全 文 :了哥王叶子化学成分研究(Ⅰ)
张 立1,刘慧琼2,肖 玥2,陈燕忠2,王定勇2*
(1.广东省中医院 药学部,广东 广州510120;2.广东药学院 药科学院,广东 广州510006)
摘 要:对瑞香科荛花属植物了哥王[Wikstroemia indica(L.)C.A.Mey]的叶子进行化学成分研究。
方法:用甲醇提取及柱色谱等方法进行分离,薄层色谱跟踪检测,波谱法鉴定结构。结果:从该植物叶子
中共分离鉴定出6个化合物,分别是西瑞香素(1)、异西瑞香素B(2)、杨梅素(3)、槲皮素(4)、山奈酚
(5)、芫花素(6)。结论:首次报道了哥王叶子的化学成分。
关键词:了哥王叶子;化学成分;瑞香科荛花属植物
中图分类号:R284.1 文献标识码:A 文章编号:1673-2197(2012)08-0041-02
收稿日期:2012-05-20
作者简介:张立(1978-),女,广东省中医院主管药师,研究方向为医院药学。
通讯作者:王定勇(1967-),男,博士,广东药学院教授,硕士生导师,研究方向为天然药物研究与新药研发。
Chemical Constituents of the Leaf of Wikstroemia indica
Zhang Li 1,Liu Huiqiong,Xiao Yue2,ChenYanzhong2,Wang Dingyong2*
(1.Department of Pharmacy,Guangdong Provincial Hospital of TCM,Guangzhou 510120,China;
2.Colege of Pharmacy,Guangdong Pharmaceutical University,Guangzhou 510006,China)
Abstract:Objective:To study the chemical constituents of leaf of Wikstroemia indica(L.)C.A.Mey.Methods:The plant was
extracted by MeOH,then separated and repeatedly purified by methods of chromatography,TLC for tracking and detection.Their
structures were elucidated by IR,MS and NMR.Results:Six compounds were isolated from the leaf of Wikstroemia indica and iden-
tified as daphnoretin(1),isodaphnoretin B(2),myricetin(3),quercetin(4),kaempferol(5)and genkwanin(6).Conclusion:
The chemical constituents of leaf of Wikstroemia indica was reported for the first time.
Key Words:Leaf of Wikstroemia Indica;Chemical Constituents;Thymelaeaceae Wikstroemia Genus
了哥王[Wikstroemia indica(L.)C.A.Mey]为瑞香
科荛花属植物,又名南岭荛花,广泛分布于我国江西、广东、
广西等省区,资源丰富。了哥王根、茎、叶和果实均可入药,
性味苦寒、微辛,具有清热解毒、消肿散结、止痛等功效,主
治跌打损伤、散瘀止痛,为民间常用中草药[1]。现代药理研
究表明了哥王具有抗菌[2]、消炎[3]、抗病毒[4]、抗癌[5]等药理
作用,是一种开发潜力巨大的天然资源。文献报道了哥王
中主要含有黄酮类、香豆素、木脂素类、挥发油类、甾体类等
化学成分[6],但这些研究主要集中在了哥王的茎(含茎皮)
和根(含根皮)部位。至今未见了哥王叶子化学成分研究方
面的文献报道。本试验对采自广东省阳春市的了哥王叶子
进行系统的化学成分研究,从其甲醇提取物中分离得到6
个化合物,经波谱数据分析结合理化性质及文献对照,分别
鉴定为西瑞香素(1)、异西瑞香素B(2)、杨梅素(3)、槲皮素
(4)、山奈酚(5)、芫花素(6),化学结构式见图1。本文报道
了这些化合物的提取分离与结构鉴定工作。
图1 化合物1~6的化学结构
1 植物来源及仪器
了哥王叶子于2010年10月采自广东省阳春市,由广东
药学院中药学院曾令杰教授鉴定为了哥王[Wikstroemia in-
dica(L.)C.A.Mey]的叶子,标本存放在作者实验室。
X-6显微熔点测定仪(未校正);Nicolet PROTEGE460
红外光谱仪(KBr压片);Bruker AM-500型核磁共振仪
(TMS为内标);Agilent6120型质谱仪;色谱用硅胶为青岛
—14—
海洋化工厂产品;色谱用聚酰胺为台州市路桥四甲生化塑
料厂产品;所用试剂均为分析纯。
2 提取与分离
取阴干的了哥王叶子5kg,粉碎至约60目,用适量甲醇
室温浸泡3次,每次7天,合并提取液,抽滤,减压回收甲醇
得粗提物680g。粗提物用水分散后置于分液漏斗中,依次
用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯和正丁醇萃取,回收溶剂后
得石油醚部位浸膏35g,二氯甲烷部位浸膏65g,乙酸乙酯部
位浸膏90g,正丁醇部位浸膏105g,正丁醇萃取后的水相弃
去。
取二氯甲烷部位浸膏50g,经硅胶(200~300目)柱层
析(1.0kg,φ100mm×L 800mm),石油醚/乙酸乙酯(20∶1
~1∶1,V/V)梯度洗脱,同时配合重结晶技术,获得化合物
1(680mg)和2(105mg)。
取乙酸乙酯部位浸膏80g,经聚酰胺(100~200目)柱
层析(1.5kg,φ100mm×L 1 000mm),以氯仿/甲醇梯度洗
脱,同时配合重结晶技术。甲醇-氯仿(1∶10,V/V)洗脱获
得化合物6(750mg),甲醇-氯仿(1∶8,V/V)洗脱获得化合
物5(80mg),甲醇-氯仿(1∶5,V/V)洗脱获得化合物4
(65mg),甲醇-氯仿 (1∶2,V/V)洗脱获得化合物 3
(55mg)。
3 结构鉴定
化合物1,淡黄色针晶(甲醇),在紫外灯下(365nm)薄
层检识呈蓝色荧光,mp.250.0℃~251.5℃。ESI-MS(neg-
ative mode)m/z:351.2[M-H]-;ESI-MS(positive mode)
m/z:353.1[M+H]+,374.9[M+Na]+;IRνmax(KBr)
cm-1:3411,1720,1616,1500,1275,1150,1130,1020,
910,840;1 H-NMR(500MHz,DMSO-d6):δ6.37(1H,
d,J=9.6Hz,H-3’),8.02(1H,d,J=9.6Hz,H-4’),7.
