全 文 ：⒇文章编号: 1008 3464 ( 2001) 03 0231 02
土沉香成熟胚的组织培养及植株再生
兰芹英 , 方春妍 , 何惠英 , 程治英
(中国科学院 西双版纳热带植物园 , 云南 勐腊 666303)
摘 要 : 本文研 究了土沉香成 熟胚的不同器官 的分化力 。结果表明 : 土沉香 胚轴接种在
M S+ BA0. 1 mg / L+ N AA 0. 01 mg /L和 1 /2M S+ BA0. 1 mg /L+ N AA 0. 01 mg / L培养基上 ,愈伤组织诱导
率分别为 80. 00%和 83. 33% 。 2, 4-D 2 mg /L加 BA0. 5～ 2 mg /L和 ZT 1 mg /L加 IAA 0. 1 mg / L有利于子
叶诱导愈伤组织 , 诱导率为 100%。 1 /2M S+ BA 2 mg /L+ N AA 0. 5 mg /L+ 蔗糖 3%有利丛芽的诱导 , 但苗
易玻璃化。 而 1 /2M S+ KT 2 mg /L+ IAA 0. 02 mg /L对侧芽的诱导和生长较有利。 幼苗用 1 000 mg / L的
N AA浸泡 20 min, 生根率达 85%。
关键词: 土沉香 ; 组织培养 ; 植株再生
中图分类号: Q945　　　文献标识码: A
Mature embryo culture and plantlet regeneration of the Aquilaria sinens is
LAN Qin ying , FAN G Chun yan, HE Hui-ying , CHEN Zhi ying
( Xishungbanna Tropical Bo tanical Garden, The Chinese Academy of Sciences, Mong la 666303)
Abstract : Plumular axis o f Aquilaria sinensis were cul tured on four media wi th di fferent PGR
( Plant Grow th Regula to rs ) . It is found that the M S+ BA 0 . 1 mg / L+ N AA 0 . 0 1 mg / L and
1 / 2M S+ BA 0 . 1 mg / L+ N AA 0. 0 1 mg / L media were good for the induction cal lus . The higher
induction f requency fo r the sprouts when the stem segments w ere cul tured in the 1 /2M S+ BA 2 mg /L
+ N AA 0. 5 mg /L+ sucrose 3% , but the vit rification shoo ts w ere caused easy by this medium. The
sprouts g row th bet ter in 1 /2M S+ K T 2 mg /L+ IAA 0. 02 mg /L. It i s benefi t fo r the rooting when
seeding soaking in N AA 1 000 mg /L.
Key words: Aquilaria sinensis; ti ssue culture; plantlet reg enera tion
　　土沉香 [Aquilaria sinensis ( Lour. ) Gilg ] , 又称白木香 , 为瑞香科沉香属植物 , 是一种热带亚
热带常绿乔木。该属有 15种 , 我国有 2种。土沉香是我国特有的药用植物 , 也是我国生产沉香的唯一
植物资源 ,被列为国家三级保护植物 [1 ]。沉香树干可分泌出一种能制取名贵中药的物质——沉香 ,沉香
是我国、 日本、 印度以及其他东南亚国家的传统名贵药材和名贵的天然香料 [2 ] , 其性辛、 微湿、 无毒 ,
有降气、 纳贤、 平肝、 镇静、 止痛等多种功能。其种子含油率高 , 可用于制皂、 鞣革、 润滑油。树皮
含强韧纤维 , 色白而细 , 为人造棉和打字蜡纸原料 [3 ]。土沉香主产广东、 海南、 广西 , 福建也有少量分
布。但由于生境的破坏和人们掠夺式的采掘 ,致使这一树种濒临灭绝 [ 3]。因此对其进行离体培养和保存
研究具有重要的意义。国外未见有关土沉香组织培养的报道 ,国内叶勤法等 [1 ]用当年生嫩枝的叶片和茎
段诱导愈伤组织 , 并分化出丛芽。本文介绍了土沉香种子胚轴和子叶的愈伤组织诱导率、 分化及幼苗
的生长。
第 20卷　第 3期
Vol. 20, No . 3
广 西 农 业 生 物 科 学
Journal o f Guangx i Ag ric. and Bio l. Science
2001年 9月　
Sept. , 2001　
⒇ 收稿日期: 2000 10 30
基金项目: 中国科学院植物园工委会资助项目 ( 980302)
作者简介: 兰芹英 ( 1966 ) , 女 , 云南腾冲人 , 中国科学院西双版纳热带植物园实验师。
1　材料与方法
材料取自中国科学院西双版纳热带植物园药用植物区栽培十多年的成年树种子。种子剥去外壳 ,用
75% C2 H5OH浸泡 1 min然后用 0. 1%的 HgCl2灭菌 5 min,再用无菌水冲洗 3～ 4次 ,分 2组处理接种
在不同的培养基中。第 1组: 胚轴 ; 第 2组: 子叶。每个处理的外植体数为 20～ 42。基本培养基为 MS
