因素和水平
Ｔａｂｌｅ　１　Ｆａｃｔｏｒ　ａｎｄ　ｌｅｖｅｌ　ｏｆ　Ｌ１６（４５）ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ　ｔｅｓｔ　ｆｏｒ　Ｄ．ｒｕｂｒｏｖｏｌｖａｔａ
水平
Ｌｅｖｅｌ
因素　Ｆａｃｔｏｒ
葡萄糖＋果糖／（ｇ／Ｌ）（Ａ） 蛋白胨＋硫酸铵／（ｇ／Ｌ）（Ｂ） 竹叶／（ｇ／Ｌ）（Ｃ） ＶＢ６／（ｇ／Ｌ）（Ｄ）ＩＡＡ／（ｍｇ／Ｌ）（Ｅ）
１　 １０＋２０　 ２＋３　 ２０　 ０．０４　 ０．４
２　 １５＋１５　 ２．５＋２．５　 ４０　 ０．０８　 ０．８
３　 ２０＋１０　 ３＋２　 ６０　 ０．１２　 １．２
４　 ５＋２５　 ３．５＋１．５　 ８０　 ０．１６　 １．６
１．５ 数据统计与分析
挑取约３ｍｍ的供试母种块接入配制好的平板
培养基中，置２４℃（温度处理试验除外），避光培养
（光照处理试验除外）。每隔１２ｈ观察１次菌丝的
萌发情况，当菌丝萌发后每２４ｈ测量菌丝生长速
度，最后观察并描述其菌落特征。用ＳＰＳＳ　２０．０软
件进行数据分析。
２ 结果与分析
２．１ 不同化学因子对红托竹荪菌丝生长的影响
２．１．１ 碳源 由图１可知，菌丝在添加葡萄糖的
培养基中萌动最快，１．５ｄ时萌发与ＣＫ的１．６７ｄ
差异不显著，在前５ｄ生长速度显著高于其他处理，
但后期速度快速下降显著低于其他处理，而果糖的
速度时间曲线是后期生长速度较其他处理快。平均
生长速度最快的是以果糖为碳源的培养基，为
０．４０４ｍｍ／ｄ，与ＣＫ没有显著差异，但萌发时间为
６．６７ｄ；菌丝在以甘露糖为碳源的培养基中萌动迟
钝，且不能吃料正常生长，且菌丝变为淡红而老化；
其他碳源如蔗糖、麦芽糖、可溶性淀粉，萌动缓慢且
生长速度较缓慢分别为０．２５ｍｍ／ｄ、０．２７ｍｍ／ｄ和
０．２３ｍｍ／ｄ。以甘露糖为碳源的培养基中菌丝变淡
红且老化，其他处理的菌丝雪白、浓密、气生菌丝发
达。因此，葡萄糖和果糖是红托竹荪菌丝生长较为
适宜的碳源。
２．１．２ 氮源 由图２可知，菌丝在以蛋白胨和硫
酸铵为氮源的培养基中萌发较快，均为２ｄ，虽略低
于ＣＫ１．６７ｄ，但差异不显著。以蛋白胨为氮源的
·５７·
　龚光禄 等　红托竹荪培养基及培养条件优化
　ＧＯＮＧ　Ｇｕａｎｇｌｕ　ｅｔ　ａｌ　Ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｍｅｄｉｕｍ　ａｎｄ　Ｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ　ｏｆ　Ｄｉｃｔｙｏｐｈｏｒａ　ｒｕｂｒｏｖｏｌｖａｔａ
图１ 不同碳源红托竹荪菌丝的生长情况
Ｆｉｇ．１　Ｍｙｃｅｌｉａ　ｇｒｏｗｔｈ　ｏｆ　Ｄ．ｒｕｂｒｏｖｏｌｖａｔａｃｕｌｔｕｒｅｄ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｍｅｄｉｕｍ　ｗｉｔｈ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｃａｒｂｏｎ　ｓｏｕｒｃｅ　ｆｏｒ　ｔｗｏ　ｗｅｅｋｓ
图２ 不同氮源红托竹荪菌丝的生长情况