70(1H,d,J=8.5Hz,H-5’),7.10(1H,dd,J=8.5,2.
0Hz,H-6’),7.17(1H,d,J=2.0Hz,H-8’),7.88(1H,
s,H-4),7.22(1H,s,H-5),6.88(1H,s,H-8),3.82
(3H,s,6-OCH3);13C-NMR (125MHz,DMSO-d6):δ
160.1(C-2),136.2(C-3),131.4(C-4),109.9(C-5),
146.1(C-6),150.6(C-7),103.1(C-8),147.9(C-9),
110.7(C-10),160.5(C-2’),114.3(C-3’),144.5(C-
4’),130.4(C-5’),113.9(C-6’),157.4(C-7’),104.4
(C-8’),155.4(C-9’),114.8(C-10’),56.5(6-OCH3)。
以上数据与西瑞香素(daphnoretin)一致
[7]。
化合物2,淡黄色粉末,在紫外灯下(365nm)薄层检识
呈蓝色荧光,mp.238.0℃~240.0℃。ESI-MS(negative
mode)m/z:381.1[M-H]-;IRνmax(KBr)cm-1:3340,
1731,1612,1580,1510,1474,1275,1236,1125,1070,
987,845;1 H-NMR(500MHz,DMSO-d6):δ6.37(1H,
d,J=9.5Hz,H-3’),8.03(1H,d,J=9.5Hz,H-4’),
7.70(1H,d,J=8.5Hz,H-5’),7.11(1H,dd,J=8.5,
1.9Hz,H-6’),7.17(1H,d,J=1.9Hz,H-8’),7.84
(1H,s,H-4),6.68(1H,s,H-8),3.93 (3H,s,5-
OCH3),3.80 (3H,s,6-OCH3);13C-NMR (125MHz,
DMSO-d6):δ159.9(C-2),135.2(C-3),126.4(C-4),
149.0(C-5),137.7(C-6),154.5(C-7),98.9(C-8),148.
9(C-9),105.3(C-10),159.8(C-2’),113.8(C-3’),144.
2(C-4’),129.8(C-5’),113.5(C-6’),157.6(C-7’),
103.7(C-8’),154.9(C-9’),114.4(C-10’),61.8(5-
OCH3),60.5 (6-OCH3)。以上数据与异西瑞香素 B
(isodaphnoretin B)一致[8]。
化合物 3,棕黄色针晶 (MeOH),mp.324.5℃ ~
326.0℃。1 H-NMR(500MHz,DMSO-d6):δ12.51(s,5-
OH),6.37(1H,d,J=2.0Hz,6-H),6.18(1H,d,J=2.
0Hz,8-H),7.25(2H,s,2’,6’-H);13C-NMR(125MHz,
DMSO-d6):δ147.3(C-2),136.3(C-3),176.2(C-4),161.
2(C-5),98.6(C-6),164.4(C-7),93.7(C-8),156.6(C-9),
103.4(C-10),121.2(C-1’),107.7(C-2’,6’),146.2(C-
3’,5’),136.6(C-4’)。以上数据与杨梅素(myricetin)一
致[9]。
化合 物 4,黄 色 晶 体 (MeOH),mp.312.5℃ ~
314.0℃。1 H-NMR (500MHz,DMSO-d6):δ12.55 (5-
OH),6.20(1H,d,J=2.0Hz,H-6),6.40(1H,d,J=2.
