全 文 :第 26卷第 1期 西 南 农 业 大 学 学 报 (自然科学版) Vol.26 ,No.1
2004年 2月 Journal of Southwest Agricultural University(Natural Science) Feb.2004
文章编号:1000-2642(2004)01-0058-03
花叶绿萝的多倍体诱导及快速繁殖①
张兴翠
(西南农业大学 农学及生命科学学院 ,重庆 400716)
摘要:为改良现有的绿萝栽培品种 , 丰富遗传育种资源。在无菌条件下 , 将丛生芽浸入 0.05%, 0.1%, 0.2%, 0.5%秋
水仙素水溶液中 1 d , 然后转入MS+3 mg·L–16-BA+0.2 mg·L–1NAA 中培养。培养30 d后 , 4 种处理都诱导出了变异
芽 , 通过根尖细胞染色体检测 , 变异芽为四倍体或嵌合体 , 其中以浓度为 0.2%的秋水仙素溶液浸泡处理效果最好 ,
得到的变异芽 71%为纯合的四倍体 , 其染色体数量由 58(2n=2x=58)变为 116(2n=4x=116)。
关 键 词:花叶绿萝;多倍体;快速繁殖
中图分类号:S 682.39 文献标识码:A
RAPID PROPAGATION AND POLYPLOIDY INDUCTION IN
SCINDAPSUS AURUS CV.WILCOXII
ZHANG Xing-cui
(College of Agronomy and Life Science , Southwest Agricultural University , Chongqing 400716 , China)
Abstract:Under aseptic conditions , caespitose shoots of Scindapsus aurus were dipped in 0.05%, 0.1%, 0.2% and 0.5% colchicine solutions
for 1 day and then transferred to MS + 6-BA 3 mg/L +NAA 0.5 mg/ L.Thirty days later shoots were successfully induced in all the four
treatments.Examination of the chromosomes of the root tip cells of the regenerated plantlets revealed that they were either tetraploids or chimeras.
Treatment with colchicine solution at 0.2% for 1 day gave the best results and 75% of the variant buds obtained were tetraploids with a chromo-
some number of 116(2n=4x=116)as compared to the diploid counterparts(2n=2x=58).
Key words:Scindapsus aurus cv.Wilcoxii;polyploidy;rapid propagation
绿萝(Scindapsus aurus)又称石柑子 ,为天南星科
绿萝属常绿大型攀援藤本植物[ 1] ,原产所罗门群岛 ,
在热带地区常攀援生长在雨林的岩石和树干上 ,可长
成巨大的藤本植物。是优良的室内观叶植物 ,叶面有
较厚的角质层 ,能适应室内干燥的环境条件。茎细长
而下垂 ,叶片心形 、光亮而呈嫩绿色 。园艺变种花叶
绿萝 cv.Wilcoxii ,叶片有黄色斑纹 ,观赏效果甚好;玛
伯王后 cv.Mwrble Queen ,叶片几乎成乳白色 ,上面有
绿色斑点。多作盆栽悬垂观叶植物或制成图腾柱式
品种。喜欢湿热的环境条件 , 冬季室温不宜低于
15℃,否则 ,叶片枯黄脱落 。为了使花叶绿萝更具观
赏价值和增强其对环境的适应性 ,我们对其进行多倍
体诱导 。以期获得优良抗寒品种 ,同时为加速繁殖对
其组织培养快速繁殖技术进行研究 。
1 材料与方法
以园艺变种花叶绿萝为试验材料。
1.1 愈伤组织诱导
选取旺盛生长无病虫害花叶绿萝幼嫩枝条 ,在自
来水下冲洗 30 ~ 60 min ,用 70%酒精消毒 30 ~ 60 s ,
再放入 0.1%升汞水溶液中灭菌 10 min ,然后用无菌
① 收稿日期:2003-06-09
基金项目:重庆市农委资助项目
作者简介:张兴翠(1964-),女 ,四川彭州人,西南农业大学副研究员 ,从事药用植物栽培育种研究。
DOI :10.13718/j.cnki.xdzk.2004.01.015
水清洗3 ~ 5次 ,无菌状态下剥取 0.5 ~ 1.0 mm 的茎
尖接入下述各组培养基中培养:
1.MS+0.5 mg ·L-16-BA+0.2 mg·L-1NAA
2.MS+0.5 mg·L-16-BA+0.5 mg·L-1NAA
3.MS+1 mg·L-16-BA+0.2 mg·L-1NAA
4.MS+1 mg·L-16-BA+0.5 mg·L-1NAA
5.MS+3 mg·L-16-BA+0.2 mg·L-1NAA
6.MS+3 mg·L-16-BA+0.5 mg·L-1NAA
7.MS+5 mg·L-16-BA+0.2 mg·L-1NAA
8.MS+5 mg·L-16-BA+0.5 mg·L-1NAA
1.2 继代增殖
将丛生芽分切转植 ,也可将肿胀的茎基部连同瘤
状的愈伤组织横切或纵切(指按茎伸长的方向)成片
状 ,插入 1.1所述的 8种培养基中培养。
1.3 生根培养
切割 2叶或 3叶的丛生芽 ,转入 1/2 MS 的培养
基中培养 。或者将 2叶和 3叶的丛生芽 ,在自然光条
件下炼苗 7 ~ 15 d ,直接插入腐殖土或沙壤土中 。
1.4 多倍体诱导方法
将丛生芽浸入0.02%,0.05%,0.1%,0.2%和0.