Ｆｉｇ．２　Ｍｙｃｅｌｉａ　ｇｒｏｗｔｈ　ｏｆ　Ｄ．ｒｕｂｒｏｖｏｌｖａｔａｃｕｌｔｕｒｅｄ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｍｅｄｉｕｍ　ｗｉｔｈ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｎｉｔｒｏｇｅｎ　ｓｏｕｒｃｅ　ｆｏｒ　ｔｗｏ　ｗｅｅｋｓ
培养基菌丝的平均生长速度最大，为１．０７ｍｍ／ｄ，
蛋白胨前期生长速度较快显著高于其他处理，后期
速度迅速下降并显著低于以硫酸铵、黄豆粉、牛肉膏
为氮源的培养基，菌丝雪白、浓密、气生菌丝发达；在
以硫酸铵和黄豆粉培养中菌丝萌发后，在一个相对
稳定的范围内生长，速度波动较小，平均生长速度分
别为０．９２ｍｍ／ｄ，与蛋白胨有差异但不显著，且显
著高于其他处理；以硫酸铵为氮源的培养基，菌丝雪
白、浓密、气生菌丝发达；以黄豆粉为氮源的培养基，
白色、浓密、纽结成菌丝束、气生菌丝较不发达。菌
丝在以尿素为氮源的培养基中不能萌发也不生长，
菌丝甚至死亡。其他氮源菌丝表现出萌动缓慢，以
及生长速度相对较慢的生长态势。其中，牛肉膏菌
丝萌动时间显著低于ＣＫ，生长速度先增大后减少，
平均速度显著高于ＣＫ；硝酸钾萌动时间与生长速
度均显著劣于硝酸铵，菌丝淡白色到淡红，较稀疏，
气生菌丝不发达，并且均显著劣于硫酸铵，说明铵盐
较硝酸盐作为氮源更容易被红托竹荪菌丝吸收。因
此，蛋白胨、硫酸铵和黄豆粉是红托竹荪菌丝生长较
为适合的氮源，且蛋白胨是典型的速效氮源，硫酸铵
和黄豆粉是缓释性的氮源。
２．１．３ Ｃ／Ｎ 由图３可知，Ｃ／Ｎ对菌丝萌动的影
响呈先增快后放慢的趋势，其中，Ｃ／Ｎ比为２５时萌
动最快，为２．３３ｄ；最慢的为 Ｃ／Ｎ 比为３５时，为
４．０ｄ。在所有的处理中菌丝生长速度在４ｄ时达
到一个较高水平，在以后生长过程中生长速度基本
保持稳定，波动不显著；平均生长速度表明，随着
Ｃ／Ｎ比增加呈先增大后减小的趋势。Ｃ／Ｎ比为２３
时达到最大１．６７ｍｍ／ｄ，其次是 Ｃ／Ｎ 比为２５和
２０，分别为１．５５ｍｍ／ｄ和１．５１ｍｍ／ｄ，差异不显著，
但显著高于其他处理，且菌丝雪白、浓密、气生菌丝
发达。由菌落特征可知，菌丝在Ｃ／Ｎ比低于１５和
·６７·
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　贵 州 农 业 科 学
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　Ｇｕｉｚｈｏｕ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ
图３ 不同Ｃ／Ｎ比红托竹荪菌丝的生长情况
Ｆｉｇ．３　Ｍｙｃｅｌｉａ　ｇｒｏｗｔｈ　ｏｆ　Ｄ．ｒｕｂｒｏｖｏｌｖａｔａｃｕｌｔｕｒｅｄ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｍｅｄｉｕｍ　ｗｉｔｈ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｃａｒｂｏｎ／ｎｉｔｒｏｇｅｎ　ｒａｔｉｏ　ｆｏｒ　ｔｗｏ　ｗｅｅｋｓ
图４ 不同无机盐红托竹荪菌丝生长速度的时间曲线
　　　　　　Ｆｉｇ．４　Ｔｉｍｅ　ｃｕｒｖｅ　ｏｆ　ｍｙｃｅｌｉａ　ｇｒｏｗｔｈ　ｓｐｅｅｄ　ｏｆ　Ｄ．ｒｕｂｒｏｖｏｌｖａｔａｃｕｌｔｕｒｅｄ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｍｅｄｉｕｍ　ｗｉｔｈ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ
ｉｎｏｒｇａｎｉｃ　ｓａｌｔ　ｆｏｒ　ｔｗｏ　ｗｅｅｋｓ
高于２８时，菌丝均较稀疏、且纽结形成菌丝束。因
此，红托竹荪菌丝生长的最适Ｃ／Ｎ比为２０～２５，最
佳Ｃ／Ｎ比为２３。
２．１．４ 无机盐 由图４可知，菌丝在含有Ｚｎ２＋的
培养基中生长速度呈先增大后减小的变化趋势与基
础培养基一致，且平均萌动时间和平均生长速度分
别为３ｄ和０．６６ｍｍ／ｄ，与基础培养基差异不显著，
且菌丝雪白、浓密、气生菌丝发达；在含有 Ｋ＋ 和
Ｆｅ２＋的培养基中菌丝的平均萌动时间与平均生长
速度均低于基础培养基但不显著。在含有Ｃａ２＋和
Ｍｇ２＋的培养基中菌丝的平均生长速度显著低于基
础培养基。因此，Ｚｎ２＋对红托竹荪菌丝的萌动与生
长有一定的促进作用。
２．２ 不同物理因子对红托竹荪菌丝生长的影响
２．２．１ 温度 由图５可知，在０℃的温度条件下红
托竹荪菌丝停止生长，但菌丝仍有活力，随着温度的
升高，菌丝的平均生长速度呈先增大后减小的变化
趋势，温度为２５℃时生长速度最大０．５６ｍｍ／ｄ，当
温度超过这一温度时菌丝的生长速度开始减小；而
平均萌动时间则是先逐渐增快后又减慢，当温度为
２８℃时，菌丝萌动最快１．３ｄ；虽然在温度高达４０℃
的温度条件下菌丝仍然能生长，但萌发较缓慢、速度
较低，到后期甚至停止生长。因此，红托竹荪菌丝生
长的最适温度为２２～２８℃，最佳的生长温度为
２５℃，但在２８℃条件下可以有效刺激菌丝的萌动。
如果在菌丝培养期间先将温度调节至２８℃，待菌丝
萌动后再将温度下调到２５℃继续培养，可能达到更
好的效果。
２．２．２ ｐＨ 由图６可知，当ｐＨ低于４．５的条件
下 菌丝很难萌动，甚至死亡；当ｐＨ高于５．０时，随
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　龚光禄 等　红托竹荪培养基及培养条件优化
　ＧＯＮＧ　Ｇｕａｎｇｌｕ　ｅｔ　ａｌ　Ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｍｅｄｉｕｍ　ａｎｄ　Ｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ　ｏｆ　Ｄｉｃｔｙｏｐｈｏｒａ　ｒｕｂｒｏｖｏｌｖａｔａ
图５ 不同温度红托竹荪菌丝的生长情况
Ｆｉｇ．５　Ｍｙｃｅｌｉａ　ｇｒｏｗｔｈ　ｏｆ　Ｄ．ｒｕｂｒｏｖｏｌｖａｔａｃｕｌｔｕｒｅｄ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｍｅｄｉｕｍ　ｕｎｄｅｒ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｆｏｒ　ｔｗｏ　ｗｅｅｋｓ
图６ 不同ｐＨ红托竹荪菌丝的生长情况
Ｆｉｇ．６　Ｍｙｃｅｌｉａ　ｇｒｏｗｔｈ　ｏｆ　Ｄ．ｒｕｂｒｏｖｏｌｖａｔａｃｕｌｔｕｒｅｄ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｍｅｄｉｕｍ　ｗｉｔｈ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｐＨ　ｆｏｒ　ｔｗｏ　ｗｅｅｋｓ