0Hz,H-8),6.93(1H,d,J=7.8Hz,H-5’),7.62(1H,
dd,J=7.8,2.0Hz,H-6’),7.69(1H,d,J=2.0Hz,H-
2’),10.92(1H,br.s,7-OH),9.63(1H,br.s,3-OH),
9.40(2H,br.s,3’,4’-OH)。与文献[9]报道数据一致,样
品与槲皮素对照品共薄层色谱,Rf值一致,且混合熔点不
下降,故鉴定该化合物为槲皮素(quercetin)。
化合物 5,淡黄色结晶 (MeOH),mp.284.0℃ ~
286.0℃。1 H-NMR(500MHz,DMSO-d6):δ6.74(1H,d,
J=1.8Hz,H-6),6.83(1H,d,J=1.8Hz,H-8),7.29
(2H,d,J=8.8Hz,H-3’,5’),8.53(2H,d,J=8.8Hz,
H-2’,6’),12.23(3H,br.s,3,7,4’-OH),13.36(1H,s,
5-OH)。以上数据与山奈酚(kaempferol)一致[10]。
化合物6,淡黄色结晶(甲醇),mp.283.5℃~285.0℃。
ESI-MS(positive mode)m/z:285.1[M+H]+;ESI-MS
(negative mode)m/z:283.2[M-H]-;1 H-NMR(500MHz,
DMSO-d6):δ3.86(3H,s,7-OCH3),6.84(1H,s,H-3),
6.36(1H,d,J=2.0Hz,H-6),6.76(1H,d,J=2.0Hz,
H-8),6.93(2H,d,J=8.8Hz,H-3’,5’),7.94(2H,d,J
=8.8Hz,H-2’,6’),10.34(1H,br.s,4’-OH),12.93
(1H,s,5-OH);13C-NMR(125MHz,DMSO-d6):δ163.8
(C-2),103.0(C-3),181.7(C-4),157.0(C-5),97.9(C-6),
165.2(C-7),92.6(C-8),161.0(C-9),104.4(C-10),121.2
(C-1’),128.3(C-2’,6’),115.7(C-3’,5’),159.8(C-4’),
56.0(7-OCH3)。以上数据与芫花素(genkwanin)一致[11]。
—24—
小青龙汤提取工艺研究
金 瑜1,肖 平2*
(1.常熟市建发医药有限公司,江苏 常熟215500;2.南京中医药大学,江苏 南京210046)
摘 要:目的:研究小青龙汤的最佳提取工艺。方法:采用正交试验法考察诸因素对提取的影响,以提取
物中麻黄碱含量和出干膏率为指标。提取物经乙醚脱脂、萃取提取分离麻黄碱,用 HPLC法检测结果。
结果:对小青龙汤提取效果影响较大的因素依次为:提取次数、提取时间和水用量。结论:以8倍量的水
提取1次,煮沸0.5h,提取效果最佳。
关键词:小青龙汤;正交实验;提取工艺;麻黄碱;HPLC
中图分类号:R284 文献标识码:A 文章编号:1673-2197(2012)08-0043-03
收稿日期:2012-05-18
作者简介:金瑜(1977-),女,江苏省常熟市建发医药有限公司主管中药师,研究方向为中药制剂。
通讯作者:肖平(1987-),男,南京中医药大学硕士研究生,研究方向为中药质量标准。
小青龙汤由麻黄、芍药、细辛、干姜、甘草、桂枝、半夏和
五味子八味药组成,系张仲景所创辛温解表的代表方剂,主
治风寒素表、水饮内停之证,具有解表化饮、止咳平喘之功
效,疗效确切[1]。其中,麻黄碱是君药麻黄的主要有效成分
之一。本实验以麻黄碱含量为考察指标,采用正交实验,对
提取工艺中加水量、提取时间、提取次数等因素进行系统考
察,从而优选出最佳提取工艺。
1 实验材料
1.1 实验仪器
岛津高效液相色谱仪(日本岛津株式会社LC-6A),岛
津紫外-可见光分光光度检测器(SPD-6AV),超声提取仪
(上海SB2000),鼓风干燥箱(上海爱斯佩克环境仪器有限公
司LC-223
)。
4 结果与讨论
研究表明,了哥王叶子主要含有香豆素和黄酮类化学
成分,其中西瑞香素和芫花素的含量较高,研究结果与了哥
王茎及根的化学成分类似。西瑞香素具有很好的抗炎、抗
病毒及抗肿瘤作用[3-5],也是控制了哥王相关制剂(如了哥王
片、穿王消炎片等)质量的重要指标化合物。了哥王叶子中
西瑞香素含量高且再生快,资源易得,因此从了哥王叶子中
分离西瑞香素潜力巨大。近年来,黄酮类化合物的抗氧化、
降血糖等药理作用倍受重视,已成天然产物研究领域的热
点之一。本研究获得的4个黄酮类成分表明了哥王叶子不
仅具有抗炎、抗病毒及抗肿瘤作用,而且在心血管疾病的防
治上有潜在应用前景,值得进一步研究开发。
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(责任编辑:宋勇刚)
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