全 文 ：食用菌学报２０１３．２０（２）：３２～３６
收稿日期：２０１３－０１－３１原稿；２０１３－０３－２１修改稿
基金项目：福建省公益类科研院所项目（编号：２０１１Ｒ１０２４－４）、福州市科技计划项目（编号：２０１１Ｇ９３）、福建省财政
专项［闽财指（２０１１）９７５号］的部分研究内容
作者简介：林陈强（１９７９－），男，２０１１年毕业于福建农林大学，微生物学专业，硕士，助理研究员，主要从事微生物、
食药用菌天然产物研究与开发。
＊本文通讯作者　Ｅ－ｍａｉｌ：ｌｒｂ１６８８８＠ｓｉｎａ．ｃｏｍ
文章编号：１００５－９８７３（２０１３）０２－００３２－０５
棘托竹荪菌盖提取物的抗氧化活性
林陈强，林戎斌＊，陈济琛，张　慧，林新坚
（福建省农业科学院土壤肥料研究所，福建福州３５０００１）
摘　要：分别采用水、乙醇和乙酸乙酯对棘托竹荪（Ｄｉｃｔｙｏｐｈｏｒａ　ｅｃｈｉｎｏｖｏｌｖａｔａ）菌盖活性成分进行提取，结果
表明：乙醇和乙酸乙酯提取物中不含多糖类物质，３种提取物中均含有三萜和黄酮类物质。抗氧化活性检测结
果表明：３种提取物对·ＯＨ、ＤＰＰＨ·、·Ｏ２－清除率以及对Ｆｅ２＋螯合能力均呈量效关系；对·ＯＨ和ＤＰＰＨ·
的清除能力醇提物最强，水提物对·Ｏ２－清除率和对Ｆｅ２＋螯合能力最好。
关键词：竹荪；菌盖；抗氧化活性；活性成分
　　大量的研究发现，衰老及许多疾病均与氧
自由基有着密切关系，如心肌缺血、脑缺血、动
脉粥样硬化、糖尿病、炎症、肿瘤等［１，２］，衰老和
这些疾病可被自由基清除剂等抗氧化物质所改
善，因此抗氧化物质一直受到关注，其中包括真
菌来源的天然抗氧化化合物［３，４］。棘托竹荪
（Ｄｉｃｔｙｏｐｈｏｒａ　ｅｃｈｉｎｏｖｏｌｖａｔａ）隶 属 鬼 笔 科
（Ｐｈａｌａｃｅａｅ）竹荪属（Ｄｉｃｔｙｏｐｈｏｒａ），生长在有大
量竹子残体和腐殖质的竹林地里。竹荪是美味
珍稀的食用菌，同时具有很高的药用开发价值，
它含有多糖等生物活性物质，在抗肿瘤［５］、抗凝
血［２６］、抗氧化［７］、刺激免疫［８］以及降血脂［９］方面
都有一定的疗效。
竹荪可分成可食部分（菌柄和菌裙）和不可
食部分（菌盖和菌托）。商品竹荪只是采收、加
工可食部分，而占子实体鲜重６０％以上的菌盖
和菌托被直接遗弃，造成巨大的资源浪费。以
往对竹荪抗氧化活性作用的报道主要以竹荪菌
柄和菌裙为主，而竹荪菌盖、菌托中活性产物的
研究少见报道［１０］。因此，笔者采用不同溶剂对
棘托竹荪菌盖中的活性产物进行提取，测定其
中粗多糖、总三萜和总黄酮含量，并研究各提取
物其对ＤＰＰＨ·、·ＯＨ、·Ｏ２－的清除效果及对
Ｆｅ２＋的螯合能力，以期寻找棘托竹荪菌盖中有
开发价值的活性物质，为该菌菌盖的开发利用
提供参考。
１　材料与方法
１．１试验材料
　　棘托竹荪（Ｄ．ｅｃｈｉｎｏｖｏｌｖａｔａ）菌球由福建
省顺昌县食用菌办提供。竹荪菌球洗净后放
置试验台上，待其完全开伞后收集竹荪菌盖，
清洗掉菌盖上的孢体，室温下晾干，４ ℃保存
备用。
１．２试剂
　　Ｆｅｒｒｏｚｉｎｅ、ＤＰＰＨ 标准品购于Ｓｉｇｍａ公司；
齐墩果酸、芦丁标准品购于成都曼思特生物科技
有限公司；其它试剂为国产分析纯。
１．３菌盖各提取物制备
　　取晾干（表面干燥无水分）的竹荪菌盖各
５００ｇ，分别加入１Ｌ去离子水、无水乙醇、乙酸
乙酯，匀浆５ｍｉｎ（九阳料理机，ＪＹＬ－Ｄ０５５）。
水提取：８５℃水浴２ｈ；醇提取：６０℃水浴２ｈ，
酯提 取：５０ ℃ 水 浴 ２ｈ。各 提 取 液 过 滤 后
３０００　ｇ离心１５ｍｉｎ，上清液浓缩至１００ｍＬ，
－２０℃保存备用。
１．４提取物浓度测定
　　取干燥皿１１０℃烘干测其重量（ｍ皿），分别
吸取浓缩后的上清液１、２、３、４、５ｍＬ至干燥皿
中，１１０℃完全烘干测其总重（ｍ总），上清液中提
