全 文 ：Chenmical Intermediate
当代化工研究136 生物制药与研究 2016·08
金丝草的总黄酮富集工艺研究
ＯＯ 朱ＯＯＯ迪
（常州卫生高等职业技术学校ＯＯ江苏ＯＯ213000）
摘要：金丝草Pogonatherum crinitum (Thunb.)Kunth系禾本科金发草属植物，该植物具有良好的降血糖作用，为了开发利用该植物，我们对其全
草进行了黄酮成分的富集工艺研究探索。
关键词：金丝草；黄酮含量；提取工艺
中图分类号：T 文献标识码：A
Research on Flavone Gathering Thechnology of Pogonatherum Crinitum (Thunb.)Kunth
Zhu Di
（Changzhou Health Higher Vocational and Technical School, Jiangsu, 213000）
Abstract：Pogonatherum crinitum (Thunb.)Kunth is the grass family blond grass plant, and it has good hypoglycemic effect, in order to
develop and utilize this plant, we have taken research on the gathering thechnology of its whole herb’s flavonoid content.
Key words：Pogonatherum crinitum (Thunb.)Kunth；flavonoid content；extraction process
1.金丝草黄酮类成分不同提取工艺的研究
(1)不同浓度乙醇提取
①精密称取金丝草粉末10.00g，用70%乙醇热回流提
取，提取3次，每次1.5小时，合并提取液，回收乙醇至浸膏
状，于水浴上挥干乙醇，用蒸馏水热溶，过滤。滤液用石油
醚萃取三次，于水浴上挥干水层中的石油醚，用水饱和正丁
醇萃取至正丁醇层近无色，合并水饱和正丁醇层，回收正丁
醇至干，用30%乙醇溶解，稀释至50ml。
②精密称取金丝草粉末10.00g，用90%乙醇热回流提
取，按a项方法提取。
流程图：
金丝草粉末
70%乙醇提取
90%乙醇提取
合并乙醇，回收至干
石油醚提取
挥干水层中
的石油醚
水饱和正丁醇萃取弃去水层
合并正丁醇，回收至干，30%乙醇溶解，稀释至50ml，
得样液。
(2)不同提取工艺提取
①金丝草200g，粉碎后用70%乙醇热回流提取3次，
每次1.5小时，合并提取液，回收乙醇至浸膏状，至蒸发皿
中挥干乙醇，用蒸馏水热溶，离心得澄清液，经大孔树脂
分离，用水、30%乙醇、70%乙醇、90%乙醇洗脱，收集
30%、70％乙醇洗脱液，回收乙醇至干，得4.0g30%乙醇
部分浸膏，1.2g70%乙醇部分浸膏。
流程图：
金丝草200g
粉碎后工业乙醇
提取，回收乙醇
浸膏
适量蒸馏水热溶
水不溶物
水层
离心
澄清液
大 孔
树脂
水部分
30%乙醇部分
70%乙醇部分
90%乙醇部分
回收乙醇至干
回收乙醇至干
4.0g
1.4g
②金丝草200g，粉碎后用70%乙醇热回流提取3次，每
次1.5小时，合并提取液，回收乙醇至浸膏状，至蒸发皿中
挥干乙醇，用蒸馏水热溶，趁热过滤，用石油醚萃取3次，
于水浴上挥干水层中的石油醚，用水饱和正丁醇萃取水层
至水饱和正丁醇层近无色，合并正丁醇液，回收至干，用
30%乙醇溶解，至蒸发皿挥干乙醇，得干浸膏8.5g。
2.黄酮类成分的含量测定
(1)制备
①对照品溶液的制备
精密称取芦丁标准品5.20mg，溶于60%乙醇，定容
25ml，完全转移25ml至50ml量瓶中，加水稀释至刻度，得
浓度为0.10mg/ml的芦丁对照品溶液。
②供试品溶液的制备
A.不同浓度乙醇提取所得样液的供试品溶液的制备
分别将70%和90%乙醇提取药材所得的样液过滤，精
密量取续滤液2ml于50ml量瓶中，用30%乙醇稀释定容至刻
度，得供试品溶液。
B.不同工艺所得样品的供试品溶液的制备
a.精密量取金丝草提取所得黄酮干燥粉末50.00mg，溶
于30%乙醇中，定容50ml，过滤，精密量取续滤液2.5ml于
25ml量瓶中，用30%乙醇定容，得供试品溶液。
b.精密量取 金丝草提取所得黄酮干燥粉末50.00mg，溶
于30%乙醇中，定容50ml，过滤，精密量取续滤液2.5ml于
25ml量瓶中，用30%乙醇定容，得供试品溶液。
(2)含量测定
①标准曲线的绘制
分别精密吸取对照品溶液0，1.0，2.0，3.0，4.0，
5.0ml于10ml量瓶中，精密加入5%亚硝酸钠溶液和10%硝