着ｐＨ的增加，菌丝萌动呈先逐渐加快后保持相对
平稳的趋势，而生长速度则呈先增大后减小的生长
趋势；当ｐＨ 为６．０时，萌发和生长速度均达到最
高，分别为１．７ｄ和０．９４ｍｍ／ｄ，并显著优于其他处
理，且在整个生长过程中均表现出较好的生长态势，
菌丝雪白、浓密、气生菌丝发达；在碱性的条件下菌
丝也能生长，尤其是ｐＨ 为８．５时菌丝平均生长速
度较快０．６２ｍｍ／ｄ，与ｐＨ为５．５时差异不显著，但
在后期生长过程中速度较为缓慢；而ｐＨ高于９时，
菌丝虽然前期生长较好，但后期生长放缓甚至停止
生长，且在ｐＨ为１０时菌丝容易纽结形成菌丝束。
因此，红托竹荪菌丝生长的最适ｐＨ 为５．５～６．５，
最佳ｐＨ为６．０。
２．２．３ 光照 由图７可知，菌丝在不同的光照处
理下生长速度均呈现逐渐增大的趋势后相对平稳。
其中，在黑暗的条件下菌丝萌动较快（０．２３ｄ），萌发
后生长速度迅速增加，平均速度为０．７８ｍｍ／ｄ，显
著高于其他处理，且菌丝雪白、浓密、气生菌丝发达；
菌丝在全光照下萌动最慢（７．６７ｄ），显著低于其他
处理，且生长速度也相对较小为０．４０ｍｍ／ｄ，显著
低于全黑暗处理。因此，红托竹荪菌丝耐黑暗条件
下生长，为提高菌丝的生长速度和活力在生产上制
·８７·
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　贵 州 农 业 科 学
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　Ｇｕｉｚｈｏｕ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ
图７ 不同光照处理红托竹荪菌丝的生长情况
Ｆｉｇ．７　Ｍｙｃｅｌｉａ　ｇｒｏｗｔｈ　ｏｆ　Ｄ．ｒｕｂｒｏｖｏｌｖａｔａｃｕｌｔｕｒｅｄ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｍｅｄｉｕｍ　ｕｎｄｅｒ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｌｉｇｈｔ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ　ｆｏｒ　ｔｗｏ　ｗｅｅｋｓ．
作菌种时可以在避光条件下培养。
２．３ 天然提取物、维生素和激素对红托竹荪菌丝
体生长发育的影响
２．３．１ 天然提取物 由图８可知，菌丝在添加竹
叶煮汁培养基中的生长趋势为先高后低，与基础培
养基相似，但平均速度（１．０１６ｍｍ／ｄ）显著高于基础
培养基（０．６６４ｍｍ／ｄ），萌动时间为２．３ｄ，略高于基
础培养基（３．３ｄ），但差异不显著，且菌丝雪白、浓密
粗壮、气生菌丝发达；在添加其他几种天然物煮汁的
培养基中菌丝前期生长速度显著低于基础培养基，
而后期显著提高，但平均生长速度均显著低于基础
培养基，尤其是添加红托竹荪菌丝体煮汁的培养基，
菌丝很难萌发甚至死亡。因此，竹叶煮汁有促进红
托竹荪菌丝生长的作用，在培育红托竹荪菌丝或制
作菌种时可加入适当的竹叶煮汁，这样更有利于红
托竹荪菌丝的萌动与生长。
２．３．２ 维生素及激素 由图９可知，菌丝在添加
不同维生素和生长激素的培养基中生长速度均呈先
增大后减小的变化趋势。其中，添加ＶＢ６和ＩＡＡ的