和 1 /2M S (大量元素减半 ) , 不同培养阶段添加不同的植物激素。所有培养基均含 3%的蔗糖和 0. 8%
的琼脂条 , pH5. 8± 0. 1, 培养温度 26± 2℃ , 每天光照 10 h, 光照强度 2 000 lx。
2　结果与分析
2. 1　胚轴和子叶愈伤组织的诱导和分化 表 1　胚轴在不同培养基中的愈伤组织诱导率比较
Table 1　 Comparion of the callus reduction rate in
diff erent base media
培养基
M edium
接种数 /段
Num ber of
explan ts
愈伤组织
诱导率 /%
Callus reduction rate
长度 / cm
Leng th
1 /2M S 21 54. 17 0. 40± 0. 12
1 /2M S+ BA0. 1+ NAA0. 01 42 83. 33 0. 42± 0. 10
M S 35 36. 11 0. 28± 0. 07
M S+ BA0. 1+ NAA0. 01 36 80. 00 0. 47± 0. 19
表 2　不同植物激素对子叶愈伤组织的诱导率的影响
Table 2　 Effects of diff erent plant hormones on callus
reduction rate of cotyledonary
培养基
Medium
接种数 /段
Num ber of
ecplants
愈伤组织
诱导率 /%
Cal lus
reduction rate
丛芽诱导率 /%
Shoots
reduction
rate
1 /2M S+ 2, 4-D 2+ BA0. 5 20 100 18. 18
1 /2M S+ 2, 4-D 2+ BA2 20 100 22. 73
1 /2M S+ IAA0. 2+ BA2 20 38. 89 0
1 /2M S+ IAA1+ BA2 20 11. 43 0
1 /2M S+ IAA2 20 0 0
1 /2M S+ IAA0. 1+ IBA0. 1+ BA1+ GA0. 2 20 35. 71 0
1 /2M S+ IAA0. 1+ NNA0. 1+ ZT1+ GA0. 2 20 100 0
接种胚轴长约 0. 1～ 0. 15 cm培养
在 4组培养基中 (如表 1所示 )。 30 d后
观察 , 胚轴培养在 1 /2M S和 1 /2M S+
BA0. 1 mg /L (单位下同 ) + N AA 0. 01
培养基中 , 添加植物激素的愈伤组织诱
导率高于没有添加植物激素的 , 诱导率
分别为 83. 33%和 54. 17%。同样的 MS
+ BA0. 1 mg /L+ N AA 0. 01有利愈伤
组织的诱导 ,诱导率为 80. 00% ,培养在
MS培养基中的诱导率为 36. 11%。愈伤
组织转入 MS+ ZT 1+ N AA 0 . 1和
MS+ ZT0. 5+ N AA 0. 1未诱导出芽。
表 2结 果 表 明 , 2 , 4 - D 2加
BA 0. 5～ 2和 ZT 1加 IAA 0. 1+ N A A
0. 1+ GA 0. 2有利于子叶诱导愈伤组
织 , 诱导率为 100% 。在不含 2, 4-D2、
BA和 ZT的培养基中诱导率为 0。
2, 4-D 2+ BA 2和 2, 4-D 2+ BA 0. 5的丛芽诱导率为 22. 73%和 18. 18% ,其它组合的丛芽诱导率为 0。
2. 2　无机盐及激素对芽诱导的影响
幼苗茎段转入 1 /2M S或 MS两种基本培养基中 , 添加 BA1～ 2或 KT1～ 5, 60 d后 , 幼苗茎段丛
芽诱导率为 100% ,繁殖倍数为 1. 14～ 4. 78倍。 1 /2M S+ N AA0. 5丛芽诱导率较高 ,但苗易玻璃化。同
样 MS+ K T1～ 5, 也易产生玻璃苗 , 叶片变黄 , 脱落。玻璃苗再转入 1 /2M S+ K T培养基中也不能恢
复正常。在多次实验中发现 BA比 KT易产生玻璃苗 , 同样 MS比 1 /2M S易产生玻璃苗。我们在树胡
椒的培养中也发现相似的结果 , M S比 B5易产生玻璃苗 , BA比 K T易产生玻璃苗。目前我们这两个种
有类似的反应。具体原因不清楚。 1 /2M S+ KT 2+ IAA 0. 02有利于芽的繁殖 , 繁殖培数为 4. 78倍。
2. 3　根的诱导
将生长健壮长约 5 cm的幼苗转入以下培养基进行生根培养: ( 1) 1 /2M S+ N AA0. 1+ IAA 0. 1;
( 2) 1 /2M S+ N AA0. 1+ IAA 0. 1+ IBA0. 1; ( 3) 1 /2M S+ N AA0. 1+ IAA 0. 2+ IBA0. 2, 1个月后没有
生根 , 将没有生根的幼苗用 1 000 mg /L的 NAA浸泡 20 min, 插在装有粗砂的盆子里 , 用塑料袋或玻
璃容器罩上 , 保持湿度 , 生根率达 85% 。
参考文献:
[ 1 ]　叶勤法 , 戚树源 , 林立东 . 土沉香愈伤组织培养及植株再生 [ J] . 热带亚热带植物学报 , 1998, 6 ( 2): 172～ 176.
[ 2] 　戚树源 , 陆碧瑶 , 朱亮锋 , 等 . 白木香愈伤组织的化学成分 [ J] . 中草药 , 1993, 24 ( 2): 59～ 74.
[ 3] 　宋朝枢 , 徐荣章 , 张清华 . 中国珍稀濒危保护植物 [ M ] . 北京: 中国林业出版社 , 1989.
(责任编辑　梁健 )
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