第２期 林陈强，等：棘托竹荪菌盖提取物的抗氧化活性
取物浓度Ｃ（ｍｇ／ｍＬ）＝ （ｍ总－ｍ皿）／ｖ。
１．５竹荪菌盖各提取物中总糖、粗三萜及总黄酮
含量的测定
　　采用硫酸－苯酚法测定各提取物中总糖含
量［１１］。以齐墩果酸作为标准品，参考刘晓珍
等［１２］的方法测定各提取物中粗三萜含量。以芦
丁为标准品，参考杜志云等［１３］的方法测定各提取
物中黄酮含量。
１．６提取物抗氧化活性测定
１．６．１清除·ＯＨ活性
　　将不同提取物浓缩液分别（水提取物以超纯
水稀释，醇提取物及酯提取物以无水乙醇稀释）
稀释至０．５、１、２、４、６、８、１０ｍｇ／ｍＬ，以维生素Ｃ
作为对照，参考Ｓｍｉｒｏｎｆｆ的方法测定提取物对
·ＯＨ的清除率［１４］。
１．６．２清除ＤＰＰＨ·活性
　　将不同提取物浓缩液分别稀释至０．０５、０．１、
０．２、０．４、０．６、０．８、１．０、１．２ｍｇ／ｍＬ，以芦丁作为
对照，参考Ｖａｔｔｅｍ的方法测定提取物对ＤＰＰＨ·
的清除率［１５］。
１．６．３清除·Ｏ２－活性
　　将不同提取物浓缩液分别稀释至０．５、１、２、
４、６、８、１０、１２ｍｇ／ｍＬ，以维生素Ｃ作为对照，参
考徐怀德等的方法测定提取物对·Ｏ２－ 的清
除率［１６］。
１．６．４对Ｆｅ２＋螯合能力
　　将不同提取物浓缩液分别稀释至０．５、１、２、
４、６、８、１０、１２ｍｇ／ｍＬ，以ＥＤＴＡＮａ作为对照，参
考董怡等等的方法测定提取物对 Ｆｅ２＋ 的螯合
能力［１７］。
２　结果与分析
２．１提取物中不同成分含量
　　菌盖不同提取物中各类成分（总糖、粗三萜、
总黄酮）含量不同（表１）。水提取物中总糖含量
为２６２．２ｍｇ／ｇ，醇提取物和酯提取物中不含糖；
粗三萜含量依次为乙酸乙酯提取物＞乙醇提取
物＞水提取物；总黄酮含量为乙醇提取物＞水提
取物＞乙酸乙酯提取物，乙酸乙酯提取物中黄酮
含量很少。
表１　竹荪菌盖各粗提物不同成分含量
Ｔａｂｌｅ　１　Ｔｏｔａｌ　ｓｕｇａｒ，ｃｒｕｄｅ　ｔｒｉｔｅｒｐｅｎｏｉｄ　ａｎｄ　ｔｏｔａｌ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄ　ｌｅｖｅｌｓ　ｉｎ　ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｏｆ　Ｄ．ｉｎｄｕｓａｔａ　ｐｉｌｅｉ
提取物
Ｅｘｔｒａｃｔ
总糖
Ｔｏｔａｌ　ｓｕｇａｒ（ｍｇ／ｇ）
粗三萜
Ｃｒｕｄｅ　ｔｒｉｔｅｒｐｅｎｏｉｄｓ（ｍｇ／ｇ）
总黄酮
Ｔｏｔａｌ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ（ｍｇ／ｇ）
水提取物
Ａｑｕｅｏｕｓ
２６２．２±２２．２　 ７１．４±１１．４　 １３６．５±１７．４
乙醇提取物
Ｅｔｈａｎｏｌｉｃ
ＮＤ　 ２７１．３±１８．９　 １５１．１±１５．３
乙酸乙酯提取物
Ｅｔｈｙｌ　ａｃｅｔａｔｅ
ＮＤ　 ４８０．７±３１．９　 ２．７±１．１
ＮＤ：未检测到　ＮＤ：ｎｏｔ　ｄｅｔｅｃｔｅｄ
２．２抗氧化活性
２．２．１清除·ＯＨ活性
　　各提取物对·ＯＨ 均有清除作用（图１），且
基本表现量效正相关，其中醇提取物活性最高，
与Ｖｃ接近，酯提取效果最差。
２．２．２清除ＤＰＰＨ·活性
　　不同浓度的提取物对ＤＰＰＨ·的清除效果
见图２。各提取物对ＤＰＰＨ·均有清除作用，且
基本表现量效正相关，其中醇提取物活性最强，
较高浓度的活性高于芦丁，其余依次为酯提取物
和水提取物。
２．２．３清除·Ｏ２－的活性
　　各提取物对超氧自由基·Ｏ２－均有清除作用
图１　各提取物对·ＯＨ的清除率
Ｆｉｇ．１　·ＯＨ　ｒａｄｉｃａｌ－ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　Ｄ．ｉｎｄｕｓａｔａｅｘｔｒａｃｔｓ