5%的秋水仙素水溶液中 24 h[ 2] ,然后再将这些处理
过的材料转入分化培养基 MS+3 mg·L-16-BA+0.2
mg·L-1NAA中 ,促使其丛生芽分化。
1.5 染色体检测方法采用去壁低渗法[ 3]
2 研究结果
2.1 愈伤组织诱导
培养 50 ~ 60 d后 ,8种培养基中的茎尖均不同程
度膨大 ,形成愈伤组织。切割愈伤组织转入 MS+3
mg·L-1 6-BA+0.2 mg·L-1NAA中培养 30 ~ 40 d ,在
切块表面形成无数瘤状的愈伤组织块 ,继续培养在瘤
状愈伤组织表面分化出绿色的不定芽(见图 1)。切
割不定芽转入 MS +3 mg·L-16-BA +0.2 mg·L-1
NAA中培养 ,不定芽基部愈伤组织很快增大 ,并不断
分化产生大量的丛生芽。
表 1 增殖培养结果表
Table 1 Rusult of multiplication culture
培养基 1 2 3 4 5 6 7 8
接种芽数/个 10 10 10 10 10 10 10 10
新增芽数/个 34 33 41 43 55 58 67 66
增殖倍数 3 3 4 4 6 6 7 7
苗 态 粗壮 粗壮 粗壮 粗壮 健壮 健壮 细小 细小
2.2 继代增殖
将丛生芽分切转植 ,约经 40 d培养 ,可以再分化
出许多芽来(见图 2),从表 1结果可以得出 ,最适增
殖培养基为MS+3 mg·L-16-BA+0.5 mg·L-1NAA。
增殖得苗较多后可不必切得过细 ,按芽切块或 2 ~ 3
芽一丛即可 。苗长大到有 2 ,3片小叶时 ,可切下转到
生根培养基上 ,或直接炼苗移栽 。
图 1 瘤状愈伤组织
Fig 1 bulmp-callus
图 2 丛生芽的分化
Fig 2 differentiation of bunch bud
2.3 生根培养
将 2 ,3叶的丛生芽 ,转入 1/2 MS 的培养基中培
养 ,10 ~ 15 d后在基部节间萌生 1 ~ 3条浅绿色的健
壮根。或者将 2 ,3叶的丛生芽 ,切割后直接插入腐殖
土或沙壤土中均能顺利生根。
2.4 过渡移栽
在工厂化生产绿萝种苗过程中 ,丛生芽增殖到一
定数量 ,就可进行过渡移栽 。绿萝无菌苗像花叶芋 、
龟背竹等其他天南星科植物的幼苗那样 ,很易成活 ,
也较耐污染 。移植时一般都有健壮根 1 ~ 3条 ,对生
长很有利 。无根苗精心管理成活率也可达 90%左
右 。
2.5 诱导结果
诱导结果见表 2 ,从表 2结果看 ,以 0.2%的秋水
59第 26卷第 1期 张兴翠 花叶绿萝的多倍体诱导及快速繁殖
仙素溶液浸泡丛生芽的处理的诱导率高(14%),且纯
合四倍体植株的比例最大(5∶2)。四倍体植株形态
特征表现为叶片增厚 、叶色浓绿 、植株矮壮 、根系肥大
等 ,经根尖细胞染色体制片检测 ,具有以上形态特征
的幼苗的染色体数目由 2 n=2 x=58(见图 3)变成了
2 n=4 x=116(见图 4)。
将具有四倍体特征的幼苗茎尖转入增殖培养基
中 ,均能分化出大量四倍体无菌苗。移栽入土后 ,也
保持原有形态变异特征。
表 2 花叶绿萝多倍体诱导结果表
Table 2 Result of polyploidy induction of cv.Wilcoxii
浓度/ % 检测苗数/个
变 异数 / 个
4 x 嵌合体 变 异率/ % 4x∶嵌合体 4x 诱导率/%
0.02 50 0 0 0 0∶0 0
0.05 50 1 4 10 1∶4 2
0.1 50 3 3 12 1∶1 6
0.2 50 5 2 14 5∶2 10
0.5 30 2 0 7 2∶0 7
图 3 二倍体花叶绿萝的染色体
Fig 3 chromosome of diploid cv.Wilcoxii
图 4 四倍体花叶绿萝的染色体
Fig 4 chromosome of tetraploid cv.Wilcoxii
3 结论与讨论
3.1 绿萝的茎尖能用组织培养方法诱导成苗 。这种
方法在繁殖材料较少和优良新品种加速繁殖时有其
特殊意义。
3.2 利用秋水仙素作诱导剂 ,在无菌条件下采用浸
泡处理可培养出四倍体 。其中以丛生芽浸入 0.2%
秋水仙碱溶液 1 d效果最好 ,诱导率为 14%,纯合体
比例为 5∶2 ,且四倍体的植物形态正常 ,表现出多倍
体的巨大性 。
3.3 多倍化在其他(如母菊 Matricaria thamomilla 、曼
陀罗 D.stramonium 等)许多植物上培育出了具有有
利生物学特性的新品种[ 4] ,获得了成分含量高 、抗性
和适应性强的遗传新材料 。绿萝四倍体的植物形态 、
根尖染色体数目方面 ,显示出了多倍体特征。移栽至
田间后 ,有望培育出抗寒力强 、观赏价值更高的优良
新品种绿萝 。通过这种试管内诱导四倍体的方法 ,可
在试管内大量繁殖 ,因此能在短期内繁育出大量四倍
体绿萝新品种。
参考文献:
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[ 4] 乔传卓 , 崔 熙.药用植物多倍体的作用[ J] .中药材科
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