全 文 :第1 0卷 第 2期 畜 牧 兽 医 学 报
1 97 9年 2 0月 A C TA V E T ER I NA R IA E T Z 0 0C T E H NI C A S I NI C A
V o l
.
x o票 N o。 2
o
e t里 1 7 9 9
羊红擅 ( P im p in e ]la t h e llt , n g ia n a w o lf f )
对马驴催情作用的初步研究 ’
袁福汉 刘以训 李树民
(陕西省畜收兽医研究所 ) (中国科学院动物研究所内分泌室 )
张惠民 肖莉莉 董云香
(白水县畜牧兽医站 ) (渭南地区畜收兽医站 )
提 要
在本实验里选用 T有卵巢疾病的 9匹 马和 6头驴 ,按每百公斤体重投药75 克 ,
隔 日一剂 , 连服五 剂为一疗程 , 无效者再服药一 疗程 。 在服药期间每 2 一 4 日
作一次直肠检查 , 同时采血作雌二醉放射免疲测 定 。 初步实验结果表明 , 15 例
受试 马驴服药后 , 其中 14 例 的卵巢功 能有显著改变 , 滤泡开始发育 , 最终 出现
发情和排卵。 血中雌二醉则定结果表明 , 服药后其激素水平逐渐上升 , 在排卵
前 2 4一 48 小 时达到高峰 。 其峰值 变动范围 , 马为 8 。 6一 29 . l p g /m l( 平均 1 6 . 4 士
3 p g / m l ) , 驴 为 4 . 3一 5 3 . 2 p g /m l (平均 2 1 . 4 9 士 9 . 0 0 p g / m l ) 。
初 步实验证明 , 羊红腹有类似于促性腺激素的功能 。 其作用途径是 否经过
垂体作用于卵巢还不清楚 , 需迷一 步实验证明 。
近年来有些实验指出 , 草药 “ 羊红腋 ” 有促进家畜卵巢功 能 的 效 果 〔 ` ’ “ ; “ ’ 。 在家
畜不育症中 , 卵巢功能失常 (或功能降低 ) 较为常见 , 不少卵 二巢静止或滤泡萎缩 , 因而
停止发情 。 据初步统士卜这种不育症约占马驴母畜的 17 。 7% , 严重影响家畜的繁殖 。
四年来伐们用羊红擅在 19 1头 (匹 ) 大家育中进行了促发情实验 , 获得了良好结果 。 受
试马共 1 1 1匹 , 其中发情排卵者 9 6匹 ( 8 6。 4% ) , 驴 3 5头 , 排卵发情者 3 1头 【” l , 黄牛 3 1
头 , 发情排卵者 25 头 ( 8 0 。 6% ) ; 奶牛 14 头 , 发情排卵者 13 头 ( 93 % ) 。 为 了进一步确定该
药的功能 , 我们对九匹马和六头驴的卵巢滤泡发育和血液中雌二醇的变化进行了研究 。
一 、 试验材料和方法
1
、 药物 : 草药 “ 羊红腹 ” 系伞形 科 简 芹 属 缺 刻 叶 茵芹 ( iP m p i n el la t h e -
n u n ig a n a)
, 多年生草本植物 。 产于我国陕西 、 黑龙江 、 吉林 、 山西 、 河北 、 内 蒙 、
. 本丈承米致一教授指教 , 特以玫扮 . 乃冲赵 性毛 、 马玉军同志带助浏定样品 : 在此表示 感讲 .