３３
食　用　菌　学　报 第２０卷
图２　各提取物对ＤＰＰＨ·的清除率（％）
Ｆｉｇ．２　ＤＰＰＨ·ｒａｄｉｃａｌ－ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ
Ｄ．ｉｎｄｕｓａｔａｅｘｔｒａｃｔｓ
（图 ３），其 中 水 提 取 物 效 果 最 佳；浓 度 为
１０ｍｇ／ｍＬ时，各个提取物对·Ｏ２－清除率均达
到９０％以上。
图３　各提取物对·Ｏ２－的清除率
Ｆｉｇ．３　·Ｏ２－ｒａｄｉｃａｌ－ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ
Ｄ．ｉｎｄｕｓａｔａｅｘｔｒａｃｔｓ
２．２．４对Ｆｅ２＋螯合能力
　　各提取物对Ｆｅ２＋均有螯合作用（图４），当浓
度低于６ｍｇ／ｍＬ时表现量效正相关；螯合能力
最强的为水提物（浓度６ ｍｇ／ｍＬ 时，螯合率
８６％），其次是醇提物、酯提物。
３　讨论
　　竹荪（Ｄ．ｅｃｈｉｎｏｖｏｌｖａｔａ）中含多种活性成
图４　各提取物对Ｆｅ２＋的螯合率
Ｆｉｇ．４　Ｆｅ２＋ｃｈｅｌａｔｉｎｇ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　Ｄ．ｉｎｄｕｓａｔａｅｘｔｒａｃｔｓ．
分，多 糖、酮 类、半 萜、酚 类、烯 烃 等 化 合
物［１８，１９］，其中有些成分已确定具有一定的抗氧
化作用，如杨海龙等［３］报道短裙竹荪多糖具有
清除超氧阴离子自由基的作用，能抑制人红细
胞膜的脂质过氧化。袁广峰等［２０］采用石油
醚、乙酸乙酯和乙醇分别对液体培养的茶薪菇
（Ａｇｒｏｃｙｂｅ　ｃｙｌｉｎｄｒａｃｅａ）菌丝体和培养液进行抽
提或萃取，结果表明石油醚、乙酸乙酯和乙醇
提取物中均含有三萜类物质，并具有较高的抗
氧化活性。黄酮类这类化合物具有多种生物
活性，例如：抗菌、抗病毒，抗肝脏毒，抑制脂质
过氧化，抗血小板凝集，防止毛细管渗透，抗氧
化和清除自由基的作用［２１］。
本文研究表明：竹荪菌盖含有多糖、黄酮、
三萜等多种抗氧化活性物质，且竹荪菌盖水提
物、乙醇提取物、乙酸乙酯提取物对 ＤＰＰＨ·、
·ＯＨ、·Ｏ２－均有清除作用，对Ｆｅ２＋具有螯合
作用，且均呈明显的量效关系。
在实验浓度范围内，对·ＯＨ 和 ＤＰＰＨ·
的清除能力，相比而言醇提物最强，水提物对
·Ｏ２－清除率和对Ｆｅ２＋螯合能力最好，不同提
取物在不同的抗氧化测试模型中体现的活性
强弱不同，可能与各提取物中含有不同类型的
抗氧化活性成分或同类型活性成分但含量不
同等因素有关，需进一步分离纯化得到单一化
合物以明确提取物中各活性成分抗氧化的作
用机理。
４３
第２期 林陈强，等：棘托竹荪菌盖提取物的抗氧化活性
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５３
食　用　菌　学　报 第２０卷
Ｒａｄｉｃａｌ　Ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇａｎｄ　Ｆｅ２＋ＣｈｅｌａｔｉｎｇＡｃｔｉｖｉｔｉｅｓ
ｏｆ　Ａｑｕｅｏｕｓ，Ｅｔｈａｎｏｌｉｃ　ａｎｄ　Ｅｔｈｙｌ　Ａｃｅｔａｔｅ　Ｅｘｔｒａｃｔｓ
ｏｆ　Ｄｉｃｔｙｏｐｈｏｒａ　ｅｃｈｉｎｏｖｏｌｖａｔａ　Ｐｉｌｅｉ
ＬＩＮ　Ｃｈｅｎｑｉａｎｇ，ＬＩＮ　Ｒｏｎｇｂｉｎ，ＣＨＥＮ　Ｊｉｃｈｅｎ，ＺＨＡＮＧ　Ｈｕｉ，ＬＩＮ　Ｘｉｎｊｉａｎ＊