酸铝溶液各0.3ml，放置10min，分别加1mol/LNaOH溶液
4ml，用30%乙醇稀释至刻度，摇匀，放置15min，于
510nm处测吸收度。以浓度(mg/ml)为横坐标，吸光度
137生物制药与研究 Chenmical Intermediate当代化工研究2016·08
( A ) 为 纵 坐 标 绘 制 标 准 曲 线 ， 见图5-1。其回归方程为
A=10.413C-0.0047，r=0.9992，表明在0.0104～0.0520mg/ml
浓度范围内吸光度与浓度有良好的线性关系，见表1。
序号 1 2 3 4 5
浓度C(mg/ml) 0.0104 0.0208 0.0312 0.0416 0.0520
吸收度 A 0.110 0.209 0.314 0.424 0.544
表1 对照品标准曲线
0.6
0.5
0.4
0.3
0.2
0.1
0
0.060.050.040.03
c（mg/ml）
0.020.010
A
图5-1 对照品标准曲线
②不同浓度乙醇提取所得样液中黄酮类成分的含量测定
分别精密量取用70%和90%乙醇提取药材后所制备的
供试品溶液2，3，4ml于10ml量瓶中，按2.2.1方法测吸收度
③不同提取工艺所得样品中黄酮类成分的含量测定。
分别精密量取按不同提取工艺所制备的供试品溶液3，
4，5ml于10ml量瓶中，按2.2.1方法测吸收度。
(3)实验结果
①不同浓度乙醇提取药材对半成品中黄酮类成分得率的
影响
乙醇浓度
(%)
取样体积
(ml)
吸收度
A
浓度
(mg/ml)
得率
(%)
平均得率
(%)
70
2 0.247 0.02417 1.51
1.443 0.348 0.03387 1.41
4 0.463 0.04492 1.40
90
2 0.217 0.02129 1.33
1.323 0.326 0.03176 1.32
4 0.430 0.04174 1.30
表2 不同浓度乙醇提取药材对半成品中黄酮类成分得率的影响
②不同提取工艺对半成品中黄酮类成分含量的影响
提取工艺
取样体积
(ml)
吸收度
A
浓度
(mg/ml)
含量
(%)
平均含量
(%)
大孔树脂
30%乙醇
部分
3 0.138 0.01370 45.68
44.634 0.179 0.01764 44.10
5 0.225 0.02206 44.12
大孔树脂
70%乙醇
部分
3 0.136 0.01351 45.04
43.384 0.174 0.01716 42.90
5 0.215 0.02110 42.20
提取工艺
取样体积
(ml)
吸收度
A
浓度
(mg/ml)
含量
(%)
平均含量
(%)
正丁醇萃
取部分
3 0.127 0.01265 42.16
40.164 0.161 0.01591 39.78
5 0.196 0.01927 38.55
表3 不同提取工艺对半成品中黄酮类成分含量的影响
③不同提取工艺对半成品中黄酮类成分得率的影响
提取工艺
大孔树脂30%乙
醇部分
大孔树脂70%
乙醇部分
正丁醇萃取
部分
得率(%) 0.89 0.30 1.70
表4 不同提取工艺对半成品中黄酮类成分得率的影响
④研究结论
A.用70%乙醇提取所得半成品得率比用90%乙醇提取
的高，而且提取过程中可见90%部分呈墨绿色，含较多的
叶绿素，建议用70%乙醇提取金丝草药材；
B.2.2a提取工艺所得半成品中黄酮类成分含量比2.2b提
取工艺略高，虽然2.2a提取工艺通过大孔树脂分离，可以有
效去除杂质，但是黄酮成分的得率2.2b提取工艺明显比2.2a
提取工艺，因此为了更多的富集黄酮，建议用2.2b提取工艺
提取金丝草药材，即用正丁醇萃取总黄酮得率比较高。
(4)结论探讨
①该含量测定的方法是根据《药典》2015版一部中规
定的方法检测，原理铝离子与黄酮类化合物作用后生成了黄
色络合物，黄色的深浅与黄酮含量成一定的比例关系，可做
定量检测。
②实验证明了用70%乙醇提取比用90%乙醇提取黄酮
的得率更高。可能因为金丝草黄酮类成分中含较多苷类，
含水量高的乙醇溶液有利于对苷类的提取。色素是脂溶性物
质，易溶于含水量低的溶剂，90%乙醇含水量低，提取了较
多的色素。
③通过正丁醇萃取的黄酮得率比较高，在文献中也能发
现禾本科植物黄酮主要集中在正丁醇部位，尤其是大量的黄
酮碳苷。
参考文献
[1]中华人民共和国药典委员会编.中华人民共和国药典2015版(一
部).北京化学工业出版社.
[2]中国科学院上海药物研究所编著.中草药有效成分提取与分离.上
海科学技术出版社:103.
•【作者简介】朱迪（1983~），女，常州卫生高等职业技术学校，研究方向：生药学。