10 8 畜 牧 兽 医 学 报 功卷
山东、 广东 、 台湾海峡等地 。 经西北植物研究所初步分析 ! ` ’ , 草药主要含有黄酮 类 ,
香油精类 、 幽体 、 芳香油 、 糖等成分 , 正待进一步鉴定 。 本实验所用药物采挖于陕西宜
君县旗盘公社 。 将根和嫩叶晒干 , 用粉碎机粉碎 , 装缸备用 。
2
、 受试马驴 : 受试母畜均属农区马驴 , 已有 ”一 18 月的不琴精历史。 ` 舍饲 、 饲草以麦秸为主 , 加少量首着或野青草 , 饲料以玉米大麦为主 、 日标准 ` 1一 3斤 , 多数仅
有轻度使役 。 用舞前经湘夫以五的连襄鲡瘫 ; 琴有当卵篡好静止 , 萎缩而无滤泡发育者作为实验对象 。
3
、 给药方法 : 羊红遭粉末 , 按每百公斤体重 75 克 , 开水浸泡 , 胃管一次投服 , 隔
日一剂 , 连服五剂 , 停药观察检查 1 天 , 即 20 天为一疗程 。 无效者再服一个疗程 , 最多
两个疗程 。 在用药期间发现卵巢出现滤泡发育者仍续继按疗程给药 , 若有排卵者 、 即停
止给药 。
4
、 直肠检查和护理 L 愉疗期间一般 2— 4 天作一次直肠检查 , 必要时一日可检查 2一 3 次 , 治疗期间饲料标准 , 使役等均与治疗前一样 。与 、 取血 : 一般在服药前 , 服药后每四天 , · 滤泡发育过程中 , 排卵 及 排 卵后数小
时 , 排卵后 3 天分别由颈静脉常规取瓜 离心后将血清储存于低温冰箱 。
6一 岭二醉放射免瘫落定: .1 5毫升马血清加 7 . 5毫升二氯甲烷在震荡器上提取 15 分
钟 , 离心 (4 。0Q转 /分 ) 15 分钟 , 弃上液 , 把下面的提取液倒入试管内 , 在 45 ℃— 50 ℃水浴中荞发于终, 加适晕P B S缓冲液使其溶解 , 其雌二醇含量按我们以前报导过的放射
免疫方法进行测定 f`二。 ’ 。
二、 ’ 实 验 结 一 果
在 15 例受试马驴 ( 马 9 匹 , 驴 6 头 ) 中 , 服药后 , 其中 14 例 (只有一匹马例外 ) 的
卵巢功能有显著改变 , 滤泡开始发育 , 最终出现发情和排卵 , 结果见表 1 。
表 1 羊红破对马驴的催情作用
: 实瘾 , …一
~
蔚丽沪止一 ,一代两 万焉赢孵茹一(一个疗程 ) } (两个疗程 )一 马一 ! 。西- - -一一 - - -一一石一一 ’ 下一一 。 一 - - - - 一驴 { 6 头 6 . 1
表 1还说明服药疗程及剂数对促发情的效果 。 ’ 从表中可见 , 在第一服药疗程 ( 4 一
6荆 ) 中发情者一占71 。 4% , 在第一疗程未发情而再服药的一个疗程中发情者占2 8 。 6% 。
羊红殖对数种卵巢疾病的治疗效果列于表 2 。
表 2 单红彼对不同娜撰库病的促发情效果
静 止
发情头数 无效头数
一聋甲色一一~ }`一二招红一 -壁登色 一{.一工竺丝一哗燮终 一 J三夔生生.
2 1 。 !
.
1 { 沐
2 期 袁福汉等 :羊红脸对马驴催情作用的初步研究
羊红腹对静止或轻度萎缩的卵巢治疗效果更为显著 。 服药后血液中雌二醇水平的相
应变化见 图 1和图 2 。
目 i 护介派治洛 《 育与血液中冲二醉一 t t 。 浪度 (每众代衣 .头护的平均位)
200 Iǎú逆臣)喇务 .冷ù、禽代望乍艘峨
` J 一一, 一一 J 一一一 一 ~ 一 J ~ ~ ~ . ~ ~ ~ ~ ~ ~ J拍镇前 韵止 / 期痣鹅 虑甩 二期
二期 、口期 排卯拼爽甩 界毯 宾甩 右扣 、时
奔防
三夫
目 : 马介象的游泡度 育与血液中雌二醉一 1 卜 浓度 (每点 代衣 8 匹 马的千均位 )
值得注意的是 , 马和驴在排卵前 (一般在 24 一 48 小时 ) 都出现一个雌二醇的分泌高
峰 , 分别达到 1 6。 4士 3和 2 1。 4 6士 9 . 0 ( p g /m l) , 看来驴的波动范围较 大 。 表 3 代 表
典型的 4 匹受试马和 3头受试驴服药后滤泡的发育和血液中的雌二醇浓度的相应变化。
随着滤泡的发育 , 血中雌激素水平逐渐上升 。 在 各受试家畜 排 卵 前 (一般为 24 一48 小
时 , 表 中未列出 ) , 滤泡接近成熟 , 此时血中雌激素水平也达到高峰 。 排卵后雌激素水
平迅速下降 。 直肠检查的结果与在血液中所测得 的雌激素变化完全相符 。
功 8 畜 枚 兽 医 学 报 1 0卷
表 名 典型马驴服药后卯集的渝泡发育和血液中雄二醉浓度的变化 带