（Ｔｈｅ　Ｓｏｉｌ　ａｎｄ　Ｆｅｒｔｉｌｉｚｅｒ　Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｆｕｊｉａｎ　Ａｃａｄｅｍｙ　ｏｆ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｆｕｚｈｏｕ，Ｆｕｊｉａｎ　３５０００１，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｈｏｔ（８５℃）ａｑｕｅｏｕｓ，ｅｔｈａｎｏｌｉｃ　ａｎｄ　ｅｔｈｙｌ　ａｃｅｔａｔｅ　ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｏｆ　Ｄｉｃｔｙｏｐｈｏｒａ　ｅｃｈｉｎｏｖｏｌｖａｔａ　ｐｉｌｅｉ　ｗｅｒｅ
ａｓｓｅｓｓｅｄ　ｆｏｒ　ｔｏｔａｌ　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ，ｃｒｕｄｅ　ｔｒｉｔｅｒｐｅｎｏｉｄ　ａｎｄ　ｔｏｔａｌ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄ　ｃｏｎｔｅｎｔ．Ｔｒｉｔｅｒｐｅｎｏｉｄｓ，ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ
ａｎｄ　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ　ｗｅｒｅ　ｐｒｅｓｅｎｔ　ｉｎ　ａｌ　ｔｈｒｅｅ　ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｂｕｔ　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ　ｗｅｒｅ　ｄｅｔｅｃｔｅｄ　ｏｎｌｙ　ｉｎ　ｔｈｅ　ａｑｕｅｏｕｓ
ｅｘｔｒａｃｔｓ．Ａｌ　ｔｈｒｅｅ　ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｅｘｈｉｂｉｔｅｄ　ｄｏｓｅ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ　ＤＰＰＨ·，Ｏ２－ · ａｎｄ ·ＯＨ　ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ，ａｎｄ　Ｆｅ２＋
ｃｈｅｌａｔｉｎｇ，ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ．Ｅｔｈａｎｏｌｉｃ　ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｅｘｈｉｂｉｔｅｄ　ｈｉｇｈｅｓｔ　ＤＰＰＨ·ａｎｄ·ＯＨ　ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ，ｗｈｅｒｅａｓ
ａｑｕｅｏｕｓ　ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｗｅｒｅ　ｍｏｓｔ　ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ　ｉｎ　ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ·Ｏ２－ａｎｄ　ｃｈｅｌａｔｉｎｇ　Ｆｅ２＋．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｄｉｃｔｙｏｐｈｏｒａ　ｅｃｈｉｎｏｖｏｌｖａｔａ；ｐｉｌｅｕｓ　ｅｘｔｒａｃｔ；ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　ａｃｔｉｖｉｔｙ；ｂｉｏａｃｔｉｖｅ　ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ
［本文编辑］　朱丽娜
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