培养基，菌丝萌动时间均为２．６７ｄ，平均速度也较快
分别为０．９０８ｍｍ／ｄ和０．７５４ｍｍ／ｄ，显著高于基础
培养基及其他处理，且菌丝雪白、浓密、气生菌丝发
图８ 不同提取物红托竹荪菌丝的生长情况
Ｆｉｇ．８　Ｍｙｃｅｌｉａ　ｇｒｏｗｔｈ　ｏｆ　Ｄ．ｒｕｂｒｏｖｏｌｖａｔａｃｕｌｔｕｒｅｄ　ｏｎ　ｍｅｄｉｕｍ　ｗｉｔｈ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｆｏｒ　ｔｗｏ　ｗｅｅｋｓ
·９７·
　龚光禄 等　红托竹荪培养基及培养条件优化
　ＧＯＮＧ　Ｇｕａｎｇｌｕ　ｅｔ　ａｌ　Ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｍｅｄｉｕｍ　ａｎｄ　Ｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ　ｏｆ　Ｄｉｃｔｙｏｐｈｏｒａ　ｒｕｂｒｏｖｏｌｖａｔａ
图９ 不同维生素与激素红托竹荪菌丝的生长情况
Ｆｉｇ．９　Ｍｙｃｅｌｉａ　ｇｒｏｗｔｈ　ｏｆ　Ｄ．ｒｕｂｒｏｖｏｌｖａｔａｃｕｌｔｕｒｅｄ　ｏｎ　ｍｅｄｉｕｍ　ｗｉｔｈ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｖｉｔａｍｉｎ　ａｎｄ　ｈｏｒｍｏｎｅ　ｆｏｒ　ｔｗｏ　ｗｅｅｋｓ
达；而添加其他几种维生素和激素的培养基，菌丝萌
动和平均生长速度均显著低于基础培养基或差异不
显著。因此，适宜红托竹荪菌丝生长的最佳维生素
和生长激素为ＶＢ６和ＩＡＡ，在培育红托竹荪菌丝或
制作菌种时加入适当的 ＶＢ６和ＩＡＡ将更有利于红
托竹荪菌丝的生长。
２．４ 培养基的最优组合
由图１０可知，在不同的培养基中有的菌丝颜色
会有白色变为淡红的色变现象，菌丝浓密程度与气
生菌丝也有差异，菌落还会出现不同程度的轮纹。
而且轮纹明显的菌丝颜色也较深，容易纽结，相互缠
绕严重，细胞较短小、凹凸不平，锁状联合不明显，如
图１１Ａ－２；没有发生色变的菌丝粗壮、细胞较长且
饱满，分枝较少、纽结与相互缠绕现象不明显，锁状
联合显著，如图１１Ｂ－２。
　　正交试验结果（表２）表明，菌丝的平均萌动时
间为１～１．５ｄ，且试验处理间差异不显著。由平均
生长速度极差分析可知，影响红托竹荪菌丝生长的
因素主次关系为 Ｅ＞Ｃ＞Ｂ＞Ｄ＞Ａ，即ＩＡＡ＞竹
叶＞速效与迟效氮源的配比＞ＶＢ６＞速效与迟效碳
源的配比。各因素的最好水平分别为 Ａ（葡萄糖＋
果糖）５ｇ＋２５ｇ／Ｌ，Ｂ（蛋白胨＋硫酸铵）２．５ｇ＋
２．５ｇ／Ｌ，Ｃ（竹叶）２０ｇ／Ｌ，Ｄ（ＶＢ６）０．１６ｇ／Ｌ，Ｅ
（ＩＡＡ）１．６ｍｇ／Ｌ，即Ａ４Ｂ２Ｃ１Ｄ４Ｅ４组合，平均萌动时
注：左，菌落 （培养皿９０ｍｍ）；右上，菌落特征（７×）；右下，边缘菌丝（１　０００×）。
Ｎｏｔｅ：Ｌｅｆｔ，Ｃｏｌｏｎｙ；Ｕｐｐｅｒ　ｒｉｇｈｔ，Ｃｏｌｏｎｙ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ（７×）；Ｌｏｗｅｒ　ｒｉｇｈｔ，Ｅｄｇｅ　ｍｙｃｅｌｉｕｍ（１　０００×）．
图１０ 红托竹荪菌丝体在不同培养基中的菌落特征