篆琢筒落澎蔚而那丽尸一一 , 一一一甲一一一尸 , 一节一一沐不同滤泡期血液中雌 }给药前 } _ _ _ ` … … …,卜卵或 排卵后称乡胃臀一 」 夕肠阴 习又 ’ { { 三天芍 \ 别 \ \ { 。 一期滤抱 {二期滤抱 J三期滤抱「四期滤抱 }排卵后、 、 、 { 变化 ! { ’ 粉 , k 哄
{ 1 1 { 、 } 二一
3 马 0 0 5 。 8 5 。 7 1 0 。 9 2 6 。 2 1 7 。 7 4 。 4
6 马 2 。 2 2 。 3 2 。 3 3 。 9 1 0 。 4 2 9 。 1 1 0 . 3 9 。 1
1 1 马 0 3 一 1 5 。 1 1 0 。 7 1 1 。 2 1 4 。 7 8 。 1 4 。 4
1 6 马 4 。 8 5 。 1 8 。 2 8 。 2 1口。 4 1 5 。 5 7 。 3
l 驴 0 2 . 0 1 0 。 9 1 8 。 4 2 8 。 9 1 。 8 4 。 9
2 驴 6 。 7 4 。 0 2 。 3 4 。 3 15 。 7 0
1 8 驴 5 。 8 8 , 5 1 5 . 2 63 。 2 0 。 6
一纷粼
. 表中未标出给药后时 间 , 给药后的延续时问为 1 3一2 天 , 嘴在同一性月期 范时内 .
三 、 讨 论
实验结果清楚表明 , 按每百公斤体重 75 克羊红膺给药 , 经一个或两个疗程后 , 可使
93 % 以上的马驴卵巢重新发情和排卵 。 经直肠检查 , 卵巢滤泡的发育过程与血液 中雌二
醇浓度的上升完全相符。 因此 , 我们认为羊红擅促发情作用很可能通过某种途径促进滤
泡发育和卵子成熟 , 激发滤泡分泌雌二醇 , 最终导致发情和排卵孙经几年试用 , 本 药安
全 , 无付作用 。 动物服药后 , 体温 、 脉搏 、 呼吸正常 〔 7 ’ 。 从羊红擅的临床效果 看 来 ,
有类似于促性腺激素的效能 , 刺激卵巢滤泡发育和排卵 。 但从现有的实验结果还无法肯
定羊红擅对卵巢的作用是直接的还是 间接的 , ’这有待于进一步的实验来证明 。
目前对正常马血中雌二醇浓度的周期性变化 己有不少报导 , 但对驴的有关报导还未
见到 。 在本实验中 , 马驴服药前血中雌二醇含量甚低 (马平均为 1 。 96 士 0 . g g p g / m l , 波
动范围 。— 4 . 6 , 驴平均为 3 . 40 士 1 . 56P g / m l , 波动范围 。一 5 . 8 。 服药 后 滤 泡 发育 , 雌二醇水平也逐渐上升 , 在排卵前 (一般在 24一 48 小时 ) 达到高峰 。 马的峰值为1 6 . 4 :!= 3 p g nJ/ l (波动范围 8 . 6— 2 9 . i p g加 l ) , 而驴的峰值为 2 1。 4 6士 9 . 0 0 (波动 范围 4 . 忍— 5 3 . 2 p g /。 1) 。 由此可见 , 马和驴的雌激素水平大致相似 , 但在驴 的 个 体间波动范围较大 。 排卵或排卵后数小时 , 雌激素水平显著下降 , 到黄体期 (排卵后 3 天 )
下降到很低的水平 (马 5 . 1 8 土 o . 7 9 p g /二 1 , 驴 1 . 7 6士 o . s i p g / m l ) 。 o x e n d e r ` . ’ ( 19 7 7 )
和 P p ol kt a ` 。 ’ ( 1 9 7 5) 等人对正常马血液中雌二醇的浓度作了测定 , 他们发现在排卵前
24 — 4 8小时有一分泌峰 。 O x o n de 晰测得的峰值大约是 5一 l o p g /ml . 而 P p l ot k a所测得的峰值大约为 25 — S Op g / m b S at 。 ’ : “ 1对正常马血中雌激素总量和雌二醇含量分别进行了类似测定 , 、 测走贻果指出 , 排卵前雌激素总量大约为 5 。p g / m l , 而雌二醇浓度
为 30P g加 l, 我们对治愈马排卵前 ( 24 ` 二二二二4 8小时 ) 所测得的结果与上述学者的测定 结
果基本相符 。 不过早些时候也有人报导排 卵 前 的 峰 值 是 在 卜 60一 1。。 p g加 1以 上 。“ “ 尸 2口` 吕 造成这些差别的原因很多 , 其中可能由于地区和品种的不同 , 更有可能 是
由于测定技术上的向题 。 如抗体的特异性 , 提取溶荆 、 操作技术以及作标准曲线的方式
等等。 因此 , 很难将上述测定结果作绝对比较。
2 期 袁福汉等 :羊红度对马驴催情作用的初步研究 0 9 1
参 考 文 献
(r) 白水县畜牧站 , 渭南地区畜收站 , 陕西省畜收兽仄研究所 ( 1 9 7 6) : 草药羊红腹 对 马 卵
巢疾病《催情 》 的试验报告 ( 13 例 ) , 动物学杂志 1 9 7 7 , 3 . P . 。 .