Ｆｉｇ．１０　Ｃｏｌｏｎｙ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ　ｏｆ　Ｄ．ｒｕｂｒｏｖｏｌｖａｔａ　ｍｙｃｅｌｉａ　ｃｕｌｔｕｒｅｄ　ｏｎ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｍｅｄｉａ　ｆｏｒ　ｆｏｕｒ　ｗｅｅｋｓ
　注：Ａ为色变菌丝，Ｂ为正常菌丝，－１为菌落（培养皿９０ｍｍ），－２为菌落特征（７×），－３为菌丝（８０×），－４为边缘菌丝（１０００×）。
　Ｎｏｔｅ：Ａ，Ｄｉｓｃｏｌｏｒａｔｉｏｎ　ｍｙｃｅｌｉｕｍ；Ｂ，Ｎｏｒｍａｌ　ｍｙｃｅｌｉｕｍ；－１，Ｃｏｌｏｎｙ；－２，Ｃｏｌｏｎｙ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ（７×）；－３，Ｍｙｃｅｌｉｕｍ（８０×）；－４，Ｅｄｇｅ　ｍｙ－
ｃｅｌｉｕｍ（１０００×）．
图１１ 红托竹荪的菌丝体变现象
Ｆｉｇ．１１　Ｖａｒｉａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｄ．ｒｕｂｒｏｖｏｌｖａｔａ　ｍｙｃｅｌｉａ　ａｆｔｅｒ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｏｆ　ｆｏｕｒ　ｗｅｅｋｓ
·０８·
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　贵 州 农 业 科 学
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　Ｇｕｉｚｈｏｕ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ
表２ 红托竹荪菌丝生长的正交试结果Ｌ１６（４５）
Ｔａｂｌｅ　２　Ｇｒｏｗｔｈ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　Ｄ．ｒｕｂｒｏｖｏｌｖａｔａ　ｍｙｃｅｌｉａ
实验号
Ｎｏ．
因素
Ｆａｃｔｏｒｓ
Ａ　 Ｂ　 Ｃ　 Ｄ　 Ｅ
生长情况
Ｇｒｏｗｔｈ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ
平均萌动时间／ｄ 平均生长速度／（ｍｍ／ｄ）
１　 １　 １　 １　 １　 １　 １．５±０．２８９Ａａ　 ０．４１７±０．０２４　５Ｆｆ
２　 １　 ２　 ２　 ２　 ２　 １．５±０．２８９Ａａ　 ０．７１６±０．００５　２ＣＤＥｃｄ
３　 １　 ３　 ３　 ３　 ３　 １．５±０．０００Ａａ　 ０．１２７±０．０２４　３Ｇｇ
４　 １　 ４　 ４　 ４　 ４　 １．５±０．５００Ａａ　 ０．９０７±０．０１１　７ＢＣｂ
５　 ２　 １　 ２　 ３　 ４　 １．５±０．２８９Ａａ　 ０．６９４±０．１４５　１ＤＥｃｄ
６　 ２　 ２　 １　 ４　 ３　 １．０±０．０００Ａａ　 １．３０４±０．０３１　５Ａａ
７　 ２　 ３　 ４　 １　 ２　 １．０±０．０００Ａａ　 ０．８３９±０．０５８　１ＢＣＤｂｃ
８　 ２　 ４　 ３　 ２　 １　 １．５±０．２８９Ａａ　 ０．００１±０．００１　３Ｇｇ
９　 ３　 １　 ３　 ４　 ２　 １．５±０．２８９Ａａ　 ０．５９６±０．０１０　３ＥＦｄｅ
１０　 ３　 ２　 ４　 ３　 １　 １．５±０．２８９Ａａ　 ０．４４８±０．０３６　４Ｆｆ