〔 2 ) 白水县畜牧站 , 渭南地区畜牧站 , 陕西省畜收兽医研究所 ( 1 9 7 7) : 草药羊红 鹰 对 大家
畜卵巢疾病 《 催情 》 的试验报告 ( 61 例 ) , 陕西牧医科技 19 7 7 , 2 . P 29 .
〔 8 〕 陕西羊红擅科研协作组 ( 19 7 8) : 草药羊红擅治疗大家畜卵巢疾病 《催情 》 的 试验 报告
(内部交流 )
〔 4 〕 西北植物研究所 ( 1 97 7) : 羊红殖化学成分简报 (内部交流 )
〔 5 〕 刘以训 、 李树民 ( 1 9 7 9) : L H一 R H九肤类似物抑 制蜕膜形成机理的研究 , I 对妊娠大鼠
的实验 , 动物学报 , 1 9 7 9 , 3 .
〔 6 〕 刘以训 、 李树民 ( 1 9 7 8 ) : L H一 RH九肤类似物 抑制说膜形成机理的研究 , 1 、 对假 孕
大鼠的实验 , 动物学报 , 1 9 7 9 , 4 .
〔 7 〕 袁福汉 ( 1 0 7日) 对草药羊红擅的初步认识 , 中国兽医杂志 , 1 9 7 9 、 5 ( 1 ) P 1 8一 2 1
8
.
O
x e n d e r , W
.
D
,
N o d
e n , p
.
A
. a n
d 11
.
D
.
H a f s ( 1 9 7 7 ) : E s t r u s , o v u l a t o n s e r u m
p r o , s t e r o n e , E s t r a d i o l a n d L H e o n e e n t r a t i o n s i n m a r e s a f et r a n i n e r e a s e d p il o t o p e r i o d
d u r i n g w i n t e r
。
A m
.
J
。
V
e t
.
R e s
。 v o l
。
3 8 , n o
.
2 p 2 0 3 一 2 0 7 。
。 . P l o t k a , E . D , F o l e了 , C . W , W i t b e r s p o o n , D . M , S e h m o l l e r , G . C 一 G o e t s e h 一 D .
D
.
( r 9 7 s ) : p e r 主v u l a t o r y e h a n g e s i n p e r i p h e r a l p l a s m a p r o g e s t e r o n e a n d e s t r o g e n e o o c e n
~t
r a t i o n s i n th e m a er
.
A m e r i e a n 丁. V e t e r i n a r y R e s e a r e五( 1 9 7 5 ) 3 6 (。 ) 1 3 5 9一 6 2 。
` 尸
r o
.
s
a t o , K
. , M i y a k e , M
. ,
Y
o s五i k o 节 a , T . , K a m b e g a w a , 人 . ( 一9 7 7 ) s t u d i e s o n s o ur m
o s t r o g e n a 皿 d p r o 罗 s t e r o n e l e , ” 15 d u r i几 9 t h e o s t r o u s e y e l e a n d e a r 17 p r e助 a n e v i n m a er s 。
E q u i那 V et . 7 . ( 1 9 77 一9 ( 2 ) 5 7一 6 0 .
1 1
.
p a t t i s o n , M
.
L
. e t a l ( 1 0 7幻 : D e t e r m i n a t so n o f L H a n d e s t r a d i o l 一 1 7B s u r ,
w i th r e fe r a n e e t o th e t i m e o f o v u l a t io n m a r e
.
B i
o l
.
R e p r o d
.
7 ( 1 9 7 2 )
: 1 3 6
.
1 2
.
p a t t i s o n , M
.
L
.