１１　 ３　 ３　 １　 ２　 ４　 １．０±０．２８９Ａａ　 １．２８９±０．０３５　１Ａａ
１２　 ３　 ４　 ２　 １　 ３　 １．０±０．０００Ａａ　 ０．７２２±０．０１１　７ＣＤＥｃｄ
１３　 ４　 １　 ４　 ２　 ３　 １．５±０．２８９Ａａ　 ０．５４６±０．００４　９ＥＦｅｆ
１４　 ４　 ２　 ３　 １　 ４　 １．５±０．２８９Ａａ　 １．１８５±０．０３０　７Ａａ
１５　 ４　 ３　 ２　 ４　 １　 １．５±０．２８９Ａａ　 ０．４１３±０．００４　９Ｆｆ
１６　 ４　 ４　 １　 ３　 ２　 １．５±０．５００Ａａ　 ０．９８２±０．０７４　５Ｂｂ
Ｋ１ ０．５４２　 ０．５６３　 ０．９９８　 ０．７９１　 ０．３２０
Ｋ２ ０．７１０　 ０．９１３　 ０．６３６　 ０．６３８　 ０．７８３
Ｋ３ ０．７６４　 ０．６６７　 ０．４７７　 ０．５６３　 ０．６７５
Ｋ４ ０．７８２　 ０．６５３　 ０．６８５　 ０．８０５　 １．０１９
极差 Ｒａｎｇｅ　 ０．２４０　 ０．３５０　 ０．５２１　 ０．２４３　 ０．６９９
间（１．０±０．２８９）／ｄ，平均生长速度 （１．３１１±
０．０１５　３）／（ｍｍ／ｄ）。因此，组合不在正交组合中，故
以此组合再次进行菌丝生长验证试验，结果菌丝的
萌动时间为１ｄ，平均生长速度为１．３１１ｍｍ／ｄ，略
高于正交表中的最佳组合Ａ２Ｂ２Ｃ１Ｄ４Ｅ３，但差异不显
著，而且与表中的其他较优组合Ａ３Ｂ２Ｃ３Ｄ２Ｅ４和Ａ４
Ｂ２Ｃ３Ｄ１Ｅ４差异也不显著。因此，最优水平组合 Ａ４
Ｂ２Ｃ１Ｄ４Ｅ４与 Ａ２Ｂ２Ｃ１Ｄ４Ｅ３、Ａ３Ｂ２Ｃ３Ｄ２Ｅ４和 Ａ４Ｂ２Ｃ３
Ｄ１Ｅ４均可以作为红托竹荪母种培养基的最优组合，
且菌丝雪白、浓密，有不太明显的轮纹，气生菌丝发
达，且菌丝粗壮饱满、分枝较少，纽结变形的菌丝较
少。
３ 结论与讨论
３．１ 讨论
葡萄糖和果糖均为红托竹荪菌丝生长较为适宜
的碳源。以葡萄糖作为碳源时，菌丝萌动较快且早
期生长速度较快，而后期降低；而果糖作为碳源时，
则萌动较迟，后期生长速度相对较快。而且在正交
试验中两者混合使用的效果较显著，可能是在葡萄
糖和果糖的混合培养基中，菌丝先利用速效的葡萄
糖，此时菌丝中与果糖代谢相关的酶逐渐积累，当葡
萄糖耗尽时，迟效的果糖才继续被菌丝利用。这与
邓攀认为的菌体优先利用葡萄糖，当葡萄糖耗尽后，
才开始利用果糖的碳源代谢阻遏效应相符［１６］。
蛋白胨、硫酸铵和黄豆粉均为红托竹荪菌丝生
长较为适宜的碳源。以蛋白胨作为氮源时，菌丝萌
动较快且前期生长速度也较快，后期生长速度降低，
为速效氮源；而硫酸铵和黄豆粉作为氮源时菌丝萌
动快，生长速度也较为稳定，表现为缓释氮源。虽与
杜昱光等认为蛋白胨和黄豆粉为竹荪生长的最适氮
源相符［１４］，但与有机氮作为微生物迟效氮源［１７］和无
机氮作为微生物速效氮源［１８］有一定的差异。这可
能跟蛋白胨既能为菌丝生长提供氮元素，又能提供
多种必需的生长因子有关。铵盐与硝酸盐相比，铵
盐更有利于红托竹荪菌丝的生长，这与一般真菌对
铵盐的利用要优于硝酸盐的结果一致［１９］。
菌丝生长的最适Ｃ／Ｎ比为２０～２５，最佳Ｃ／Ｎ
比为２３，但在较低和较高Ｃ／Ｎ比条件下，如Ｃ／Ｎ比
为１５和≥２８时，菌丝均较稀疏、纽结并形成菌丝
束，这是否与原基分化前先形成菌索有关［２０］，若有
关系，则在栽培上可以通过改变基质的Ｃ／Ｎ促进原
基的形成，对缩短红托竹荪出菇时间有一定的意义。
ＺｎＳＯ４是红托竹荪菌丝生长最适的无机盐，有促进
红托竹荪菌丝生长的作用，这与有些学者的观点一
致［１４，２１－２３］。
菌丝生长的适宜温度为２２～２８℃，最佳２５℃，
但２８℃的条件下更有利于红托竹荪菌丝的萌动；适
宜ｐＨ　５．５～６．５，最佳ｐＨ为６．０左右；光照会抑制
菌丝的生长发育，避光有利于菌丝的生长发育，与黄
义勇、余海尤等的观点一致［１２，２４］。
天然提取物胡萝卜和鲜松针煮汁有利于竹荪菌
丝的生长，Ｂ族维生素尤其是 ＶＢ１２对菌丝生长作用
明显，而生长调节剂效果不明显［９，１４］；傅伟杰在松口
蘑母钟扩繁的试验中也发现，加菇类菌丝的麦芽汁
培养基最佳［２５］。但在本研究中，天然提取物以竹叶
最好，胡萝卜和松针显著低于对照组试验，这与红托
竹荪的生境相关。而且添加红托竹荪组织煮汁的培
养基对菌丝生长极其不利，尤其是三级种菌丝体煮
汁，其使菌丝体不能萌动甚至死亡，这可能与菌丝分
·１８·
　龚光禄 等　红托竹荪培养基及培养条件优化
　ＧＯＮＧ　Ｇｕａｎｇｌｕ　ｅｔ　ａｌ　Ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｍｅｄｉｕｍ　ａｎｄ　Ｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ　ｏｆ　Ｄｉｃｔｙｏｐｈｏｒａ　ｒｕｂｒｏｖｏｌｖａｔａ
解的某些代谢物有关，其原因还有待进一步探究。
Ｂ族维生素中以 ＶＢ６对菌丝的促进效果最好，其次
是ＶＣ，最差的是ＶＢ１２，添加生长激素尤其是ＩＡＡ对
菌丝的萌动与生长均有显著的效果。
在研究过程中还发现，菌丝在不同培养基中随
着培养时间的延长，菌丝容易发生色变，主要由白色
变为淡红色，且发生了色变的菌丝常表现为菌丝局
部不规则膨胀，菌丝隔膜间距变短，菌丝纽结并相互
缠绕，锁状联合不明显，易失水。这可能与外源刺
激［２６］或菌丝老化等原因有关，有待进一步研究。
３．２ 结论
在单因素基础上确定了影响菌丝生长较大的几
个因素：葡萄糖＋果糖（Ａ）、蛋白胨＋硫酸铵（Ｂ）、竹
叶（Ｃ）、ＶＢ６（Ｄ）和ＩＡＡ（Ｅ），设计了５因素４水平的
正交试验。结果表明，影响红托竹荪菌丝生长的因
素主次关系为Ｅ＞Ｃ＞Ｂ＞Ｄ＞Ａ。并最终获得最优
组合Ａ４Ｂ２Ｃ１Ｄ４Ｅ４，即葡萄糖５ｇ，果糖２５ｇ，蛋白胨
２．５ｇ，硫酸铵２．５ｇ，竹叶２０ｇ（煮汁），ＶＢ６０．１６ｇ，
生长素（ＩＡＡ）１．６ｍｇ，水１　０００ｍＬ。但因这个配方
组合与Ａ２Ｂ２Ｃ１Ｄ４Ｅ３；Ａ３Ｂ２Ｃ３Ｄ２Ｅ４和 Ａ４Ｂ２Ｃ３Ｄ１Ｅ４
差异显著，因此也可以作为红托竹荪菌丝生长的最
佳培养基；并获得了最佳的培养条件为，２８℃刺激菌
丝萌动，２～２．５ｄ后于２５℃避光培养。上述结果也
可用于红托竹荪菌丝液体发酵和菌种生产。在原种
和栽培种的生产上，为了提高效率、降低成本，可以
将竹叶直接加入培养料中混合使用，也可用黄豆粉
代替硫酸铵，因碳源配比是影响最小的因素，还可不
用加入果糖等碳源。
［参 考 文 献］
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（责任编辑：刘忠丽）
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