( 1 9 7 4 ) D i s s e r t a t i o n a b s t r a e t s I n t e r红 a t i o n a l B . ( 1 9 7 4 ) 3 5 ( 8 ) 4 2 7 6
一 7 7 E n 。
(A n i m a l B r e e d i n g a b s t r a c t 1 9 7 5
. v o
l
。
4 3 n o
。
8 一 3 2 3 7 )
1 3
.
E
r a一d o , 5 . , B o n o , G . , F a n t i e , D E ( 1 9了3 ) : v a r i a t i o n s i n p l a s m a e o n e e n t r a t io n s o f
o e s t r o g e n d
n r
i
n g th
e o s t r o u s e y e l
e o f t h e 皿 a r e . A t t i d e l l a s o e i e t a H a l i a n a d e l le S e i e n z e
丫 e t e r i n a r i e ( 1 9 7 3 ) 2 7 , 2 8 5 一 2 9 1
1 1 0 畜 牧 兽 医 学 报 1 0卷
A P R E L IM IN A R Y S T U D Y O F T H E IN D U C T IO N
O F O E S T R U S B Y
“
Y A N G H U N G SH A N
”
H E R B S
IN M A R E S A N D D O N K E Y S W IT H D Y S F U N C T IO N A L
O V A R IE S
Y u a n F u h
a n L iu Y i x u n Z h a n g H u im i n
x i a o L i l i D o n g Y u n x i a n g L I S卜um in
S u功m a r y
Y a u g 工王u n g S h a n , ( P i m P i n e l l a t h e l l u n g i a n a ) i s a 卜e br f o 林 n d i n
m a n y P r o v i n e e s o f C h i n a w h i e h h a d b e e n k n o w n t o b e a b l e t o i红 d u e e
o e o t r u s i n xn a n y s p e e i e s o f d o m e s t i e a n i m a l s
.
T五e p r e , e n t s t u d了 w a s
e a r r i e d o u t o n 9 m a r e s a n d 6 d o n k e y s s e l e e t e d w i t h d y s f u n e t i o n a l o v a r i e s
t o o b s e r v e w h e t h e r t h i s h e r b h a s a n y g o n a d o t r o P h i e P r o P e r t y w h i e h 13
r e s p仙 s ib l e f o r t h e i r o va 或 a n : t im u l a t i o 刀 .
p r e l i m i n a r y r e s u l t s s五o w e d t h a t t h君 o v a r i a n f杜 n e t i o n s w e r e r e s t o r e d
f已 l o w e d b y o e o t r u s a n d o v u l a t i o n a f t e r t h is h e r b : a dm i n i` t r a t i o n 。 T h e
f lQ l童e u l a r d七甲 e lQP m e n t w a s e h e e k e d b y r e e t a l p al p a t i o n 、 T五e e s t r a d三0 1
1 7 B l e v e l s i n s e r u m a t v a r i o u s P h a s e s a f t e r t五e d r u g t r e a tm e n t w e r e
m e a , u r o d b y r a d i o i m m u n o a s s a y ( R I A )
.
T h e h o rm o n e l e v e l s i n e r e a s e d g r a d u a l l y a f t e r a d m i n i s t r a t i o n o f t h e
h e r b a n d r e a e h e d a P e a k 2 4一 4 8 h r s b e f o r e o v u l a t i o n , r a n g i n g f r o m
8
.
6一 2 9 . 1 . p g . / m l i n t h e m a r e s ( a v e r a g e 1 6 . 4 士 3 P g . / m l ) a n d 4 。 3一 5 3 。 2
p g
.
/ m l i n t h e d o n k e y s ( a v e r a g e 2 1
。
4 6土 9 . 0 0 ) . T h e P a t t e r n o f 五o r m o n a l
p r o f i l e w a s w e l l a g x e e d w i t h t h e f o l l i e u l a r d e v e l o P m e n t a s a s s e s s e d b y
r e e t a l P a l P a t i o n
。
I t w a s e o n f i r m e d t h a t a y a n g H u n g S h a n , h a s s t i m u l a t i n g e f f e e t b n
t h
e o v a r i e s
,
h o w c v e r
,
i t w a s n o t d i s e l o s e d w h e t h e r i t a e t s d i r e t l y o n
o v a r i e : o r m e d i a t e d b y t h e p i t u t a r y
.
F u r t h e r i n v e s t i g a t i o n o n t h e
m e a s u r m e n t o f s e r u m g o n a d o t r o p h i n s ( F S H a n d L H ) a f t e r d r u g t r e a t m e n李
w a s s u g g e s t e d
,